陽(yáng)春砂仁種殼的化學(xué)成分研究

黃綠　付興情　趙榮華　鮑泥滿

摘要：目的研究陽(yáng)春砂Amomum villosum Lour.種殼的化學(xué)成分。方法采用硅膠、Sephadex LH-20、RP C18 柱色譜等手段對(duì)陽(yáng)春砂仁種殼70%乙醇提取物進(jìn)行分離純化，并通過(guò)波譜數(shù)據(jù)、薄層色譜信息鑒定所得化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果從陽(yáng)春砂仁種殼中分離得到5個(gè)化合物，分別鑒定為：β-谷甾醇（β-sitosterol，1）、香草酸（Vanillic acid，2）、原兒茶酸（Protocatechuic acid，3）、槲皮素（Quercetin，4）、谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside，5）。結(jié)論五個(gè)化合物均為首次從砂仁種殼中分離得到。

關(guān)鍵詞：陽(yáng)春砂仁種殼;化學(xué)成分;分離鑒定

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2020）04-0077-03

Study on the Chemical Composition of Seed Shell of Amomum Villosum

HUANG Lu，F(xiàn)U Xing-qing，ZHAO Rong-hua，BAO Ni-man

（1. Yunnan University of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China;2. Collaborative Innovation Center of Southern Medicine Research，Kunming 650500，China）

【Abstract】Objective：To study the chemical composition of seed shell of Amomum villosum. Methods：The silica gel，Sephadex LH-20，RP C18 column chromatography were used to separate and purify the 70% ethanol extract of the seed shell of Amomum villosum and the structure of the obtained compounds was identified by spectroscopy data and thin layer chromatography information. Results：Five compounds were isolated from the seed shell of Amomum villosum，and were identified as：β-sitosterol（1），vanillic acid（2），and protocatechuic acid（3），Quercetin（4），sitosterol-β-D-glucoside （5）. Conclusion：All five compounds were isolated from Amomum villosum for the first time.

【Key words】seed shell of Amomum villosum，chemical composition，separation and identification

砂仁為我國(guó)“四大南藥”之一，始載于《本草拾遺》，為我國(guó)藥食同源的大宗藥材，距今已有1300多年的藥用及食用歷史。2015版《中國(guó)藥典》記載，砂仁為姜科植物陽(yáng)春砂Amomum villosum Lour.、綠殼砂 Amomum villosum our.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen 或海南砂 Amomum longiligulare T.L.Wu 的干燥成熟果實(shí)。性溫、味辛，歸脾、胃經(jīng)，有化濕開(kāi)胃、溫脾止瀉、理氣安胎的功效，臨床用于濕濁中阻，脘痞不饑，脾胃虛寒，嘔吐泄瀉，妊娠惡阻，胎動(dòng)不安等證[1]。中醫(yī)藥中常用砂仁治療腸胃疾病，歷來(lái)有化濕醒脾第一要藥之稱，砂仁亦有作為調(diào)味佳品、加工食品的輔料等作用。砂仁藥用部位為種子團(tuán)，種子團(tuán)粗加工處理會(huì)產(chǎn)生大量的廢料種殼，深入認(rèn)識(shí)和開(kāi)發(fā)砂仁非藥用部位，可合理、綠色利用砂仁藥材資源。

《中藥別名大辭典》[2]記載，砂仁殼為砂仁之果殼，性味功效與砂仁相似，但溫性略減，化濕、行氣之力較弱。適用于脾胃氣滯，脘腹脹滿，嘔惡食少等證。焦樹德《用藥心得十講》云：“砂殼也有理氣醒胃的作用，但缺乏砂仁溫中散寒的效力。砂殼氣味薄，燥性小，肝旺脾弱者用之合宜”[3]。程鐘齡認(rèn)為砂仁殼與砂仁相比，更能寬胸啟膈，行氣解郁，故在啟膈散一方中使用砂仁殼，而非砂仁[4]。還有醫(yī)家認(rèn)為砂仁殼煅燒、研末后，可單用治療熱壅上焦致咽喉疼痛和口舌生瘡[5]。中藥發(fā)揮相關(guān)療效是因其本身含有的化學(xué)成分，所含的成分決定其發(fā)揮對(duì)應(yīng)的功效。現(xiàn)有研究表明砂仁種殼富含揮發(fā)油以及抗氧化性成分，有抑菌、抗氧化等作用但是相關(guān)的化學(xué)成分以藥理活性研究極少[6]。為揭示陽(yáng)春砂仁種殼臨床功效物質(zhì)基礎(chǔ)，合理開(kāi)發(fā)其藥用資源，本研究對(duì)陽(yáng)春砂仁種殼的化學(xué)成分進(jìn)行提取分離和結(jié)構(gòu)鑒定，從中分離得到5個(gè)化合物，分別鑒定為β-谷甾醇（β-sitosterol，1）、香草酸（Vanillic acid，2）、原兒茶酸（Protocatechuic acid，3）、槲皮素（Quercetin，4）、谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside，5），所有化合物均為首次從該部位分離得到。

1儀器與材料

暗箱四用紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（德國(guó)IKA集團(tuán)）;實(shí)驗(yàn)室級(jí)超純水機(jī)（南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司）;循環(huán)水真空泵（鞏義市予華牌儀器有限責(zé)任公司）;微控?cái)?shù)顯電熱板（北京萊伯泰科儀器有限公司）;超聲清洗器（上?？茖?dǎo)儀器有限公司）;萬(wàn)分之一電子天平（奧豪斯儀器有限公司）;核磁共振光譜用Bruker AV-600（600 MHz）超導(dǎo)核磁共振儀測(cè)定（TMS內(nèi)標(biāo)，德國(guó)Bruker公司）。薄層色譜及柱色譜用硅膠（青島海洋化工有限公司）;羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20 凝膠）為Pharmacia 公司進(jìn)口分裝;AB-8大孔樹脂（天津浩聚樹脂科技有限公司）;十八烷基鍵合硅膠（Rp-18）為日本富士硅化工產(chǎn)品;分離純化所有試劑均為普通工業(yè)級(jí)經(jīng)重蒸后使用。

實(shí)驗(yàn)用陽(yáng)春砂仁采自云南金平，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥炮制研究中心趙榮華教授鑒定為陽(yáng)春砂仁Amomum villosum Lour.，剝?nèi)∑錃な褂谩?/p>

2提取與分離

取干燥陽(yáng)春砂仁殼6.75 kg，粉碎，用5倍量70%乙醇浸泡過(guò)后超聲（30 min，50 Hz）3次，過(guò)濾，濾液合并，濃縮后，用水稀釋至乙醇濃度為10 %左右。經(jīng)AB-8大孔樹脂粗劃為水部分、30 %乙醇部分，50 %乙醇部分，70 %乙醇部分，90%乙醇部分。50%乙醇部分經(jīng)乙酸乙酯1：1萃取3次，取乙酸乙酯部分，濃縮，得流分A 29 g，流分A用硅膠柱、Rp-8反相柱、Sephadex LH-20 凝膠柱色譜等分離純化。經(jīng)熒光，TLC檢測(cè)，最終分離得到5個(gè)化合物，分別為化合物1（10.3 mg），2（17.5 mg），3（11 mg），4（35.12 mg），5（7.5 mg）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色無(wú)定型粉末，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10%硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點(diǎn)清晰顯紫色。1H-NMR（600 Hz，CDCl3）δ：5.18（1H，s，H-6），6.81（1H，d，J=12.1Hz，H-3），0.85（7H，d，J=6.9 Hz，H-2，H-26，H-9），0.76（1H，d，J=6.4 Hz，H-27）;13C-NMR（150 Hz，CDCl3）δ：141.03（C-5），121.74（C-6），71.49（C-3），56.93（C-14），56.20（C-17），50.32（C-9），46.00（C-24），42.47（C-13），42.00（C-4），39.93（C-12），37.41（C-1），36.67（C-10），36.30（C-20），34.09（C-22），32.05（C-8），31.32（C-7），29.82（C-2），29.23（C-25），28.39（C-16），26.29（C-23），24.43（C-15），23.19（C-28），21.22（C-11），19.88（C-26），19.46（C-19），19.09（C-27），18.87（C-21），12.04（C-18），11.96（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物1為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物2：淺粉色無(wú)定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80℃烘烤至斑點(diǎn)清晰顯紫色。1H-NMR（600 Hz，CD3OD）δ：7.56（1H，d，J=1.9 Hz，H-2），7.55（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.83（1H，d，J=8.8 Hz，H-5），3.89（1H，s，3-OCH3）;13C-NMR（150 Hz，CD3OD）δ：169.95（COOH），152.51（C-4），148.52（C-3），125.19（C-1），122.93（C-6），115.72（C-5），113.68（C-2），56.33（3-OCH3）以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物2為香草酸（Vanillic acid）。

化合物3：白色無(wú)定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80℃烘烤至斑點(diǎn)清晰顯黃色。1H-NMR（600Hz，CD3OD）δ：7.42（1H，d，J=2.2 Hz，H-2），7.40（1H，dd，J=2.0Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.2Hz，H-5），13C-NMR（150Hz，CD3OD）δ：170.17（C=O），151.42（C-4），145.95（C-3），123.82（C-6），117.65（C-5），115.67（C-2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物3原兒茶酸（Protocatechuic acid）。

化合物4：黃色無(wú)定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點(diǎn)清晰顯黃色。1H-NMR（600 Hz，CD3OD）δ：7.73（1H，d，J=2.2 Hz，H-2′），7.63（1H，dd，J=8.5 Hz 2.2Hz，H-6′），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），6.38（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.18（1H，d，J=2.1 Hz，H-6）;13C-NMR（150Hz，CD3OD）δ：177.34（C-4），165.58（C-7），162.53（C-5），158.24（C-9），148.78（C-4′），148.00（C-2），146.24（C-3′），137.25（C-3），124.16（C-1′），121.69（C-6′），116.24（C-5′），116.00（C-2′），104.54（C-10），99.24（C-6），94.42（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物4為槲皮素（Quercetin）。

化合物5：白色無(wú)定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點(diǎn)清晰顯黃色。1H-NMR（600 Hz，CDCl3）δ：5.30（1H，s，H-6），4.34（1H，dt，J=7.8 Hz 2.3Hz，H-1′），0.77（9H，s），0.61（3H，s）;13C-NMR（150 Hz，CDCl3）δ：140.15（C-5），122.13（C-6），100.98（C-1′），79.12（C-3），76.22（C-3′），75.59（C-5′），73.42（C-2），69.94（C-4′），61.76（C-6′），56.65（C-14），55.96（C-17），50.07（C-9），45.73（C-24），42.24（C-13），39.66（C-12），38.63（C-4），37.15（C-1），36.63（C-10），36.06（C-20），33.85（C-22），31.84（C-8），31.78（C-7），29.53（C-2），29.25（C-25），28.16（C-16），25.95（C-23），24.20（C-15），22.97（C-28），20.97（C-11），19.70（C-27），19.22（C-19），18.90（C-26），18.67（C-21），11.86（C-29），11.25（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道基本一致，故鑒定化合物5為谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside）。

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（收稿日期：2019-12-23）

基金項(xiàng)目：一帶一路地區(qū)——湄公河流域緬甸重要藥材資源調(diào)查（30260200500）

作者簡(jiǎn)介：黃綠（1994-），女，在讀碩士研究生，研究方向：中藥資源開(kāi)發(fā)與利用。

通信作者：鮑泥滿，E-mail：baoniman215@163.com