• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    紅花木蓮組織培養(yǎng)外植體消毒方法初步研究

    2016-12-26 21:15:23高宇瓊郭春喜田鵬
    安徽農(nóng)學(xué)通報(bào) 2016年20期
    關(guān)鍵詞:組織培養(yǎng)外植體消毒劑

    高宇瓊+郭春喜+田鵬

    摘 要:該文以紅花木蓮為試驗(yàn)材料,研究了不同消毒劑、不同消毒時(shí)間及不同外植體對(duì)紅花木蓮組織培養(yǎng)外植體的消毒效果的影響。結(jié)果表明:用75%酒精浸30s后,以0.1% HgCl2消毒10min,消毒效果最好;腋芽是組織培養(yǎng)的良好材料。研究結(jié)果為紅花木蓮組培快繁提供了依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:紅花木蓮;外植體;消毒劑;組織培養(yǎng)

    中圖分類號(hào) S79 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731(2016)20-0017-03

    Study on Disinfection for the Explants of Manglietia insignis in Tissue Culture

    Gao Yuqiong et al.

    (College of Agroforestry Engineering and Planning,Tongren University,Tongren 554300,China)

    Abstract:Manglietia insignis was taken as material,the effect of different disinfectants,disinfection time and different explants on Manglietia insignis was studied. The results showed that the most optimal method of sterilization was dipping axillary bud in 75% alcobol for about 30s and then in the solution 0.1% HgCl2 for 10min;the axillary bud was the optimal explant. These results provide the basis for tissue culture and rapid propagation of Manglietia insignis.

    Key words:Manglietia insignis;Explant;Disinfectants;Tissue culture

    紅花木蓮(Manglietia insignis(wall)Blume)為木蘭科(Magnoliaceae)木蓮屬常綠闊葉喬木樹種中較原始的種類,自然分布于我國(guó)云南、廣西、貴州等地,尼泊爾、印度東北部、緬甸北部也有零星分布。紅花木蓮樹干通直,樹態(tài)優(yōu)美,葉形秀麗,花大呈紅色,是優(yōu)良的城市園林綠化樹種[1];其生長(zhǎng)迅速,木材紋理通直,結(jié)構(gòu)細(xì)密,有光澤、香味,心材耐腐,不翹不裂,加工容易,也是優(yōu)良的裝飾用材和膠合板材樹種。但是,由于其分布零星、數(shù)量較少,且不斷被砍伐,目前遭遇了瀕臨滅絕的境地,被列為國(guó)家三級(jí)保護(hù)植物[2-3]。組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為保護(hù)和繁殖珍貴樹種的有效措施之一,而外植體的消毒是組織培養(yǎng)成功的前提。本文就紅花木蓮組織培養(yǎng)中的外植體選擇和消毒進(jìn)行了研究,為紅花木蓮組培提供無菌材料,并為紅花木蓮組培快繁技術(shù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)材料取自貴州省銅仁市梵凈山自然保護(hù)區(qū)。選取生長(zhǎng)旺盛、健壯、無病害的成年紅花木蓮植株實(shí)生苗植株,取腋芽作為外植體進(jìn)行消毒試驗(yàn)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 外植體的處理 將采集的外植體用流水沖10min,用洗衣粉浸泡3~4min,漂洗數(shù)次,再用流水沖洗30min。

    1.2.2 不同消毒劑及消毒濃度試驗(yàn) 在超凈工作臺(tái)上,先用75%的酒精浸泡外植體30s,用無菌水沖洗1次,轉(zhuǎn)入消毒劑中消毒,然后按照下面處理方式對(duì)外植體進(jìn)行消毒試驗(yàn),以不同濃度的消毒劑設(shè)計(jì)以下6種處理:(1)0.1%HgCl2消毒劑浸泡8min;(2)0.2%HgCl2消毒劑浸泡8min;(3)3%NaClO消毒劑浸泡8min;(4)4%NaClO消毒劑浸泡8min;(5)9%Ca(ClO)2消毒劑浸泡8min;(6)10%Ca(ClO)2消毒劑浸泡8min。處理后,用無菌水沖洗4~5次,濾紙吸凈外植體材料表面多余水分,然后接到啟動(dòng)培養(yǎng)基上。每處理接種30瓶,每瓶接種1個(gè)腋芽,試驗(yàn)重復(fù)3次,25d后分別觀察并統(tǒng)計(jì)污染率、殺傷率、存活率。

    1.2.3 不同消毒時(shí)間試驗(yàn) 以上步試驗(yàn)選出的最宜濃度的消毒劑按照以下時(shí)間進(jìn)行消毒處理,消毒時(shí)間分別為2min、4min、6min、8min、10min、12min。每處理接種30瓶,每瓶接種1個(gè)腋芽,試驗(yàn)重復(fù)3次,25d后分別觀察并統(tǒng)計(jì)污染率、殺傷率、存活率。

    1.2.4 不同外植體消毒試驗(yàn) 分別將紅花木蓮的嫩葉片、腋芽、帶芽的莖段、去皮種子經(jīng)0.1%HgCl2消毒8min后,用無菌水沖洗4~5次,濾紙吸凈外植體材料表面多余水分,將葉片切成1~2cm2的塊狀、帶芽莖段切成2~3cm的段狀,然后接到啟動(dòng)培養(yǎng)基上。每種外植體接種30瓶,每瓶接種1個(gè),試驗(yàn)重復(fù)3次,25d后分別觀察并統(tǒng)計(jì)污染率、殺傷率、存活率。

    1.3 培養(yǎng)條件 接種培養(yǎng)基為:MS+6-BA 1.5mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+3%蔗糖+0.7%瓊脂的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,培養(yǎng)基滅菌前用1moL·L-1 NaOH將pH調(diào)至5.6~6.0。培養(yǎng)基于121℃、1.1kg/cm2條件下滅菌20min,自然冷卻凝固后使用。培養(yǎng)溫度(25±2)℃,光照強(qiáng)度1 000~2 000Lx,光照時(shí)間12h/d。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 采用Microsoft Excel統(tǒng)計(jì)污染率、殺傷率、存活率。按照下列公式統(tǒng)計(jì)污染率及存活率:

    污染率(%)=污染數(shù)/接種總數(shù)×100;

    殺傷率(%)=受殺傷數(shù)/接種總數(shù)×100;

    存活率(%)=(接種總數(shù)-污染數(shù)-受殺傷數(shù))/接種的莖段總數(shù)×100

    2 結(jié)果與分析

    2.1 消毒劑對(duì)外植體消毒效果的影響 不同濃度的消毒劑對(duì)紅花木蓮?fù)庵搀w消毒效果的影響,結(jié)果見表1。由表1可知:HgCl2比NaClO、Ca(ClO)2的存活率都高,污染率也較其他消毒劑低,經(jīng)HgCl2處理后的紅花木蓮腋芽外植體,存活數(shù)相對(duì)高、污染程度小,但是殺傷數(shù)比其他消毒劑大。不同濃度的NaClO、Ca(ClO)2的存活率相差不大,但污染率相差較大。不同濃度的相同消毒劑相比,均是高濃度的消毒效果比低濃度的好,但殺傷率也隨之增大??傮w來說,3種消毒劑之間HgCl2與NaClO、Ca(ClO)2存在顯著差異,消毒效果為HgCl2>Ca(ClO)2>NaClO。在HgCl2兩個(gè)濃度處理時(shí),隨著濃度的增大,污染率隨之下降,但殺傷率也提高,存活率反而降低。因此,綜合考慮污染率、殺傷率及存活率三者因素,本試驗(yàn)最適宜的消毒處理為處理1即0.1%HgCl2消毒8min的外植體存活率最高,達(dá)到81.1%。

    2.2 消毒時(shí)間對(duì)外植體消毒效果的影響 以0.1% HgCl2為消毒劑,進(jìn)行不同消毒時(shí)間對(duì)外植體效果的影響,結(jié)果見表2。由表2可知,隨著消毒時(shí)間的增加,紅花木蓮腋芽外植體的存活率越來越高,在10min時(shí)紅花木蓮腋芽的成活率最高,達(dá)到84.4%。消毒時(shí)間太短,外植體的殺傷度較輕但其污染個(gè)數(shù)較多,而消毒時(shí)間太長(zhǎng),外植體的殺傷度較重但其污染個(gè)數(shù)較少。因此選用污染個(gè)數(shù)較少,殺傷率中等的,成活率相對(duì)較高時(shí)間,作為紅花木蓮腋芽外植體消毒時(shí)間的適宜時(shí)間。

    2.3 不同外植體對(duì)消毒效果的影響 以0.1% HgCl2消毒時(shí)間10min為消毒處理,用紅花木蓮當(dāng)年生嫩葉片、腋芽、帶芽的莖段、去皮種子進(jìn)行不同外植體消毒效果試驗(yàn),結(jié)果見表3。由表3可知,腋芽作為外植體時(shí),存活率達(dá)到84.4%且能夠發(fā)生分化,其次是去皮種子,而嫩葉片和帶芽的莖段相差不大。這可能是由于腋芽處于生長(zhǎng)旺盛時(shí)期,腋芽?jī)?nèi)部帶菌較少,因而消毒效果比較好。帶芽的莖段存活率低的原因可能是莖段帶的細(xì)菌較多,以致消毒較難。去皮種子、嫩葉殺傷率較大,可能是消毒時(shí)間太長(zhǎng),HgCl2對(duì)幼嫩組織殺傷力較大。對(duì)于植物幼嫩組織可適當(dāng)減少消毒時(shí)間。

    3 結(jié)論與討論

    木本植物組織培養(yǎng)中的困難之一是獲得無菌材料[4]。因此,外植體消毒成功與否,不僅關(guān)系到能否獲得無菌材料,更關(guān)系到紅花木蓮組培快繁技術(shù)的獲得。研究表明:不同的消毒劑對(duì)外植體消毒效果有不同的影響。本試驗(yàn)中,用腋芽作外植體時(shí),HgCl2的消毒效果優(yōu)于NaClO、

    Ca(ClO)2,獲得的無菌材料最多。這與蛇足石杉[5]、青榨槭[6]、四倍體刺槐[7]、大榕[8]、金銀花[9]、麻櫟[10]等植物外植體消毒研究結(jié)果一致。這是因?yàn)镠g2+可與帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)相結(jié)合,使細(xì)菌蛋白變性,酶失活[11]。

    不同的消毒時(shí)間對(duì)于外植體消毒效果有明顯影響,隨著消毒時(shí)間的延長(zhǎng),污染率降低,但殺傷率升高,導(dǎo)致外植體存活率降低。因此,不能靠延長(zhǎng)滅菌時(shí)間來改善消毒效果,最佳消毒時(shí)間確立應(yīng)在綜合考慮污染率、殺傷率基礎(chǔ)上,以外植體存活率為最終判定依據(jù)[12-13]。本試驗(yàn)得到的最適宜的消毒時(shí)間為10min,此時(shí)達(dá)到了較好的消毒效果,

    消毒劑對(duì)不同外植體的作用也不相同,這可能與外植體材料的組織部位、植株年齡、取材季節(jié)以及植株的生理狀態(tài)、質(zhì)量有關(guān)系。通過試驗(yàn)結(jié)果得出,腋芽是紅花木蓮?fù)庵搀w消毒最好的外植體,可能是腋芽所帶的污染相對(duì)較少,且腋芽處于萌動(dòng)時(shí)期,易分化,存活率高。

    參考文獻(xiàn)

    [1]黎明,馬煥成,李福秀.紅花木蓮苗期光合特性研究[J].西部林業(yè)科學(xué),2004,33(2):42-45.

    [2]傅立國(guó),羅仲春,陳湘健.中國(guó)珍稀瀕危植物[M].上海:上海教育出版社;1989.

    [3]魯元學(xué),武全安,龔洵,等.紅花木蓮有性繁殖和生態(tài)生物學(xué)特性的研究[J].廣西植物,1998,19(3):267-271.

    [4]陳正華.木本植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用[J].北京:高等教育出版社,1986.

    [5]楊雪飛,羅建平,王瑛.蛇足石杉莖尖滅菌方法與組織培養(yǎng)的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(12):4947-4948,5025.

    [6]賴玉潔,路丙社,陳書明,等.青榨槭外植體消毒方法初步研究[J].河北林果研究,2007,22(2):143-145,158.

    [7]郭軍戰(zhàn),舒慶艷,王麗玲,等.四倍體刺槐組織培養(yǎng)中的外植體選擇和消毒研究[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào),2002,17(1):15-18.

    [8]張金鋒,徐美玲,葛勝娟,等.大榕組織培養(yǎng)不同滅菌方法的初步研究[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,(3):501-502.

    [9]文明玲,樂正碧,徐茜,等.金銀花組織培養(yǎng)外植體滅菌方法探索[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,(2):50-51.

    [10]唐羅忠,趙丹,諸葛強(qiáng),等.麻櫟組織培養(yǎng)外植體選擇與滅菌方法[J].江蘇林業(yè)科技,2010,37(5):22-25.

    [11]馮金玲,陳輝,楊志堅(jiān),等.錐栗組織培養(yǎng)外植體消毒和選擇[J].福建林學(xué)院學(xué)報(bào),2006,26(1):22-25.

    [12]吳林森,馮福娟,張宇,等.西蘭花離體快繁外植體消毒技術(shù)初探[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù),2006,26(3):96-98.

    [13]劉進(jìn)平,吳繁花.木薯外植體表面消毒和啟動(dòng)培養(yǎng)的研究[J].廣西熱帶農(nóng)業(yè),2004,94(5):1-3. (責(zé)編:張宏民)

    猜你喜歡
    組織培養(yǎng)外植體消毒劑
    漲瘋了!碘漲50%,三氯漲超30%,溶劑漲超250%……消毒劑要漲價(jià)了
    含氯消毒劑,別僅憑名字辨別
    不同激素配比對(duì)紫花苜蓿幼苗4種外植體愈傷組織誘導(dǎo)效果的影響
    正確使用消毒劑
    瀕危植物單性木蘭外植體啟動(dòng)培養(yǎng)
    解決蘋果矮化砧M9外植體褐化現(xiàn)象的研究
    東方百合“甜夢(mèng)”花器官組織培養(yǎng)再生植株研究
    瀕危植物南川木菠蘿組織培養(yǎng)技術(shù)研究
    天然植物激素對(duì)鐵皮石斛組培苗誘導(dǎo)芽分化的影響
    科技視界(2016年22期)2016-10-18 14:55:15
    迷你觀賞植物的組織培養(yǎng)與銷售
    亚洲av免费在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 日韩三级伦理在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 天堂俺去俺来也www色官网| 各种免费的搞黄视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久99热6这里只有精品| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 少妇人妻久久综合中文| 在线观看免费高清a一片| 日本黄色片子视频| 中文资源天堂在线| 国产黄色免费在线视频| 亚洲国产精品专区欧美| 大片电影免费在线观看免费| 舔av片在线| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品女同一区二区软件| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 成人无遮挡网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品嫩草影院av在线观看| 最近手机中文字幕大全| 毛片女人毛片| 亚洲精品日本国产第一区| 91久久精品国产一区二区成人| 欧美激情在线99| 午夜福利视频精品| 高清欧美精品videossex| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久国内精品自在自线图片| 成年人午夜在线观看视频| 在线免费十八禁| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费av不卡在线播放| 亚洲熟女精品中文字幕| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 精品熟女少妇av免费看| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久韩国三级中文字幕| videos熟女内射| 精品酒店卫生间| 免费观看a级毛片全部| 午夜免费鲁丝| 国产亚洲一区二区精品| 看免费成人av毛片| 亚洲综合色惰| 久久午夜福利片| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲国产日韩一区二区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 色播亚洲综合网| 久久久久久久大尺度免费视频| 内射极品少妇av片p| 亚洲精品,欧美精品| 久久ye,这里只有精品| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲成人一二三区av| 一级a做视频免费观看| 一级a做视频免费观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 最后的刺客免费高清国语| 成年免费大片在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 啦啦啦啦在线视频资源| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产精品99久久久久久久久| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 我的老师免费观看完整版| 只有这里有精品99| 久久久久久久久大av| 国产精品爽爽va在线观看网站| 色播亚洲综合网| 久久久色成人| 成年av动漫网址| av专区在线播放| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 老司机影院毛片| 在线a可以看的网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| av专区在线播放| 国产 精品1| 国产亚洲精品久久久com| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲av成人精品一二三区| 免费看a级黄色片| www.av在线官网国产| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久久久久久亚洲中文字幕| 内地一区二区视频在线| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 欧美激情久久久久久爽电影| 青春草国产在线视频| 国产成人福利小说| 国产视频首页在线观看| 久久精品综合一区二区三区| 99久久精品热视频| 国产成人freesex在线| 亚洲精品国产av成人精品| 男男h啪啪无遮挡| 日韩成人av中文字幕在线观看| 97在线视频观看| 日日撸夜夜添| 国产 一区精品| 毛片女人毛片| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲国产高清在线一区二区三| 看免费成人av毛片| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产久久久一区二区三区| 国产精品伦人一区二区| 亚洲精品456在线播放app| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品一区二区性色av| 日本一二三区视频观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 免费av不卡在线播放| 极品少妇高潮喷水抽搐| 精品一区二区三区视频在线| 国产亚洲最大av| 成人黄色视频免费在线看| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久久精品免费免费高清| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产在线一区二区三区精| h日本视频在线播放| 视频区图区小说| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 我的老师免费观看完整版| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 在线 av 中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 日韩中字成人| 国产在视频线精品| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲精品视频女| 搡老乐熟女国产| 国产精品一二三区在线看| 91狼人影院| 亚洲精品成人久久久久久| 丝袜美腿在线中文| 久久久久久久亚洲中文字幕| 一区二区三区精品91| 校园人妻丝袜中文字幕| 乱码一卡2卡4卡精品| 高清午夜精品一区二区三区| 成人特级av手机在线观看| 久久人人爽人人片av| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 一个人看视频在线观看www免费| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美成人a在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 少妇丰满av| 午夜激情久久久久久久| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲精品456在线播放app| 在线观看一区二区三区激情| 久久鲁丝午夜福利片| 日本免费在线观看一区| 成人国产麻豆网| 夫妻午夜视频| 99久国产av精品国产电影| 成人鲁丝片一二三区免费| 免费黄频网站在线观看国产| 久久女婷五月综合色啪小说 | 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 春色校园在线视频观看| 99久久人妻综合| 日韩欧美一区视频在线观看 | 内地一区二区视频在线| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 夫妻午夜视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 麻豆乱淫一区二区| 久热这里只有精品99| 在线天堂最新版资源| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 如何舔出高潮| 日韩一区二区视频免费看| 国产熟女欧美一区二区| 欧美日韩视频精品一区| 日韩强制内射视频| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产在线男女| 三级经典国产精品| 亚洲欧洲日产国产| 国产91av在线免费观看| 中文天堂在线官网| 亚洲综合精品二区| 高清视频免费观看一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 日韩一区二区三区影片| 我的老师免费观看完整版| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产综合懂色| 最新中文字幕久久久久| 国产精品国产三级国产专区5o| av天堂中文字幕网| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久久a久久爽久久v久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 成人无遮挡网站| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 黄色视频在线播放观看不卡| 看免费成人av毛片| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲天堂国产精品一区在线| 少妇丰满av| 水蜜桃什么品种好| 亚洲电影在线观看av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲精品视频女| 能在线免费看毛片的网站| 中文资源天堂在线| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲在线观看片| 国产精品不卡视频一区二区| 一级毛片 在线播放| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲成色77777| 激情五月婷婷亚洲| 国产成人精品一,二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产老妇女一区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久国产乱子免费精品| 成年人午夜在线观看视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲国产欧美人成| 真实男女啪啪啪动态图| 国产伦精品一区二区三区视频9| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲性久久影院| 亚洲av福利一区| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲精品视频女| 最近手机中文字幕大全| 国产男女超爽视频在线观看| av在线播放精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 另类亚洲欧美激情| 黄片wwwwww| 最后的刺客免费高清国语| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美精品国产亚洲| 国产 精品1| 国产色婷婷99| 亚洲精品自拍成人| 超碰av人人做人人爽久久| 99热全是精品| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲精品456在线播放app| 久久久久国产网址| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 天天躁日日操中文字幕| 日韩电影二区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲精品456在线播放app| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲av成人精品一二三区| 大片免费播放器 马上看| 欧美97在线视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 看黄色毛片网站| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲av一区综合| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 网址你懂的国产日韩在线| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲真实伦在线观看| av国产精品久久久久影院| 日日啪夜夜爽| 1000部很黄的大片| 搡老乐熟女国产| 国产91av在线免费观看| 国产午夜福利久久久久久| 激情五月婷婷亚洲| 性色av一级| 欧美最新免费一区二区三区| 国产成人精品婷婷| 青春草国产在线视频| h日本视频在线播放| 国产av不卡久久| 极品教师在线视频| av在线亚洲专区| 久久久久网色| 可以在线观看毛片的网站| av在线观看视频网站免费| 久久午夜福利片| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 少妇人妻精品综合一区二区| 内地一区二区视频在线| 国产熟女欧美一区二区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产精品无大码| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费黄频网站在线观看国产| 在线观看av片永久免费下载| 国产高清有码在线观看视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 日韩人妻高清精品专区| 国产高清国产精品国产三级 | 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲激情五月婷婷啪啪| av在线播放精品| 精品视频人人做人人爽| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲精品日本国产第一区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| av免费观看日本| 精品一区二区三区视频在线| 伦理电影大哥的女人| 久久久久久久久大av| 亚洲不卡免费看| 少妇被粗大猛烈的视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 午夜福利高清视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产永久视频网站| 亚洲人与动物交配视频| 国产亚洲5aaaaa淫片| 少妇 在线观看| 国产乱人视频| 久久人人爽人人片av| 日本免费在线观看一区| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲色图综合在线观看| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲不卡免费看| 久久久午夜欧美精品| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产一区二区三区综合在线观看 | 国产 一区 欧美 日韩| 日本免费在线观看一区| 一级毛片电影观看| 特大巨黑吊av在线直播| 永久免费av网站大全| 黄色怎么调成土黄色| 天堂网av新在线| 国产一区二区三区av在线| 性色avwww在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 中国三级夫妇交换| 日日啪夜夜撸| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 另类亚洲欧美激情| 日韩制服骚丝袜av| 青春草国产在线视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产爽快片一区二区三区| 日韩人妻高清精品专区| 国产美女午夜福利| 日本与韩国留学比较| 女人被狂操c到高潮| 亚洲欧美精品专区久久| 成人亚洲精品av一区二区| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲av不卡在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 18禁动态无遮挡网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 欧美bdsm另类| 国产大屁股一区二区在线视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 精品视频人人做人人爽| 久久久精品欧美日韩精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 高清av免费在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 少妇的逼好多水| 亚洲天堂国产精品一区在线| 少妇丰满av| 午夜福利高清视频| 激情 狠狠 欧美| 国产精品久久久久久精品古装| 寂寞人妻少妇视频99o| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲精品一区蜜桃| 午夜日本视频在线| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲丝袜综合中文字幕| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国内精品宾馆在线| 国产一区二区三区综合在线观看 | 久久久欧美国产精品| 99久久精品热视频| 在线免费十八禁| 一个人看的www免费观看视频| 在线观看国产h片| 一级毛片aaaaaa免费看小| 七月丁香在线播放| 晚上一个人看的免费电影| freevideosex欧美| 在线 av 中文字幕| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美日本视频| 亚洲内射少妇av| 涩涩av久久男人的天堂| 搡女人真爽免费视频火全软件| 涩涩av久久男人的天堂| 精品久久国产蜜桃| 亚洲无线观看免费| 91久久精品国产一区二区成人| 国产老妇女一区| 在线 av 中文字幕| 日本与韩国留学比较| 久久久久久久国产电影| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲人成网站在线观看播放| 综合色丁香网| 国产黄片美女视频| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲欧美精品自产自拍| 少妇 在线观看| 国产精品福利在线免费观看| 日本三级黄在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 精品一区二区三卡| 国产精品三级大全| 尾随美女入室| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产精品久久久久久久电影| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲精品自拍成人| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 中国三级夫妇交换| 18+在线观看网站| 黄色怎么调成土黄色| 成人免费观看视频高清| 一级毛片我不卡| 熟女电影av网| 国产美女午夜福利| 亚洲成人中文字幕在线播放| 在线观看人妻少妇| 国产视频首页在线观看| 亚洲最大成人中文| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 永久免费av网站大全| 成年免费大片在线观看| 美女国产视频在线观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 久久99热这里只频精品6学生| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 高清欧美精品videossex| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 美女视频免费永久观看网站| 一本色道久久久久久精品综合| 日韩一区二区视频免费看| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲国产高清在线一区二区三| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 少妇的逼好多水| 高清视频免费观看一区二区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 午夜福利高清视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 97超视频在线观看视频| 波多野结衣巨乳人妻| 青青草视频在线视频观看| 国产精品.久久久| 亚洲国产最新在线播放| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲人成网站在线播| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 欧美+日韩+精品| videossex国产| 日韩av不卡免费在线播放| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 午夜视频国产福利| 综合色丁香网| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久久久性生活片| 久久99热这里只有精品18| 欧美潮喷喷水| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 全区人妻精品视频| 国产精品一二三区在线看| 少妇人妻 视频| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产高潮美女av| 亚洲国产成人一精品久久久| 2018国产大陆天天弄谢| 国产成人精品福利久久| 国产人妻一区二区三区在| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产日韩欧美在线精品| 精品少妇久久久久久888优播| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美3d第一页| xxx大片免费视频| 搞女人的毛片| 精品久久久精品久久久| 日日啪夜夜撸| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产精品精品国产色婷婷| 插逼视频在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品av视频在线免费观看| 久久久精品免费免费高清| 毛片一级片免费看久久久久| 国产永久视频网站| 久久精品国产亚洲av天美| 91久久精品国产一区二区三区| h日本视频在线播放| 少妇人妻精品综合一区二区| 少妇人妻久久综合中文| 97超碰精品成人国产| 丰满少妇做爰视频| 中文欧美无线码| 丝袜喷水一区| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产成人精品婷婷| 国产精品.久久久| 51国产日韩欧美| 草草在线视频免费看| 免费黄网站久久成人精品| 一边亲一边摸免费视频| 网址你懂的国产日韩在线| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲av.av天堂| 日韩成人伦理影院| 日本欧美国产在线视频| 五月伊人婷婷丁香| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 国产成人精品一,二区| av在线播放精品| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| av线在线观看网站| 欧美一区二区亚洲| 制服丝袜香蕉在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美国产精品一级二级三级 | 在线精品无人区一区二区三 | 亚洲人成网站在线观看播放| 一区二区三区乱码不卡18| 国产一区二区三区av在线| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| av卡一久久| 久久99精品国语久久久| 在线观看一区二区三区激情| 欧美zozozo另类| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 新久久久久国产一级毛片| 午夜免费鲁丝| 久久热精品热| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美精品人与动牲交sv欧美| av线在线观看网站| 国产综合精华液| 久久久久久九九精品二区国产| 精品人妻一区二区三区麻豆| 精品少妇久久久久久888优播| 日韩人妻高清精品专区| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 日韩一本色道免费dvd| 精品人妻一区二区三区麻豆| 天美传媒精品一区二区| 男的添女的下面高潮视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 在线观看美女被高潮喷水网站| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 新久久久久国产一级毛片| 免费观看性生交大片5| 国产永久视频网站| 真实男女啪啪啪动态图| 丝袜美腿在线中文| 只有这里有精品99| 成年女人在线观看亚洲视频 | 蜜臀久久99精品久久宅男|