氧糖
- miRNA-589-5p調(diào)控氧糖剝奪人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的機制
-589-5p對氧糖剝奪誘導(dǎo)的HBMEC損傷的調(diào)控機制及其與組蛋白脫乙酰酶(HDAC)3、核因子E2相關(guān)因子(Nrf)2/血紅素加氧酶(HO)-1信號通路之間的關(guān)系。1 材料與方法1.1材料 HBMEC購自中國上?？茖W(xué)研究院細(xì)胞庫;改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM)培養(yǎng)液購自美國Invitrogen;胎牛血清購自浙江天杭生物科技股份有限公司;Lipofectamin3000轉(zhuǎn)染試劑購自賽默飛世爾科技(中國)公司;真核表達(dá)載體pcDNA3.1均購自Promeg
中國老年學(xué)雜志 2024年6期2024-03-22
- 水凝膠負(fù)載bFGF對氧糖剝奪條件下樹突狀細(xì)胞的影響①
DC2.4 細(xì)胞氧糖剝奪（oxygen-glucose deprivation，OGD）模型，初步探究負(fù)載bFGF的緩釋水凝膠貼片對OGD 條件下DC2.4細(xì)胞的影響。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 細(xì)胞系 細(xì)胞采用DC2.4 小鼠樹突狀細(xì)胞購自武漢普諾賽生命科技有限公司（貨號：CL-0545）。1.1.2 主要試劑 明膠（國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；戊二醛（福晨化學(xué)試劑有限公司）；CCK-8（上海Bimake生物科技有限公司）；高糖DMEM 培養(yǎng)基
中國免疫學(xué)雜志 2023年11期2023-11-30
- lncRNA CRNDE靶向miR-212-5p調(diào)控氧糖剝奪誘導(dǎo)的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元損傷
皮質(zhì)神經(jīng)元,建立氧糖剝奪(OGD)誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷模型,旨在觀察CRNDE能否靶向miR-212-5p影響OGD誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷,以期為缺血缺氧性腦損傷的治療提供新的作用靶點。1 材料與方法1.1 實驗動物及試劑 雄性SD大鼠,清潔級,7日齡,體質(zhì)量10.30 ～13.16 g,河南省實驗動物中心,許可證號:SYXK(豫)2019-0003;胎牛血清(FBS),浙江天杭生物科技股份有限公司;DMEM培養(yǎng)基和細(xì)胞計數(shù)試劑盒-8(CCK-8),北京索萊寶科技有
蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報 2023年6期2023-08-02
- 氧糖剝奪影響人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接相關(guān)蛋白的機制研究
。本研究旨在探究氧糖剝奪影響人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）緊密連接相關(guān)蛋白的機制，以期為缺血性腦血管病的臨床防治提供新的思路。1 材料與方法1.1 主要實驗試劑與儀器 實驗試劑：DMEM購于Corning公司（貨號：R10-017-CV），Gibco?胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）購于Invitrogen（貨號：16000-044），青霉素-鏈霉素溶液（
實用心腦肺血管病雜志 2023年2期2023-02-22
- NLRP3炎癥小體在bEnd.3細(xì)胞氧糖剝奪及復(fù)氧復(fù)糖后的表達(dá)觀察
對象，觀察在不同氧糖剝奪及復(fù)氧復(fù)糖時間點NLRP3炎癥小體及其下游因子的表達(dá)變化。1 材料和方法1.1 實驗細(xì)胞bEnd.3細(xì)胞系購于ATCC1.2 主要試劑、材料和儀器DMEM無糖培養(yǎng)基(Gibico)，DMEM培養(yǎng)基(Gibico)，胎牛血清(Gibico)，胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)(Solarbio)，抗NLRP3抗體(ABMART)，抗β-actin抗體(Affinity)，鼠二抗(Cell Signaling Technology)
中國實驗診斷學(xué) 2023年2期2023-02-21
- 八味沉香散含藥血清對H9c2細(xì)胞氧糖剝奪損傷的保護機制研究 Δ
法，進(jìn)一步研究在氧糖剝奪損傷細(xì)胞模型中，八味沉香散含藥血清改善心肌缺血損傷的可能機制，以期為八味沉香散的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)，促進(jìn)其現(xiàn)代化研究。1 材料1.1 細(xì)胞與動物本研究所用細(xì)胞為大鼠H9c2細(xì)胞（貨號CL-0089），購自武漢普諾塞生命科技有限公司。SPF級雄性SD大鼠50只，體質(zhì)量200～220 g，購自西安交通大學(xué)[實驗動物使用許可證號：SYXK（青）2020-0001]，飼養(yǎng)于青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系實驗中心（正常光照、自由飲食）。本實驗所有操作
中國藥房 2023年1期2023-01-14
- 刺五加提取物對人神經(jīng)細(xì)胞SH-SY5Y氧糖剝奪再灌注損傷的保護作用研究＊
SY5Y 細(xì)胞的氧糖剝奪再灌注（Oxygen and Glucose Deprivation/Reperfusion，OGD/R）模型來模擬腦缺血/再灌注過程，發(fā)現(xiàn)一種刺五加提取物可以減輕SH-SY5Y細(xì)胞氧糖剝奪再灌注后的損傷，并通過MTT 法檢測細(xì)胞活力、流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡率、熒光顯微鏡檢測活性氧水平、檢測胞內(nèi)抗氧化酶活力及脂質(zhì)氧化產(chǎn)物、檢測胞內(nèi)ATP 水平等手段，證實了其通過抑制氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡和保護線粒體功能來實現(xiàn)對SH-SY5Y細(xì)胞的保護作用。
- 右美托咪定對氧糖剝奪再復(fù)氧下Huvecs的保護機制*
Huvecs)在氧糖剝奪再復(fù)氧條件下的損傷[4]，但具體的細(xì)胞內(nèi)分子機制還有待于進(jìn)一步深究。為此本研究擬在前期研究的基礎(chǔ)上探究DEX預(yù)處理對Huvecs的保護機制。1 材料與方法1.1 細(xì)胞培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株Huvecs(由陸軍軍醫(yī)大學(xué)高原軍事醫(yī)學(xué)系贈)復(fù)蘇后培養(yǎng)于含10%胎牛血清的高糖培養(yǎng)基內(nèi)，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞約80%融合時，用0.05%胰蛋白酶消化傳代培養(yǎng)。1.2 試劑藥物DEX：江蘇恒瑞制藥有限公司；高糖培養(yǎng)基
重慶醫(yī)學(xué) 2022年3期2022-03-23
- 左歸丸含藥血清對大鼠海馬神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪損傷的保護作用及機制研究
混合細(xì)胞以及細(xì)胞氧糖剝奪處理[6]，在細(xì)胞水平研究左歸丸含藥血清對細(xì)胞氧糖剝奪損傷的作用及機制。1 材料與方法1.1 實驗材料1.1.1 實驗動物：健康SPF級SD雄性大鼠，出生后1～3 d，體重200 g左右，購自西安交通大學(xué)動物實驗中心。動物生產(chǎn)許可證號：SYXK(陜)2020-005。1.1.2 主要試劑：左歸丸(Z11020735)，購自北京同仁堂股份有限公司；0.3 g/L戊巴比妥鈉(H31020240)，購自上海新亞藥業(yè)有限公司；相關(guān)一抗購自美
陜西醫(yī)學(xué)雜志 2022年1期2022-01-21
- 榅桲總黃酮對氧糖剝奪誘導(dǎo)的人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響及機制研究
著·榅桲總黃酮對氧糖剝奪誘導(dǎo)的人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響及機制研究劉禹岐，郗歐，劉怡彤110000 沈陽，遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院腦病一科（劉禹岐、郗歐），康復(fù)科（劉怡彤）探究榅桲總黃酮（TFCOM）對氧糖剝奪（OGD）誘導(dǎo)的人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HBMEC）損傷的影響及可能機制。體外培養(yǎng) HBMEC，建立 OGD 模型。用 10、20、40 μg/ml TFCOM 干預(yù) OGD 誘導(dǎo)的 HBMEC，CCK8 法檢測細(xì)胞增殖活性，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡，
中國醫(yī)藥生物技術(shù) 2021年6期2021-12-21
- 外源性H2S對氧糖剝奪再灌注后SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護作用
。因此，本研究以氧糖剝奪再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后的SH-SY5Y細(xì)胞作為神經(jīng)細(xì)胞的體外缺血再灌注損傷模型，探討H2S對神經(jīng)細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護作用機制。1 材料與方法1.1 試劑與儀器NaHS購自Sigma公司（美國），牛血清、DMEM培養(yǎng)基、2.5 mL/L胰蛋白酶液及10×PBS均購自HyClone公司，二甲亞砜(DMSO)購自Gibco公司。Tris堿、甘氨酸PMSF、S
西安交通大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版） 2021年5期2021-10-14
- 腦心通通過抑制TRPM7抗神經(jīng)元氧糖剝奪/復(fù)氧損傷
為研究對象，建立氧糖剝奪/復(fù)氧（oxygen-glucose deprivation/reoxygenation，OGD/R）損傷模型，由于中藥復(fù)方用于離體實驗存在諸多問題，本研究采用腦脊液藥理學(xué)的給藥方法，觀察腦心通的神經(jīng)保護作用以及對TRPM7的影響，以期為腦心通治療缺血性腦卒中提供實驗依據(jù)。1 材料1.1 動物Wistar 大鼠，體質(zhì)量（180±20）g [天津中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，SCXK（津）2009-0004]；大耳白家兔，體質(zhì)量（2±0.2
中南藥學(xué) 2021年8期2021-09-04
- 活性多肽GRGDS 對氧糖剝奪誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷的保護作用及其機制研究
肽GRGDS 對氧糖剝奪損傷后的PC12 細(xì)胞是否具有保護作用。1 材料1.1 細(xì)胞株P(guān)C12 細(xì)胞購自ATCC 細(xì)胞庫，培養(yǎng)在含有10%胎牛血清的完全培養(yǎng)液中，每12 h 觀察一次細(xì)胞的生長狀態(tài)，每24 h 更換一次細(xì)胞培養(yǎng)液，待細(xì)胞長到80%進(jìn)行傳代。1.2 藥物與試劑活性多肽GRGDS（上海淘普生物科技有限公司）；高糖DMEM 培養(yǎng)液、DMEM 無糖培養(yǎng)液（Gibco 公司）；凋亡試劑盒、蛋白質(zhì)提取試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；抗體：β-肌動
藥學(xué)實踐雜志 2021年4期2021-07-28
- PKA-PINK1/Parkin信號通路在氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖后大鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡和焦亡中的作用
原代星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪-復(fù)糖復(fù)氧模型，以揭示PKA-PINK1/Parkin信號通路在神經(jīng)系統(tǒng)缺血再灌注損傷中發(fā)揮的作用。1 材料與方法1.1實驗動物及分組 24 h內(nèi)的SD新生大鼠，共168只，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司負(fù)責(zé)提供(SYXK(京)2012-0036)。分離腦組織后，行原代大鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)，并將所分離培養(yǎng)的原代大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分為4組，每組42只，分別為對照組(C組)、氧糖剝奪組(oxygen-glucose deprivat
河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2021年2期2021-04-13
- 沉默Apaf-1基因?qū)?span id="j5i0abt0b" class="hl">氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞線粒體凋亡通路的影響①
PC12細(xì)胞建立氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖細(xì)胞模型，模擬神經(jīng)細(xì)胞體外缺血再灌注損傷環(huán)境，靶向抑制Apaf-1蛋白表達(dá)，在細(xì)胞水平探討Apaf-1對氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞線粒體凋亡通路的影響，為腦缺血再灌注損傷的靶向治療提供新的思路和實驗依據(jù)。1 材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞 PC12細(xì)胞(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)購自BOSTER公司，經(jīng)NGF誘導(dǎo)后具有神經(jīng)元特性。1.1.2主要試劑與儀器 opti-MEMⅠ培養(yǎng)基、胎牛血清(美國Gibco公司)；脂
中國免疫學(xué)雜志 2021年1期2021-01-26
- 黃芪甲苷通過抑制細(xì)胞凋亡減輕氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞損傷的研究
究對象，通過建立氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖細(xì)胞模型模擬CIRI對神經(jīng)細(xì)胞的損傷過程，研究黃芪甲苷對腦缺血再灌注所致神經(jīng)元損傷的保護作用及機制。1 材料與方法1.1 細(xì)胞PC12細(xì)胞(經(jīng)NGF 誘導(dǎo)高分化)，由河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院中心實驗室主任許順江教授惠贈。1.2 主要試劑黃芪甲苷(HY-N0099，MCE)；胎牛血清，購自浙江天杭生物科技股份有限公司；DMEM basic(1×)、胰蛋白酶、1×PBS緩沖液，均購于美國Gibco公司；Earle's平衡鹽溶液(1
中醫(yī)藥學(xué)報 2020年11期2020-12-03
- 氧糖剝奪再灌注對小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響
質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞系制作氧糖剝奪再灌注（OGD/R）模型模擬體內(nèi)腦卒中損傷，觀察不同時長OGD/R 后小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變，探討OGD/ R 對小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。1 材料及方法1.1 細(xì)胞、試劑、儀器（1）細(xì)胞BV2 永生化的鼠小膠質(zhì)細(xì)胞由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院（中國）細(xì)胞培養(yǎng)中心提供。（2）試劑DMEM/F12 培養(yǎng)基（美國Gibco 公司），胎牛血清（美國Gibco 公司），EBSS 平衡鹽溶液（中國solarbio 公司）；白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）E
嶺南急診醫(yī)學(xué)雜志 2020年5期2020-11-09
- 高聚原花青素新型降解產(chǎn)物生物活性研究
2和PC12細(xì)胞氧糖剝奪模型來研究新型降解產(chǎn)物對兩種細(xì)胞損傷的保護作用，并從構(gòu)效關(guān)系角度探究降解產(chǎn)物活性的變化規(guī)律，對新型降解產(chǎn)物的潛在生物活性及構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行初步探索。1 材料和儀器1.1 材料與試劑葡萄籽原花青素提取物購自天津尖峰有限公司。硫普羅寧購自瑪雅生物科技有限公司；L-抗壞血酸購自瑞士Fluka公司；過硫酸鉀、醋酸鈉、三氯化鐵、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉均購自博迪化工有限公司；醋酸購自科密歐化工有限公司；濃鹽酸、甲醇（分析級）、乙酸乙酯（分析級）購自
中外葡萄與葡萄酒 2020年6期2020-10-29
- 二氮嗪對氧糖剝奪后BV-2細(xì)胞凋亡及caspase-3表達(dá)的影響
和三氣培養(yǎng)箱創(chuàng)造氧糖剝奪條件對BV-2細(xì)胞進(jìn)行處理，可模擬缺血缺氧狀態(tài)下的細(xì)胞微環(huán)境。本研究擬通過氧糖剝奪誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞探討二氮嗪對缺血缺氧狀態(tài)下小膠質(zhì)細(xì)胞的影響。1 材料與方法1.1 主要儀器及試劑HERA Cell 150 三氣培養(yǎng)箱（美國 Billups-Rothenberg 公司），F(xiàn)ACScalibur流式細(xì)胞檢測分析儀（美國 BD 公司），Eclipse NI正置熒光顯微鏡+圖像采集系統(tǒng)（日本尼康公司 ），RPMI1640培養(yǎng)基、新生胎牛血
中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2020年1期2020-01-09
- HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞氧糖剝奪再灌注模型的建立
引起再灌注損傷。氧糖剝奪再灌注（OGD/R）模型通過剝奪細(xì)胞的營養(yǎng)及氧氣供給模擬人體缺血再灌注損傷過程，是目前較為理想的體外實驗?zāi)Ｐ蚚3]。海馬對缺氧的耐受力較差，因此選擇海馬神經(jīng)元細(xì)胞建立穩(wěn)定的氧糖剝奪再灌注模型，對缺血性腦中風(fēng)疾病的研究具有重要意義[4]。本研究以HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞為研究對象，采用缺氧小室（見圖1）對細(xì)胞進(jìn)行缺氧、不同時間的復(fù)氧建立氧糖剝奪再灌注模型，通過觀察細(xì)胞形態(tài)，檢測細(xì)胞存活率，同時測定不同條件下細(xì)胞培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶（LDH
廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報 2020年1期2020-01-07
- 毛蕊異黃酮抑制氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞凋亡研究
量的毛蕊異黃酮對氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同劑量毛蕊異黃酮均可改善PC12細(xì)胞生長狀態(tài)，提高細(xì)胞存活率，但其具體作用機制尚不明確。本實驗應(yīng)用氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞模型，模擬體外CIR損傷環(huán)境，探討毛蕊異黃酮拮抗氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞損傷的凋亡作用機制。1 材料1.1 細(xì)胞PC12細(xì)胞(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系，經(jīng)NGF誘導(dǎo)后，高分化具有交感神經(jīng)元特性，批號：CX0247)購于BOSTER公司。1.2 主要試劑毛蕊異黃
中國藥理學(xué)通報 2019年12期2019-12-11
- 鹿紅方對氧糖剝奪模型心臟干細(xì)胞自噬和抗凋亡能力的影響
紅方(LHF)對氧糖剝奪模型CSCs自噬和CSCs抗凋亡能力的影響。1 材料與方法1.1 實驗材料1.1.1 CSCs及實驗藥物 CSCs購自Lonza公司；鹿紅方由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院制劑室提供，由鹿角片、紅花、仙靈脾、補骨脂、女貞子、山萸肉、沉香按15∶9∶30∶20∶15∶30∶6 比例配制。鹿紅方水提物制備方法如下：將藥材置不銹鋼鍋中，加適量水浸泡1 h，置于電磁爐上，先用大火煮沸后，再用小火保持微沸煎煮1 h，18層紗布過濾，濾液備用；另外
中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志 2019年12期2019-07-26
- 不同時間氧糖剝奪再灌注對SH-SY5Y細(xì)胞線粒體自噬及功能的影響*
線粒體被認(rèn)為是在氧糖剝奪再灌注(oxygen and glucose deprivation，OGD/R)中保護細(xì)胞免受缺血應(yīng)激的必要條件[5]。線粒體自噬是由自噬選擇性清除線粒體的過程，線粒體自噬可以識別并去除異常線粒體，維持線粒體的內(nèi)穩(wěn)態(tài)，線粒體蛋白中Beclin1、P62的表達(dá)水平能很好地反應(yīng)胞內(nèi)線粒體自噬的活性[6]。本研究對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤(SH-SY5Y)細(xì)胞體外構(gòu)建不同時間的OGD/R模型，觀察OGD/R后SH-SY5Y細(xì)胞線粒體膜電位及活性氧
貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2019年4期2019-05-08
- 聚肌胞苷酸對氧糖剝奪損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞TLR3信號通路的影響
腦缺血小鼠及體外氧糖剝奪損傷處理的星形膠質(zhì)細(xì)胞TLR3-TRIF信號通路下游IFN-3的表達(dá)起到抑制炎癥反應(yīng)的作用。但現(xiàn)階段尚未明確其具體作用機制，因此本研究采用Western blot檢測氧糖剝奪損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞模型TLR3信號通路中的相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)的變化，進(jìn)一步探討Poly I：C對神經(jīng)細(xì)胞的保護作用機制。1.材料與方法1.1 實驗動物及主要試劑SD乳鼠，購自于凱學(xué)生物科技（上海）有限公司。Poly I：C（購自于上海玉博生物科技有限公司），TRIF、
醫(yī)藥前沿 2019年36期2019-03-23
- 右美托咪定通過調(diào)控TLR4表達(dá)對神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪損傷保護作用的機制研究
，本研究通過構(gòu)建氧糖剝奪損傷細(xì)胞模型，從炎癥反應(yīng)上分析右美托咪定調(diào)控TLR4表達(dá)對神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪損傷的保護機制。1 材料和方法1.1 實驗材料PC12細(xì)胞購于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所。采用DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)于37℃和5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)。以0.25%胰蛋白酶消化傳代，收集第3代長勢良好的對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實驗。1.2 主要試劑與儀器右美托咪定購于江蘇恒瑞醫(yī)藥公司，DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清和胰蛋白酶購于美國Gibco公司，Triz
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2019年1期2019-02-13
- 米諾環(huán)素促進(jìn)PC12細(xì)胞氧糖剝奪/復(fù)氧后神經(jīng)突生長及機制研究*
素對PC12細(xì)胞氧糖剝奪損傷具有保護作用，可以顯著提高細(xì)胞的存活率且促進(jìn)神經(jīng)突的生長[3]，但其具體機制尚不明確。肌球蛋白輕鏈磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)是Rho激酶(ROCK)的下游底物之一，活化的ROCK滅活MLCP，使其不能水解MLC的磷酸基團，從而提高細(xì)胞內(nèi)MLC的磷酸化水平，導(dǎo)致生長錐的崩解及軸突回縮[4]。所以本研究旨在觀察米諾環(huán)素對氧糖剝奪/復(fù)氧后PC12細(xì)胞神經(jīng)突生長的影響，并探討MLCP
重慶醫(yī)學(xué) 2018年22期2018-08-29
- 紅景天苷通過JAK2/STAT3通路抑制退變髓核細(xì)胞的炎癥反應(yīng)和凋亡
報道。本研究通過氧糖剝奪培養(yǎng)正常人髓核細(xì)胞構(gòu)建退變髓核細(xì)胞模型，觀察紅景天苷對退變髓核細(xì)胞的影響并探討其可能的機制，為治療椎間盤髓核細(xì)胞退變引起的腰椎間盤突出提供理論依據(jù)。1 材料和方法1.1 材料人髓核細(xì)胞(human nucleus pulposus cells, HNPCs) 購自上海中喬新舟生物科技有限公司，進(jìn)口于美國ScienCell研究實驗室；紅景天苷(純度>98%)購自南京朗朗科技銷售有限公司，10 mg 紅景天苷溶于1 mL 無菌PBS 配
中國骨質(zhì)疏松雜志 2018年5期2018-08-02
- 17-AAG在氧糖剝奪后復(fù)糖復(fù)氧誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡中的作用
70的表達(dá)來抑制氧糖剝奪復(fù)糖復(fù)氧模型(oxygenglucose deprivation and recovery，OGD/R)誘導(dǎo)的大鼠海馬神經(jīng)元凋亡。為驗證此設(shè)想，本研究擬以大鼠海馬神經(jīng)元OGD/R為基礎(chǔ)，探索17-AAG對神經(jīng)元的保護作用以及HSP70在17-AAG發(fā)揮神經(jīng)保護作用中的角色。1 材料與方法1.1 實驗動物與試劑 出生1d的SD大鼠購自第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心。DMEM培養(yǎng)基、無糖DMEM、胎牛血清和B27添加劑均購自美國Gibco公司
解放軍醫(yī)學(xué)雜志 2018年4期2018-05-10
- 血栓通膠囊對氧糖剝奪/復(fù)氧致 HUVEC 細(xì)胞緊密連接損傷的改善作用
型，考察PNS對氧糖剝奪/復(fù)氧(oxygen-glucose deprivation and re-oxygenation，OGD/R)致細(xì)胞緊密連接損傷的改善，從體外角度考察PNS對缺血致內(nèi)皮緊密連接損傷的保護作用，探討PNS有效單體成分，為PNS口服制劑的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。1 材料和方法1.1 藥品與試劑血栓通膠囊原料三七總皂苷，哈爾濱珍寶制藥有限公司提供，為類白色至淡黃色無定形粉末，味苦，微甘，批號20111201，主要單體成分為Rg1(31.1
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2018年2期2018-03-05
- 腺苷預(yù)處理對氧糖剝奪復(fù)氧糖后星形膠質(zhì)細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子和血管生成素-1水平的影響
分為正常對照組、氧糖剝奪組和腺苷預(yù)處理組。正常對照組細(xì)胞不進(jìn)行氧糖剝奪，在氧糖剝奪期及復(fù)氧糖期均更換高糖DMEM。氧糖剝奪組細(xì)胞在氧糖剝奪期更換為無糖、無血清的DMEM；腺苷預(yù)處理組細(xì)胞在氧糖剝奪前24 h給予含100μmol·L-1腺苷的高糖DMEM培養(yǎng)，氧糖剝奪期將培養(yǎng)基更換為無糖、無血清DMEM。氧糖剝奪期，將氧糖剝奪組和腺苷預(yù)處理組細(xì)胞放入含體積分?jǐn)?shù)95%氮氣、體積分?jǐn)?shù)5%CO2的自制缺氧倉內(nèi)缺氧8 h；在復(fù)氧糖期，氧糖剝奪組及腺苷預(yù)處理組細(xì)胞培養(yǎng)
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報 2018年2期2018-02-09
- PGC-1α過表達(dá)逆轉(zhuǎn)OGD/R誘導(dǎo)的神經(jīng)元線粒體功能降低和凋亡*
α)基因過表達(dá)對氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)誘導(dǎo)的神經(jīng)元線粒體功能及細(xì)胞凋亡的影響。方法采用RT-PCR的方法從C57BL/6乳鼠大腦皮層獲取PGC-1α的全基因序列，并克隆到真核表達(dá)載體pEGFP-N1上，經(jīng)PCR初步鑒定后轉(zhuǎn)染原代皮層神經(jīng)元，Western blot鑒定PGC-1α的表達(dá)情況，成功構(gòu)建PGC-1α真核表達(dá)載體pEGFP-N1-PGC-1α。分別將轉(zhuǎn)染pEGFP-N1和pEGFP-N1-PGC-1α載體的皮層神經(jīng)元進(jìn)行OGD/R處理，分別
中國病理生理雜志 2017年11期2017-11-22
- 苦碟子注射液對氧糖剝奪損傷的C6膠質(zhì)細(xì)胞凋亡與自噬調(diào)節(jié)作用?
】苦碟子注射液對氧糖剝奪損傷的C6膠質(zhì)細(xì)胞凋亡與自噬調(diào)節(jié)作用?鄭 宏1，張昕洋2，魯雨荍1，曾子修2，梁 曉2，劉雪梅1△ (1. 北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院，北京 100078； 2. 北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)目的: 研究苦碟子注射液對氧糖剝奪損傷C6膠質(zhì)細(xì)胞凋亡與自噬的調(diào)節(jié)作用，明確其對氧糖剝奪損傷膠質(zhì)細(xì)胞的保護作用。方法: 采用氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)的方法建立C6膠質(zhì)細(xì)胞損傷模型，按隨機數(shù)字表法分為空白對照組、氧糖剝奪/復(fù)氧模型組、苦碟
中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志 2017年8期2017-09-18
- 氧糖剝奪對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響*
100850)氧糖剝奪對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響*韓 雪1， 黃 欣2， 朱玲玲2△， 范 明1,2△(1. 首都醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)系， 北京 100069； 2. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所認(rèn)知科學(xué)研究室， 北京 100850)目的：建立體外氧糖剝奪模型模擬腦缺血缺氧損傷, 探討氧糖剝奪對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECS)屏障功能的影響。方法：細(xì)胞培養(yǎng)至完全融合后換成無糖培養(yǎng)基置于低氧手套箱(0.3% O2)分別處理0.5 h、1 h、2 h和4
中國應(yīng)用生理學(xué)雜志 2017年2期2017-06-05
- 淫羊藿苷對氧糖剝奪PC12細(xì)胞單胺類遞質(zhì)含量的影響
41)淫羊藿苷對氧糖剝奪PC12細(xì)胞單胺類遞質(zhì)含量的影響莫鎮(zhèn)濤 李文娜 翟玉榮 石京山1龔其海1(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)藥理教研室，廣東 珠海 519041)目的 研究淫羊藿苷對氧糖剝奪PC12細(xì)胞單胺類遞質(zhì)紊亂的調(diào)節(jié)作用。方法 采用PC12細(xì)胞氧糖剝奪(2 h)損傷模型，將10-7、10-6、10-5mol/L淫羊藿苷預(yù)給藥1 h加氧糖剝奪期間給藥2 h后，用MTT法檢測細(xì)胞活力，ELISA法檢測細(xì)胞上清液的去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羥色胺(
中國老年學(xué)雜志 2017年8期2017-05-10
- 缺血再灌注損傷腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Necroptosis模型的建立
管內(nèi)皮細(xì)胞，采用氧糖剝奪及復(fù)氧復(fù)糖方法，篩選出擬缺血再灌注損傷時間點。在擬缺血再灌注模型基礎(chǔ)上，予Casepase抑制劑z-VAD-FMK 20 μmol/L干預(yù)，采用CCK-8檢測細(xì)胞活性；透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)；Annexin V-FITC/PI(Propidium Iodide)雙染色法檢測細(xì)胞死亡方式。結(jié)果：確定氧糖剝奪2 h復(fù)氧復(fù)糖8 h，作為擬缺血再灌注時間點；z-VAD-FMK作用于擬缺血再灌注損傷BMECs后，細(xì)胞活性無統(tǒng)計學(xué)意義；z-V
世界中醫(yī)藥 2017年4期2017-04-22
- 氧糖剝奪再灌注引起的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡與NF-κBp65和COX-2蛋白表達(dá)的關(guān)系
肖 雁， 官志忠氧糖剝奪再灌注引起的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡與NF-κBp65和COX-2蛋白表達(dá)的關(guān)系黃 赟1， 董艷軍2， 肖 雁1， 官志忠1目的 探討氧糖剝奪再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后SH-SY5Y細(xì)胞凋亡情況及NF-κB信號通路NF-κBp65、COX-2蛋白的表達(dá)。方法 將SH-SY5Y細(xì)胞分為正常對照組、氧糖剝奪4 h/再灌注24 h組(OGD/R)組。利用流式細(xì)胞術(shù)分別
中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志 2017年2期2017-03-16
- 腺苷預(yù)處理星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪復(fù)氧糖后CX3CL1、GLT-1表達(dá)的變化
處理星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪復(fù)氧糖后CX3CL1、GLT-1表達(dá)的變化王 潔 韓艷艷 李 娟 毛向雷 牛草原 李艷艷 蘭春偉 譚 軍(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000)目的 探討在缺氧復(fù)氧情況下腺苷預(yù)處理誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運體蛋白(GLT-1)和趨化因子(CX3CL1)的表達(dá)變化。方法 原代培養(yǎng)的大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分為正常組、模型組和腺苷預(yù)處理組。模型組:細(xì)胞接受5 h氧糖剝奪/復(fù)氧糖24 h處理；腺苷預(yù)處理組：細(xì)胞在氧糖剝奪前24 h加入
中國老年學(xué)雜志 2017年2期2017-02-14
- HT22細(xì)胞氧糖剝奪再灌注及Grasp65過表達(dá)干預(yù)后高爾基體的形態(tài)變化及其可能機制研究
勝?HT22細(xì)胞氧糖剝奪再灌注及Grasp65過表達(dá)干預(yù)后高爾基體的形態(tài)變化及其可能機制研究王 佳1， 熊 炬2， 周文勝2目的 探討HT22細(xì)胞氧糖剝奪再灌注及Grasp65過表達(dá)干預(yù)后高爾基體的形態(tài)變化及其可能機制。方法 利用小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系HT22為研究對象，HT22細(xì)胞經(jīng)氧糖剝奪再灌注損傷及Grasp65過表達(dá)干預(yù)后，采用MTT法檢測細(xì)胞存活率；Hoechest33258熒光染色法評估細(xì)胞凋亡；并應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)觀察高爾基體的形態(tài)；應(yīng)用We
中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志 2016年12期2017-01-12
- 體外培養(yǎng)的乳鼠皮層神經(jīng)元氧糖剝奪后軸突損傷的實驗觀察
的乳鼠皮層神經(jīng)元氧糖剝奪后軸突損傷的實驗觀察田青 葉文華 陶玉倩目的 建立乳鼠皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型，觀察氧糖剝奪處理對神經(jīng)元軸突損傷的影響。方法 取出生24 h內(nèi)的SD大鼠大腦皮層神經(jīng)元，采用逐漸降低培養(yǎng)液中血清濃度和添加阿糖胞苷的方法培養(yǎng)、純化神經(jīng)元，觀察其形態(tài)并鑒定。建立氧糖剝奪模型，隨機分為正常對照組和氧糖剝奪處理組(2、4、6、8 h各1組)。采用噻唑藍(lán)比色法測定神經(jīng)元活性，βⅢ-tubulin 免疫熒光染色觀察軸突形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果 神經(jīng)元培養(yǎng)3
新醫(yī)學(xué) 2016年11期2016-12-06
- 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的蛋白激酶在缺血大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞中的保護作用
馬神經(jīng)元細(xì)胞根據(jù)氧糖剝奪(腦缺血)誘導(dǎo)時間不同分為正常海馬神經(jīng)元細(xì)胞組，氧糖剝奪誘導(dǎo)120 min組、氧糖剝奪誘導(dǎo)120 min后正?；謴?fù)10 min組、氧糖剝奪誘導(dǎo)120 min后正?；謴?fù)30 min組和氧糖剝奪誘導(dǎo)120 min后正?；謴?fù)60 min組。采用Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)對樣品進(jìn)行檢測，區(qū)分實驗樣本中正常、壞死、凋亡細(xì)胞。結(jié)果隨著氧糖剝奪(腦缺血)時間的延長而神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的數(shù)量呈現(xiàn)不斷增加的趨勢；而隨著氧糖剝奪(腦缺血)
中國老年學(xué)雜志 2016年6期2016-04-14
- 乙酰葛根素對氧糖剝離致神經(jīng)元損傷的干預(yù)作用
01乙酰葛根素對氧糖剝離致神經(jīng)元損傷的干預(yù)作用李 蘭 劉東梅安徽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校護理學(xué)部 安徽合肥 230601本文主要通過三組實驗來研究乙酰葛根素氧糖剝離對神經(jīng)細(xì)胞損傷的干預(yù)作用。研究方法在氧糖剝離的基礎(chǔ)上建立細(xì)胞模型；利用6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚（DAPI）法觀察神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率；利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測細(xì)胞核因子（或稱為K基因結(jié)合核因子）、蛋白質(zhì)（HIF-1α）以及P53基因的表達(dá)；利用蛋白印跡法或免疫印跡的實驗方法測定熱休克蛋白
東方食療與保健 2016年7期2016-03-08
- 內(nèi)皮祖細(xì)胞對氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護作用
著·內(nèi)皮祖細(xì)胞對氧糖剝奪/復(fù)氧損傷神經(jīng)元的保護作用李子惠1，柏盈盈1，居勝紅2(1.東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院 分子與功能影像實驗室，江蘇 南京 210009；2.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院 放射科，江蘇 南京 210009)目的:研究內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)共培養(yǎng)對氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)損傷神經(jīng)元是否有保護作用。方法:分離培養(yǎng)新生小鼠的海馬神經(jīng)元，利用缺氧培養(yǎng)室建立神經(jīng)元OGD/R模型。分離培養(yǎng)小鼠骨髓源性EPCs，采用Transwell小室建立EPCs與OGD/R損
東南大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版） 2015年3期2015-03-22
- 基于Activin A途徑的大黃素神經(jīng)保護機制的研究
制備神經(jīng)元細(xì)胞的氧糖剝奪(OGD)模型，并在此基礎(chǔ)上，給予大黃素干預(yù)，分別檢測細(xì)胞的生存力；應(yīng)用酶聯(lián)免疫方法檢測細(xì)胞培養(yǎng)基的Activin A的表達(dá)含量；應(yīng)用Western blotting 對caspase-3蛋白的檢測。結(jié)果pc-12細(xì)胞經(jīng)牛膝多肽刺激后轉(zhuǎn)化為類神經(jīng)元樣細(xì)胞，在OGD后的pc-12細(xì)胞呈明顯的梯度變化；實驗組細(xì)胞的生存力明顯提高，其培養(yǎng)基的Activin A含量升高明顯，caspase-3蛋白的表達(dá)與單純應(yīng)用氧糖剝奪組比較，表達(dá)降低(P
中國實驗診斷學(xué) 2015年11期2015-03-10
- 吡拉格雷鈉對氧糖剝奪/復(fù)氧后星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫及AQP4表達(dá)的影響
外星形膠質(zhì)細(xì)胞行氧糖剝奪/復(fù)氧處理，建立細(xì)胞水腫模型，觀察TSF對星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫模型的治療效果及其對AQP4表達(dá)的影響。1 材料與方法1.1 實驗動物及材料1.1.1 實驗動物 出生3 d內(nèi)的SD新生乳鼠(由江蘇大學(xué)動物中心提供)。1.1.2 材料及試劑 戊巴比妥鈉(美國Sigma公司);胎牛血清，0.25%胰蛋白酶(含0.025%EDTA)，DMEM無糖培養(yǎng)基，DMEM培養(yǎng)基(美國Sig-ma公司);D-Hanks緩沖液;3-氧 － 甲基-［1-3H］
中國藥理學(xué)通報 2015年12期2015-02-27
- Netrin-1促進(jìn)氧糖剝奪后腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存活☆
trin-1促進(jìn)氧糖剝奪后腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存活☆丁喬*廖松潔*闕嘉麗*李晨光*余劍*目的通過建立體外氧糖剝奪模型模擬缺血缺氧環(huán)境，觀察軸突導(dǎo)向因子netrin-1對腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞氧糖剝奪損傷后的作用。方法體外培養(yǎng)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞，免疫熒光法檢測其netrin-1受體結(jié)直腸癌缺失基因（deleted in colorectal cancer,DCC）及uncoordinated(UNC)5H2的表達(dá)；并使用不同濃度netrin-1作用于氧糖剝奪損傷的腦微血
中國神經(jīng)精神疾病雜志 2015年3期2015-02-06
- SN50對缺血再灌注損傷中TNF-α影響的實驗研究
，再將細(xì)胞模型在氧糖剝奪條件下進(jìn)行培養(yǎng)，通過體外實驗來觀察和了解SN50對缺血再灌注損傷中TNF-α表達(dá)的影響，為眼部缺血性疾病的臨床治療提供理論探索。1 材料與方法1.1 試劑與儀器 SN50(Biomy公司 美國)，TNF-α ELISA Kit(美國Invitrogen公司)，RPMI 1640培養(yǎng)液(美國Gibco公司)，胎牛血清(美國Gibco公司)，MTT(美國Invitrogen公司)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶與細(xì)胞培養(yǎng)皿(美國Corning公司)，ROR
東南國防醫(yī)藥 2014年5期2014-12-07
- 氯化鋰對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞氧糖剝奪模型PARP/AIF凋亡信號通路的影響
300)氯化鋰對氧糖剝奪的SH-SY5Y細(xì)胞具有較強的保護作用，1.0 mmol/L氯化鋰為細(xì)胞保護的有效劑量，其作用機制之一可能是對 AIF信號通路的抑制〔1〕。本實驗擬采用氧糖剝奪的SH-SY5Y細(xì)胞模型模擬腦缺血再灌注損傷進(jìn)一步闡述氯化鋰對PARP-1/AIF信號通路的影響，為鋰劑用于缺血性腦血管病的治療奠定理論基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1主要儀器設(shè)備 二氧化碳(CO2)培養(yǎng)箱；低溫高速離心機；BB6220型三氣培養(yǎng)箱；倒置相差顯微鏡；顯微照相系統(tǒng)；超
中國老年學(xué)雜志 2014年3期2014-09-12
- 突觸蛋白Synapsin在氧糖剝奪模型中的表達(dá)及意義
PC12細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪處理，建立缺血性腦損傷模型，采用Western blot方法檢測不同時間氧糖剝奪模型細(xì)胞中的Synapsin蛋白表達(dá)，探討Synapsin蛋白在氧糖剝奪模型中的表達(dá)及意義。1 材料與方法1.1 細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞株(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)購自北京銀紫晶生物技術(shù)公司。1.2 主要試劑和儀器DMEM培養(yǎng)基購自美國Gibco公司；胎牛血清購自北京鼎國公司；鼠神經(jīng)生長因子(NGF)、胰蛋白酶均購自美國Sigma公司；抗突觸素抗體購自武漢博士
中國實驗診斷學(xué) 2014年3期2014-08-25
- HMGB1基因沉默對氧糖剝奪/復(fù)氧所致星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的保護作用
星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪/復(fù)氧以模擬在體腦缺血再灌注損傷，觀察HMGB1表達(dá)的變化情況，探討RNA干擾抑制HMGB1表達(dá)是否對氧糖剝奪/復(fù)氧的星形膠質(zhì)細(xì)胞具有保護作用。1 材料與方法1.1 實驗動物 新生24h內(nèi)Sprague-Dawley大鼠40只，雌雄兼有，由重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(渝)2012-0001。1.2 主要試劑 DMEM高糖、胎牛血清(美國Gibco)，無糖DMEM培養(yǎng)基(中國鈕因華信)，慢病毒載體HMGB1siR
解放軍醫(yī)學(xué)雜志 2014年4期2014-03-02
- 腺苷預(yù)處理對OGD星形膠質(zhì)細(xì)胞NGF和BDNF的影響
細(xì)胞用于實驗，在氧糖剝奪（oxygen－glucose deprivation，OGD）處理前實驗組給予100μmol／L的腺苷預(yù)處理，研究其對內(nèi)源性NGF、BDNF表達(dá)的影響。1 材料與方法1.1實驗動物出生24h內(nèi)的SD大鼠，雌雄不限，體質(zhì)量10～12g。1.2實驗方法將SD大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離、消化、培養(yǎng)、鑒定，通過分組處理，隨機分為3組：正常對照組（normal control group）、氧糖剝奪組（OGD group）、腺苷預(yù)處理組（ADO
中國實用神經(jīng)疾病雜志 2013年4期2013-10-11
- 腦必通膠囊對局灶性腦缺血大鼠腦血流量及內(nèi)皮細(xì)胞iNOS表達(dá)的影響
［3］。2.4 氧糖剝奪模型的建立 先將培養(yǎng)HUVEC細(xì)胞的培養(yǎng)液換成無糖DMEM培養(yǎng)基，然后轉(zhuǎn)移置缺氧培養(yǎng)氣室中，同時打開有白色塑料鉗夾的聚丙烯管道的進(jìn)氣口和出氣口，將入口處的聚丙烯管道于包含有所需的混合氣體的源頭相連，向氣室內(nèi)充入95%的N2和5%的CO2氣體，將氣流自動控制在每分鐘20 L，大約4 min氣室被完全充滿后，切斷氣體來源，關(guān)上白色的塑料鉗夾以緊閉氣室，最后將這個氣室置于37℃溫育。氧糖剝奪的時間分別是1、3、6、12、24 h。2.5
中成藥 2013年2期2013-08-28
- 米非司酮對孕酮防護PC12細(xì)胞氧糖剝奪損傷的影響*
胞證明孕酮可減輕氧糖剝奪（oxygen-glucose deprivation，OGD）對神經(jīng)元的損傷。然而孕酮的防護作用是通過核受體介導(dǎo)的基因途徑，還是通過膜受體介導(dǎo)的非基因途徑目前尚不清楚［2］。本文在PC12細(xì)胞的OGD損傷模型，觀察孕酮核受體拮抗劑米非司酮（mifepristone，MIF）阻斷孕酮核受體前后細(xì)胞形態(tài)、存活率、培養(yǎng)液中葡萄糖含量的變化，探討核受體介導(dǎo)的基因途徑在孕酮抗OGD損傷中所扮演的角色。1 材料與方法1.1 材料與試劑大鼠嗜鉻
中國應(yīng)用生理學(xué)雜志 2013年2期2013-03-25
- 氧糖剝奪對體外培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)Cdh1蛋白表達(dá)的影響及機制＊
培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪（oxygen－glucose deprivation，OGD）后Cdh1蛋白的表達(dá)變化，及其是否與細(xì)胞外液葡萄糖含量有關(guān)，為進(jìn)一步明確缺血缺氧性腦損傷的發(fā)病機制提供實驗依據(jù)。1 材料與方法1.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外純化培養(yǎng)根據(jù)McCarthy 等［3］報道的方法，取新生1～2 d SD 大鼠，75%乙醇消毒，無菌操作下取出全腦浸于4℃預(yù)冷D－h(huán)anks液中，用眼科鑷快速剝除腦膜及小腦，夾取皮層置于另一玻璃皿中。仔細(xì)剪碎皮層組織后，
華中科技大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版） 2012年3期2012-12-23
- PC12細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定及氧糖剝奪模型的制備
能，同時應(yīng)用體外氧糖剝奪（oxygen－glucose deprivation，OGD）來模擬體內(nèi)腦缺血過程，為探討缺血缺氧狀態(tài)下對神經(jīng)元的活力、凋亡、信號通路機制的研究定物質(zhì)基礎(chǔ)。1 材料和方法1.1 實驗細(xì)胞大鼠PC12細(xì)胞株購自北京金紫晶生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤細(xì)胞庫）。鼠神經(jīng)生長因子（NGF）（Sigma公司，美國）。1.2 實驗方法1.2.1 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代 將細(xì)胞懸液加入含有DMEM完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)液2－3天更換一次。
中國實驗診斷學(xué) 2012年5期2012-11-23
- PC12細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定及氧糖剝奪模型的制備
能，同時應(yīng)用體外氧糖剝 奪 （oxygen－glucose deprivation，OGD）來模擬體內(nèi)腦缺血過程，為今后進(jìn)一步探討缺血缺氧狀態(tài)下對神經(jīng)元的活力、凋亡、信號通路機制的研究奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。1 材料和方法1.1 實驗細(xì)胞大鼠PC12細(xì)胞株購自北京金紫晶生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤細(xì)胞庫）。鼠神經(jīng)生長因子（NGF）（Sigma公司，美國）。1.2 實驗方法1.2.1 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代 將細(xì)胞懸液加入含有DMEM完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)液2
中國實驗診斷學(xué) 2012年12期2012-11-05
- 促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對氧糖剝奪后星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫及AQP4表達(dá)的影響☆
hEPO預(yù)處理對氧糖剝奪后星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫及其AQP4表達(dá)的影響，并探討其意義。1 材料與方法1.1 研究對象 新生2 d內(nèi)的SD大鼠(重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供)50只，胎牛血清(美國Gibco)，無糖DMEM培養(yǎng)基(中國 鈕因華信)，神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(美國Sigma)，乳酸脫氫酶試劑盒(美國 Hyclone)，RT-PCR試劑盒(美國 Ferments)，AQP4 多克隆抗體(美國 Santa Cruz)。1.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)[8]取新
中國神經(jīng)精神疾病雜志 2012年1期2012-09-14
- 孕酮對氧糖剝奪損傷的PC12細(xì)胞的保護作用*
為依靠葡萄糖的無氧糖酵解來獲取能量。然而，無氧糖酵解產(chǎn)生ATP的效率下降，要滿足腦細(xì)胞對能量的需求，就需要大量葡萄糖作為底物，葡萄糖進(jìn)入腦細(xì)胞必須借助細(xì)胞膜上的GLUT3進(jìn)行跨膜轉(zhuǎn)運。因此GLUT3表達(dá)的多少就成為決定缺血時腦細(xì)胞對葡萄糖利用效率的首要因素，在腦缺氧缺血損傷的病理過程中起關(guān)鍵作用，是干預(yù)腦缺氧缺血損傷的重要靶點。探索缺氧缺血時增強神經(jīng)元葡萄糖供給和攝取能力的調(diào)控因素具有重要意義。本實驗室前期在缺氧缺血新生鼠和缺血－再灌注大鼠已經(jīng)證實孕酮(p
中國病理生理雜志 2012年2期2012-09-14
- 大鼠皮層小膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪模型的制備
。本實驗采用體外氧糖剝奪(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型來模擬腦損傷過程,為研究缺血過程中小膠質(zhì)細(xì)胞的腦保護作用提供了可靠、實用的方法。1 材料與方法1.1 實驗動物出生1～2d Wistar大鼠。購自吉林大學(xué)中心實驗室。1.2 實驗方法1.2.1 大鼠皮層小膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)和鑒定 采用酶消化法結(jié)合機械分離法進(jìn)行培養(yǎng)[2]。應(yīng)用倒置顯微鏡觀察不同時期細(xì)胞形態(tài)及生長情況。在培養(yǎng)第8天用OX42免疫細(xì)胞化學(xué)染色進(jìn)行鑒定。1.
中外醫(yī)療 2011年35期2011-06-15