非霍奇金淋巴瘤患者MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗血藥濃度及療效的相關性研究

中圖分類號 R969.4;R979.1 文獻標志碼A 文章編號 1001-0408（2025）13-1641-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.13.15

Study on relationships of MS4A1 gene polymorphism with blood concentration and eficacy of rituximab in patientswithnon-Hodgkin'slymphoma

SHI Feng'2，LIU Tao1，HUANG He¹ ，F(xiàn)ANG Caifu1，GUAN Shaoxing2，ZHANG Zhang1，WANG Zhao1，F(xiàn)ANG Xiaojiel，CHEN Zhuojia’，LIU Shu'（1.Dept. of Pharmacy，Cancer Center，Sun Yat-sen University，Guangzhou 510060，China;2.School of Pharmaceutical Sciences，Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510o06，China）

ABSTRACTOBJECTIVETo explore the efects ofCD20 coding gene（MS4AI）polymorphismon the blood concentrationand efcacyof rituximab in patients with non-Hodgkin'slymphoma.METHODS Aprospective observational study was conductedon 160 newlydiagnosed non-Hodgkin’slymphoma patients who received theR-CHOPregimen atthe Sun Yat Sen UniversityCancer Center from January2016 toDecember 2020，withaminimum follow-upperiodof approximately5years.The bloodconcentration ofrituximabwas detected byenzyme-linked immunosorbent assay.MS4AI tagSNPs wereselected by Haploview4.2software， includingrs1051461，rs17155034，rs4939364，andrs10501385.ThegenotypeofMS4AlwasdetectedbyMatrix-asisted laser desorption/ionizationtimeof-fightmasspectrometry.Univaratelinearregressonanalysiswasemploedtoexaminetheelain betweenvariousfactors（demographic，clinical，andgenotypicvariables）inpatientsandthesteady-statetroughconcentrationof rituximab during the first course of treatment，followed by multivariate linear regression analysis.Kaplan-Meier curves were drawn to evaluate progression-free survival （PFS）and overall survival （Os）. Using MS4A1 genotype and tumor stage asindependentvariables，Coxregressionmodelwasemployed to evaluate thefactors influencingpatientprognosis.

RESULTSTheblood concentrationofrituximab in MS4A1 rs10501385 CC carriers was 15.20μg/mL ，whichwas significantly lowerthan 21.95μg/mL in AA⁺AC carriers（ Plt;0.05）.The multivariate linear regresion model incorporating tumor stage and MS4A1 rs1050l385 polymorphism explained 7.3% of theinterindividual variabilityinrituximabconcentrations.Compared with MS4A1rs1051461 CCcarriers， CT⁺TT carriers had significantly prolonged PFS and OS（ ΔPlt;0.05 ）.The Cox proportional hazards regression model showed that the MS4A1 rs1051461 CCgenotype（ HR=4.406 ， 95% CI：1.743-11.137， Plt;0.05 ）andtumorIamp;IV（ HR=3.233 ，95%CI：1.413-7.399， Plt;0.05 ）were independent risk factors for PFS.CONCLUSIONS Thetumor staging and MS4A1rs10501385 polymorphismare keyinfluencing factors for bloodconcentrationofrituximab，andMS4Alrs1051461polymorphism significantlyafectsPFSinnon-Hodgkin's lymphoma patients.

KEYWORDSrituximab；non-Hodgkin’s lymphoma；MS4Al；genetic polymorphism；blood concentration；efficacy

淋巴瘤根據(jù)組織病理學改變可分為霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤兩大類。在我國，非霍奇金淋巴瘤病例數(shù)約占淋巴瘤總病例數(shù)的 90% 以上。非霍奇金淋巴瘤由發(fā)育異常的淋巴細胞（通常為B淋巴細胞）引起，而CD20是B淋巴細胞的標志物，在正常B淋巴細胞和約95% 的惡性B淋巴細胞表面表達，因此，CD20被認為是一個治療B細胞淋巴瘤的理想靶點。利妥昔單抗是第1個研發(fā)上市的靶向B淋巴細胞CD20抗原的嵌合單克隆抗體，其在淋巴瘤的治療中處于基石地位。直到今天，CD20-CHOP方案仍然是權威指南推薦的眾多非霍奇金淋巴瘤的一線治療選擇。

CD20是一種具有高度保守的四次跨膜結構域的跨膜蛋白，由MS4A1基因編碼。目前，MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗療效的相關性已被廣泛探討。例如韓國有研究報道，彌漫大B細胞淋巴瘤患者的CD20表達水平個體差異很大，且低表達者與不良預后相關4。國內(nèi)研究通過對彌漫大B淋巴瘤患者進行測序，發(fā)現(xiàn)MS4A1rs17155019、rs2070770與CD20的表達水平有相關性。但中國患者的類似研究并不多見，能夠影響利妥昔單抗療效的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide poly-morphism，SNP）還未被確認。

近年來，不斷有國內(nèi)外研究報道，利妥昔單抗的血藥濃度是非霍奇金淋巴瘤治療響應的決定性因素之一。例如美國一項針對166例非霍奇金淋巴瘤患者的研究顯示，在整個治療過程中，利妥昔單抗的中位谷濃度（ （c_trough） 與臨床響應顯著相關。本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)，達到利妥昔單抗有效血藥濃度是良好預后的重要保障在濾泡淋巴瘤中達到有效血藥濃度 （18.4μg/mL 可顯著降低化療失敗的風險（ P=0.012） ；在彌漫大B細胞淋巴瘤中達到有效血藥濃度也與更優(yōu)的無進展生存期（progression-freesurvival，PFS）（ Plt;0.000 1 、總生存期（overall survival，OS）（ P=0.003 8 顯著相關；但現(xiàn)實中有超過1/3的患者都未能達到有效血藥濃度[7-8]。利妥昔單抗的代謝途徑包括靶標CD20介導的清除和非靶標介導的清除。因此，進一步通過藥物基因組學研究，確定患者血藥濃度個體差異的來源，將有助于臨床制定精準的給藥劑量。

由上可知，CD20作為利妥昔單抗治療的靶點，其表達水平對藥物療效及藥物清除過程的影響均不可忽視。有鑒于此，本研究通過Haploview4.2軟件挑選CD20編碼基因MS4A1的標簽SNP（tagSNP），以非霍奇金淋巴瘤患者為研究對象，開展前瞻性觀察性臨床研究，并通過5年的長期隨訪，考察tagSNP的基因多態(tài)性對利妥昔單抗血藥濃度以及療效的影響，以期為利妥昔單抗個體化給藥劑量的設計和治療方案的優(yōu)選提供理論依據(jù)。

1 研究對象

本研究納入了160例于2016年1月至2020年12月在中山大學腫瘤防治中心新確診為CD20+的非霍奇金淋巴瘤，并接受R-CHOP方案（利妥昔單抗 + 環(huán)磷酰胺 + 多柔比星 + 長春新堿 + 潑尼松）治療的患者作為研究對象。在醫(yī)院電子病歷系統(tǒng)登記患者的年齡、性別、瘤種、用藥情況、不良反應、療效評估結果、隨訪信息等資料。本研究經(jīng)中山大學腫瘤防治中心倫理委員會審批并在中國臨床試驗注冊中心注冊（臨床試驗注冊號為ChiCTR1800017001），患者均簽署知情同意書。

本研究的納人標準為：（1）具有可獲取的新鮮或固定腫瘤組織標本，根據(jù)臨床表現(xiàn)、血液檢查、骨髓細胞學檢查、淋巴結或骨組織病理結果，符合《中國惡性淋巴瘤診療規(guī)范（2015年版）》中CD20+的非霍奇金淋巴瘤的診斷標準；（2）既往未接受過化療或放療等抗腫瘤治療；（3）影像學上至少有1個可測量的病灶；（4）年齡大于14歲；（5心電圖正常，心肌射血分數(shù) ?50% 。

本研究的排除標準為：（1）各種先天性或者獲得性免疫缺陷（包括獲得性免疫缺陷綜合征、Wiskott-Aldrich綜合征、腎移植術后長期口服抗排斥藥物等免疫功能缺陷等）患者；（2）其他惡性腫瘤化療或放療后發(fā)生的繼發(fā)性淋巴瘤患者；（3）存在需要接受系統(tǒng)性抗生素或抗病毒藥物治療的活動性感染者；（4）失代償性心功能衰竭、擴張性心肌病和最近6個月內(nèi)發(fā)生過心肌梗死的患者；（5）伴有乙型肝炎病毒感染并處于活動期的患者；（6）嚴重的精神性疾病患者；（7）哺乳期或妊娠期女性；（8）治療期間依從性差、數(shù)據(jù)收集不全、無法評價療效和安全性的患者。

2 方法

2.1血樣采集及DNA提取

因多項藥代動力學研究表明，利妥昔單抗的 c_trough 與藥-時曲線下面積（areaunderthecurve，AUC）顯著相關[10-1]，且文獻推薦檢測第1個療程的 c_trough 進行預后分析[2，故本研究檢測了第1個療程利妥昔單抗的 c_trough ，即在第2個療程給藥前采集患者血樣 2mL ，用乙二胺四乙酸抗凝管收集。所有血樣采集后于6h內(nèi)以 5000r/min 離心 10min ，分離出血漿和血細胞，將血漿凍存于一 80^°C 超低溫冰箱，3個月內(nèi)完成血藥濃度檢測；剩余血細胞按TIANamp血液DNA試劑盒[天根生化科技（北京）有限公司]說明書操作提取DNA，于 -80^°C 超低溫冰箱凍存，用于后續(xù)基因型檢測。

2.2 基因型檢測

采用Haploview4.2軟件挑選MS4A1基因tagSNP：rsl051461、rs17155034、rs4939364、rs10501385；取“2.1\"項下血樣分離后的凍存血細胞，以基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜（matrix-assisted laser desorption/ioniza-tion time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）法進行基因型檢測。首先采用AssayDesigner3.1軟件設計PCR引物并進行PCR擴增，然后進行蝦堿性磷酸酶消化反應和單堿基延伸反應，最后采用MALDI-TOF-MS法，以Typer4.0軟件檢測質(zhì)譜峰，根據(jù)質(zhì)譜峰圖判讀各樣本目標位點的基因型。

2.3 利妥昔單抗血藥濃度檢測

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinked immunosor-bentassay，ELISA）[]檢測利妥昔單抗血藥濃度。取“2.1\"項下凍存血漿，通過建立“捕捉抗體-利妥昔單抗-檢測抗體”的夾心法進行血藥濃度定量。方法的特異性、選擇性、準確度、精密度、稀釋線性、稀釋平行性、樣品穩(wěn)定性均符合要求。

所用儀器、藥品及試劑有：Veriti梯度PCR儀（美國ABI公司）、DNA質(zhì)譜陣列基因分析系統(tǒng)（美國AgenaBioscience公司）、酶標儀/全波長讀數(shù)儀（美國ThermoFisherScientific公司）、利妥昔單抗注射液（瑞士RochePharmaLtd公司，國藥準字J20170034，規(guī)格 100mg/10 mL，批號分別為H0224/SH0123、H0242/SH0132、H0235/SH0129）、注射用環(huán)磷酰胺（德國BaxterOncologyGmbH公司，國藥準字H20160467，規(guī)格 0.2g ，批號分別為7F167A、7F172A、8A210A）、注射用鹽酸多柔比星（瀚暉制藥有限公司，國藥準字H33021980，規(guī)格 10mg ，批號分別為18007113、18019811、1900611）鹽酸多柔比星脂質(zhì)體注射液（石藥集團歐意藥業(yè)有限公司，國藥準字H20113320，規(guī)格為 ，批號分別為

691161211、691171210、691180701）、注射用硫酸長春新堿[深圳萬樂藥業(yè)有限公司，國藥準字H44021772，規(guī)格1mg （按 C₄₆H₅₆N₄O₁₀?H₂SO₄ 計），批號分別為1706V2、1809V1、1810V1]、醋酸潑尼松片（天津力生制藥股份有限公司，國藥準字H12020689，規(guī)格 5mg ，批號分別為CP180511A、CP190602A、CP190615A）、利妥昔單抗ELISA試劑盒（美國BioVision公司）。

2.4 臨床治療方法

登記人組患者確診時及治療過程中的身高、體重、合并用藥情況、一般健康狀態(tài)、生化指標、血常規(guī)指標等資料。患者根據(jù)病情并遵照《中國惡性淋巴瘤診療規(guī)范（2015年版）》，接受 4～6 個療程R-CHOP方案治療，每21d為1個療程。R-CHOP化療方案的用法用量為：利妥昔單抗 375mg/m² 緩慢靜脈注射、環(huán)磷酰胺 750mg/m² 靜脈注射、多柔比星 50mg/m² （或多柔比星脂質(zhì)體20mg/m²） 靜脈注射、長春新堿 2mg 靜脈注射，第 1～5 天；另每天口服潑尼松 100mg ，每21d為1個療程。一般達到完全緩解后鞏固2個療程，共進行 6～8 個療程。若期間發(fā)生腫瘤進展或控制不佳，則更換其他化療方案，視為患者出組。

2.5 療效評價

在患者治療結束后，每3個月對其進行1次電話隨訪，建立電子管理檔案，隨訪日期截至2024年12月31日。在隨訪期內(nèi)，基于患者的PFS和OS繪制生存曲線（PFS是指患者從接受治療至觀察到疾病進展或因任何原因死亡之間的時間；OS是指從隨機化分組開始至因任何原因死亡或到隨訪截止的時間），探討MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗療效的相關性。

2.6 統(tǒng)計學處理

應用SPSS24.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。采用單因素線性回歸分析患者人口統(tǒng)計學（性別、年齡、體重等）、臨床指標、基因型與第1個療程利妥昔單抗穩(wěn)態(tài)c_trough 的相關性；再將有統(tǒng)計學意義（ 的因素作為自變量，第1個療程利妥昔單抗穩(wěn)態(tài) c_trough 作為因變量進行多元線性回歸分析。繪制Kaplan-Meier曲線以評估患者的PFS和OS。以MS4A1基因型和腫瘤分期為自變量，采用Cox回歸模型評估影響患者預后的因素，數(shù)據(jù)以風險比（hazardratio，HR）及其 95% 置信區(qū)間（confi-denceinterval，CI）表示。

符合正態(tài)分布的計量資料以 表示，多組間比較采用方差分析，進一步兩兩比較采用 t 檢驗；偏態(tài)分布的計量資料以 M（P_²⁵，P_⁷⁵） 表示，使用非參數(shù)檢驗。計數(shù)資料用頻數(shù)或率 （%） 表示，采用 χ² 檢驗。檢驗水準 α=0.05 。

3結果

3.1患者一般資料

共納入160例患者，其中男性87例、女性73例；初診時骨髓侵犯者12例，腫瘤分期達Ⅱ或V期者84例；利妥昔單抗的給藥劑量為說明書推薦的 375mg/m² ，大部分患者的給藥劑量為 500～800mg ，平均給藥劑量為（639.91±65.03）mg 。患者的一般資料見表1。

BSA：體表面積；BMI：體重指數(shù)；LDH：乳酸脫氫酶；TBIL：總膽紅素；ALT：丙氨酸轉氨酶；AST：天冬氨酸轉氨酶;CRE：肌酐；UA：尿酸；CYSC：胱抑素C；GLOB：球蛋白；ALB：白蛋白；A/G：球蛋白/白蛋白；TP：總蛋白；CRP：C反應蛋白;PLT：血小板;HGB：血紅蛋白；WBC：白細胞；LY：淋巴細胞絕對值;MO：單核細胞絕對值；NE：中性粒細胞絕對值；NLR：中性粒細胞與淋巴細胞的比值；LMR：淋巴細胞與單核細胞的比值；PLR：血小板與淋巴細胞的比值。

3.2 MS4A1基因型檢測結果

160例患者中，MS4A1的4個位點rs1051461、rs17155034、rs4939364、rs10501385的基因型分布頻率見表2，其均符合Hardy-Weinberg平衡 （Pgt;0.05） ），具有群體代表性。其中，rs10501385等位基因頻率與美國國家生物技術信息中心數(shù)據(jù)庫（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/）中納入的東亞患者人群的統(tǒng)計數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義（ ΔPlt;0.05 ）。

3.3利妥昔單抗的血藥濃度檢測結果

160例患者利妥昔單抗的 c_trough 均值為 （20.29±9.83 ）μg/mL ，范圍為 0.07～49.49μg/mL。

3.4MS4A1基因型與利妥昔單抗血藥濃度的相關性 分析

rs10501385AA+AC基因型患者利妥昔單抗的 c_trough 均值為 （21.95±9.33）μg/mL ，CC基因型患者為（ 15.20± 7.92）μg/mL ，兩組 c_trough 均值比較的差異有統(tǒng)計學意義（ P=0.038 ）。而rs17155034、rs4939364、rs1051461不同基因型組間利妥昔單抗的 c_trough 比較的差異無統(tǒng)計學意義 （Pgt;0.05 ）。結果見表3。

MS4A1基因型與利妥昔單抗 c_trough 相關性的單因素分析結果見表4。由表4可知，rs10501385位點對非霍奇金淋巴瘤患者利妥昔單抗 c_trough 的影響有統(tǒng)計學意義0 _F=4.415 P=0.038 ），回歸方程為利妥昔單抗 c_trough= 21.948-6.746×rs10501385 位點賦值（若患者rs10501385位點基因型為CC則賦值為1，AA或AC則賦值為0）；由R² 值可知，MS4A1rs10501385基因多態(tài)性能解釋 3.8% 的利妥昔單抗血藥濃度個體差異。

3.5非霍奇金淋巴瘤患者人口統(tǒng)計學及臨床指標與利妥昔單抗血藥濃度的相關性分析

將患者人口統(tǒng)計學指標（性別、年齡、體重等）以及臨床指標作為自變量，利妥昔單抗 c_trough 作為因變量進行單因素回歸分析。結果顯示，患者的性別、腫瘤分期、初診時骨髓侵犯、TBIL、ALT、AST、A/G與利妥昔單抗 c_trough 相關（ Plt;0.05） ，其中A/G與其呈正相關，其余因素呈負相關。結果見表5。

3.6多元線性回歸分析利妥昔單抗血藥濃度的影響因素

根據(jù)“3.4”\"3.5\"項下結果，對單因素回歸分析中差異有統(tǒng)計學意義的指標進一步進行多元線性回歸分析，最終得到以腫瘤分期和 MS4AIrs10501385 基因多態(tài)性建立的利妥昔單抗血藥濃度預測方程： c_trough=26.800- 3.502× 腫瘤分期賦值 -3.217×rs10501385 位點賦值（腫瘤分期Ⅲ或V期賦值為1，I或Ⅱ期則賦值為0;rs10501385位點基因型為CC賦值為1，AA或AC則賦值為0，結果見表6。由 R² 值可知，該回歸模型能解釋 7.3% 的利妥昔單抗血藥濃度個體差異。其中，rs10501385CC型的偏回歸系數(shù)為一3.217，提示在其他因素不變的情況下，與攜帶 rs10501385AA⁺AC 基因型患者比較，攜帶rs10501385CC基因型患者的 c_trough 下降了3.217μg/mL（95%CI 為 -6.377～-0.058） 。

3.7MS4A1基因多態(tài)性與非霍奇金淋巴瘤患者預后的 相關性分析

截至隨訪日期，160例患者的中位PFS為66.82個月，中位OS為69.42個月。攜帶rs1051461CT+TT基因型患者的中位PFS為67.37個月，CC基因型患者的中位PFS為47.53個月，Log-rank檢驗顯示二者差異有統(tǒng)計學意義 （χ²=4.520，Plt;0.05） 。攜帶rs1051461CT+TT基因型患者的中位OS為70.55個月，CC基因型患者的中位OS為65.83個月，Log-rank檢驗顯示二者差異有統(tǒng)計學意義 （χ²=4.321 ， Plt;0.05 ）。位于MS4A1的其他3個SNP，即rs17155034、rs4939364和rs10501385均未被發(fā)現(xiàn)與非霍奇金淋巴瘤患者預后有顯著相關性 （Pgt; 0.05）。結果見圖1、表7。

因腫瘤分期是已知的療效影響因素，故本研究將MS4A1基因型、腫瘤分期作為因變量，將PFS和OS分別作為自變量，進行單因素Cox回歸模型分析，然后將分析結果中差異有統(tǒng)計學意義的指標作為自變量，進一步進行多因素Cox回歸模型分析，以評估影響患者預后的因素。結果發(fā)現(xiàn)，MS4A1rs1051461CC基因型（ HR= 4.406，95%CI 為 1.743～11.137，Plt;0.05） 和腫瘤分期Ⅲ或V期 Δ（HR=3.233，95%CI 為 1.413～7.399，Plt;0.05） 是影響患者PFS的獨立危險因素（表8），但兩因素對患者OS無顯著影響（具體數(shù)據(jù)略）。

4討論

4.1MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗血藥濃度的相關性

本研究首先分析了非霍奇金淋巴瘤患者MS4A1基因多態(tài)性對利妥昔單抗血藥濃度的影響。CD20作為靶點介導了利妥昔單抗的體內(nèi)代謝消除過程，即利妥昔單抗通過自身的Fab段與B淋巴細胞膜表面的CD20抗原結合，被內(nèi)吞至細胞內(nèi)，然后被轉運至溶酶體內(nèi)，最終被降解成肽片段和氨基酸[13]。本研究結果發(fā)現(xiàn)，MS4A1rs10501385突變與利妥昔單抗的 c_trough 顯著相關，rs10501385CC基因型的 c_trough 為 15.20μg/mL ，顯著低于AA⁺AC 型的 21.95μg/mL 。單因素分析結果顯示，MS4A1rs10501385基因多態(tài)性能解釋 3.8% 的利妥昔單抗血藥濃度個體差異；以患者腫瘤分期和MS4A1rs10501385基因多態(tài)性建立的利妥昔單抗血藥濃度多元線性回歸模型能解釋 7.3% 的個體差異。綜上，MS4A1rs10501385基因多態(tài)性是影響利妥昔單抗血藥濃度的重要因素。本研究隨后通過在線網(wǎng)站3DSNPv2.0（https：//omic.tech/3dSNPv2/）、HaploReg v4.2（https： //pubs.broadinstitute.org/mammals/haploreg/haploreg. php）以及RegulomeDB v2.2（https：//www. regulomedb. org/regulome-search/）進一步分析了該位點的功能，結果顯示，rs10501385可結合轉錄因子POLR2A，其突變可能對Bcl6b、STAT的基因組結合基序產(chǎn)生影響，這提示該位點可能通過影響轉錄因子與靶基因的結合能力，調(diào)控MS4A1基因表達，最終影響了利妥昔單抗的血藥濃度。

近年來，不斷有國外研究報道，較高的利妥昔單抗血藥濃度是治療非霍奇金淋巴瘤成功的關鍵因素之_[7-8]。一項在美國慢性淋巴細胞白血病患者中進行的利妥昔單抗群體藥動學研究結果顯示，治療響應組患者在每個療程中的利妥昔單抗 c_trough 均高于非響應組，且在第3、6個療程與非響應組比較的差異有統(tǒng)計學意義[14]。另一項惰性復發(fā)/難治性B細胞性非霍奇金淋巴瘤研究結果顯示，長期維持利妥昔單抗 c_troughgt;25μg/mL 才能保證療效。在與我國漢族人群相對接近的日本人群中，一項侵襲性B細胞淋巴瘤研究檢測了治療響應組7例、非響應組5例患者的血藥濃度，發(fā)現(xiàn)治療響應組患者的c_trough 為 （59.7±11.4）μg/mL ，顯著高于非響應組的（2號 （43.0±6.4）μg/mL（P=0.021）^[15] 。以上研究提示，利妥昔單抗必須在體內(nèi)達到一定濃度才能發(fā)揮療效?；诒狙芯拷Y果，推薦 MS4AIrs10501385 基因多態(tài)性作為利妥昔單抗個體化給藥劑量設計的參考依據(jù)之一。

4.2MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗療效的相關性

本研究進一步評估了非霍奇金淋巴瘤患者MS4A1基因多態(tài)性對利妥昔單抗療效的影響，發(fā)現(xiàn)MS4A1rs1051461突變與非霍奇金淋巴瘤的預后相關。攜帶rs1051461CT+TT基因型患者的中位PFS為67.37個月，顯著長于攜帶CC基因型患者的47.53個月；同樣，rs1051461CT+TT基因型患者的中位OS為70.55個月，顯著長于攜帶CC基因型患者的65.83個月。本研究還通過Cox回歸模型分析得出MS4A1rs1051461CC基因型 ?HR=4.406，95%CI 為 1.743～11.137，Plt;0.05） 和腫瘤分期Ⅱ或V期 （HR=3.233，95%CI 為 1.413～7.399 ，Plt;0.05 ）是影響患者PFS的獨立危險因素。隨后，本研究通過在線網(wǎng)站3DSNP v2.0 、HaploRegv4.2和Regu-lomeDB v2.2 進一步分析該位點的功能，可知rs1051461的功能注釋為 3^′ -UTR突變，有結合轉錄因子CTCF的實驗證據(jù)，提示該位點可能通過影響轉錄因子與靶基因的結合能力，調(diào)控MS4A1基因表達；同時，由于rs1051461位于 3^′ -UTR端，因此其也可能通過多腺昔酸化狀態(tài)、翻譯、降解等影響CD20mRNA的表達（但其具體機制仍需進一步研究），從而影響利妥昔單抗的預后。

4.3 本研究的局限性

本研究存在如下不足：一是納入樣本量較為有限，在某些基因突變頻率低的亞組存在患者例數(shù)少的情況，且為探索性研究，在初步分析階段未進行多重比較校正，未來需要在更大規(guī)模的樣本中驗證這些發(fā)現(xiàn)。二是關于利妥昔單抗血藥濃度的分析，因單抗類藥物的體內(nèi)消除還受非特異性胞飲作用、Fcγ受體等因素的影響，故需要在未來的研究中繼續(xù)探索更多導致其血藥濃度個體差異的因素。

綜上，本研究探究了非霍奇金淋巴瘤患者MS4A1基因多態(tài)性與利妥昔單抗血藥濃度及療效的相關性，發(fā)現(xiàn)MS4A1rs10501385CC基因型攜帶者的利妥昔單抗血藥濃度較低，推薦將該位點作為個體化給藥劑量設計的參考依據(jù)；同時，本研究還發(fā)現(xiàn)MS4A1rs1051461CC基因型攜帶者的中位PFS和OS均較短，且MS4A1rs1051461CC基因型和腫瘤分期為ⅡI或N期是影響患者PFS的獨立危險因素，故建議加強上述幾類人群治療過程中的療效監(jiān)測并提高隨訪頻率。

參考文獻

[1] BRAYF，LAVERSANNEM，SUNGH，etal.Globalcancerstatistics 2022：GLOBOCAN estimates ofincidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries [J].CACancerJClin，2024，74（3）：229-263.

[2] PAVLASOVA G，MRAZ M. The regulation and function of CD2O：an“Enigma”of B-cell biology and targeted therapy[J].Haematologica，2020，105（6）：1494-1506.

[3] 中國臨床腫瘤學會指南工作委員會.中國臨床腫瘤學會 （CSCO）淋巴瘤診療指南2024[M].北京：人民衛(wèi)生出版 社，2024;23-219.

[4] CHOI CH，PARKYH，LIMJH，et al.Prognostic implication of semi-quantitative immunohistochemical assessment of CD20 expression in diffuse large B-cell lymphoma[J].JPathol Transl Med，2016，50（2）：96-103.

[5]ZHANGLN，WANGL，F(xiàn)ANGC，etal.The significance ofsingle nucleotide polymorphism rs2070770 in CD20 genein Chinese patients with diffuse large B-cell lymphoma[J].LeukLymphoma，2015，56（3）：676-681.

[6]BERINSTEINNL，GRILLO-LOPEZAJ，WHITECA， et al.Association of serum Rituximab（IDEC-C2B8） concentration andanti-tumorresponse inthe treatmentofrecurrent low-grade or follicular non-Hodgkin’s lymphoma [J].Ann Oncol，1998，9（9） ：995-1001.

[7]LIU S，HUANG H，CHENR X，et al.Low initial trough concentration of rituximabisassociated with unsatisfactory response of first-line R-CHOP treatment in patients with follicular lymphoma with grade 1/2[J]. Acta Pharmacol Sin，2021，42（4）：641-647.

[8]LIU S，WANG Z，CHEN R X，et al. Rituximab exposureresponse in triweekly R-CHOP treatment in DLBCL：a loading dose is recommended to improve clinical outcomes[J].Clin Transl Sci，2022，15（3）：680-690.

[9］石遠凱，孫燕，劉彤華.中國惡性淋巴瘤診療規(guī)范：2015 年版[J].中華腫瘤雜志，2015，37（2）：148-158.

[10]JAGER U，F(xiàn)RIDRIK M， ZEITLINGER M，et al. Rituximab serum concentrations during immuno-chemotherapy of follicular lymphoma correlate with patient gender，bone marrow infiltration and clinical response[J]. Haematologica，2012，97（9）：1431-1438.

[11]GOLAY J， SEMENZATO G，RAMBALDI A，et al. Lessons for the clinic from rituximab pharmacokinetics and pharmacodynamics[J].MAbs，2013，5（6）：826-837.

[12]TOUT M，CASASNOVAS O，MEIGNAN M，et al. Rituximab exposure is influenced by baseline metabolic tumor volume and predicts outcome of DLBCL patients：a Lymphoma Study Association report[J].Blood，2017，129 （19）：2616-2623.

[13]KAMATHA V. Translational pharmacokinetics and pharmacodynamics of monoclonal antibodies[J]. Drug Discov Today Technol，2016，21/22：75-83.

[14]LI J，ZHI JG，WENGER M，et al. Population pharmacokineticsof rituximab in patients with chronic lymphocytic leukemia[J].JClin Pharmacol，2012，52（12）：1918-1926.

[15]TOBINAI K，IGARASHI T，ITOH K，et al. Japanese multicenter phase II and pharmacokinetic study of rituximab in relapsed or refractory patients with aggressive B-cell lymphoma[J].Ann Oncol，2004，15（5） ：821-830.

[16]CONNE B，STUTZ A，VASSALLI JD. The 3^′ untranslated region of messenger RNA：a molecular “hotspot” for pathology [J]. Nat Med，2000，6（6）：637-641.