復(fù)方坦索羅辛非那雄胺膠囊的含量測(cè)定方法研究

哈藥集團(tuán)制藥六廠，黑龍江哈爾濱 150056

鹽酸坦索羅辛是一種強(qiáng)效和高選擇性的α1-腎上腺素受體抑制劑，它作用于血管平滑肌而不影響血壓，松弛尿道緊張狀態(tài)，使排尿障礙得到改善，臨床上可用于治療良性前列腺增生和前列腺肥大引起的排尿障礙[1]。非那雄胺為良性前列腺增生治療藥物，具有抑制5α-還原酶而阻斷雙氫睪酮（DHT）的合成作用[2]，臨床上用于治療老年男性前列腺炎和男性脫發(fā)[3-4]。目前，國(guó)內(nèi)外暫未有復(fù)方坦索羅辛非那雄胺制劑上市。

1 儀器與試藥

濕法混合制粒機(jī)；GKF-900型膠囊充填機(jī)；ZES-8G型智能溶出試驗(yàn)儀；Waters 515型高效液相色譜儀。鹽酸坦索羅辛；非那雄胺。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽酸坦索羅辛含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱：KromasilC18（250nm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.2mol.L-1磷酸二氫鉀-0.2mol.L-1磷酸鹽溶液=5:7:7（v/v），流速為1mL.min-1，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為20μl，檢測(cè)波長(zhǎng)225nm。在該色譜條件下，供試品中鹽酸坦索羅辛峰能達(dá)到基線分離，理論塔板數(shù)按鹽酸坦索羅辛峰計(jì)應(yīng)不低于2000。

2.1.2 溶液制備

2.1.2.1 對(duì)照溶液精密稱取鹽酸坦索羅辛對(duì)照品25.12mg，加流動(dòng)相溶解，并定容至25mL量瓶中，制成濃度為 1.0048mg·mL-1的鹽酸坦索羅辛對(duì)照品貯備液。精密量取5mL貯備液置10mL量瓶中，即得0.5024mg.mL-1的對(duì)照品溶液。

2.1.2.2 供試品溶液取本品20粒的內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸坦索羅辛25mg），置于50mL量瓶中，加流動(dòng)相充分溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.1.3 專屬性試驗(yàn)取空白溶劑和空白輔料，依法測(cè)定，結(jié)果空白溶劑對(duì)主峰和降解產(chǎn)物測(cè)定無(wú)干擾，表明此方法專屬性強(qiáng)。

2.1.4 線性關(guān)系考察精密稱取對(duì)照品貯備液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、7.0mL，分別置于10mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀。結(jié)果鹽酸坦索羅辛50.24～351.68μg·mL-1濃度范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999）。

2.1.5 精密度試驗(yàn)精密稱取對(duì)照品貯備液適量，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果鹽酸坦索羅辛的峰面積RSD=1.2%（n=6），表明該方法的精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)取“2.1.2”項(xiàng)下供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、16、24h進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果鹽酸坦索羅辛峰面積RSD=1.3%（n=8），表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.7 重復(fù)性試驗(yàn)取同一批供試品 6份，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。結(jié)果鹽酸坦索羅辛的含量平均值為99.23%，RSD=1.2%。

2.1.8 加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的同一批樣品細(xì)粉（相當(dāng)于鹽酸坦索羅辛5mg）6份，置于20mL量瓶中。再精密量取鹽酸坦索羅辛對(duì)照溶液（1.0048mg·mL-1）5mL加至上述20mL量瓶中，加甲醇適量，超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液1mL置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得供試品溶液。依法測(cè)定，結(jié)果平均回收率99.1%，RSD=0.48%（n=6）。

2.1.9 含量測(cè)定按“2.1.2”項(xiàng)下供品溶液的制備方法制備三批樣品的供試品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定鹽酸坦索羅辛峰面積，并計(jì)算其含量。結(jié)果三批樣品的含量分別為99.8%、99.7%、99.8%，平均含量為99.77%。

2.2 非那雄胺含量測(cè)定（高效液相色譜法）

2.2.1 非那雄胺色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱：WatersC18（250mm×4.6mm，5.0μm），流動(dòng)相為甲醇-水（75:25），流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm，理論塔板數(shù)按非那雄胺峰計(jì)算大于1500。

2.2.2 溶液制備

2.2.2.1 對(duì)照溶液精密稱取非那雄胺對(duì)照品50mg，置100mL的量瓶中加流動(dòng)相70mL，超聲5min使非那雄胺溶解。加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，備用。

2.2.2.2 供試品溶液取本品20粒的內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于非那雄胺5mg），置于50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲5min使溶解并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，備用。

2.2.3 線性關(guān)系考察精密稱取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml對(duì)照品溶液分別置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，配成0.04、0.08、0.12、0.16、0.20mg·mL-1的溶液。結(jié)果非那雄胺在0.04～0.20mg·mL-1濃度范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系（r=0.9996）。

2.2.4 精密度試驗(yàn)稱取對(duì)照品溶液適量，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果峰面積RSD=0.61%，結(jié)果表明該方法的精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液分別于0，2，4，6，8，12，24h進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果RSD=0.68%測(cè)定溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6 回收率試驗(yàn)精密稱取非那雄胺對(duì)照品5mg六份，分別置于50mL量瓶中，再分別按處方比例加入相應(yīng)的空白輔料，加流動(dòng)相超聲溶解并稀釋至刻度，濾過(guò)。精密量取濾液2mL置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定，結(jié)果平均回收率（n=6）為99.24%，RSD=0.38%。

2.2.7 含量測(cè)定依法測(cè)定本品三批，按峰面積以外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為99.7%、99.6%、100.1%，平均含量為99.8%。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方坦索羅辛非那雄胺膠囊中主藥含量采用高效液相色譜法外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定，方法準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，雜質(zhì)不干擾主藥的測(cè)定，是可以控制產(chǎn)品質(zhì)量的。

[1]劉艷紅,徐文奎,馬德保,等.鹽酸坦洛新胃漂浮緩釋小丸的制備與體外釋放[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2009,26(11):852-856.

[2]Mconnell JD,Wrlson JD,George FW,et al.Prostate volume predicts outcome of treatment of benign prostatic hyperplasia with finasteride:Meta–analysis of randomized clinical trisls[J].Urology,1996,48(3):398.

[3]Beisland HO,Brekkan E,et al.Scandinavian clinical study of finateride in the treatment of begign prostatic hyperplasia[J].Ear Urol,1992,22(4):271.

[4]Stoner E.The Finasteride Study Group.The clinical effects of 5α-reductase inhibitor,finasteride,on begign prostatic hyperplasia[J].J Urol,1991,147(5):1298.