凝乳酶
- 簡析凝乳酶凝乳機理及羔羊凝乳酶自制方法
1250 引言凝乳酶（Chymosin）對奶酪生產(chǎn)至關(guān)重要。早在公元3—4世紀，人類就偶然發(fā)現(xiàn)動物胃中某種成分可使乳凝固，這是人們認識凝乳酶的伊始[1]。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，制作奶酪用的工業(yè)化商品凝乳酶已經(jīng)取得了許多突破，但在國內(nèi)家庭牧場和羊乳企業(yè)小規(guī)模生產(chǎn)制作奶酪上，凝乳酶的傳統(tǒng)提取方法仍是解決其來源的最為簡單易行的核心關(guān)鍵技術(shù)。1 凝乳酶種類及作用機理1.1 種類根據(jù)凝乳酶來源的不同，可以分為動物凝乳酶、植物凝乳酶、微生物凝乳酶、遺傳工程凝乳酶四大
中國乳業(yè) 2022年7期2022-08-04
- 乳清在奶酪制作中的工藝優(yōu)化
乳酸菌發(fā)酵劑和凝乳酶通過發(fā)酵使奶中的蛋白質(zhì)凝固、排乳清，再把凝乳塊壓縮成固定形狀而制成的一種營養(yǎng)價值很高的發(fā)酵乳制品，又被稱為干酪[1]。奶酪制作過程中排除的乳清中富含乳清蛋白、礦物質(zhì)和少量的凝乳酶，乳清中的乳清蛋白主要含有α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳鐵蛋白及免疫球蛋白等，乳清蛋白含有豐富的生物活性物質(zhì)，因此不僅容易被人體消化吸收而且具有極高的代謝效率，具有很高的生物利用價值[2-3]。乳清中殘留的凝乳酶具有再利用的價值，直接排放乳清不僅污染環(huán)境而且損失
中國調(diào)味品 2021年10期2021-10-15
- 微小毛霉G-3凝乳酶的酶學(xué)特性研究
100048）凝乳酶（Chymosin，EC 3.4.23.4）是重要的工業(yè)用酶之一，在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在干酪制作過程中，它主要起著凝固牛乳、改善風(fēng)味和質(zhì)構(gòu)、影響干酪得率等作用[1]。傳統(tǒng)凝乳酶最初來源于未斷奶的小牛皺胃，而隨著世界干酪及干酪素產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，其供應(yīng)已不能滿足現(xiàn)代生產(chǎn)所需[2]。因此，研究學(xué)者進行大量研究從動植物或微生物中尋找最具發(fā)展?jié)摿Φ?span id="j5i0abt0b" class="hl">凝乳酶。其中，微生物具有易培養(yǎng)、生長周期短、受地域氣候時間限制小等特性，用其生產(chǎn)凝乳酶成本低、經(jīng)
食品安全導(dǎo)刊 2021年24期2021-10-13
- 多羥基化合物對凝乳酶熱穩(wěn)定性的影響
4)0 引 言凝乳酶是制作乳酪必需的酶制劑[1]，還用于兒童消化不良的臨床治療[2]，其對熱敏感，易失活[3]。多羥基化合物作為酶穩(wěn)定劑操作簡便、適用范圍廣，應(yīng)用最為廣泛[4-6]。熒光光譜常用于研究蛋白質(zhì)分子構(gòu)象變化。氨基酸殘基所處微環(huán)境極性增加則熒光強度降低、發(fā)射峰紅移，疏水性增加則熒光強度升高、發(fā)射峰藍移[7]。多羥基化合物的種類、濃度等對酶熱穩(wěn)定性影響的研究大多集中于單一成分對酶的保護作用[8]。少量保護劑配方優(yōu)化的研究中，多羥基化合物是過量添加的
中國乳品工業(yè) 2021年5期2021-06-27
- 混料設(shè)計優(yōu)化牦?！扒?span id="j5i0abt0b" class="hl">凝乳酶干酪素的工藝及產(chǎn)品的性質(zhì)分析
胃酶是最常用的凝乳酶，用其生產(chǎn)的干酪素出品率較高、品質(zhì)較好，但我國小牛皺胃酶的生產(chǎn)還沒有實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，目前主要依靠國外進口，單純依靠屠宰小牛提取凝乳酶無法滿足市場的需要[6]。目前以曲拉為原料，利用酸法生產(chǎn)干酪素已有大量報道[7-8]，但采用凝乳酶制備食品級干酪素的報道依然相對較少。凝乳酶干酪素制備過程中，由于單一酶的凝乳效果有限，本實驗擬采用混合酶進行凝乳試驗，但不同酶的混合比例是研究的難點?；炝显O(shè)計是一種特殊的回歸設(shè)計，是研究混合料中不同組分比例變化對得
食品與發(fā)酵工業(yè) 2020年6期2020-04-13
- 重組大腸桿菌表達凝乳酶工業(yè)化研究
統(tǒng)大腸桿菌表達凝乳酶發(fā)酵工藝的不足，在 10 m 3 新型高溶氧發(fā)酵罐上，對重組大腸桿菌（ Recombinant?E.?Coli）連續(xù)流加補料發(fā)酵生產(chǎn)凝乳酶進行了工業(yè)化研究，優(yōu)化了培養(yǎng)基配方和工藝條件。 結(jié)果表明：優(yōu)化后的培養(yǎng)基以及工藝條件比優(yōu)化前菌體濃度與酶活均具有較大的提升，對凝乳酶工業(yè)化發(fā)展提供了重要的技術(shù)支持?！娟P(guān)鍵詞】凝乳酶;高密度發(fā)酵;培養(yǎng)基;流加培養(yǎng);優(yōu)化【中圖分類號】R715???【文獻標(biāo)識碼】A????【文章編號】1004-7484（2
中國保健營養(yǎng) 2019年12期2019-12-15
- 甲醇芽孢桿菌凝乳酶的重組表達及其結(jié)構(gòu)特性
）甲醇芽孢桿菌凝乳酶是一種具有凝乳作用的微生物蛋白酶[1]。凝乳酶在干酪生產(chǎn)過程中不僅起凝乳作用，還會影響干酪的質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味[2]。小牛皺胃酶因具有高凝乳活性和低非特異性水解活性，所產(chǎn)干酪的質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味均符合生產(chǎn)要求[3]，此酶已作為商品凝乳酶用于干酪的生產(chǎn)，但由于生產(chǎn)成本高以及屠宰動物引發(fā)的倫理問題[4]，使得尋找小牛皺胃酶代替品顯得尤為重要。植物凝乳酶來源廣泛，價格低廉，但植物生長周期長，凝乳活性低[5]。微生物凝乳酶易提取，酶活力高，逐漸在干酪生產(chǎn)中占據(jù)
食品科學(xué) 2019年22期2019-12-04
- 不同進口白霉奶酪中優(yōu)勢霉菌分離鑒定及其凝乳酶酶學(xué)特性研究
突出，微生物源凝乳酶酶學(xué)特性研究日益廣泛[21-24]?；诖?，本研究從進口白霉奶酪中篩選優(yōu)勢霉菌進行鑒定，并研究該凝乳酶的酶學(xué)性質(zhì)，以期為白地霉在霉菌奶酪生產(chǎn)中的應(yīng)用提供基礎(chǔ)資料。1 材料與方法1.1 材料與設(shè)備1.1.1 實驗材料白霉奶酪，生產(chǎn)商Nordex Food；Danish Brie cheese白霉奶酪，生產(chǎn)商Arla Foods amba Troldhede Dairy Y；Danish Camembert cheese白霉奶酪，生產(chǎn)商北京
中國乳品工業(yè) 2019年7期2019-09-10
- 微生物凝乳酶研究進展
3)0 引 言凝乳酶（MCE）通常專用于指代能夠誘導(dǎo)牛奶凝乳形成的功能性酶制劑，現(xiàn)凝乳酶的來源主要有四種：動物性來源、植物性來源、微生物來源及通過生物工程改造的微生物發(fā)酵所得[1]。乳制品行業(yè)日益增長的需求使得傳統(tǒng)凝乳酶（動物性來源）無法滿足市場需要，20世紀60年代初開始，在世界范圍內(nèi)人們就已經(jīng)開始尋找動物性凝乳酶的替代物；而微生物凝乳酶（MCEs）良好的功能特性及低廉的生產(chǎn)成本使其成為傳統(tǒng)凝乳酶的重要替代品之一，有資料顯示，到目前為止，微生物凝乳酶已用
中國乳品工業(yè) 2019年3期2019-04-26
- 青海牧區(qū)產(chǎn)凝乳酶細菌多樣性分析
730000)凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵酶,奶酪加工工程中凝乳酶具有切斷κ-酪蛋白特定肽鍵的功能,能使牛乳中的酪蛋白凝結(jié)[1];奶酪成熟過程中，凝乳酶可將酪蛋白分解為大分子多肽,并進一步降解成氨基酸、胺、含硫化合物等風(fēng)味物質(zhì)[2]。根據(jù)來源不同，凝乳酶可分為動物凝乳酶、植物凝乳酶和微生物凝乳酶。不同來源的凝乳酶性質(zhì)不同,動物凝乳酶在干酪生產(chǎn)中應(yīng)用最早,但由于原料缺乏,導(dǎo)致其價格昂貴[3]。植物凝乳酶由于蛋白水解力強,制成的干酪有一定苦味,限制了其應(yīng)用[2]。
食品工業(yè)科技 2018年16期2018-09-13
- 四氫嘧啶對凝乳酶熱穩(wěn)定性的影響
研究四氫嘧啶對凝乳酶熱穩(wěn)定性的影響，向凝乳酶溶液中加入0.175～5.600 mmol/L的四氫嘧啶，測定不同濃度四氫嘧啶對凝乳酶活力的影響；之后測定了含0.50～2.00 mmol/L四氫嘧啶的凝乳酶溶液在69℃保溫不同時間后的凝乳酶活力，將熱保溫后的酶溶液在4℃復(fù)性36 h，并再次測定酶活力的變化。結(jié)果顯示，不同濃度四氫嘧啶對凝乳酶活力影響不大，各組酶活力均降低8.2%左右；加入四氫嘧啶會顯著降低凝乳酶的熱穩(wěn)定性，但會發(fā)生明顯的復(fù)性作用，提示四氫嘧啶可
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年1期2018-02-03
- 四氫嘧啶對熱變性凝乳酶復(fù)性作用的研究
250104)凝乳酶是生產(chǎn)乳酪和干酪素必需的酶制劑，能水解牛奶中κ-酪蛋白的Phe105-Met106肽鍵使牛奶凝結(jié)[1]。凝乳酶與其他酶制劑一樣，易受多種物理化學(xué)因素的影響而變性失活[2]。以海藻糖為代表的糖類、多元醇、聚合物等化合物作為酶的穩(wěn)定劑，具有適用范圍廣、作用效果較好的特點，已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用[3]。四氫嘧啶(1，4，5，6-四氫-2-甲基-4-嘧啶羧酸，Ectoine)是一種滲透壓補償性溶質(zhì)，與其他穩(wěn)定劑相比，具有性質(zhì)穩(wěn)定、用量小、保護作用
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年3期2018-01-19
- 凝乳酶熱失活動力學(xué)研究
川摘要：為研究凝乳酶在334～343 K熱失活動力學(xué)表現(xiàn)，利用Arrhenius方程，分別計算得到了不同溫度下，凝乳酶的熱失活速率常數(shù)k、半衰期t1/2，并最終計算得到了凝乳酶的失活活化能Ea為（539.58±1.55）kJ/mol。335～343 K時，數(shù)據(jù)線性回歸擬合結(jié)果較好，凝乳酶的熱失活符合一級反應(yīng)動力學(xué)規(guī)律。在較低的334 K時，失活速率常數(shù)的線性回歸分析擬合度較低，凝乳酶在保溫前期失活速率常數(shù)偏高，而后期偏低，曲線斜率前后差別顯著，提示凝乳酶的
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年12期2018-01-09
- 酒曲中產(chǎn)凝乳酶微生物菌株的分離篩選及鑒定
貞耐*酒曲中產(chǎn)凝乳酶微生物菌株的分離篩選及鑒定騰軍偉，趙 笑，楊亞威，張 健，趙愛梅，姜云蕓，李 柳，鄭 喆，楊貞耐*（北京食品營養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心，北京市食品添加劑工程技術(shù)研究中心，北京工商大學(xué)，北京 100048）針對酒曲中的微生物進行分離純化，得到11 株細菌和2 株真菌，并采用酪蛋白平板法和Arima時間法篩選出了1 株產(chǎn)凝乳酶的細菌菌株編號為LB-51。通過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化實驗和16S rDNA序列分析鑒定該菌株為解淀粉芽孢桿菌，將該
食品科學(xué) 2017年16期2017-09-03
- 一株地衣芽孢桿菌產(chǎn)凝乳酶酶學(xué)性質(zhì)研究
地衣芽孢桿菌產(chǎn)凝乳酶酶學(xué)性質(zhì)研究宋 曦1，汪 慧1，尚 菲2，韓 雍1，劉圓媛1(1隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院，甘肅慶陽 745000；2隴東學(xué)院生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅慶陽 745000)目的：對地衣芽孢桿菌所產(chǎn)凝乳酶的酶學(xué)特性進行研究。方法：在不同的溫度、pH值、底物濃度、不同金屬離子等條件下測定地衣芽孢桿菌產(chǎn)凝乳酶相對酶活力。結(jié)果：地衣芽孢桿菌所產(chǎn)凝乳酶最適凝乳溫度為70℃；40℃以上熱處理后凝乳活性有不同程度的損失，75℃熱處理10min后凝乳酶活性喪失；
中國食物與營養(yǎng) 2017年7期2017-08-22
- 米黑毛霉UV-LiCl-6凝乳酶酶學(xué)特性研究
-LiCl-6凝乳酶酶學(xué)特性研究朱建寧1，張衛(wèi)兵2*，張忠明2，楊敏2，文鵬程2，宋雪梅2，張丹妮2（1.甘肅省食品藥品監(jiān)督管理局，甘肅蘭州730000；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730070）以米黑毛霉凝乳酶為研究對象，研究反應(yīng)溫度、pH值、脫脂乳濃度、金屬離子對凝乳酶活力的影響。結(jié)果表明，米黑毛霉凝乳酶最適反應(yīng)溫度為75℃，在35℃～45℃穩(wěn)定性較好；米黑毛霉凝乳酶的最適pH值為6.0，在pH值為7.0～10.0時較為穩(wěn)定；脫脂乳濃度
衛(wèi)生職業(yè)教育 2017年13期2017-07-25
- 原核表達重組牛凝乳酶的純化
原核表達重組牛凝乳酶的純化普燕，李軼杰，張富春*(新疆大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆生物資源基因工程重點實驗室，新疆 烏魯木齊，830046)原核表達獲得的重組牛凝乳酶與商品重組牛凝乳酶有相似的酶學(xué)特性，具商業(yè)潛力，故進一步研究其純化方法。使用離心與飽和硫酸銨沉淀，成功純化出有活性的重組牛凝乳酶。蛋白最終回收率為1.82%，總活力比純化前提高了73.3%，比活力提高了95.3倍。同時，討論了如何提高包涵體復(fù)性率與產(chǎn)物回收率，為今后該酶的工業(yè)化生產(chǎn)提供技術(shù)參
食品與發(fā)酵工業(yè) 2017年4期2017-06-19
- 加拿大擬批準乳酸克魯維酵母提取的凝乳酶B、以及糖精在某些特定食品中使用
魯維酵母提取的凝乳酶B、以及糖精在某些特定食品中使用2017年4月19日，加拿大衛(wèi)生部在其官方網(wǎng)站上發(fā)布消息稱，收到一份食品添加劑的申請，要求批準由乳酸克魯維酵母CIN（yeast Kluyveromyceslactis CIN）提取的凝乳酶B的使用，乳酸克魯維酵母CIN來自乳制品如奶酪、夸克（一種新鮮奶酪）和發(fā)酵乳制品如酸奶、開菲爾和酸奶油中。其他生物來源的凝乳酶B，包括馬克斯克魯維酵母（Kluyveromycesmarxianusvar），（DS118
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2017年5期2017-04-08
- 枯草芽孢桿菌PNG27生產(chǎn)凝乳酶的發(fā)酵工藝優(yōu)化及分離純化研究
PNG27生產(chǎn)凝乳酶的發(fā)酵工藝優(yōu)化及分離純化研究陳蕊，別小妹，呂鳳霞，趙海珍，張充，陸兆新*(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇 南京，210095)通過單因素試驗、Plackett-Burman試驗設(shè)計、Box-Behnken響應(yīng)面試驗設(shè)計對培養(yǎng)基成分及發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，使最終發(fā)酵液凝乳酶活力達到222.34 ± 4.99 U/mL。采用乙醇分級沉淀、DEAE-纖維素離子交換柱層析和Sephadex G-100分子篩等分離手段對枯草芽孢桿菌PNG27凝乳酶進行分離純化
食品與發(fā)酵工業(yè) 2017年1期2017-02-15
- 解淀粉芽孢桿菌GSBa-1凝乳酶的生產(chǎn)及其酶學(xué)性質(zhì)研究
菌GSBa-1凝乳酶的生產(chǎn)及其酶學(xué)性質(zhì)研究騰軍偉，鄭喆，梅雪洋，付琦潔，張健，楊貞耐*(北京工商大學(xué),北京食品營養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心/食品添加劑與配料北京高校工程研究中心, 北京,100048)采用正交試驗設(shè)計優(yōu)化了解淀粉芽孢桿菌GSBa-1發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶的工藝條件：發(fā)酵溫度35 ℃，裝液量40%，搖床轉(zhuǎn)速180 r/min，發(fā)酵時間84 h。在此優(yōu)化條件下，獲得的凝乳酶凝乳活力為558.14 Su/mL。進一步研究了該酶的酶學(xué)性質(zhì)，凝乳酶最適反應(yīng)溫度
食品與發(fā)酵工業(yè) 2016年12期2017-01-09
- 駱駝凝乳酶的分子結(jié)構(gòu)與制備干酪的研究現(xiàn)狀
046)?駱駝凝乳酶的分子結(jié)構(gòu)與制備干酪的研究現(xiàn)狀普燕，馬曉林，張富春*，李軼杰(新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆生物資源基因工程重點實驗室，新疆 烏魯木齊，830046)駱駝凝乳酶與牛凝乳酶有著相似的一級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)，但二者對牛乳的親和力、催化速率卻有著較大的差異，研究其分子水平上的不同，對今后凝乳酶的蛋白質(zhì)工程改造有著重要意義。同時駱駝凝乳酶制備干酪苦味少，聯(lián)合駱駝凝乳酶與改良發(fā)酵劑制備新型低質(zhì)、低鹽干酪也成為干酪研發(fā)的方向之一。該文綜述了駱駝凝乳酶
食品與發(fā)酵工業(yè) 2016年10期2016-12-02
- 解淀粉芽孢桿菌GSBa-1產(chǎn)凝乳酶培養(yǎng)基組成的優(yōu)化
GSBa-1產(chǎn)凝乳酶培養(yǎng)基組成的優(yōu)化騰軍偉，楊貞耐*（北京工商大學(xué)食品添加劑與配料北京高校工程研究中心/食品質(zhì)量與安全北京實驗室，北京 100048）從甜酒曲中分離篩選得到1株解淀粉芽孢桿菌菌株GSBa-1，為了提高該菌株液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶的能力，采用單因素實驗和響應(yīng)面法優(yōu)化其產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成。通過單因素實驗分析了碳源、氮源、金屬鹽、磷源對菌株GSBa-1產(chǎn)凝乳酶的影響，并采用響應(yīng)面法對產(chǎn)酶培養(yǎng)基中麥芽糖、蛋白胨和酵母浸粉含量3個主要因素的優(yōu)化組合進行了定量研
食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報 2016年4期2016-10-18
- Paenibacillus spp. BD3526發(fā)酵小麥麩皮生產(chǎn)凝乳酶
酵小麥麩皮生產(chǎn)凝乳酶杭鋒1,2，洪青2，陶源1，王欽博2，劉振民2，陳衛(wèi)1*1(江南大學(xué) 食品學(xué)院，食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室，江蘇 無錫, 214122)2(乳業(yè)生物技術(shù)國家重點實驗室，光明乳業(yè)股份有限公司乳業(yè)研究院，上海，200436)摘要對Paenibacillus spp. BD3526凝乳酶的發(fā)酵條件和凝乳性能進行了研究，探討了不同培養(yǎng)基、發(fā)酵時間、碳源、氮源和裝液量對凝乳酶活力和活菌數(shù)的影響，并與商業(yè)化的小牛皺胃酶、重組凝乳酶、Rhizomu
食品與發(fā)酵工業(yè) 2016年2期2016-06-07
- 酒曲發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶及其酶學(xué)特性研究
8)酒曲發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶及其酶學(xué)特性研究趙愛梅，趙笑，段紫怡,楊亞威，滕軍偉，楊貞耐(北京工商大學(xué)食品質(zhì)量與安全北京實驗室,北京100048)通過研究不同因素對酒曲發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶的影響，確定適宜的產(chǎn)酶條件：酒曲添加量3%（質(zhì)量分數(shù)），發(fā)酵時間4 d，培養(yǎng)基初始pH值為6.0，搖床轉(zhuǎn)速120 r/m in。利用乙醇分級沉淀對酒曲發(fā)酵液中的凝乳酶進行提取，得到體積分數(shù)為70%乙醇沉淀蛋白具有凝乳活力；進一步進行Sephadex G-75凝膠過濾得到純化凝乳酶，并經(jīng)S
中國乳品工業(yè) 2016年2期2016-04-27
- 貫筋藤鮮莖中凝乳酶的提取工藝研究
）貫筋藤鮮莖中凝乳酶的提取工藝研究王紅燕1，陶 亮1，2，陳 森1，李 濤1，黃艾祥1*（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院云南昆明650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院云南昆明650201）以云南西北部地區(qū)的野生植物貫筋藤的鮮莖為原料，在單因素的試驗基礎(chǔ)上，采用L9（33）正交試驗方法，以貫筋藤鮮莖中凝乳酶活力為評價指標(biāo)，研究了不同的預(yù)處理方式、料液比、浸泡時間、浸泡溫度對其提取工藝的影響，確定了貫筋藤鮮莖中凝乳酶的最佳提取條件和提取率。結(jié)果表明，貫筋
中國釀造 2015年3期2015-12-27
- 干酪用牛凝乳酶替代品的研究進展*
830046)凝乳酶(milk clotting enzyme，MCE)，廣義上講是指能使乳液凝固的一類酶，被廣泛用于干酪加工初期的凝乳過程。凝乳酶由于來源不同，為了便于區(qū)分，進行如下定義:狹義上的凝乳酶(EC3.4.23.4)稱為chymosin，表示由哺乳動物體內(nèi)chymosin基因表達出的凝乳酶。從新生小動物(皺)胃中提取的天然的具有凝乳功能并用于干酪生產(chǎn)的酶制劑稱為rennet或皺胃酶粗提物，它的成分主要包括chymosin和胃蛋白酶，其中chym
食品與發(fā)酵工業(yè) 2015年5期2015-12-25
- 類芽孢桿菌發(fā)酵液提取凝乳酶方法研究*
200436)凝乳酶是干酪生產(chǎn)過程中起凝乳作用的關(guān)鍵性酶，通過水解k-酪蛋白中的Phe105-Met106肽鍵導(dǎo)致牛乳凝結(jié)［1］。近年來有關(guān)凝乳酶的來源、凝乳機理及小牛皺胃酶替代物均有較詳細的報道研究［2-3］。隨著世界干酪產(chǎn)業(yè)規(guī)模的不斷擴大和小牛皺胃酶的短缺，微生物來源凝乳酶因其產(chǎn)量大、成本較低、經(jīng)濟效益高的優(yōu)勢越來越廣泛地應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)中［4-8］。目前相關(guān)微生物產(chǎn)凝乳酶及其提純研究報道多集中在 Rhizomucor spp.、Mucor spp.、
食品與發(fā)酵工業(yè) 2015年12期2015-12-25
- 重組牛凝乳酶原與重組單峰駝凝乳酶原活化速率的初步比較*
830046)凝乳酶最先是以凝乳酶原的形式由胃黏膜細胞分泌，在胃的酸性環(huán)境下，酶原活化，從凝乳酶原的N端釋放出42個AA的肽段(propeptide)，形成有活性的凝乳酶［1］。凝乳酶從進化上來源于胃蛋白酶家族，不同種屬動物凝乳酶基因與蛋白的序列相似度極高［2］，將genbank獲得的單峰駝凝乳酶與牛凝乳酶編碼序列進行比對，其核酸與氨基酸的相似度分別為87.87% 和83.73%，比對兩種酶原的propeptide氨基酸序列，相似度為76.2%。有研究報道
食品與發(fā)酵工業(yè) 2015年7期2015-12-16
- 微小毛霉凝乳酶基因的定點突變及突變菌株的篩選
業(yè)新的增長點，凝乳酶是干酪產(chǎn)業(yè)的核心原料，其品質(zhì)決定了干酪的品質(zhì)。世界干酪生產(chǎn)中所使用凝乳酶約30%為微生物來源的基因工程凝乳酶[1-2]。我國干酪生產(chǎn)所使用的高品質(zhì)凝乳酶基本依賴進口，國產(chǎn)凝乳酶主要從小牛皺胃中獲得，來源不穩(wěn)定且成本較高。開發(fā)成本低、生產(chǎn)周期短的基因工程凝乳酶對于我國干酪產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要意義[3-5]。然而，微生物來源的基因工程凝乳酶普遍具有水解專一性差和熱穩(wěn)定性過高的缺陷[6-8]。本研究針對前期構(gòu)建的微小毛霉凝乳酶表達載體[9,10
中國乳品工業(yè) 2015年2期2015-12-16
- 凝乳酶對牦牛乳硬質(zhì)干酪成熟期間蛋白降解的影響
730070）凝乳酶對牦牛乳硬質(zhì)干酪成熟期間蛋白降解的影響王玲1，2，梁琪1，2，*，宋雪梅1，2，張炎1，2（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730070；2.甘肅省功能乳品工程實驗室，甘肅蘭州730070）以新鮮牦牛乳為原料，采用小牛皺胃酶、木瓜蛋白酶和微生物凝乳酶制作硬質(zhì)干酪，探討凝乳酶種類對牦牛乳硬質(zhì)干酪成熟期間蛋白質(zhì)降解的影響。結(jié)果表明：三種凝乳酶牦牛乳硬質(zhì)干酪成熟過程中，不同凝乳酶牦牛乳硬質(zhì)干酪在成熟期間蛋白質(zhì)降解能力存在較大差異，
食品工業(yè)科技 2015年14期2015-11-07
- 凝乳酶效價測定方法研究
00050)?凝乳酶效價測定方法研究李京，王悅，劉莉莎，任雪，范慧紅Δ(中國食品藥品檢定研究院，北京 100050)目的 考察凝乳酶效價測定方法的影響因素，改進凝乳酶效價測定方法；考察凝乳酶國家標(biāo)準品穩(wěn)定性、適用性。方法 考察不同奶粉底物和酶濃度對凝乳酶效價測定的影響；建立3×3量反應(yīng)平行線法，并對多批樣品進行測定，結(jié)果與絕對法、單點相對法進行比較；使用絕對法和統(tǒng)計分析對凝乳酶標(biāo)準品穩(wěn)定性進行考察；通過量反應(yīng)平行線法考察凝乳酶標(biāo)準品的適用性。結(jié)果 不同奶粉
中國生化藥物雜志 2015年10期2015-07-07
- 米黑毛霉產(chǎn)凝乳酶發(fā)酵條件研究
0）米黑毛霉產(chǎn)凝乳酶發(fā)酵條件研究文 / 關(guān)曉艷，師希雄，文鵬程，汪月，張忠明，張衛(wèi)兵（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 甘肅蘭州，730070）為了進一步提高米黑毛霉發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶的活力，采用單因素和正交試驗設(shè)計，對影響米黑毛霉產(chǎn)凝乳酶活力的起始pH、溫度、接種量及發(fā)酵時間等主要因素進行了優(yōu)化。結(jié)果表明: 溫度對米黑毛霉產(chǎn)凝乳酶活力影響最大，其次是接種量，發(fā)酵時間，起始pH 的影響較小。單因素和正交試驗結(jié)果確定的最佳發(fā)酵條件為: 在250mL三角瓶中裝發(fā)酵培養(yǎng)
中國食品工業(yè) 2015年7期2015-03-02
- 雙峰駝凝乳酶原基因的生物信息學(xué)分析
制作干酪所用的凝乳酶需求量大增。干酪加工中添加凝乳酶的主要目的是促使牛乳凝結(jié)，為排除乳清提供條件［1］。凝乳酶是一種從未斷奶的小牛皺胃中發(fā)現(xiàn)的天門冬氨酸蛋白酶，可以專一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe105-Met106之間的肽鍵，破壞乳中的酪蛋白膠束引起蛋白質(zhì)凝聚，因此在乳制品尤其是在干酪加工制作中應(yīng)用廣泛［2］，理想的凝乳酶應(yīng)能迅速、專一地打開κ-酪蛋白Phe105-Met106鍵，但水解蛋白其他肽鍵的能力較低，即兩者的活力比值要高［3］。凝乳酶凝乳后制成
生物信息學(xué) 2014年1期2014-11-14
- 發(fā)酵條件對產(chǎn)酶的影響
12400）產(chǎn)凝乳酶活力及C/P（clotting activities/proteolytic activities）值不僅受菌株本身性質(zhì)的影響，還和發(fā)酵條件有關(guān)。由于液態(tài)發(fā)酵的發(fā)酵條件可控，在工業(yè)化生產(chǎn)凝乳酶方面有較大優(yōu)勢。由于絲狀真菌適合在固態(tài)培養(yǎng)條件下生長，本章首先將固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)與液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)進行對比實驗，選擇優(yōu)勢較大的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基；然后對液態(tài)培養(yǎng)不同孢子培養(yǎng)基、接種量、發(fā)酵時間及溫度進行優(yōu)化試驗。發(fā)酵；條件；產(chǎn)酶1 材料與方法1.1 菌株及培養(yǎng)
中國醫(yī)藥指南 2014年14期2014-04-19
- 牛凝乳酶基因在畢赤酵母中的表達
62）0 引言凝乳酶是從未斷奶的小牛第四胃中提取的一種天冬氨酸蛋白酶，它可以切斷牛乳κ－酪蛋白的Phe－Met肽鍵，導(dǎo)致牛乳凝結(jié)［1］.在小牛皺胃中，凝乳酶通常合成為一個含有381個氨基酸的前體聚肽—凝乳酶原前體，凝乳酶原前體在分泌過程中去掉16個信號肽形成含有365個氨基酸的凝乳酶原［2］.凝乳酶原無活性，它在酸性pH下通過多步的自動催化過程，去掉N末端42個氨基酸形成有活性的含有323個氨基酸的蛋白－凝乳酶［3］.目前，凝乳酶年均需求量為2.5×107
湖北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2014年3期2014-03-27
- 產(chǎn)凝乳酶微生物的研究概況
程，張衛(wèi)兵*產(chǎn)凝乳酶微生物的研究概況李學(xué)朋1，梁琪1，師希雄1，馮瑞章2，張炎1，文鵬程1，張衛(wèi)兵1*（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730070；2.宜賓學(xué)院發(fā)酵資源與應(yīng)用四川省高校重點實驗室，四川宜賓644000）凝乳酶用途廣泛，其來源主要有動物凝乳酶、植物凝乳酶和微生物凝乳酶，微生物凝乳酶一直是凝乳酶研究的熱點。對近年來國內(nèi)外產(chǎn)凝乳酶真菌、細菌和放線菌種類以及產(chǎn)凝乳酶微生物的選育的研究情況進行了綜述，以期為微生物凝乳酶的研究和開發(fā)提供參
中國釀造 2014年4期2014-03-04
- 牛凝乳酶原基因在食品級乳酸乳球菌中的重組表達
00081）牛凝乳酶原基因在食品級乳酸乳球菌中的重組表達張艷麗1,2，聶春明2，周利偉2，張 偉2，張宇宏2,*，楊曉紅1,*（1.南方山地園藝學(xué)教育部重點實驗室，西南大學(xué)園藝園林學(xué)院，重慶 400715；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所，北京 100081）將牛凝乳酶原基因連接pNZ8149載體，并轉(zhuǎn)化乳酸乳球菌NZ3900，經(jīng)乳酸鏈球菌素Nisin誘導(dǎo)，測得重組菌株胞內(nèi)凝乳酶活力達到0.7 SU/mL，培養(yǎng)基中檢測不到凝乳酶活力，實現(xiàn)了牛凝乳酶原基因在
食品科學(xué) 2014年7期2014-01-18
- 原核表達重組牛凝乳酶原及重組牛凝乳酶酶學(xué)特性*
830046)凝乳酶是制造干酪過程中起凝乳作用的關(guān)鍵性酶，對干酪的質(zhì)構(gòu)及干酪特有風(fēng)味的形成有非常重要的作用。它存在于未斷奶的哺乳動物胃中，能夠?qū)Ｒ恍粤呀猞?酪蛋白多肽鏈105～106位的苯丙氨酸和甲硫氨酸之間的肽鍵［1－3］，使得酪蛋白沉淀凝聚，乳清排出。凝乳酶的傳統(tǒng)來源是吃奶的小牛皺胃(第四胃)，可用來制作各種類型的干酪，也是衡量其他凝乳酶代用品的標(biāo)準。隨著世界范圍內(nèi)干酪市場需求的日益增長，來源于小牛皺胃的凝乳酶制劑難以滿足干酪制作的需求量，人們開始尋找
食品與發(fā)酵工業(yè) 2013年8期2013-11-19
- 凝乳酶在干酪生產(chǎn)中的應(yīng)用
型干酪，即通過凝乳酶的作用促進凝乳的形成。凝乳酶的作用關(guān)系到干酪品質(zhì)的好壞與干酪生產(chǎn)的經(jīng)濟效益，在干酪生產(chǎn)中的作用至關(guān)重要。目前，隨著干酪產(chǎn)量的快速增長，傳統(tǒng)的小牛皺胃凝乳酶的生產(chǎn)已經(jīng)處于供不應(yīng)求的狀態(tài)，探尋新來源凝乳酶成為了目前研究的熱點。1 凝乳酶概述凝乳酶在干酪生產(chǎn)中的使用可以追溯到約公元前6000年，舊石器時代的人們用小牛的皺胃作為容器盛裝牛乳的過程中發(fā)現(xiàn)牛乳凝集現(xiàn)象，從而使得皺胃凝乳酶在干酪生產(chǎn)中的應(yīng)用成為了可能[1]。凝乳酶按來源可分為動物性凝
中國乳業(yè) 2013年1期2013-10-09
- 一株產(chǎn)凝乳酶解淀粉芽孢桿菌的篩選、鑒定及酶學(xué)性質(zhì)
000）一株產(chǎn)凝乳酶解淀粉芽孢桿菌的篩選、鑒定及酶學(xué)性質(zhì)張衛(wèi)兵1，2，3，甘伯中1，2，3，*，梁 琪1，2，3，米 蘭1，2，3，張 炎1，2，3（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州730070；2.甘肅省功能乳品工程實驗室，甘肅蘭州730070；3.甘肅省干酪素工程技術(shù)研究中心，甘肅蘭州730000）采用酪蛋白培養(yǎng)基，從甘南牦牛放牧區(qū)分離篩選產(chǎn)凝乳酶細菌。通過形態(tài)學(xué)、生理生化特征和16S rDNA序列同源分析對菌株進行鑒定，并對該菌株所產(chǎn)凝乳
食品工業(yè)科技 2012年7期2012-11-02
- 復(fù)合凝乳酶膠囊治療功能性消化不良的臨床療效觀察
用單獨服用復(fù)合凝乳酶膠囊、莫沙比利和聯(lián)合使用復(fù)合凝乳酶膠囊、莫沙比利的方式進行治療，以觀察應(yīng)用復(fù)合凝乳酶治療FD的臨床療效。研究結(jié)果報告如下。1 資料與方法1.1 一般資料 以2010年6月至2011年2月來我院消化內(nèi)科門診治療的150例功能性消化不良患者作為研究對象，按隨機數(shù)字表法將病例分為3組:復(fù)合凝乳酶組50例，男23例，女27例，年齡24～68歲，平均年齡46歲;莫沙比利組50例，男21例，女29例，年齡23～72歲，平均51歲;復(fù)合凝乳酶聯(lián)用莫沙
中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2012年1期2012-11-01
- 酸-酶共促凝乳的研究進展
中會加入少量的凝乳酶以促進凝乳，這種凝乳方式為酸-酶共促型凝乳。盡管酸-酶共促凝乳對新鮮干酪的生產(chǎn)極其重要，但有關(guān)酸-酶共促作用的研究直到近些年才有所報道。本文在概述酶凝、酸凝的基礎(chǔ)之上，對酸-酶共促凝乳的性質(zhì)及影響等研究進行了論述，以期明確酸及凝乳酶在促進凝膠形成過程中的作用。1 酶凝乳及酸凝乳概述酪蛋白是形成凝乳的主要成分，在自然狀態(tài)下，牛乳中的酪蛋白多以膠束的形式存在，粒徑為20～300 nm，由αs1-，αs2-，β-，κ- 這4 種酪蛋白組成，其
中國乳業(yè) 2012年5期2012-04-13
- 微小毛霉凝乳酶的分離純化研究
730070)凝乳酶是生產(chǎn)奶酪及凝乳酶干酪素中使牛乳凝固的關(guān)鍵性酶，它是一種天冬氨酸蛋白酶，其主要的生物學(xué)功能是限制性剪切酪蛋白Phe105～Met106之間的肽鍵，從而導(dǎo)致牛奶的凝結(jié)，因此被廣泛應(yīng)用于奶酪制造業(yè)和干酪素產(chǎn)業(yè)［1］。凝乳酶來源廣泛，在動植物以及微生物中都有，傳統(tǒng)的凝乳酶來源于小牛的皺胃，但是隨著世界奶酪產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，單純靠宰殺大量的小牛獲取凝乳酶顯然與現(xiàn)代工業(yè)的發(fā)展不相符，植物凝乳酶雖然來源廣泛，但是其蛋白水解力強，并且受時間、地點等的限
微生物學(xué)雜志 2012年2期2012-01-12
- 牛凝乳酶原基因在大腸桿菌中的高效表達及活性檢測
02206）牛凝乳酶原基因在大腸桿菌中的高效表達及活性檢測張俊瑞1，馬夏吟1，張紅星2，郝彥玲1（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083；2.北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)學(xué)院，北京 102206）以實驗室保存的攜帶凝乳酶原前體基因的重組載體pMD 19-T/bPPC為模板克隆凝乳酶原基因，經(jīng)雙酶切后與載體pET-30a連接得到重組載體pET-30a/bPC，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21（DE3），經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后，采用SDS-PAGE檢測目的蛋白表達情況
中國乳品工業(yè) 2012年3期2012-01-08
- 微小毛霉發(fā)酵制取凝乳酶的培養(yǎng)基優(yōu)化研究
小毛霉發(fā)酵制取凝乳酶的培養(yǎng)基優(yōu)化研究張麗紅1，2，王 昕1，樸姍善1，鄭 麗1，2，楊貞耐1，2，*(1.吉林大學(xué)生物與農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，吉林長春130024;2.中國農(nóng)業(yè)科技東北創(chuàng)新中心農(nóng)產(chǎn)品加工研究中心，吉林長春130033)利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化微小毛霉的發(fā)酵培養(yǎng)基，提高微小毛霉凝乳酶的凝乳活力。在單因素實驗的基礎(chǔ)上，用Design－Expert軟件對實驗數(shù)據(jù)進行多元回歸分析，建立了3種因素與凝乳酶活力之間的函數(shù)關(guān)系，得出在基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基中加入的氯化鈣、乳
食品工業(yè)科技 2011年9期2011-10-25
- 牛初乳乳清制備的研究
。1.3 試劑凝乳酶：效價1:5000；CaCl2·2H2O：分析純；NaCl：分析純。1.4 試驗方法1.4.1 原料奶的脫脂脫脂的目的是除去腥味，有助于對初乳乳清的進一步提取，防止由于原料奶中脂肪的存在而對凝乳效果產(chǎn)生影響。由于原料的特殊性，在對原料奶進行脫脂前，應(yīng)將其預(yù)熱到25～30 ℃，以保證其中的活性因子不被破壞。分離過程如下：原料奶預(yù)熱→分離→收集。1.4.2 凝乳酶活力的測定凝乳酶的活力指1 mL凝乳酶溶液（或1 g）干粉在35 ℃的條件下，
中國乳業(yè) 2011年3期2011-04-13
- 枯草芽孢桿菌產(chǎn)凝乳酶發(fā)酵條件的優(yōu)化
枯草芽孢桿菌產(chǎn)凝乳酶發(fā)酵條件的優(yōu)化丁明亮，歐陽安然，王望斐，顧正華，丁重陽*，張 梁，石貴陽(工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室，江南大學(xué)生物工程學(xué)院，江蘇 無錫 214122)為進一步提高枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)凝乳酶(milking-clotting enzyme，MCE)的能力，采用單因素試驗和響應(yīng)曲面法對枯草芽孢桿菌液態(tài)發(fā)酵的產(chǎn)酶條件進行研究和優(yōu)化。結(jié)果表明：最優(yōu)發(fā)酵工藝為：葡萄糖添加量16.2g/L，在500mL三角
食品科學(xué) 2011年3期2011-03-30
- 新疆奶酪現(xiàn)狀及前景探討
酪的凝乳機理、凝乳酶特性及其在新疆奶酪中的應(yīng)用現(xiàn)狀等問題進行了詳細介紹，進而探討了新疆奶酪產(chǎn)業(yè)的發(fā)展前景。奶酪；凝乳；酸凝奶酪；酶凝奶酪；凝乳酶0 引 言奶酪具有悠久歷史，據(jù)說世界上關(guān)于奶酪最早的記錄是在12000年以前，當(dāng)時人們將牛奶倒入動物內(nèi)臟內(nèi)攜帶，在遷徙路途中，牛奶經(jīng)過不停的振蕩發(fā)酵形成奶酪。在新疆，哈薩克族、蒙古族等游牧民族素來習(xí)慣制作并食用稱“奶疙瘩”的奶酪。奶疙瘩是一種以牛奶為原料，約1/10比例濃縮原料奶中的蛋白質(zhì)和脂肪的奶酪。同時牛奶經(jīng)乳
中國乳品工業(yè) 2011年10期2011-02-14
- 我國凝乳酶產(chǎn)生菌育種的研究進展
2000）我國凝乳酶產(chǎn)生菌育種的研究進展張超壘1，王成忠1，張志國1,2,張玲梅3（1.山東輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院,濟南 250353；2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,南京 210095；3.山東龍大植物油有限公司，山東聊城 252000）綜述了目前我國在凝乳酶產(chǎn)生菌在自然選育、誘變育種和基因工程育種這3方面的研究進展情況。微生物凝乳酶；自然選育；誘變育種；基因工程育種0 引言隨著人們生活水平的提高及生活觀念的轉(zhuǎn)變，奶酪生產(chǎn)行業(yè)得到了很快的發(fā)展，與之相
中國乳品工業(yè) 2011年4期2011-02-13
- 凝乳酶的研究進展
150010）凝乳酶的研究進展劉佟1， 崔艷華1，張?zhí)m威1，曲曉軍2（1.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，哈爾濱 150090；2.黑龍江省科學(xué)院微生物研究所，哈爾濱 150010）凝乳酶是一種最早在未斷奶的小牛胃中發(fā)現(xiàn)的天門冬氨酸蛋白酶，可專一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe105-Met106之間的肽鍵，破壞酪蛋白膠束使牛奶凝結(jié)，凝乳酶的凝乳能力及蛋白水解能力使其成為干酪生產(chǎn)中形成質(zhì)構(gòu)和特殊風(fēng)味的關(guān)鍵性酶，被廣泛地應(yīng)用于奶酪和酸奶的制作。本文以牛凝乳酶
中國乳品工業(yè) 2011年8期2011-01-04
- 重組凝乳酶原在大腸桿菌中的表達及活性研究
0046）重組凝乳酶原在大腸桿菌中的表達及活性研究李新蘋，劉歡歡，普燕，張富春，李軼杰（新疆大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，烏魯木齊 830046）為了提高干酪生產(chǎn)中起重要凝乳作用的凝乳酶的原核表達效率，分析了Genbank中牛、羊和駱駝凝乳酶原（prochymosin，pCHY）的保守序列及大腸桿菌密碼子的偏愛性，合成了凝乳酶原序列，并將其克隆至大腸桿菌原核表達載體上。經(jīng)IPTG的誘導(dǎo)得到高效表達的凝乳酶原；Western blotting檢測證明了其具有免疫
中國乳品工業(yè) 2011年9期2011-01-04
- 6種凝乳酶在干酪制作過程中理化特性的研究
5021）6種凝乳酶在干酪制作過程中理化特性的研究趙秀玲（黃山學(xué)院 旅游學(xué)院，安徽 黃山 245021）以西安常興乳品廠的新鮮奶為原料，添加EZAL MAO11乳酸發(fā)酵劑，研究牛奶干酪加工過程中酸度和出品率的變化，以及不同凝乳酶對它們的影響。結(jié)果表明，牛奶干酪加工過程中，酸度緩慢上升，而不同凝乳酶對酸度無顯著影響（P＞0.05）;不同凝乳酶對干酪出品率的影響：羔羊皺胃酶＞小牛皺胃酶＞微生物凝乳酶＞豬胃蛋白酶＞木瓜蛋白酶＞無花果蛋白酶。凝乳酶；干酪制作；理化
黃山學(xué)院學(xué)報 2010年5期2010-12-21
- 重組微小毛霉凝乳酶的發(fā)酵條件及其酶學(xué)性質(zhì)
*重組微小毛霉凝乳酶的發(fā)酵條件及其酶學(xué)性質(zhì)李玉秋，王景會，李鐵柱，張 莉，楊貞耐*(吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究中心，吉林 長春 130033)通過對重組微小毛霉凝乳酶(recombinant Mucor pusillus rennet，RMPR)發(fā)酵條件的研究，確定甲醇誘導(dǎo)體積分數(shù)1%、初始OD600nm0.5、裝瓶量100mL/500mL搖瓶、誘導(dǎo)時間96h為發(fā)酵最適條件。培養(yǎng)液離心取上清用硫酸銨分級沉淀獲得粗酶液，并對其酶學(xué)性質(zhì)進行研究，經(jīng)測定該酶
食品科學(xué) 2010年19期2010-09-15
- 牛凝乳酶全長cDNA的克隆及其原核表達載體的構(gòu)建
30033)牛凝乳酶全長cDNA的克隆及其原核表達載體的構(gòu)建張莉, 姜媛媛, 張健, 楊貞耐＊(吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究中心,吉林長春 130033)從小牛皺胃中提取凝乳酶(Chymosin)總RNA,經(jīng)過RT-PCR獲得凝乳酶cDNA,純化后與pMD-18T載體連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109,通過雙酶切和序列測定,獲得了凝乳酶全長基因序列。序列測定表明,凝乳酶全長核苷酸長度為1 143 bp,編碼381個氨基酸。與GenBank上已發(fā)表序列NM_18
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2010年2期2010-08-27
- 凝乳酶的研究進展
730070）凝乳酶的研究進展朱仁俊1，石振興1，甘伯中2，胡永金1（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科技學(xué)院，昆明 650201；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品與科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州 730070）介紹了凝乳酶的來源結(jié)構(gòu)、理化特性及凝乳機理，對提高微生物源凝乳酶的活力、產(chǎn)量的研究進展及未來凝乳酶研究領(lǐng)域的開發(fā)進行了綜述，并對其應(yīng)用前景和開發(fā)進行展望。凝乳酶；干酪；凝乳活力；蛋白分解力0 引 言凝乳酶是干酪生產(chǎn)中使乳液凝固的關(guān)鍵性酶。它對干酪的質(zhì)構(gòu)形成及特有風(fēng)味的形成有非常重
中國乳品工業(yè) 2010年1期2010-02-12
- 重組凝乳酶搖瓶發(fā)酵條件的初步優(yōu)化研究
魏祥法摘 要:凝乳酶是一種酸性蛋白酶,用作動物飼料添加劑,可提高動物特別是幼齡動物對飼料中蛋白成分的消化吸收率,促進其生長。本試驗研究了由畢赤酵母胞外表達多拷微小毛霉凝乳酶的搖瓶發(fā)酵條件。確定最佳表達條件為:甲醇每24 h添加1.0%,無氨基酵母氮源培養(yǎng)基(YNB)添加1.5%,采用pH 6.0的磷酸緩沖液,誘導(dǎo)120 h,在此條件下,重組凝乳酶的產(chǎn)量可達6 500 IU/ml。關(guān)鍵詞:凝乳酶;發(fā)酵條件;畢赤酵母中圖分類號:S816.79 文獻標(biāo)識號:A
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2009年12期2009-01-15