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    天丹通絡(luò)膠囊中總黃酮的含量測定

    2015-11-03 05:59:08江蘇省蘇北人民醫(yī)院225001盧善亮
    首都食品與醫(yī)藥 2015年18期
    關(guān)鍵詞:乙醇溶液錐形瓶量瓶

    江蘇省蘇北人民醫(yī)院(225001)盧善亮

    天丹通絡(luò)膠囊是用于腦血管疾病的一種中成藥,具有活血通絡(luò),熄風(fēng)化痰的功效。藥理學(xué)試驗結(jié)果顯示,天丹通絡(luò)膠囊具有抑制血液凝血系統(tǒng)、提高血液纖活性、抑制血栓形成、促進(jìn)血栓溶解、抗腦缺血作用,主要用于中風(fēng)中經(jīng)絡(luò),風(fēng)痰淤血痹阻脈絡(luò)證,癥見半身不遂、偏身麻木、口眼歪斜、語言蹇塞;腦梗死急性期、恢復(fù)早期見上述證候者。天丹通絡(luò)膠囊主要含川芎、槐花、豨薟草、丹參、水蛭、天麻、石菖蒲、人工牛黃、黃芪、牛膝等10味中草藥。其中主味藥槐花的主要成分為黃酮,本文采用分光光度法測定天丹通絡(luò)膠囊中總黃酮的含量,方法操作簡便,快速可靠,完全可以用于該制劑的質(zhì)量控制。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器 Cary50型紫外可見分光光度計(美國瓦里安中國有限公司);JA2003電子天平(上海精科天平廠);KQ-400KDB型高功率數(shù)控超聲器(昆山市超聲儀器有限公司)。

    1.2 試藥 蘆丁對照品(廠家提供,批號20090508),天丹通絡(luò)膠囊(山東鳳凰制藥,批號0912221,1003205,1005209);其余試劑均為分析純。

    附表1 提取方法考察(The test of extraction way)

    附表2 提取時間的考察(The test of extraction time)

    附表3 加樣回收率實驗(The determination of recovery rate)

    附表4 樣品測定(The assay of the samples)

    2 實驗方法與結(jié)果

    2.1 對照品溶液的制備[1]精密稱取105℃干燥至恒重的蘆丁對照品100mg,置50mL量瓶中,加甲醇30mL,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,搖勻,得蘆丁對照品溶液。

    2.2 線性關(guān)系的考察 精密量取蘆丁對照品溶液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL與6.0mL,分別置25mL量瓶中,各加水6mL,加5%亞硝酸鈉溶液1mL,使混勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁溶液1mL,搖勻,放置6分鐘,加氫氧化鈉試液10mL,再加水至刻度,搖勻,放置15分鐘,在500nm的波長處測定吸收度。以吸收度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),得回歸方程為y=0.011x-0.0194 (r=0.9999),表明在8~48μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

    2.3 提取方法的考察[2]

    2.3.1 取膠囊內(nèi)容物1.5g,于60℃干燥1小時,精密稱定,置索氏提取器中,加乙醚120ml,加熱回流至提取液無色,放冷,棄去乙醚液。再加甲醇9 0 m L,加熱回流至提取液無色,移置100mL量瓶中,用甲醇少量洗滌容器,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻[1]。精密量取10mL,置2 5 m L 量瓶中,加水至刻度,搖勻即得。精密量取1mL置2 5 m L 量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。

    2.3.2 取膠囊內(nèi)容物1g,于60℃干燥1小時,精密稱定,置于50mL錐形瓶中,分別加入60%,70%,80%的乙醇溶液,超聲波振蕩1小時后,取續(xù)濾液10ml,置100mL量瓶中精密量取3mL置25mL量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。結(jié)果見附表1。結(jié)果為70%的乙醇超聲波振蕩提取的方法提取率最高。

    2.4 提取時間的考察 取膠囊內(nèi)容物1g,于60℃干燥1小時,精密稱定,置于50mL錐形瓶中,分別加入50mL70%的乙醇溶液,分別超聲波振蕩10min、20min、30min、45min、1h、2h、3h小時,用水補足,過濾,取續(xù)濾液10ml,置100ml量瓶中。精密量取3ml置25ml量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。結(jié)果見附表2。由附表2可知,超聲波振蕩1h提取率最高。

    2.5 重復(fù)性實驗 取本品粗粉5份,每份約1g,精密稱定,置于50ml錐形瓶中,分別加入50mL 70%的乙醇溶液,分別超聲波振蕩1h,用水補足,過濾,取續(xù)濾液10ml,置100ml量瓶中。精密量取3ml置25ml量瓶中,按2.1.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。RSD=0.4%(n=5),表明該方法重復(fù)性良好。

    2.6 穩(wěn)定性實驗 取樣品適量,精密稱定,置于50mL錐形瓶中,加入70%的乙醇溶液,超聲波振蕩1h,取續(xù)濾液10mL,置100mL量瓶中,精密量取3mL置25mL量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。每隔1h測定一次,連續(xù)測定5h,RSD=0.8%,表明樣品溶液在5h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.7 加樣回收率實驗 精密稱取天丹通絡(luò)膠囊膠囊內(nèi)容物約0.8g(6份),分別加入對照品約0.10g,于50mL錐形瓶中,加入70%的乙醇溶液,超聲波振蕩1h,取續(xù)濾液10mL,置100mL量瓶中,精密量取3mL置25mL量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。結(jié)果見附表3。

    2.8 樣品測定 精密稱取天丹通絡(luò)膠囊內(nèi)容物約1.0g(3份,3個批號),置于50ml錐形瓶中,加入70%的乙醇溶液,超聲波振蕩1h,取續(xù)濾液10ml,置100ml量瓶中精密量取3ml,置25ml量瓶中,按2.2項下方法,在500nm的波長處測定吸收度。按標(biāo)準(zhǔn)曲線計算總黃酮的含量,結(jié)果見附表4。

    3 討論

    3.1 天丹通絡(luò)膠囊是腦疾病患者常用藥物。目前尚未有對其進(jìn)行質(zhì)量控制的報道。本方法采用分光光度法,測其所含總黃酮的量,方法簡便易行,結(jié)果準(zhǔn)確,是對天丹通絡(luò)膠囊進(jìn)行質(zhì)控的良好的方法。

    3.2 筆者對總黃酮提取條件進(jìn)行考察,索氏提取法是藥典中所記載對槐花中異黃酮進(jìn)行提取的方法。但實驗過程中發(fā)現(xiàn),索氏提取法方法繁瑣,提取率不高,故采用超聲波提取法進(jìn)行提取,方法簡便高效。

    3.3 本文采用的硝酸鋁顯色法是藥典中所記載的對總黃酮測定的方法。該方法用于各類中藥的總黃酮測定中,準(zhǔn)確可靠。

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