安胎顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

【中圖分類號(hào)】R286 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1007-8517（2025）10-0057-06

DOI： 10.3969/j . issn.1007 -8517. 2025.10. zgmzmjyyzz202510011

Study onQuality Standard of Antai Granules

YE Wenqi1XU Dinghao2 1.Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 31Oo23，China; 2.Biological science College of Life Science Tianjin University，Tianjin 3OoO72，China

Abstract：ObjectiveTobuildthemethodforqualitycontrolofAntaiGranules.MethodsTLCmethodwasused toidentifyAstragaliRadix，AsiniCoriiColla，PaeoniaeRadixlbaandDipsaciRadixinthepreparation.The DiaponinsVwasdeterminedwith the wavelengths of 212nm ，Agilent EC-C₁₈ column （ 150mm×4.6mm ， 4μm ），mobile phase of acetonitrile-water（26：74）， the column temperature 3O degrees centigrade，the flow rate of 1.0mL per minute and the injection volume of 10μL Results TLC spotswereclear，egativeandnoterference，AstragaliRadix，AsiniCori Coll，PaeonaeRadixlbaandDipsaciRadixwef tively identified.Diaponins Vwas in a good linear relationship in the range of O.4802＼～9. 6045μg （ r=0 .9997），The average recovery rates was 99.8% and RSD was 2.7% . Conclusion This method is efficient and accurate，can be applied to the quality control of Antai Granules.

Keywords：AntaiGranules；DiaponinsVI；Quality Standard;HPLC

安胎顆粒為醫(yī)院制劑，源自婦科臨床經(jīng)驗(yàn)方“安胎飲”，由苧麻根、黃芩、酒白芍、枸杞子、麩炒白術(shù)、菟絲子、炒黃芪、阿膠珠、續(xù)斷片等16味中藥組成，具有益氣健脾，補(bǔ)腎安胎的功效，臨床主要用來治療先兆流產(chǎn)、胎動(dòng)不安[1]。本研究采用薄層色譜法建立炒黃芪、酒白芍、阿膠珠、黃芩的定性鑒別方法，采用HPLC法測(cè)定川續(xù)斷皂苷VI的含量[2-5]，為該制劑的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)提供參考和依據(jù)。

1儀器與試藥

ME204-E電子分析天平（瑞士梅特勒公司），G型薄層層析硅膠板（青島海洋化工），高效液相色譜系統(tǒng)（美國(guó)Agilent1260、日本島津LC2030C-3Dplus）。對(duì)照品見表1，均為中國(guó)食品藥品檢定研究院購(gòu)入。

HPLC乙腈（TEDIA），AR甲醇（成都科?。?，實(shí)驗(yàn)室自制超純水，安胎顆粒（批號(hào)：S1、S2、S3、S4；規(guī)格： 10g/ 袋）。

2方法與結(jié)果

2.1薄層鑒別取安胎顆粒樣品研細(xì)后均照TLC色譜法（《中國(guó)藥典》2020版四部通則0502）項(xiàng)下試驗(yàn)，比較供試品色譜與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上的對(duì)應(yīng)及陰性樣品有無干擾。

2.1.1炒黃芪的鑒別供試品溶液制備：取 加甲醇 50mL ，超聲處理 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?20mL 水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次 20mL ，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次[6-7]，每次 20mL ，棄去氨試液，再用正丁醇飽和水 20mL 洗滌，保留正丁醇液蒸干，殘?jiān)?80% 甲醇 1mL 使溶解，即得。對(duì)照品溶液： 0.5mg/mL 黃芪甲苷溶液， 80% 甲醇作溶劑。色譜條件及結(jié)果：缺炒黃芪陰性樣品無干擾（見表2，如圖1所示）。

2.1.2阿膠珠的鑒別供試品溶液制備：取 置厭氧瓶中，加入 25mL 濃度 3mol/L 的鹽酸溶液，攪拌均勻后加蓋密封，置烘箱中加熱 6h ，烘箱溫度為 105C ，放冷，濾過，再加水 30mL 蕩洗，殘?jiān)鼮V過并人濾液，濾液加氫氧化鈉飽和液調(diào)節(jié) pH5～6 ，加熱濃縮至 5～10mL ，加于732強(qiáng)酸苯乙烯陽(yáng)離子交換樹脂柱（柱長(zhǎng) 16cm ，內(nèi)徑1.5cm ，需前處理）上[10]，加水 100mL 洗脫，棄去洗脫液，用 3% 的氨溶液 10mL 洗脫，收集中性及酸性的洗脫液，蒸干，殘?jiān)?50% 乙醇 1mL 使溶解，即得。對(duì)照品溶液： 1mg/1mL 甘氨酸溶液，溶劑為 50% 乙醇[11-13]。色譜條件及結(jié)果：缺阿膠珠陰性樣品無干擾（見表3，如圖2）。

1、2為缺阿膠珠陰性樣品，點(diǎn)樣量分別為 10μL 、 15μL 3、4、5為安胎顆粒，點(diǎn)樣量分別為 5μL ， 10μL ， 15μL 6為甘氨酸對(duì)照品，點(diǎn)樣量 1μL

2.1.3酒白芍的鑒別供試品溶液制備：取 ，置圓底燒瓶中，加乙醇 10mL 浸潤(rùn)，再加乙酸乙酯50mL ，加熱回流 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?1mL 使溶解，加于中性氧化鋁柱（ 100～200 目， 3g ，內(nèi)徑 1.5cm ）上[14]，用50mL乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至 1mL ，即得。對(duì)照品溶液： 1mg/mL 芍藥昔溶液，溶劑為乙醇。色譜條件及結(jié)果：缺酒白芍陰性樣品無干擾（見表4，如圖3所示）。

2.1.4黃芩的鑒別供試品溶液制備：取約 5g 置圓底燒瓶中，加入 30mL 乙酸乙酯-甲醇（3：1）的混合溶液，加熱回流 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?1mL 使溶解，即得[15]。對(duì)照品溶液： 1mg/mL 黃芩苷溶液，溶劑為甲醇。色譜條件及結(jié)果：缺黃芩陰性對(duì)照無干擾（見表5，如圖4所示）。

圖3酒白芍薄層鑒別圖譜表5安胎顆粒黃芩薄層鑒別表

1、2為缺酒白芍陰性樣品，點(diǎn)樣量分別為10μL， 15μL ；3、4、5為安胎顆粒樣品，點(diǎn)樣量分別為 ⁵μL， 10μL， 15μL; 6、7、8為芍藥苷對(duì)照品，點(diǎn)樣量分別為5μL，10μL，15μL

2.2 川續(xù)斷皂苷V的含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 后續(xù)實(shí)驗(yàn)均按該項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定。

2.2.2對(duì)照品溶液的配制取川續(xù)斷皂苷V對(duì)照品，精密稱定，加適量甲醇溶解，使其成為濃度為1mg/mL 的貯備液。精密量取上述溶液適量，加乙腈-水（26：74）的混合溶液稀釋成 0.15mg/mL搖勻，即得。

2.2.3供試品溶液的制備取安胎顆粒，研細(xì)，精密稱定 3g ，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱重，超聲處理 30min ，放冷，再稱重，用溶劑補(bǔ)重，搖勻，過 0.45μm 濾膜，取續(xù)濾液，即得[16] C

2.2.4陰性對(duì)照溶液的制備取缺續(xù)斷片的安胎顆粒陰性樣品，照“2.2.3”項(xiàng)下方法操作，制成缺續(xù)斷片陰性對(duì)照溶液。

2.2.5 方法學(xué)驗(yàn)證

2.2.5.1專屬性考察取對(duì)照品溶液、安胎顆粒樣品溶液、空白溶劑及缺續(xù)斷片陰性對(duì)照溶液進(jìn)樣。樣品在與對(duì)照品保留時(shí)間相同處出鋒，且與前后小峰分離度 gt;1.5 ，理論板數(shù) gt;3000 ，陰性無干擾（如圖5）。

2.2.5.2線性關(guān)系的考察貯備液（L6）：精密稱定 0.02037g 川續(xù)斷皂苷V對(duì)照品（含量測(cè)定純度 94.3% ），加甲醇溶解并定容至 20mL ，搖勻。用甲醇將L6貯備液（濃度為 960.4455μg/mL ）稀釋至不同濃度。L1：L6貯備液 0.5mL10mL ，濃度為 48.0223μg/mL . 12：L6 貯備液 mL，濃度為 96.0446μg/mL ; 貯備液 1.6mL ，濃度為 153.6713μg/mL ： 貯備液3mL5mL ，濃度為 576.2673μg/mL ；L4：L5貯備液3mL5mL ，濃度為 345.7604μg/mL ；L1＼～L6進(jìn)樣測(cè)定并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見表7。

2.2.5.3精密度試驗(yàn)進(jìn)樣測(cè)定同一對(duì)照品溶液S1（ n=5 ），計(jì)算其峰面積RSD為 0.1% ，儀器精密度良好。

2.2.5.4重復(fù)性試驗(yàn)進(jìn)樣測(cè)定按“2.2.3”制備的安胎顆粒樣品（ n=6 ），算得川續(xù)斷皂苷VI含量的RSD為 2.7% ，重復(fù)性良好[5]

2.2.5.5 重現(xiàn)性試驗(yàn)精密稱取同一批號(hào)的安胎顆粒樣品（ n=6 ），由不同人員使用不同HPLC，按重復(fù)性試驗(yàn)方法測(cè)定并計(jì)算含量，測(cè)得川續(xù)斷皂苷VI含量RSD為 1.1% 。本法具有良好的重現(xiàn)性[5]。

2.2.5.6加樣回收率試驗(yàn)精密稱定 _1.5g 已知含量的安胎顆粒，取L6貯備液 1.9mL 加入，揮干后按重復(fù)性試驗(yàn)方法測(cè)定并計(jì)算含量。見表8。本法回收率良好。

2.2.5.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，室溫放置，在 0～40h 內(nèi)每隔一段時(shí)間進(jìn)樣，測(cè)得樣品中川續(xù)斷皂苷V峰面積 RSD=1.4% （ n=12 ）， 40h 內(nèi)該溶液具有穩(wěn)定性[5]

2.2.6樣品含量測(cè)定取 S2～S4 樣品，按S1制備方法處理并進(jìn)樣，測(cè)得3批顆粒中川續(xù)斷皂昔VI的含量。結(jié)果見表9。

3討論

炒黃芪薄層鑒別中分別對(duì)三種展開劑進(jìn)行比較，結(jié)果表明：采用三氯甲烷－甲醇－水系統(tǒng)展開后，主斑點(diǎn)的Rf值適中，分離效果佳，故最終選用該展開劑。炒黃芪、酒白芍、阿膠珠和黃芩的TLC鑒別色譜條件經(jīng)過不同溫濕度考察和不同廠家薄層板比較，展開效果均良好。同時(shí)，對(duì)枸杞子的甜菜堿、墨旱蓮的對(duì)照藥材及旱蓮苷A、黨參的黨參炔苷等藥味也進(jìn)行了鑒別指標(biāo)的摸索，均未發(fā)現(xiàn)與對(duì)照品顏色相同的斑點(diǎn)或陰性樣品有干擾，故未能建立薄層鑒別方法。

定量鑒別中，本實(shí)驗(yàn)分別研究了黃芪甲苷、芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷作為含量測(cè)定指標(biāo)的可能性。黃芪甲苷藥典使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行含量測(cè)定，不同儀器響應(yīng)相差較大，耐用性考察未通過；芍藥昔以乙腈 -0.1% 磷酸溶液作為流動(dòng)相，調(diào)整等度及梯度洗脫比例和樣品提取方法，陰性干擾均不能完全消除；毛蕊異黃酮葡萄糖昔流動(dòng)相為乙腈 -0.1% 甲酸溶液，改變甲酸溶液濃度至 0.2% 、 0.4% ，供試品目標(biāo)峰峰型較差且分離效果均不佳，故不列入含量指標(biāo)。

4結(jié)論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，定性實(shí)驗(yàn)中，炒黃芪、酒白芍、阿膠珠和黃芩的供試品色譜中，主斑點(diǎn)顯色清晰，陰性無干擾，均能有效鑒別。定量實(shí)驗(yàn)中，川續(xù)斷皂苷V液相操作方法專屬性強(qiáng)，線性關(guān)系好，加樣回收率符合要求。綜上，本研究建立的方法可用于安胎顆粒的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

[1］國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典：一部［M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020：344.

[2］單秀明，王瑾，吳愛英．HPLC法測(cè)定跌打片中川續(xù)斷皂苷V的含量［J]．中國(guó)藥師，2013，16（3）：388-390.

[3］謝仕偉，梁沃華．HPLC法測(cè)定續(xù)斷配方顆粒中川續(xù)斷皂苷VI的含量［J]．中國(guó)中醫(yī)藥咨訊，2011，3（3）：1.

[4］馮良．反相高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定滇女金丸中黃芪甲苷，川續(xù)斷皂苷VI的含量［J]．中國(guó)實(shí)用醫(yī)刊，2017，44（22）：123-125.

[5］楊曉騰，滕統(tǒng)華．祛風(fēng)止痛膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J].中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2016，17（1）：24-27.

[6］李喜香，張志瑞，畢映燕，等．祛寒逐風(fēng)顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J]．中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2020，27（2）：53-58.

[7］汪祺，張聿梅，戴忠，等．黃芪中皂苷類成分的特征薄層圖譜鑒別［J]．中國(guó)藥事，2011，25（12）：1227-1229，1232.

［8］鄒榆紅，黃毅嵐．強(qiáng)腰壯骨膏的薄層鑒別［J]．瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（1）：68-69.

[9］李慧慧，汪現(xiàn)，張錚，等．桑菊感冒合劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J]．海峽藥學(xué)，2011，23（2）：59-61.

[10］郭巧技，宋瀟瀟，劉吉金，等．調(diào)經(jīng)丸的薄層色譜鑒別［J]．中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009，3（18）：125-126.

［11］畢曉黎．復(fù)方甲亢膠囊的藥學(xué)研究［D]．武漢：湖北中醫(yī)學(xué)院，2004.

[12］方文清．玉泉丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J]．海峽藥學(xué)，2012，24（10）：58-60.

[13］金芳，雷茂華，宋坤．復(fù)方功血沖劑中阿膠的薄層色譜鑒別［J]．中藥材，1998（2）：95.

[14］李慧林．清熱通淋顆粒的研究［D]．濟(jì)南：山東中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

[15］劉茂軍，房志仲，李錫晶，等．疏肝利膽片質(zhì)控方法研究［J]．天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，15（3）：508-511，524.

［16］夏冬梅.藏藥“俄色葉”的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［D]．成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2015.（收稿日期：2024-08-20編輯：陶希睿）