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    金線蓮的研究進(jìn)展

    2016-12-26 14:20:38李付惠
    云南中醫(yī)中藥雜志 2016年11期
    關(guān)鍵詞:組織培養(yǎng)化學(xué)成分藥理作用

    李付惠

    摘要:金線蓮是我國重要珍稀中藥,研究發(fā)現(xiàn)金線蓮具有很好的保肝、抗HBV、降血糖、抗癌等藥理作用,現(xiàn)代使用非常廣泛,本文對金線蓮植物形體、組織培養(yǎng)、化學(xué)成分、藥理作用等方面進(jìn)行了詳細(xì)的綜述,以期在標(biāo)準(zhǔn)化栽培、規(guī)模化生產(chǎn)方面提供一定的參考依據(jù),也為金線蓮的在化學(xué)成分和藥理作用的深入研究奠定基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞:金線蓮;植物形體;組織培養(yǎng);化學(xué)成分;藥理作用

    中圖分類號:R28文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1007-2349(2016)11-0083-04

    金線蓮為蘭科植物花葉開唇蘭(Anoectochilus roxburghii-(will.)Lind.)的干燥全草。別名金蠶、金線蘭、金石松、金線入骨消等。素有“藥王”“金草”“神草”“烏人參”等美稱[1]。其味平、甘,具有清熱涼血、祛風(fēng)利濕、解毒、止痛、鎮(zhèn)咳等功效,主治咯血、支氣管炎、腎炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤等癥[2]?,F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),金線蓮還有滋補(bǔ)強(qiáng)壯之功,還可治療體虛、急慢性肝炎、高血壓、腫瘤、心臟病、化膿性骨髓炎、口瘡、性病等,且無毒副作用,使用安全[3]。又因金線蓮株型小巧,葉片金黃色,葉脈呈網(wǎng)狀方式排列,是觀賞價值極高的室內(nèi)珍品[4]。所以近年越來越受到消費(fèi)者的青睞,本文對金線蓮的各項(xiàng)研究進(jìn)行綜述,以期為金線蓮的合理開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

    1植物形態(tài)

    金線蓮為蘭科花葉開唇蘭(Anoectochilus roxburghii-(will.)Lind.)多年生草本植物,高4~16 cm。根莖匍匐伸長,呈圓柱形,長1~5cm,莖節(jié)明顯,表面棕褐色,下部聚生2~4片葉,葉互生,為寬卵形,上表面黑棕色,下表面暗紅色,部分葉脈紫紅色,葉柄基部鞘狀抱莖,總狀花序頂生,具3~6朵疏散的花,花暗棕色,蒴果矩圓形,香氣特異,味淡[5]。主要分布在我國廣東、廣西、浙江、江西、海南、四川、云南等[6]。

    2組織培養(yǎng)

    2.1組織培養(yǎng)金線蓮經(jīng)常生長在常綠闊葉林的潮濕地帶,喜陰涼,生產(chǎn)條件要求特殊。且種子不具胚乳,無發(fā)芽能力,只有在真菌共生條件下,才能促進(jìn)種子萌發(fā)生長,但發(fā)芽率較低,以分根法或扦插方式繁殖,時間較長且繁殖倍數(shù)低。為了更好的保護(hù)和開發(fā)金線蓮,近年來利用組織培養(yǎng)方式繁殖金線蓮已成為研究的熱點(diǎn)。

    目前金線蓮組織培養(yǎng)的研究多以莖段、莖尖或果實(shí)為試驗(yàn)材料,采用不同的培養(yǎng)基對其進(jìn)行組織培養(yǎng)。李梅等[7]從金線蓮叢生芽誘導(dǎo)的途徑進(jìn)行研究,建立了金線蓮試管苗的組織快繁培養(yǎng)技術(shù)。王建明[8]等通過設(shè)置優(yōu)化金線蓮組培的條件,發(fā)現(xiàn)液態(tài)培養(yǎng)基顯著優(yōu)于半液態(tài)和固態(tài)培養(yǎng)基;用液態(tài)培養(yǎng)基原球莖增殖倍數(shù)高且速度快。羅曉青等[9]研究發(fā)現(xiàn)金線蓮誘導(dǎo)叢生芽的最佳外植體為帶節(jié)莖段,誘導(dǎo)率達(dá)100 %,可通過原球莖增殖形成叢生芽。汪佳秀等[10]指出合理利用金線蓮組培快繁技術(shù),建立金線蓮無菌繁殖體系,能夠?qū)崿F(xiàn)金線蓮幼苗的快速繁殖。王瑩等[11]以簡化組培過程為目的,只使用一種培養(yǎng)基使組培苗在培養(yǎng)瓶中同時進(jìn)行不定芽和不定根的分化及增粗生長,從而為金線蓮工廠化生產(chǎn)和培養(yǎng)縮短時間。韓曉紅等[12]對莖片、帶節(jié)莖段和不定芽為外植體進(jìn)行組培研究,發(fā)現(xiàn)不同激素濃度配比的培養(yǎng)基對金線蓮的分化、生根有不同影響。黃淑燕等[13]研究發(fā)現(xiàn)不同植物激素對植物的增長產(chǎn)生不同的影響,不同產(chǎn)地的金線蓮對植物生長調(diào)節(jié)劑的要求不同,生長效果也不一樣。戴小英等[14]研究發(fā)現(xiàn),使用活性炭培養(yǎng)金線蓮莖段能夠有效增殖側(cè)芽分生及生長,且塊狀莖連接處含有許多幼年型的芽,幼年型芽的主芽可以萌發(fā)側(cè)芽,側(cè)芽又萌發(fā)下一級側(cè)芽,以此建立高效的快繁體系。王麗芳[15]在金線蓮生根壯苗的研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮生根及壯苗過程中往培養(yǎng)基中添加一定的香蕉泥或馬鈴薯泥,可以促使其生長量的積累和獲得較好的生根效果。吳坤林[16]研究發(fā)現(xiàn),光照強(qiáng)度的不同對金線蓮的生長發(fā)育的影響較明顯。以上研究為金線蓮的組織培養(yǎng)及快繁技術(shù)提供了理論和實(shí)踐依據(jù)。

    2.2人工栽培技術(shù)目前,人工栽培金線蓮的方式主要有:組培苗移栽、露地人工栽培和室內(nèi)人工栽培。光、溫、水、肥、氣等因素對金線蓮生長發(fā)育有較大影響。王光華[17]在金線蓮組培苗移栽技術(shù)研究中發(fā)現(xiàn),栽培基質(zhì)、種植密度、種植深度、肥料、光照等對金線蓮移栽成活率、株高有顯著影響。方金輝等[18]在金線蓮的室內(nèi)人工栽培技術(shù)研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮在大規(guī)模栽培時,可以采用標(biāo)準(zhǔn)蘑菇房形式栽培,這有利于金線蓮的生長發(fā)育。

    3化學(xué)成分

    金線蓮含有生物堿、糖類、皂苷、黃酮類、酯類、揮發(fā)油等化學(xué)成分,具有降血糖、保肝、抗HBV、降血壓、鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理活性。研究表明,金線蓮中氨基酸組成成分、含量及抗衰老活性的成分含量均高于國產(chǎn)和進(jìn)口西洋參[19-20]。

    3.1生物堿林麗清等[21]在金線蓮總生物堿的提取方法及條件優(yōu)化研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮總生物堿以氯仿為溶劑,得到的生物堿提取率為0.0589%。鐘添華等[22]研究的金線蓮總生物堿的提取和測定方法,以氯仿:甲醇(2:1)為溶劑,得到金線蓮總生物堿含量達(dá)0.0795%。朱善嵐[23]采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù),鑒定了金線蓮中的石杉堿甲和烏頭堿的含量。不同溶劑不同提取方法,對生物堿的提取率有較大的影響。

    3.2多糖及糖苷金線蓮苷是開唇蘭屬植物研究最多的成分之一,也是本屬植物已知的主要活性成分[24]。陳曉蘭等[25]對不同產(chǎn)地金線蓮根莖和葉中多糖含量進(jìn)行研究,結(jié)果表明不同產(chǎn)地不同部位金線蓮多糖含量不同,多糖范圍在0.86%~6.41%,且根莖部位的含量高于葉中含量。賴應(yīng)輝等[26]在金線蓮的無機(jī)元素及糖類的分析研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮多糖、低聚糖、還原糖的含量分別為13.31、11.25、9.74%。張曉輝[27]在金線蓮多糖結(jié)構(gòu)分析及抗糖尿病活性研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮多糖體外試驗(yàn)具有較強(qiáng)清除自由基作用;對糖尿病小鼠的血糖有明顯下降(P<0.05)作用,并且能使小鼠組織損傷減少和被修復(fù)。

    3.3黃酮類吳水華等[28]采用熒光分光光度法測定了福建野生和組培金線蓮中總黃酮的含量分別為137.3 ug.g-1和74.87 ug.g-1。龔秀會等[29]采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法,測定了福建金線蓮、臺灣金線蓮組培植株、福建金線蓮林下種植植株中黃酮含量,分別為0.743%、0.889%和0.978%。蔣元斌[30]研究發(fā)現(xiàn),福建金線蓮總黃酮含量增長方式呈“雙峰曲線”模式,而槲皮素、山奈酚、異鼠李素3種黃酮苷元含量增長方式呈“單峰曲線”模式;臺灣金線蓮除異鼠李素呈“雙峰曲線”增長模式外,另外兩種黃酮苷元變化趨勢與福建金線蓮相似呈“單峰曲線”模式。徐靜[31]從金線蓮乙酸乙酯的萃取液中,分離鑒定出了槲皮素、蘆丁、鼠李秦素-3-0-β-D葡萄苷、異鼠李素-3-0-β-D葡萄苷、鼠李秦素等成分。牟洋等[32]采用高效液相色譜法同時測定了金線蓮中4種黃酮苷元成分,分別是蘆丁、山奈酚、異鼠李素、槲皮素4種化合物。鄭維鋒等[33]采用高效液相色譜法,測定了不同產(chǎn)地金線蓮樣品中蘆丁的含量為0.063~0.095%。

    3.4酯類羅可明等[34]研究了不同溶劑萃取金線蓮揮發(fā)油的化學(xué)成分差異。在正乙烷萃取的揮發(fā)油中分離出了35種成分,鑒定出32種組分,占揮發(fā)油總量的95.71%,乙醚萃取的揮發(fā)油中分離出40種成分,鑒定出31種組分,占揮發(fā)油總量的90.86%。主要成分為亞油酸、棕櫚酸和亞油酸甲酯等。蔡金艷等[35]研究發(fā)現(xiàn),金線蓮中揮發(fā)油成分以脂肪族化合物為主,占揮發(fā)油總量的95%以上。闕萬才[36]采用色譜聯(lián)用技術(shù)法,分析了福建金線蓮的揮發(fā)性成分,檢測出了78個化合物,鑒定了37個化合物,占揮發(fā)油總量的96.26%,主要成分為十六羧酸甲酯(47.98%)、棕櫚酸(20.57%)等。以上研究發(fā)現(xiàn),金線蓮揮發(fā)油中主要成分以酯類為主。

    4藥理作用

    金線蓮其全草均可入藥,素有“金草”、“烏人參”等美稱,在福建、臺灣和東南亞地區(qū)被視為珍稀名貴藥材,常作為滋補(bǔ)強(qiáng)壯品使用。近年來,金線蓮在治療高血壓、糖尿病及腫瘤等疑難病癥方面療效顯著,逐漸引起醫(yī)藥界的重視。

    4.1降血糖陳卓等[37]研究發(fā)現(xiàn),金線蓮對四氧嘧啶引起的小鼠血糖升高具有顯著的防治作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),金線蓮的降糖機(jī)制不是通過直接刺激胰島β細(xì)胞釋放胰島素而實(shí)現(xiàn)的,可能是金線蓮阻止葡萄糖在小鼠腸道內(nèi)的吸收有關(guān)。鄧燕群等[38]研究表明,金線蓮多糖具有顯著的降血糖功效,其作用機(jī)制可能與影響糖代謝酶的活性,抑制糖異生有關(guān)。余杰等[39]在金線蓮多糖抗糖尿病作用的研究中發(fā)現(xiàn),金線蓮多糖能顯著降低糖尿病小鼠的血糖,其降血糖功能可能與調(diào)節(jié)脂代謝,提高體內(nèi)抗氧化酶活性,抑制高血糖引發(fā)的氧化應(yīng)激等有關(guān)。

    4.2保肝作用黃立峰等[40]研究發(fā)現(xiàn),金線蓮水提液大鼠腹腔注射可明顯降低由四氯化碳引起的血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶的急性升高,同時能改善肝臟組織血液流變學(xué)。

    4.3抗HBV作用鄭玲等[41]研究表明,金線蓮濃度大于或等于200 mg·mL-1時,HBsAg和HaeAg表達(dá)均受抑制。隨著作用時間的延長和藥物濃度的升高抑制作用逐漸增強(qiáng)。證實(shí)金線蓮在體外有對抗HBV活性,但其抗I-IBV活性的有效成分和作用機(jī)理尚不清楚。

    4.4降血壓作用李葆華等[42-43]研實(shí)表明,金線蓮提取物對高血壓大鼠模型具有良好的降壓作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),金線蓮提取物RM對腎血管性高血壓大鼠血壓、血漿血管緊張素Ⅱ有顯著的影響。

    4.5抗腫瘤作用許丹妮等[44]研究發(fā)現(xiàn),金線蓮多糖對免疫性抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖及免疫器官有免疫作用。鐘添華等[45]在金線蓮抑制腫瘤細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn),水提物給藥前后腫瘤細(xì)胞蛋白質(zhì)組織存在顯著差異,這可能是金線蓮水提物干擾了腫瘤細(xì)胞活性從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長有關(guān)。陳焰[46]的研究也證實(shí),金線蓮揮發(fā)油對人肺癌細(xì)胞生長有抑制作用,并呈濃度依賴性。翁秀華等[47]應(yīng)用金線蓮多糖處理前列腺癌細(xì)胞,結(jié)果表明金線蓮多糖對前列腺癌細(xì)胞的增殖具有顯著抑制作用,并呈劑量和時間依賴性。

    4.6鎮(zhèn)痛、抗炎作用李鳴等[48]對野生、人工栽培、組織培養(yǎng)三種金線蓮的水提物進(jìn)行藥理研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)三種金線蓮均有明顯的鎮(zhèn)痛作用。李芹等[49]在金線蓮噴霧劑治療患兒手足口病口腔皰疹臨床觀察研究中發(fā)現(xiàn),治療組癥狀消失平均為(1.72±1.01)d;對照組癥狀消失平均為(2.45±1.36)d,顯示金線蓮噴霧劑能更好地改善患兒口腔疼痛癥狀。

    5總結(jié)及展望

    金線蓮是我國珍貴中藥材,目前對金線蓮的研究主要是組織培養(yǎng)、化學(xué)成分、藥理作用等,一定程度上解決了金線蓮資源短缺現(xiàn)狀,同時促進(jìn)了金線蓮的標(biāo)準(zhǔn)化栽培技術(shù)的發(fā)展,為金線蓮的藥物生產(chǎn)提供了原料保障。但對金線蓮的栽培技術(shù)、生藥學(xué)、臨床使用研究較少,今后可從以下幾方面開展工作:第一,對野生金線蓮資源采取措施予以保護(hù),對野生金線蓮分布地區(qū)的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測,防止濫采、濫挖,同時深入研究人工組培、栽培技術(shù),為市場的需求提供原料保障。第二,對金線蓮的生藥學(xué)進(jìn)行研究,對它的品種進(jìn)行進(jìn)一步的考證,同時也為其近源種研究提供思路,尋找和擴(kuò)大新藥源。第三,繼續(xù)做好基礎(chǔ)性研究工作,搞清楚金線蓮的化學(xué)成分分布,同時進(jìn)行藥理活性篩選,探索藥理活性物質(zhì)。第四,在藥理研究方面,深入臨床試驗(yàn)研究,多開發(fā)臨床急需產(chǎn)品。第五,其他應(yīng)用領(lǐng)域也可進(jìn)行開發(fā)研究,如保健品、飲料、觀賞植物等方面。

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    (收稿日期:2016-08-15)

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