寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠炎癥因子及抗氧化酶的影響

慢性阻塞性肺疾病（COPD）作為呼吸系統(tǒng)常見(jiàn)病，其發(fā)病機(jī)制與慢性炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激損傷密切相關(guān)[1]。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)顯示，COPD已成為全球第三大死因。而現(xiàn)有治療手段（糖皮質(zhì)激素等）效果有限，亟須探索新型安全有效的干預(yù)策略。中醫(yī)無(wú)COPD之名，屬于“咳嗽”“哮病”“喘證”“肺脹”等范疇，肺臟長(zhǎng)期遭受內(nèi)傷、五邪入侵，致宣泄失常，損傷肺氣，進(jìn)而因肺虛而傷及脾腎，是以心腎脾肺不足為本，以血瘀痰濁阻滯為標(biāo)的本虛標(biāo)實(shí)之證，故治則應(yīng)以補(bǔ)肺納氣、止咳平喘、理肺化痰為主。寒喘祖帕顆粒由芹菜子、小茴香等中藥組成，具有化痰祛瘀、溫肺止咳、祛濕散寒的功效2]。近年來(lái)臨床研究表明寒喘祖帕顆粒對(duì)于治療COPD療效顯著3]，而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)層面其作用機(jī)制仍需系統(tǒng)驗(yàn)證4]。

1材料與方法

1.1材料

SPF級(jí)雄性KM小鼠，批號(hào)：SCXK（豫）2020-0005；廠家：河南斯克貝斯生物科技股份有限公司。

寒喘祖帕顆粒，新奇康藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：每袋6g；脂多糖，規(guī)格： 10mg ，上海源葉生物科技有限公司；IL-6、IL-8、TNF- ∝ 酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，批號(hào)均為202401，上海滬鼎生物科技有限公司；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：202401，上海滬鼎生物科技有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：JR238898，上海源葉生物科技有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

第一，造模、分組及給藥

用鼻內(nèi)滴注COPD造模液（將2mgLPS溶于香煙塵霧提取液2mL中）的方法建立COPD小鼠模型[5。將小鼠隨機(jī)分為6組，即空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（地塞米松， 1mg/kg ）和寒喘祖帕顆粒低、中、高劑量組（ 3.6g/kg ， 1.8g/kg ， 0.9g/kg ），每組8只，除空白對(duì)照組外其余5組小鼠用乙醚輕度麻醉后，將配置好的造模液滴入小鼠鼻腔內(nèi)（ 10μL ）?？瞻讓?duì)照組以及模型對(duì)照組給予純凈水，其余組各組給藥相應(yīng)受試藥，灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥 28d 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀測(cè)小鼠毛色、呼吸、飲食、進(jìn)水等一般情況，初步判斷模型成功。

第二，采集標(biāo)本

在實(shí)驗(yàn)第29天麻醉小鼠后，摘眼球取血，手術(shù)游離氣管，結(jié)扎左支氣管，PBS灌洗氣管、支氣管及肺泡，收集支氣管肺泡灌洗液。摘取左肺。

第三，指標(biāo)測(cè)定

采用ELISA法檢測(cè)小鼠血清和肺泡灌洗液中的IL-6，TNF- α 和IL-8水平；鄰苯三酚比色法測(cè)定小鼠肺組織中SOD酶的活力；微量法測(cè)定小鼠肺組織中GSH-Px酶的活力。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，使用均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差 來(lái)表示計(jì)量資料，并進(jìn)行單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1寒喘祖帕顆粒對(duì)的影響

COPD模型組小鼠毛色無(wú)光澤，部分有脫毛現(xiàn)象，煩躁不安，撕咬打架較為頻繁，呼吸急促，甚至出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)和張口呼吸等癥狀，飲水量和攝食量減少，初步判斷模型成功。

2.2寒喘祖帕顆粒對(duì)C0PD小鼠血清及肺泡灌洗液中 IL-6的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6含量顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ）；在寒喘祖帕顆粒的干預(yù)下，低、中、高劑量組的IL-6含量顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.05 ， Plt;0.01 ），結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.3寒喘祖帕顆粒對(duì)C0PD小鼠血清及肺泡灌洗液中 TNF-a的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清及肺泡灌洗液中TNF- ∝ 含量顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ）；在寒喘祖帕顆粒的干預(yù)下，TNF- ∝ 含量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.05 ， Plt;0.01 ），結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖1寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6的影響注：IL-6：白細(xì)胞介素-6；

2.4寒喘祖帕顆粒對(duì)C0PD小鼠血清及肺泡灌洗液中 IL-8的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-8含量顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ）；在寒喘祖帕顆粒的干預(yù)下，IL-8含量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.05 ， Plt;0.01 ），結(jié)果見(jiàn)圖3。

2.5寒喘祖帕顆粒對(duì)C0PD小鼠肺組織中S0D的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠肺組織中SOD活力顯 著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ）；與模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組、寒喘祖帕顆粒低、中、高劑量組肺組織中SOD活力均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ），結(jié)果見(jiàn)圖4。

2.6寒喘祖帕顆粒對(duì)C0PD小鼠肺組織中 GSH-Px 的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠肺組織中GSH-Px活力顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組、寒喘祖帕顆粒低、中、高劑量組肺組織中GSH-Px活力均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義1 Plt;0.01 ），結(jié)果見(jiàn)圖5。

3討論

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的發(fā)病機(jī)制與慢性氣道炎癥和氧化應(yīng)激損傷密切相關(guān)。其中IL-6、IL-8和TNF- ∝ 等炎癥因子發(fā)揮關(guān)鍵作用，IL-6作為多效性促炎因子，不僅加劇局部炎癥反應(yīng)，還可通過(guò)激活急性期蛋白導(dǎo)致全身性炎癥，與COPD患者的肺功能下降、肌肉萎縮及急性加重風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)[。IL-8作為強(qiáng)效趨化因子，通過(guò)招募中性粒細(xì)胞至氣道，促進(jìn)彈性蛋白酶和活性氧釋放，直接破壞肺泡結(jié)構(gòu)并加重黏液高分泌，推動(dòng)肺氣腫和氣道重塑進(jìn)程。TNF- ∝ 則通過(guò)激活NF- κ B信號(hào)通路，上調(diào)黏附分子表達(dá)并刺激其他炎性介質(zhì)（如IL-1β）的釋放，形成炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，同時(shí)誘導(dǎo)肺泡上皮細(xì)胞凋亡，加速肺組織破壞[8。三者協(xié)同作用導(dǎo)致蛋白酶-抗蛋白酶失衡、氧化應(yīng)激增強(qiáng)及持續(xù)性炎癥微環(huán)境，最終引發(fā)不可逆的氣流受限。

COPD的氧化應(yīng)激機(jī)制中，SOD和GSH-Px是關(guān)鍵的抗氧化防御分子。SOD通過(guò)催化超氧陰離子（ ）轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化氫（ ?H₂O₂ ），而GSH-Px進(jìn)一步將其分解為水，共同清除活性氧（ROS），減輕氧化損傷。COPD患者因長(zhǎng)期暴露于煙霧或污染物，ROS過(guò)度生成導(dǎo)致SOD和GSH-Px活性代償性升高，但持續(xù)氧化應(yīng)激最終耗竭其儲(chǔ)備，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)

氧化、蛋白酶-抗蛋白酶失衡及DNA損傷，加速肺氣腫和氣道炎癥。研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者肺組織及血清中SOD、GSH-Px水平顯著降低，與疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)[9-10]。

結(jié)語(yǔ)

本研究發(fā)現(xiàn)，寒喘祖帕顆粒能顯著降低COPD小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6，IL-8以及TNF- ∝ 水平，提高肺組織SOD和GSH-Px水平，提示其可通過(guò)增強(qiáng)抗氧化防御系統(tǒng)緩解氧化應(yīng)激。

圖2寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠血清及肺泡灌洗液中TNF- ∝ 的影響注：TNF-α：腫瘤壞死因子 -α ： ?_Plt;0.05 ， \"Plt;0.01

圖3寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠血清及肺泡灌洗液中IL-8的影響注：IL-8：白細(xì)胞介素-8；

圖4寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠肺組織中SOD的影響注：SOD：超氧化物歧化酶；

參考文獻(xiàn)：

[1]彭鑫，李云輝，梁磊，等.程序性細(xì)胞死亡在慢性阻塞性肺疾病中的分子機(jī)制及中醫(yī)藥干預(yù)研究進(jìn)展[J/OL].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，1-15[2025-03-25].

[2]王帥，賈佳.寒喘祖帕顆粒治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者臨床研究[J].山西醫(yī)藥雜志，2025，54（05）：368-371.

[3] 閆艷君，馬威，張娟娟.寒喘祖帕顆粒輔助治療肺腎氣虛證COPD患者的臨床效果分析[J].延安大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版），2024，22（03）：45-49.

[4] 劉琦.維藥寒喘祖帕顆粒治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期的效果及對(duì)肺功能的影響[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2023，29（08） ：11-13.

[5] 郭鵬翔，楊扶德，王志旺，等.黨參對(duì)慢性阻塞性肺疾病小鼠腫瘤壞死因子-α與核轉(zhuǎn)錄因子-KB信號(hào)通路的影響[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2022，38（16）：1930-1934+1944.

[6]郭鵬翔，楊扶德，王志旺，等.黨參對(duì)慢性阻塞性肺疾病模型小鼠炎癥介質(zhì)的影響[J].世界中醫(yī)藥，2022，17（20）：2847-2850+2859.

[7]季思勤，王振偉，盛家剛，等.桑麻杏貝湯在慢性阻塞性肺疾病急性加重期治療的作用及對(duì)肺功能、炎癥因子水平的影響[J/OL].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，1-6[2025-04-24].

[8] 白利芳，肖偉利.血清IL-6、IL-8表達(dá)與慢性阻塞性肺疾病急性加重患者預(yù)后的相關(guān)性分析[J].醫(yī)藥前沿，2024，14（28）：129-131.

[9]施國(guó)華，劉琴，吳曉麗，等.黃芪甲苷對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠氧化應(yīng)激和氣道重構(gòu)的影響[J].系統(tǒng)醫(yī)學(xué)，2024，9（12）：29-32.

[10]林靜瑜，陳祺，周凡，等.嘭菊水煎液對(duì)COPD模型大鼠炎癥因子、抗氧化酶的影響[J].山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，23（04）：309-312+316.

作者簡(jiǎn)介：任鈺帆（2003一），男，漢族，在讀本科。研究方向：中藥復(fù)方治療呼吸系統(tǒng)疾病的機(jī)制。*通訊作者：丁茂鵬（1993—），男，漢族，碩士，講師。研究方向：中藥復(fù)方治療呼吸系統(tǒng)疾病的機(jī)制。

圖5寒喘祖帕顆粒對(duì)COPD小鼠肺組織中GSH- ?Px 的影響注：GSH-Px：谷胱甘肽過(guò)氧化物酶； ?_Plt;0.05 ， ∵Plt;0.01