磷酸化

價(jià)修飾[1]。磷酸化修飾是最常見、最重要的翻譯后修飾，它發(fā)生于底物蛋白絲氨酸（S）、蘇氨酸（T）或酪氨酸（Y）殘基，幾乎參與細(xì)胞的所有生命過(guò)程，如細(xì)胞分裂、蛋白質(zhì)分解、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達(dá)調(diào)控和蛋白質(zhì)相互作用等[2]。鐵死亡的概念于2012 年被Dixon 首次提出，是一種由不受限制的脂質(zhì)過(guò)氧化和隨后的膜損傷引起的編程性細(xì)胞死亡[3]。氧化還原失調(diào)、鐵穩(wěn)態(tài)失衡是細(xì)胞發(fā)生鐵死亡的重要基礎(chǔ)[4]。本文就近年來(lái)研究較多的鐵死亡關(guān)鍵蛋白進(jìn)行綜述，以期為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床

鮑宇摘要 磷酸化修飾是膜蛋白翻譯后修飾的重要類型之一，由蛋白激酶和磷酸酶共同調(diào)節(jié)而保持一種動(dòng)態(tài)平衡，在正常生命活動(dòng)乃至腫瘤發(fā)生中發(fā)揮調(diào)控作用。磷酸化修飾誘導(dǎo)膜蛋白結(jié)構(gòu)變化可調(diào)節(jié)蛋白之間結(jié)合活力，而關(guān)鍵磷酸化位點(diǎn)突變可破壞蛋白結(jié)合并解除相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)。與其他蛋白不同，膜蛋白需要以質(zhì)膜為介質(zhì)發(fā)揮功能作用，由于膜組成復(fù)雜性和不對(duì)稱性，磷酸化修飾對(duì)膜蛋白的質(zhì)膜定位以及表面貼附至關(guān)重要。膜蛋白磷酸化還調(diào)節(jié)周圍磷脂分子的熱力學(xué)性質(zhì)和動(dòng)力學(xué)特性，從而加劇對(duì)磷脂雙

研團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn)磷酸化處理的纖維素納米纖維(cellulose nanofiber，CNF)表面可選擇性引入多聚磷酸，揭示了磷酸化CNF表面化學(xué)結(jié)構(gòu)。該研究成果于近期發(fā)表在《Biomacromolecules》，題為：“Distribution and Quantification of Diverse Functional Groups on Phosphorylated Nanocellulose Surfaces”。纖維素納米纖維(CNF)由環(huán)保可再生

，正常低水平的磷酸化才能使TAU發(fā)揮最佳功能，而高水平異常磷酸化的TAU則失去其生物學(xué)活性[7]。Herrmann等用ELISA測(cè)定快速尸解的AD與同年齡正常人的腦組織勻漿，表明 AD組的額葉皮層、頂葉皮層和海馬的TAU磷酸化水平明顯增加，其中海馬最高，但在小腦中未觀察到差異[8]。在正常的人腦中，每摩爾TAU含有2～3 mol磷酸鹽，且負(fù)面調(diào)節(jié)TAU與微管的結(jié)合，而在AD腦中，TAU被3～4倍過(guò)度磷酸化，每摩爾TAU含有8 mol磷酸鹽，磷酸化水平達(dá)到飽

[6]。蛋白質(zhì)磷酸化是細(xì)胞內(nèi)廣泛分布的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，對(duì)于蛋白質(zhì)行駛功能十分重要[7-8]，在調(diào)節(jié)高溫環(huán)境下線蟲晚期生命活動(dòng)中也起到重要作用[9-10]。常溫和高溫下的線蟲的衰老機(jī)制尚不清楚，本課題組前期的研究表明，線蟲在正常溫度(20 ℃)和高溫(25 ℃)下的衰老過(guò)程中，激酶CK2，MAPK和CAMK2也許起到重要作用，并且驗(yàn)證了磷酸化蛋白GTBP-1能夠在這兩個(gè)溫度條件下調(diào)節(jié)線蟲壽命[9]。為了獲得更多的線蟲衰老過(guò)程中的磷酸化組學(xué)信息，我們嘗試使用

(GSK3) 磷酸化和抑制，激活 GSK3 可以促進(jìn) GYS2 磷酸化和失活，蛋白磷酸酶1(PP1)則催化 GYS2 去磷酸化并激活[13,14]. 在晝夜節(jié)律基因(CLOCK)的調(diào)控作用下，GYS2 的活性表現(xiàn)出磷酸化/去磷酸化晝夜節(jié)律的轉(zhuǎn)變，這樣，GYS2 的表達(dá)合成呈現(xiàn)出了晝夜節(jié)律性[15,16]. 以往的研究發(fā)現(xiàn)[17-19]，胰島素(Insulin)可以刺激 GSK3 磷酸化抑制其活性，通過(guò)依賴PI3K激酶的途徑，胰島素激活 AKT 激酶，經(jīng)過(guò)

項(xiàng)功能[1]。磷酸化是常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾形式[2],在特定時(shí)間內(nèi),超過(guò)30%的蛋白質(zhì)會(huì)發(fā)生磷酸化或以磷酸化形式呈現(xiàn)[3]。固定化金屬離子親和色譜(IMAC)是一種高效的磷酸化肽段富集技術(shù)[4],金屬離子(如Ti4+、Fe3+和Ga3+)[5,6]通過(guò)螯合固定在基質(zhì)上,在酸性條件下吸附磷酸化肽段,并在堿性條件下洗脫[7]。該方法具有很高的特異性,能夠富集不同氨基酸位點(diǎn)上的磷酸基團(tuán)。新型鈦離子螯合IMAC材料(Ti4+-IMAC)具有高選擇性和高穩(wěn)定性[8

032）蛋白質(zhì)磷酸化是生物體內(nèi)廣泛存在的最重要的共價(jià)修飾方式之一.細(xì)胞內(nèi)有30%以上的蛋白質(zhì)發(fā)生磷酸化修飾［1］.蛋白質(zhì)磷酸化是指蛋白質(zhì)在磷酸化激酶的催化下將三磷酸腺苷（ATP）或三磷酸鳥苷（GTP）上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基上的可逆過(guò)程.激酶誘導(dǎo)蛋白質(zhì)磷酸化，磷酸酶誘導(dǎo)蛋白質(zhì)去磷酸化，這一可逆過(guò)程能調(diào)節(jié)和控制蛋白質(zhì)活力和功能，參與各種生理和病理過(guò)程，包括細(xì)胞增殖、發(fā)育分化、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及腫瘤發(fā)生等生命活動(dòng).因而，基于質(zhì)譜的磷酸化研

多種TCS發(fā)揮磷酸化調(diào)控，在無(wú)乳鏈球菌中STK1可以在體外對(duì)CovR/S的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)因子組分CovR進(jìn)行磷酸化[7]。在S.suis2中也存在絲/蘇氨酸激酶STK，研究表明STK通過(guò)磷酸化底物蛋白的絲氨酸/蘇氨酸殘基以達(dá)到調(diào)控靶蛋白的目的，從而在轉(zhuǎn)錄與翻譯、細(xì)胞壁合成、細(xì)胞分裂、應(yīng)激反應(yīng)以及毒力因子的表達(dá)[8-11]等過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。然而S.suis2編碼的STK是否能對(duì)全局性毒力負(fù)調(diào)控因子CovR進(jìn)行磷酸化作用尚不清楚。本研究參照Molle等[1

譯后修飾，其中磷酸化可調(diào)節(jié)HSP27 的細(xì)胞功能。HSP27 的異常磷酸化與病毒感染、特異性腫瘤、皮膚自身免疫性疾病、上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-mesenchymal transition，EMT） 和糖尿病心肌細(xì)胞脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，LPL）分泌增加等病理病變相關(guān)[1]。隨著研究的不斷深入，磷酸化HSP27 在各種疾病尤其是惡性腫瘤中的作用受到了廣泛的關(guān)注。1 HSP27 的生物學(xué)特性哺乳動(dòng)物小熱休克蛋白

?；Ⅳ驶?、磷酸化、糖基化、水解及氧化等，主要是對(duì)殘基上的氨基、羥基、巰基或羧基等基團(tuán)進(jìn)行修飾，而這些修飾的本質(zhì)是通過(guò)改變食品大分子的結(jié)構(gòu)、構(gòu)象、靜電荷、氫鍵、疏水作用力等，來(lái)改善其乳化性、起泡性、熱穩(wěn)定性、溶解性、凝膠特性、保水性等加工特性[4]。同時(shí)有些基團(tuán)的引入還可以賦予食品高分子本身沒(méi)有的一些生理功能特性，如免疫調(diào)節(jié)，促進(jìn)鈣的吸收等特性[5]。在上述的改性方法中，有些方法的改性產(chǎn)物雖然不能用于食品加工配料，但是這些研究可以為食品高分子的深度開發(fā)和

基化、乙?；?、磷酸化、泛素化及糖基化等，組蛋白修飾與許多基本的生物學(xué)功能密切相關(guān)，如細(xì)胞周期調(diào)控，DNA復(fù)制和修復(fù)，轉(zhuǎn)錄活性和染色體形態(tài)及功能的穩(wěn)定性等[1-4]。其中，組蛋白磷酸化是對(duì)組蛋白氨基酸殘基特殊位點(diǎn)的磷酸化修飾。組蛋白H3磷酸化可調(diào)控減數(shù)分裂過(guò)程，參與染色體的凝聚和分離過(guò)程進(jìn)而影響紡錘體和微管裝配[5]。關(guān)于組蛋白磷酸化修飾在卵母細(xì)胞成熟進(jìn)程中的研究文獻(xiàn)偏少，且部分研究結(jié)果間存在差異，Wang等[6]研究發(fā)現(xiàn)，小鼠卵母細(xì)胞在GV時(shí)期的組蛋白H3

1)可逆蛋白質(zhì)磷酸化是由特定蛋白激酶和磷酸酶調(diào)控[1-2]的蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post translational modification，PTM)方式之一，參與調(diào)節(jié)機(jī)體生命活動(dòng)的全過(guò)程，如生長(zhǎng)發(fā)育、增殖、凋亡及分化等[3-5]。在真核生物中有1/3的蛋白質(zhì)與磷酸化修飾相關(guān)[6]，主要發(fā)生在絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)殘基側(cè)鏈的羥基上，且磷酸化絲氨酸(pSer)、磷酸化蘇氨酸(pThr)、磷酸化酪氨酸(pTyr)的比例為1 800

1]。PLN的磷酸化修飾改變肌漿網(wǎng)鈣泵的結(jié)構(gòu)和功能，控制SR鈣攝取進(jìn)而改變心肌功能，參與心臟生理功能及疾病的調(diào)控。本研究對(duì)PLN磷酸化調(diào)控在心肌缺血再灌注損傷(MIRI)中的作用做一綜述。1 SERCA/PLN轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合物的結(jié)構(gòu)和功能心肌胞質(zhì)鈣穩(wěn)態(tài)主要是幾種關(guān)鍵的心肌SR鈣轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白調(diào)節(jié)的結(jié)果。心肌興奮時(shí)膜去極化，L型Ca2+通道開放引起Ca2+內(nèi)流，激活SR上的2型蘭尼堿受體(ryanodine receptor， RyR2)，進(jìn)一步誘導(dǎo)SR釋放更多Ca2+

要原料和輔料。磷酸化修飾對(duì)雞蛋清蛋白質(zhì)的生物活性和加工特性均具有重要影響。研究表明，磷酸化可使卵轉(zhuǎn)鐵蛋白的β-折疊結(jié)構(gòu)含量增加，并增強(qiáng)其抗菌活性[6-7]；磷酸化卵白蛋白可促進(jìn)腸道對(duì)鐵的吸收[8]。此外，化學(xué)磷酸化改性蛋清粉的乳化活性及穩(wěn)定性都有一定程度地提高[9]，且其起泡性與泡沫穩(wěn)定性都顯著提高[10]；卵白蛋白的化學(xué)磷酸化修飾亦能增強(qiáng)其凝膠性及在油-水界面的穩(wěn)定性[11-12]。然而，當(dāng)前的研究主要集中在雞蛋清及其主要蛋白（如卵白蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白）的

沉積而成，過(guò)度磷酸化的tau蛋白是神經(jīng)纖維纏結(jié)的重要組成成分。目前關(guān)于AD發(fā)病機(jī)制的主要學(xué)說(shuō)包括：淀粉樣肽級(jí)聯(lián)反應(yīng)、微管相關(guān)tau異常、氧化應(yīng)激、炎癥介質(zhì)、膽堿功能降低等學(xué)說(shuō)。微小RNA（microRNA, miRNA）是由內(nèi)源基因編碼的一類長(zhǎng)度在20～24個(gè)核苷酸之間的單鏈非編碼RNA分子，能負(fù)向調(diào)控靶mRNA表達(dá)，最終導(dǎo)致mRNA降解或翻譯抑制[3]。研究表明MiRNA與AD發(fā)病密切相關(guān)[4]。本文就微小RNA在tau蛋白過(guò)度磷酸化中作用的相關(guān)研究進(jìn)行

節(jié)肌球蛋白輕鏈磷酸化實(shí)現(xiàn)，血管舒張主要通過(guò)肌球蛋白輕鏈磷酸酶(Myosin light chain phosphatase，MLCP)使肌球蛋白調(diào)節(jié)輕鏈(Myosin regulatory light chains，RLC)去磷酸化實(shí)現(xiàn)。MLCP是調(diào)節(jié)血管信號(hào)的關(guān)鍵分子。MLCP是異源三聚體蛋白磷酸酶，由肌球蛋白靶向亞基(Myosin phosphatase targeting subunit，MYPT)、38kDa催化亞基(Catalytic subun

結(jié)構(gòu)域的亞型，磷酸化和剪切修飾是其各種生化活性的重要基礎(chǔ)。總結(jié)各種藥物處理和內(nèi)源性信號(hào)是如何通過(guò)調(diào)控Bad蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)促凋亡或促生存信號(hào)通路的下游調(diào)控，有助于加深對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)線粒體凋亡通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的理解，為尋找、設(shè)計(jì)、驗(yàn)證相關(guān)靶向藥物治療提供理論基礎(chǔ)。磷酸化的Bad（p-Bad）與14-3-3形成異二聚體，作為其伴侶分子定位于細(xì)胞漿；而非磷酸化Bad則通過(guò)結(jié)合含穿膜結(jié)構(gòu)域的其他Bcl-2家族蛋白并形成異二聚體接近線粒體膜而發(fā)揮促凋亡

之一。蛋白質(zhì)的磷酸化反應(yīng)是調(diào)節(jié)蛋白結(jié)構(gòu)和功能、參與和調(diào)控生化反應(yīng)的重要修飾過(guò)程。在食品工業(yè)中,利用生物或化學(xué)手段磷酸化,從而達(dá)到改善蛋白質(zhì)的功能性質(zhì)、提高蛋白質(zhì)的溶解性以及加工過(guò)程中抗變性的能力,獲得專項(xiàng)功能性性較好或具有多種優(yōu)良特性的蛋白衍生物,已受到廣泛的研究關(guān)注。根據(jù)磷酸化途徑的不同,蛋白質(zhì)的磷酸化反應(yīng)主要可以分為酶法磷酸化和非酶化學(xué)法磷酸化。酶法磷酸化是指通過(guò)蛋白激酶的催化,將ATP或GTP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物蛋白的絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸等殘基側(cè)

0210蛋白質(zhì)磷酸化是蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要內(nèi) 容，在酶和其他重要功能分子活性的發(fā)揮、第二信使傳遞和酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng)中起重要作用。細(xì)胞內(nèi)的許多蛋白通過(guò)磷酸化來(lái)行使DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期阻滯等功能。蛋白質(zhì)磷酸化網(wǎng)絡(luò)精細(xì)調(diào)節(jié)細(xì)胞應(yīng)對(duì)的各種應(yīng)激過(guò)程，例如，當(dāng)細(xì)胞暴露于紫外線損傷后，細(xì)胞內(nèi)DNA損傷修復(fù)蛋白被磷酸化激活，修復(fù)DNA；細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白被激活，細(xì)胞周期發(fā)生阻滯；如果DNA受損嚴(yán)重，有修復(fù)缺陷，細(xì)胞常通過(guò)p53依賴性凋亡發(fā)生凋亡[1-2]。p5

TJs)蛋白的磷酸化會(huì)導(dǎo)致上皮細(xì)胞的極性改變和結(jié)構(gòu)變化，從而影響上皮屏障功能。TJs蛋白的磷酸化狀態(tài)受酪氨酸激酶和絲氨酸-蘇氨酸激酶的調(diào)節(jié)。表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)是酪氨酸激酶家族中最重要的激酶，通過(guò)其配體表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor，EGF)的激活，可以調(diào)節(jié)TJs蛋白的差異表達(dá)和磷酸化狀態(tài)[4]。該研究觀察T84結(jié)腸細(xì)胞中TJs蛋白的磷酸化狀況，以及EG

。HSP27的磷酸化使其發(fā)揮功能的主要形式。了解HSP27的磷酸化有助于我們了解HSP27在脅迫應(yīng)激中發(fā)揮的作用，為進(jìn)一步研究細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)提供新的切入點(diǎn)。關(guān)鍵詞 HSP27 脅迫應(yīng)激HSP27與 aB-晶體蛋白（%ZB-crystallin，HSPB5）同源又被稱為HSPB1。其首次于1978年被分離純化，隨后的研究發(fā)現(xiàn)，HSP27在細(xì)胞內(nèi)常以二聚體四聚體等形式存在，這種聚集體的形式依賴于其不同位點(diǎn)的磷酸化。Andr？Patrick Arrigo于2016

活性。它們包括磷酸化，泛素化，乙?；谆蛠喯貂；＿@些修飾因不同刺激而促成并產(chǎn)生不同的效果，它們彼此并不是孤立的，可通過(guò)相互作用形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，共同精細(xì)的調(diào)節(jié)NF-kB的功能。如：RelA/p65的磷酸化就可以調(diào)節(jié)其乙?；?span id="j5i0abt0b" class="hl">磷酸化是這些修飾中一種快速和可逆的酶反應(yīng)，常作為幾種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的關(guān)鍵分子機(jī)制。因此，它具有調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性的許多優(yōu)點(diǎn)，并可非常有效的整合來(lái)自各種輸入信號(hào)的信息，而磷酸化過(guò)程中單個(gè)激酶也可以差異性影響多種轉(zhuǎn)錄因子[2]。以往大多

00)蛋白質(zhì)的磷酸化是最普遍、最重要的翻譯后修飾方式,與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過(guò)程密切相關(guān)[1-3]。異常的蛋白質(zhì)磷酸化與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[4]。因此研究蛋白質(zhì)磷酸化意義重大。生物樣品中磷酸化肽的含量非常低;在質(zhì)譜分析磷酸化肽時(shí),磷酸化肽的信號(hào)受到非磷酸化肽的抑制。基于上述兩個(gè)原因在質(zhì)譜檢測(cè)之前需要對(duì)磷酸化肽進(jìn)行高效富集。用于磷酸化肽的富集方法很多,主要包括金屬氧化物親和色譜(MOAC)[5,6]、固定化金屬離子親和色譜(IMA

述寄生蟲蛋白質(zhì)磷酸化修飾及磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展趙 彬1，唐亞蘭2，陸 珂2，曹曉丹2，韓 倩2，呂 超2，王 濤2，傅志強(qiáng)2，林矯矯2, 3，洪 煬2*(1.江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇句容 212400;2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所，上海 200241;3.江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇揚(yáng)州 225009)蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生命體內(nèi)一種重要的且普遍存在的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式之一，蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化是一種動(dòng)態(tài)的生物調(diào)節(jié)過(guò)

taxin 1磷酸化在TNFα誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡過(guò)程中控制Bak的激活促凋亡蛋白Bak參與凋亡(細(xì)胞死亡程序)的執(zhí)行階段。Bak基本上是在線粒體內(nèi)，并且在凋亡的早期經(jīng)歷構(gòu)象變化后在線粒體中與膜完全整合，隨后導(dǎo)致促凋亡線粒體蛋白的釋放。目前我們對(duì)Bak激活涉及的“搭檔”(partner)和機(jī)制知之甚少。Petit等近來(lái)已發(fā)現(xiàn)，在休眠和瀕死細(xì)胞中，Bak被并入2型電壓依賴性陰離子通道(voltage-dependent anionic channel of typ

2A催化亞基C磷酸化降低tau蛋白過(guò)度磷酸化楊翠翠 李 林 張 麗 李雅莉 張 蘭*(首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院藥物研究室 北京市神經(jīng)藥物工程研究中心 北京腦重大疾病研究院 神經(jīng)變性病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100053)目的 探討馬錢苷對(duì)tau蛋白過(guò)度磷酸化的影響及其作用機(jī)制。方法 馬錢苷(500、1 000 μmol/L)與人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株(SK-N-SH細(xì)胞)預(yù)孵育24 h，之后加入PI3K抑制劑Wortmannin(WT)及PKA抑制劑GF-1092

049)?血清磷酸化肽的分離富集和質(zhì)譜定量及其作為潛在腫瘤標(biāo)志物的評(píng)價(jià)翟貴金1,2, 吳 魁1, 汪福意1,3*(1. 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所, 中國(guó)科學(xué)院活體分析化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 北京 100190; 2. 天津市醫(yī)學(xué)表觀遺傳學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 天津醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系, 天津 300070; 3. 中國(guó)科學(xué)院大學(xué), 北京 100049)血清中磷酸化肽種類和濃度的變化既能反映人體內(nèi)蛋白質(zhì)水解酶活性的變化,又能反映蛋白質(zhì)翻譯后磷酸化的水平,業(yè)已成為腫瘤

072)蛋白質(zhì)磷酸化修飾在生物體內(nèi)普遍存在。真核生物中，磷酸化修飾主要發(fā)生在絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)殘基上[1]。磷酸化修飾參與調(diào)控多種細(xì)胞生命活動(dòng)，如細(xì)胞增殖、發(fā)育與分化、受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡及腫瘤發(fā)生等。其中，磷酸化修飾對(duì)抗病毒天然免疫信號(hào)通路的調(diào)控一直是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)。天然免疫反應(yīng)是機(jī)體抵御外界病原微生物入侵的第一道防線。當(dāng)病毒入侵時(shí)，機(jī)體通過(guò)自身的模式識(shí)別受體(Pattern Recognition

百萬(wàn)計(jì)的可逆性磷酸化是維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)所必需的，使得細(xì)胞能迅速適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境變化，其中Caspases與蛋白激酶的雙向通信是細(xì)胞內(nèi)重要的磷酸化反應(yīng)。蛋白激酶信號(hào)通路與Caspases通路有交互聯(lián)系［2］，一方面蛋白激酶可以激活或抑制Caspases，另一方面活化的Caspases可裂解蛋白激酶，改變下游信號(hào)。另外，多種Caspases底物蛋白被蛋白激酶磷酸化后對(duì)Caspases裂解作用的敏感性改變。本文將綜述蛋白激酶對(duì)Caspases及其底物的磷酸化作用，Cas

1100）植物磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展劉秋林1，鐘月仙1，萬(wàn)偉峰1，田 甜1，林授楷1，2，黃 健1，薛李春1，艾玉芳1，柯玉琴1，何華勤1（1.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州350002;2.莆田學(xué)院環(huán)境與生物工程學(xué)院，福建 莆田 351100）首先闡述了植物細(xì)胞蛋白質(zhì)磷酸化的作用機(jī)制，并從植物磷酸化蛋白質(zhì)的分離與鑒定技術(shù)、植物磷酸化蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)及植物蛋白質(zhì)磷酸化位點(diǎn)的預(yù)測(cè)工具，對(duì)植物磷酸化蛋白質(zhì)組的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述.最后分析了植物磷酸化蛋白質(zhì)組研

tau蛋白異常磷酸化中的作用*馮小龍，王秀蓮，王群，劉蓉△ (華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系，湖北武漢430074)目的:探討CIP2A對(duì)PP2A的調(diào)節(jié)及其在阿爾茨海默(Alzheimer disease，AD)樣tau蛋白異常磷酸化中的作用。方法:免疫熒光檢測(cè)CIP2A表達(dá)及定位; Western Blot檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果: N2a細(xì)胞與大鼠原代神經(jīng)元胞漿中均有較強(qiáng)的CIP2A陽(yáng)性著色，并與tau蛋白共定位;過(guò)表達(dá)CIP2A組磷酸化的PP2Ac

明，徐平綜 述磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的新進(jìn)展及其在肝臟生理和病理機(jī)制中的應(yīng)用衣泰龍1,2，田苗苗2，楊曉明1,2，徐平1,21 安徽醫(yī)科大學(xué)，安徽 合肥 230032 2 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所 北京蛋白質(zhì)組研究中心蛋白質(zhì)組學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206蛋白質(zhì)磷酸化是最常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾形式。由于蛋白質(zhì)的磷酸化形式可以被磷酸酶和磷酸激酶進(jìn)行可逆的調(diào)控，所以在眾多的生命活動(dòng)過(guò)程中蛋白質(zhì)的磷酸化修飾起著重要的調(diào)控作用，因此對(duì)生物體內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化

3）1 蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的概念蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)是20世紀(jì)50年代Fischer、K rebs等在研究糖原新陳代謝調(diào)控時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種動(dòng)態(tài)調(diào)控機(jī)制。1992年，F(xiàn)isher和Krebs因其在蛋白質(zhì)可逆磷酸化方面的研究獲得了諾貝爾生理學(xué)及醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。自此，作為最廣泛的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式，蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)受到了廣泛的關(guān)注。蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)是指由蛋白激酶催化的將ATP或GTP上γ位的磷酸基轉(zhuǎn)移到底物蛋白質(zhì)氨基酸殘基上的過(guò)程。該反應(yīng)主要發(fā)生于絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸等殘基側(cè)

6)抑制JNK磷酸化參與褪黑素對(duì)花萼海綿誘癌素引起的tau蛋白過(guò)度磷酸化的保護(hù)機(jī)制李夏春1，王志強(qiáng)1，柳秀平2(1.三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室，湖北宜昌 443002；2.杭州市中醫(yī)院，浙江杭州 310006)目的 探討花萼海綿誘癌素(CA)在成神經(jīng)瘤細(xì)胞(N2a)引起tau蛋白過(guò)度磷酸化的機(jī)制,及褪黑素對(duì)其是否具有保護(hù)作用。方法 小鼠成神經(jīng)瘤細(xì)胞(N2a)給予CA 5 nmol·L－1處理,或同時(shí)給予褪黑素50 mol·L－1,或同時(shí)給予維生素E(Vi

Nephrin磷酸化被認(rèn)為是維持正常足細(xì)胞形態(tài)和功能的起始事件，主要是指酪氨酸磷酸化，其胞內(nèi)段含有9個(gè)酪氨酸殘基，是潛在的磷酸化位點(diǎn)［2］。研究發(fā)現(xiàn)，nephrin的胞內(nèi)段磷酸化與Src家庭激酶Fyn和適配蛋白Nck相關(guān)，F(xiàn)yn是Src激酶，在Y1204位點(diǎn)磷酸化nephrin。Nck含有3個(gè)SH3區(qū)和1個(gè)SH2區(qū)，可結(jié)合到nephrin磷酸化位點(diǎn)Y1204，募集信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，誘導(dǎo)肌動(dòng)蛋白聚合［3］。在Fyn和Nck敲除鼠，足細(xì)胞出現(xiàn)足突融合及蛋白尿，證實(shí)

P-32的異常磷酸化與LID發(fā)生有密切關(guān)系，本文就DARPP-32與LID發(fā)生機(jī)制相關(guān)內(nèi)容予以綜述［3，4］。一、DARPP-32的結(jié)構(gòu)及分布1983年Walaas等［5］發(fā)現(xiàn)了一種對(duì)多巴胺(dopamine，DA)和環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)非常敏感的磷蛋白，稱為DARPP-32蛋白(dopamine and cAMP-regulated phosphoprotein of 32 kDa，DARP

究方法和理論。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)，以其研究對(duì)象特殊性、研究方法專業(yè)性及研究思路系統(tǒng)性，已在生命科學(xué)的多個(gè)領(lǐng)域和層面發(fā)揮獨(dú)特作用。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究尚處于初期階段，鑒于其特殊的研究方法及內(nèi)容，對(duì)揭示生命體尤其是疾病狀態(tài)下細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)具有不可替代的優(yōu)勢(shì)［1－4］。此外，磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究為尋找藥物新的作用靶點(diǎn)和疾病診斷指標(biāo)提供全新的研究思路。本文主要就磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)在生命科學(xué)、藥學(xué)及醫(yī)學(xué)研究前景進(jìn)行綜述。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)概述磷酸化是細(xì)胞中蛋白質(zhì)翻譯后最

增強(qiáng)時(shí)，可促使磷酸化的胰島素受體（IR）和它的底物（IRS）以及磷酸化瘦素去磷酸化，從而下調(diào)胰島素和瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，減弱胰島素和瘦素的作用[4-5]。此外，研究人員還發(fā)現(xiàn)了PTP1B與癌癥治療密切相關(guān)[6-7]。因此，以PTP1B作為藥物治療靶點(diǎn)，開發(fā)高親和力的新型PTP1B抑制劑，已成為最近幾年研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域。Salmeen等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，雙磷酸化酪氨酸底物與PTP1B親和能力要比單磷酸化酪氨酸底物高70%。Puius等[9]的研究表明，雙磷酸化酪

的Moesin磷酸化對(duì)晚期糖基化終產(chǎn)物誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)和功能改變的調(diào)節(jié)作用劉紅霞 馮國(guó)開 杜 靜 郭曉華 黃巧冰南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室目的：驗(yàn)證Rho A／ROCK信號(hào)通路參與晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）引起的膜突蛋白（Moesin）磷酸化，ROCK通過(guò)與Moesin直接作用導(dǎo)致Moesin磷酸化，探討AGE引起Moesin磷酸化的位點(diǎn)及其生物學(xué)效應(yīng)。方法：選用Rho A顯性負(fù)效突變體（Rho AN19）和組成型活性突變體（Rho AL63）

Ser389)磷酸化減少，從而導(dǎo)致神經(jīng)元的死亡。p70S6K可以使Tau蛋白214位點(diǎn)絲氨酸(Ser214)磷酸化從而抑制Tau蛋白聚積和配對(duì)狀螺旋形神經(jīng)絲(PHF)的形成。mTORC1/p70S6K/rpS6途徑受磷脂酶D(PLD)和磷脂酸(PA)的調(diào)節(jié)。PA與雷帕霉素競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合mTOR結(jié)構(gòu)域FRB，從而激活mTORC1，導(dǎo)致p70S6K/rpS6和4E－BP1磷酸化。法國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn):(1)人成纖維母細(xì)胞瘤細(xì)胞(SH－SY5Y)經(jīng)PA預(yù)處理可使p70S6

蛋白磷酸化/去磷酸化是指蛋白激酶(Protein kinase,PK)催化蛋白質(zhì)的含羥基氨基酸(絲/蘇和酪)的側(cè)鏈羥基形成磷酸酯,和蛋白質(zhì)磷酸酯酶(Protein phosphatase,PPase)催化磷酸蛋白的磷酸酯鍵水解而去磷酸化的過(guò)程。蛋白磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一,這一可逆過(guò)程受蛋白激酶和磷酸酶的協(xié)同作用控制,細(xì)胞內(nèi)任何一種蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)是由蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的兩種酶活性之間的平衡決定的。蛋白磷酸化/去磷酸化是細(xì)胞信號(hào)傳遞

5介孔材料用于磷酸化肽的高效富集張 宇, 秦洪強(qiáng), 吳仁安, 鄒漢法＊(中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,中國(guó)科學(xué)院分離分析化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧大連116023)結(jié)合基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALD I-TOF MS)檢測(cè)技術(shù),考察了Ti-SBA-15介孔材料對(duì)β-酪蛋白酶解產(chǎn)物中磷酸化肽的選擇性富集性能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,含Ti和Si物質(zhì)的量比為0.08的Ti-SBA-15介孔材料可選擇性地對(duì)β-酪蛋白酶解產(chǎn)物中的磷酸化肽進(jìn)行選擇性富集;對(duì)于β-酪蛋白和牛