滇山楂與山里紅總提取物降血脂和促消化作用對(duì)比研究

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1007-8517（2025）09-0030-07

DOI： 10.3969/j .issn.1007 -8517.2025. 09. zgmzmjyyzz202509008

Comparative Study on the Lipid-lowering and Digestive Effects of Crataegus scabrifolia （Franch.）Rehd and Crataeguspinnatifida Bge

GONG Lyudong1.2 ZHONG Chengzhi1，2 YAN Hong1，2 LI Ting1，2 ZI Zhida1，2 WU Desong1，2 GUO Yan1.2 *

1.Yunnan Institute of Materia Medica，Kunming 65O111，China;

2.Yunnan Province Company KeyLaboratory for TCM and Ethnic Drug of New Drug Creation，Kunming 65011，China

Abstract：Objective Tocompare the diferences between Crataegus scabrifolia （Franch.）Rehdand Crataegus pinnatifidaBge. Inreducig bloodlipidsandpromotingdigestion.MethodsAcutehyperlipidemiamodelsofmicewereestablishedbyintraperitoneal injection of 75% egg yolk emulsion，and hyperlipidemia model mice wereestablished by feeding high-fat diet for6 weeks to study andcompare thelipid-loweringefects.Measuringthe propulsionlengthandrateofevans bluetoanalyzeandcomparethedigestive efects.ResultsThetwohyperlipidemia modelmousestudiesshowedasignificantincreasethelevelsofTC，TG，LDL-Cinthe model group compared to the normal group （ Plt;0.01 ）.However，compared to the model group，Two extracts showed a significant decrease in TG levels in various dosage groups （ Plt;0.05 or Plt;0.01 ）.Additionally，the high -dose groups of two extracts exhibited a significant decrease in LDL-C levels （ Plt;0.05 or Plt;0.01 ），and there were no significant diffrences in the levels of TC，TG， LDL-C，andHDL-Cbetween Crataegusscabrifolia（Franch.）RehdandCrataeguspinnatfdaBge.Inthedigestionpromotionexperiment，thelow-dosegroupofCrataeguspinnatifidaBge.SignifcantincreasedthepropulsiondistanceandrateofEvasblue（ P （204 lt;0.01 ）.Conclusion Both Crataegus scabrifolia （Franch.）Rehdand Crataegus pinnatifida Bge.Demonstrated significan lipidloweringeffcts，particularlyinTGndDLClevels，withcomparableeicacy.However，CrtaeguspinnatifidBe.Exibieda notably superior digestive promotion eect compared to Crataegus scabrifolia （Franch.）Rehd.

KeyWords：Crataegus scabrifolia（Franch.）Rehd；Crataegus pinnatifidaBge；Lipid-lowering；DigestivePromotion；Comparative Study

我國(guó)有薔薇科（Rosaceae）山楂屬（Cratae-gus）植物共計(jì)18種[1]。2020版《中國(guó)藥典》[2]記載的山楂為薔薇科植物山里紅CrataeguspinnatifidaBge.var.major N.E.Br. 或山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥成熟果實(shí)，而滇山楂Crataegusscabrifo-lia（Franch.）Rehd始載于《滇南本草》，野生于云南、貴州、四川等地，資源較多并有栽培，習(xí)稱“云楂”[3]。山楂的化學(xué)成分主要含有黃酮、三萜、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、胺類及微量元素等[4-5]，黃酮是山楂主要活性成分，且山楂自古就是藥食兩用，具有健脾開(kāi)胃、消食化滯之功，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，山楂具有顯著的降脂[6和促消化作用[7-8] 。

目前市面上購(gòu)得的山楂主要以山里紅為主，山里紅與滇山楂雖為同科同屬，但屬于不同的種。在形態(tài)上，山里紅果型較大，直徑可達(dá) 2.5cm ，深亮紅色，葉片大，分裂較淺；而滇山楂果實(shí)扁球形，熟時(shí)黃色帶紅暈，葉片多卵狀披針形，有圓鈍鋸齒，不分裂。研究[9-10]發(fā)現(xiàn)滇山楂和山里紅在化學(xué)成分存在較大差異。滇山楂在云南地區(qū)產(chǎn)量高，但在藥理活性方面缺乏實(shí)驗(yàn)依據(jù)和活性報(bào)道，未得到充分的開(kāi)發(fā)和利用。

本文通過(guò)小鼠急性降脂實(shí)驗(yàn)，高脂血癥模型小鼠實(shí)驗(yàn)及對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)，對(duì)滇山楂和山里紅的藥理作用進(jìn)行比較研究，明確滇山楂的藥理作用，為滇山楂的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論參考。

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1受試樣品滇山楂和山里紅藥材，由云南省藥物研究所天然藥物資源研究室高級(jí)工程師朱高倩鑒定提供，批號(hào)為2015060101。滇山楂和山里紅總提取物，提取率分別為 31.7% 和 47.7% ，均由云南省藥物研究所天然藥物化學(xué)研究室提供，批號(hào)均為2015121601，常溫、密封、干燥保存。

1.2樣品制備工藝將滇山楂和山里紅藥材（切片）打成粗粉，便于有效成分的提取。采用 70% 乙醇分別對(duì)滇山楂與山里紅進(jìn)行回流提取3次，第一次采用6倍量的 70% 乙醇回流提取 ^2h ，過(guò)濾，濾渣用5倍量的 70% 乙醇回流提取 ，過(guò)濾，濾渣再用5倍量的 70% 乙醇回流提取 ^1h ，過(guò)濾，濾渣棄之，合并3次提取液。分別將滇山楂和山里紅3次提取液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮液于水浴鍋上烘干，再于減壓烘箱中干燥，得到滇山楂和山里紅總提取物的干燥浸膏。

1.3主要試劑及藥品 0.5% 羧甲基纖維素鈉（CMC-Na），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20190806；總膽固醇（TC）測(cè)試盒、甘油三酯（TG）測(cè)試盒、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)試盒和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測(cè)試盒，均由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，批號(hào)分別為：20221009、20221009、20221006、20220929；依文思藍(lán)，麥克林公司生產(chǎn)，批號(hào)：C10125249；阿托伐他汀鈣片，美國(guó)輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：L70501。

1.4實(shí)驗(yàn)儀器SK82000HP型超聲波儀，科導(dǎo)超聲儀器有限公司；JJ-2000型電子天平，江蘇常熟市雙杰測(cè)試儀器廠；Practum224SQP電子分析天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；MultiskanGO型全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，美國(guó)Thermo公司；UnicelDxc600 全自動(dòng)生化儀，美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司；3K15臺(tái)式冷凍高速離心機(jī)，德國(guó)Sigma公司。

1.5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康SPF級(jí)KM小鼠165只， 6～ 8周齡，全雄，體重（ 22±2 ）g；健康SPF級(jí)KM小鼠60只，6＼～8周齡，雌雄各半，體重（ 22±2） g，均購(gòu)自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0010；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證，SYXK（滇） K2022-0002 ，發(fā)證單位：昆明市科技局；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)云南省藥物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與使用委員會(huì)（IACUC）審查同意；動(dòng)物飼料，購(gòu)自北京科澳協(xié)力飼料有限公司；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于溫度 22～25°C ，濕度 40%～60% ，^12h 光照/黑暗循環(huán)的條件中。

1.6劑量設(shè)計(jì)依據(jù)根據(jù)前期山楂的推薦用量[2]及預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，以二者在生藥劑量相同，來(lái)折算出小鼠給藥劑量。急性降脂試驗(yàn)和促消化實(shí)驗(yàn)所使用的滇山楂總提取物小鼠劑量為 0.57g/kg 和1.14g/kg ，山里紅總提取物小鼠劑量為 0.86g/kg 和 1.72g/kg ，相當(dāng)于山楂的1倍臨床劑量和2倍臨床劑量；在高脂飼料喂養(yǎng)的降脂實(shí)驗(yàn)中，滇山楂總提取物劑量為 0.86g/kg ，山里紅總提取物劑量為 1.29g/kg ，均相當(dāng)于山楂的1.5倍臨床劑量。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1對(duì)小鼠急性高脂血癥的影響[11]采用 75% 蛋黃乳腹腔注射建立小鼠急性高脂血癥模型。SPF級(jí)KM小鼠按體重隨機(jī)分為7組，每組15只。分別為正常組、模型組、滇山楂總提取物低劑量組（0.57g/kg） 、滇山楂總提取物高劑量組0 1.14g/kg） 、山里紅總提取物低劑量組0 （0.86g/kg） 、山里紅總提取物高劑量（1.72g/kg） ）和阿托伐他汀鈣組（ 3mg/kg 。各給藥組按照相應(yīng)劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)10d ，正常組和模型組灌胃給予等量飲用水。末次給藥后 ^5h ，除正常組外，其余各組小鼠按0.1mL/10g 給藥容積腹腔注射 75% 蛋黃乳。禁食10h，自由飲水，禁食時(shí)間到后立即給藥，正常組和模型組灌胃給予飲用水，各給藥組再次灌胃給予相應(yīng)藥物，給藥后 ^1h ，摘眼球取血，分離血清，-80°C 保存。血清按照測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。

2.2對(duì)高脂血癥模型小鼠的影響[12] 采用高脂飼料喂養(yǎng)建立高脂血癥模型小鼠，連續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料6周。高脂飼料的配方為： 10% 豬油、 10% 蛋黃、 2% 膽固醇、 0.2% 膽鹽、 0.2% 丙硫氧嘧啶和77.6% 基礎(chǔ)飼料，由北京科奧協(xié)力飼料有限公司提供。SPF級(jí)KM小鼠按體重隨機(jī)分為5組，每組12只。分別為正常組、模型組、山里紅總提取物劑量組（ 1.29g/kg ）、滇山楂總提取物劑量組（0.86g/kg） ）和阿托伐他汀鈣組（ 4.46mg/kg 。各給藥組按照相應(yīng)劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)6周，正常組和模型組灌胃給予等量飲用水。正常組喂養(yǎng)普通飼料，其他各組喂養(yǎng)高脂飼料。解剖前1d禁食 ^10h ，自由飲水，禁食時(shí)間到后立即給藥，末次給藥后 ^1h ，各組小鼠摘眼球取血，分離血清， -80°C 保存。血清按照測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。

2.3對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響[13] SPF級(jí)KM小鼠按體重隨機(jī)分為5組，每組12只，雌雄各半。分別為正常組、滇山楂總提取物低劑量組 （0.57g/kg） 、滇山楂總提取物高劑量組（ 1.14g/kg? 、山里紅總提取物低劑量組（ [0.86g/kg] ）和山里紅總提取物高劑量（1.72g/kg） 。各給藥組按照相應(yīng)劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7d，正常組灌胃給予等量飲用水。

實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食 20h ，自由飲水。禁食時(shí)間到后各組立即灌胃給藥或等體積飲用水，給藥 30min 后，各組小鼠均灌胃給予 0.2mL 0.5% 伊文思藍(lán)，20min 后脫頸椎處死，打開(kāi)腹腔分離腸系膜，剪取上端至幽門、下端至回盲部的腸管。不加牽引地將小腸拉成直線，測(cè)量腸管長(zhǎng)度作為“小腸總長(zhǎng)度”。從幽門至伊文思藍(lán)前沿的距離作為“伊文思藍(lán)在場(chǎng)內(nèi)推進(jìn)距離”。用公式計(jì)算伊文思藍(lán)推進(jìn)百分率，比較組間差異。伊文思藍(lán)推進(jìn)率 （%）= （伊文思藍(lán)推進(jìn)距離/小腸長(zhǎng)度） ×100% 。

2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)所有數(shù)據(jù)用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示。應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計(jì)，兩兩比較，假定方差齊者用LSD檢驗(yàn)，方差不齊采用Dunnett's T3 檢驗(yàn)，以 Plt;0.05 或 Plt;0.01 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，后續(xù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)均為此標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用GraphPad8.0.2軟件作圖。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1對(duì)小鼠急性高脂血癥的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平顯著升高（ Plt;0.01 ），HDL-C水平未見(jiàn)顯著性差異（ Pgt;0.05 ；與模型組比較，山里紅與滇山楂總提取物各劑量組以及阿托伐他汀鈣組小鼠血清中的TG水平顯著降低（ Plt;0.01 或 Plt; 0.05），山里紅與滇山楂總提取物高劑量組小鼠血清中的LDL-C水平顯著降低（ Plt;0.01 或 Plt;0.05 ）；而滇山楂總提取物各劑量組與山里紅總提取物各劑量組比較，小鼠血清中的TC、TG、LDL-C和HDL-C水平未見(jiàn)顯著性差異（ Pgt;0.05 。如圖1和圖2所示，數(shù)據(jù)見(jiàn)表1和表2。

3.2對(duì)高脂血癥模型小鼠的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平顯著升高（ Plt;0.01 ），HDL-C水平未見(jiàn)顯著性差異（ Pgt;0.05 ）；與模型組比較，阿托伐他汀鈣組小鼠血清中的TC水平顯著降低（ P lt;0.01 ），山里紅與滇山楂總提取物劑量組小鼠血清中的TG水平降低（ Plt;0.05， ），山里紅與滇山楂總提取物劑量組以及阿托伐他汀鈣組小鼠血清中的LDL-C水平顯著降低（ Plt;0.01 或 Plt;0.05 ：但是滇山楂總提取物劑量組與山里紅總提取物劑量組比較，小鼠血清中的TC、TG、LDL－C和HDL-C水平未見(jiàn)顯著性差異（ Pgt;0.05 ）。如圖3和圖4所示，數(shù)據(jù)見(jiàn)表3和表4。

圖1對(duì)急性高脂血癥模型小鼠血脂水平TC和TG的影響圖

注：與正常組比較， ^##Plt;0.01 ；與模型組比較， ^*Plt;0.05，^**Plt;0.01， □

注：與正常組比較， ^##Plt;0.01 ；與模型組比較， ^*Plt;0.05，^**Plt;0.01 （204

注：與正常組比較， ^##Plt;0.01 ；與模型組比較，^*Plt;0.05，^**Plt;0.01_c

注：與正常組比較， ^##Plt;0.01 ；與模型組比較， ^*Plt; 0. 05， ^**Plt;0.01 。

3.3對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與正常組比較，山里紅低劑量組可以顯著提高伊文思藍(lán)在小腸的推進(jìn)距離和推進(jìn)率（ Plt;0.01 或 Plt; 0.05），其他各組未見(jiàn)顯著性差異（ Pgt;0.05， ；與山里紅低劑量組比較，滇山楂低劑量組依文思藍(lán)在小腸的推進(jìn)距離和推進(jìn)率顯著降低（ Plt;0.05 ）。如圖5所示，數(shù)據(jù)見(jiàn)表5。

注：與正常組比較， ^##Plt;0.01 ；與山里紅低劑量比較， ^*Plt;0.05 。

3討論

山楂具有藥食雙重價(jià)值，被廣泛應(yīng)用于食品、保健品和中藥開(kāi)發(fā)中[14-15]，民間的山楂類小吃更是琳瑯滿目，所使用的山楂品種以山里紅為主。

滇山楂原產(chǎn)于云南省，使用歷史悠久，豐產(chǎn)性極強(qiáng)，最高的單株果產(chǎn)量可達(dá) 1500kg ，是全國(guó)山楂罕見(jiàn)的高產(chǎn)優(yōu)良品種[16]。果實(shí)中含有豐富的礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)、維生素C、果酸和黃酮等。滇山楂的可食率較高，果肉硬度大，耐儲(chǔ)藏的性能強(qiáng)， ΔpH 值以2～3為主。然而，滇山楂的保健和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值未得到充分利用，存在明顯的資源浪費(fèi)情況。

滇山楂與山里紅同科同屬不同種，對(duì)滇山楂的化學(xué)成分以及功效研究報(bào)道均較少，寥寥數(shù)篇文獻(xiàn)也都年代久遠(yuǎn)，缺乏對(duì)滇山楂的深入研究。課題組此前對(duì)滇山楂和山里紅總提取物的急性毒性進(jìn)行了考察，發(fā)現(xiàn)以山楂臨床劑量500倍作為最大給藥劑量，滇山楂和山里紅總提取物組所有小鼠均未出現(xiàn)死亡，也未見(jiàn)急性毒性反應(yīng)。表明滇山楂和山里紅總提取物毒性較低。本研究中，滇山楂和山里紅總提取物所使用的藥效劑量均在安全范圍內(nèi)。在降血脂方面，滇山楂和山里紅總提取物均可以顯著降低急性高脂血癥模型小鼠中的TG和LDL-C水平，且二者在降脂方面的活性相當(dāng)，未見(jiàn)顯著性差異。TG的升高與飲食過(guò)多、油膩關(guān)系密切[17]，降低TG具有很好的“消食”作用，而LDL-C升高被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的獨(dú)立因素之一，抑制LDL-C水平可以顯著降低或預(yù)防心血管疾病的發(fā)生[18]。在高脂血癥模型小鼠實(shí)驗(yàn)中，滇山楂和山里紅總提取物同樣可以顯著降低TG和LDL-C水平，有意義的是實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)滇山楂和山里紅主要降低TG，而阿托伐他汀鈣主要抑制TC，可見(jiàn)二者降脂的作用途徑不同。阿托伐他汀鈣主要通過(guò)抑制肝臟中負(fù)責(zé)合成膽固醇的酶（HMG－CoA 還原酶）來(lái)降低 TC 水平[19]，山里紅和滇山楂可能是抑制外源性膽固醇在腸道的吸收進(jìn)而降低TG水平，但具體作用機(jī)制還有待深入研究。兩個(gè)降脂實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示滇山楂與山里紅一樣具有很好的降脂活性，可以起到消食和保護(hù)心血管的作用。然而在促消化方面，山里紅總提取物在低劑量下可以顯著延長(zhǎng)伊文思藍(lán)的推進(jìn)距離和推進(jìn)率，表明山里紅可以促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，起到“化滯”作用。實(shí)驗(yàn)中未顯示出顯著的量效關(guān)系，可能與高劑量組黏度過(guò)高，影響了其在腸道的吸收有關(guān)。山楂中的有機(jī)酸和纖維素成分被認(rèn)為是山楂改善消化功能的主要活性成分[20]。而滇山楂在本實(shí)驗(yàn)條件下未表現(xiàn)出顯著的促消化作用，可能在活性成分上與山里紅存在差異所致。

綜上所述，本研究對(duì)滇山楂與傳統(tǒng)山楂品種山里紅的藥理活性進(jìn)行了對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)滇山楂具有很好的降脂活性，且與山里紅作用相當(dāng)，而在促消化方面不及山里紅。該研究體現(xiàn)了滇山楂的食用或藥用價(jià)值，為滇山楂的開(kāi)發(fā)利用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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