麻黃-桂枝藥對對哮喘寒飲蘊肺證大鼠呼吸功能和氣道炎癥的影響及機(jī)制研究

中圖分類號R965 文獻(xiàn)標(biāo)志碼A 文章編號 1001-0408（2025）14-1717-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.14.05

ABSTRACTOBJECTIVETo investigate the efectsof Ephedra-Cinnamomumcouplet medicinalsonrespiratory functinand airwayinflammationinratswithasthmaofcold-fluidretentioninlungsyndromeanditsmechanism.METHODsSixtyWistarrats were randomly divided into blank group，model group，dexamethasone group [1mg/（kg?d）] ，and Ephedra-Cinnamomum low-， medium-，high-dose groups [0.234，0.936， 1.872g/（kg?d）] ，with 10 rats in each group.The model and treatment groups were sensitized by intraperitoneal injection of antigen solution （ovalbumin 100mg+ aluminum hydroxide 100mg ）and challenged with 1% ovalbuminnebulization，along withexposuretoacoldenvironmentandingestionofcoldwater，toestablishtheasthmamodel withcold-fluidretentioninlungsyndrome.Fromday2，ratsreceivedcorespondingdrugsornoalsalineintragastrically，oncea day，for21conseutivedays.Thegeneralbehavioralchangesieachgroupofratswerebservedduringtheexperimentalproes. Thelungfunction parameters [peak expiratoryflow（PEF），airwayresistance（Raw），functionalresidualcapacity（FRC），expiratory flow at 50% of forced vital capacity （EF50%） ！ weremeasured before modelingand after the last medication aswellasserum contentsof interleukin-6（IL-6），IL-13，tumor necrosis factor- ∝ （TNF- ∝ ）andinterferon-gamma （IFN-γ ） afterthe last medication were determined；the histopathological morphological changes in the lung tissues of rats werealso observed；mRNA expressions of IL-6，IL-3，TNF- ∝ ， IFN-γ ，thymic stromal lymphopoietin（TSLP），andTol-likereceptor4（TLR4），aswellasprotein expressionsofTSLPandTLR4were determinedinlungtisse.RESULTSComparedwith modelgroup，thelungtisse damageofrats wasrelievedsignificantly；Raw， FRC，the contents and mRNA expression levels of IL-6， IL-13 and TNF- α ，as well as the mRNA and protein expressions of TSLP andTLR4weresignificantlydecreased （Plt;0.05） ），while the contents and mRNA expressionsof PEF， EF50% and IFN-γ were significantlyincreased in thedexamethasone groupandEphedra-Cinnamomum medium-andhigh-dose groups（ 1lt;0.05） ： Moreover，onlya fewrats in thetwo groups exhibited typical symptomsof asthma.CONCLUSIONS Ephedra-Cinnamomum couplet medicials improverespiratoryfunction andameliorateairwayinflammation inasthmarats withcold-fluidretention inlung syndrome，themechanismofwhichmaybeassciatedwithinhibitingTSLP/TLR4signalingpathwayandmodulatingTh1/Th2 imbalance.

KEYWORDsEphedra-Cinnamomumcouplet medicinals；bronchial asthma；cold-fluidretentionin lung syndrome；thymic stromal lymphopoietin； Toll-like receptor 4

支氣管哮喘是多因素共同誘發(fā)的復(fù)雜異質(zhì)性疾病，發(fā)病率呈逐年攀升趨勢，其特征為氣道高反應(yīng)性，伴有慢性氣道炎癥。寒飲蘊肺證是由于機(jī)體尤其是肺部同時受到“形寒、飲冷\"的外邪刺激，出現(xiàn)機(jī)體陽虛寒盛、肺氣宣發(fā)和下降異常、水飲內(nèi)停伏肺的一種病證。研究表明，寒飲蘊肺證是支氣管哮喘證型中的嚴(yán)重類型，但其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確2。

麻黃-桂枝藥對來源于經(jīng)典名方小青龍湯，該方出自《傷寒論》，臨床上常用于治療哮喘等呼吸系統(tǒng)疾病。方中麻黃具有發(fā)汗解表、宣肺平喘、利水消腫的功效；桂枝則能發(fā)汗解肌、溫通經(jīng)脈、助陽化氣。筆者前期研究已初步證實，麻黃-桂枝藥對具有拮抗哮喘寒飲蘊肺證氣道炎癥及平喘作用。

在哮喘的發(fā)病過程中，寒冷刺激通過氣道上皮細(xì)胞和肥大細(xì)胞上的瞬時受體電位陽離子通道亞家族M成員8（transient receptor potential cation channel subfamilyMmember8，TRPM8）受體，促使氣道發(fā)生炎癥反應(yīng)，增加胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素（thymic stromallymphopoie-tin，TSLP）、白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）等炎癥因子的分泌，從而加重哮喘。此外，Toll樣受體4（Toll-likereceptor4，TLR4）信號通路在哮喘發(fā)病中也發(fā)揮重要作用，如卵清蛋白（ovalbumin，OVA）激動TLR4信號通路可導(dǎo)致輔助型T細(xì)胞2（Thelper2cell，Th2）介導(dǎo)的相關(guān)炎癥惡化，IL-13等炎癥因子的含量顯著增加[4。在寒冷刺激下，TSLP與TLR4信號通路的協(xié)同作用可顯著加劇哮喘的癥狀及呼吸功能損害?；诖?，本研究擬從TSLP/TLR4信號通路角度出發(fā)，探討麻黃-桂枝藥對對哮喘寒飲蘊肺證大鼠呼吸功能、氣道炎癥的影響及機(jī)制，旨在為麻黃-桂枝藥對的臨床開發(fā)提供實驗依據(jù)。

1材料

1.1主要儀器

本研究所用主要儀器包括W001型霧化儀（江蘇富林醫(yī)療設(shè)備有限公司）、FinepointeNAM型動物無創(chuàng)肺功能檢測系統(tǒng)（美國DSI公司）、Rt-2100C型酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）、EPS型電泳儀和Tanon-600型凝膠成像系統(tǒng)（上海天能科技有限公司）CFX型熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）儀（美國Bio-Rad公司）、DS-U3型成像系統(tǒng)和EclipseE10型正置光學(xué)顯微鏡（日本Nikon公司）。

1.2 主要藥品與試劑

麻黃飲片（產(chǎn)地內(nèi)蒙古，批號201224072）購自安國潤德藥業(yè)有限公司；桂枝飲片（產(chǎn)地廣西，批號210401）購自安徽三和堂藥業(yè)有限公司；麻黃、桂枝飲片經(jīng)趙東升副教授鑒定，分別為麻黃科植物草麻黃EphedrasinicaStapf的干燥草質(zhì)莖以及樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥嫩枝。

氫氧化鋁（批號SJ000389）、二甲苯（批號10023418）、中性樹膠（批號10004160）、三氯甲烷（批號10006818）異丙醇（批號80109218）均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；地塞米松磷酸鈉注射液（規(guī)格 2mg/mL 批號7211055購自辰欣藥業(yè)股份有限公司；0VA（批號9006-59-1）購自北京索萊寶生物科技有限公司；腫瘤壞死因子 ∝ （tumor necrosis factor-alpha，TNF- α ）、干擾素 γ （interferon-gamma，IFN-γ）、IL-6酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒（批號分別為9680014130921、9680003060721、9680011070921）均購自英國Abcam公司；IL-13ELISA試劑盒（批號54517261228）、兔源β-肌動蛋白（ _β -actin）抗體（批號BM0627）、兔源TSLP抗體（批號A01096）均購自武漢博士德生物工程有限公司；蘇木素染液（批號G1004）、伊紅染液（批號G1001）、Ser-vicebio？第一鏈cDNA合成試劑盒（批號G3330）、 2× SYBRGreenqPCR預(yù)混液（無ROX）（批號G3320）兔源TLR4抗體（批號GB11519-100）、辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗（批號GB23303）均購自武漢賽維爾生物科技有限公司。

1.3實驗動物

SPF級Wistar大鼠60只，6周齡，雄性，體重 180～ 200g ，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（京）2016-0011。所有動物均飼養(yǎng)于溫度 （22±2）^°C 、相對濕度 40%～60% 、晝夜 12h 光暗交替的環(huán)境中，自由攝食飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后開展后續(xù)實驗。實驗動物的使用與操作均符合山東中醫(yī)藥大學(xué)動物保護(hù)委員會關(guān)于實驗動物操作與動物福利的要求（倫理編號為SDUTCM20210917001）。

2 方法

2.1麻黃-桂枝藥對凍干粉的制備

稱取麻黃飲片 18g ，加8倍量蒸餾水浸泡 30min ，武火煎煮微沸后用文火煎煮 20min ;稱取桂枝飲片 18g ，加人至上述麻黃煎液中，武火煎煮沸后用文火煎煮40min，煎煮液過濾獲得濾液；藥渣加蒸餾水文火煎煮40min后過濾獲得濾液。合并2次濾液，減壓濃縮，制成凍干粉，研磨后用密封袋保存于干燥器中，待用。

2.2 分組、造模與給藥

將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、地塞米松組[1mg/（kg?d） ，參考前期預(yù)實驗和相關(guān)文獻(xiàn)設(shè)置]和麻黃-桂枝低、中、高劑量組 [0.234，0.936，1.872g/（kg?d） 以凍干粉的量計，低劑量為臨床等效劑量]，每組10只。模型組和各給藥組大鼠分別于第1天和第8天腹腔注射1mL 抗原液（每毫升含OVA 100mg 、氫氧化鋁 100mg ）致敏，空白組大鼠同期腹腔注射等體積生理鹽水；除空白組外，其余各組大鼠除第1天和第8天外施以“形寒、飲冷\"刺激，即將大鼠每日置于 0°C 冰箱內(nèi)冷處理 3h 以及24h冰水喂養(yǎng)，從第15天起，大鼠飲用冰水與冷處理刺激后，用 1%OVA 霧化激發(fā)哮喘，每天1次，每次 30min ，連續(xù)霧化8d，空白組大鼠使用等體積生理鹽水霧化。從第2天開始，各給藥組大鼠灌胃相應(yīng)藥物，空白組和模型組大鼠灌胃等體積生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥 21d^[7]

2.3一般行為學(xué)觀察

觀察各組大鼠實驗過程中的精神狀態(tài)、呼吸情況、皮毛潤澤情況、體重變化、飲食及飲水量變化，以及口鼻分泌物、咳喘、打噴嚏、撓鼻、呼吸急促、口唇變化等哮喘特異性癥狀體征的變化。

2.4 肺功能指標(biāo)檢測

采用動物無創(chuàng)肺功能檢測系統(tǒng)分別測定各組隨機(jī)選取的5只大鼠造模前（第1天）和末次給藥后（第22天）的呼氣流量峰值（peak expiratoryflow，PEF）、氣道阻力（airwayresistance，Raw）、功能殘氣量（functionalre-sidualcapacity，F(xiàn)RC）、呼氣中期流速（expiratoryflowat50% of forced vital capacity， EF50% ）。

2.5血清中IL-6、IL-13、TNF- α（α，IFN-γγ） 含量檢測

各組大鼠在末次給藥后，禁食不禁水 12h ，于其腹主動脈取血，靜置 2nΩ ，以 3500r/min 離心 15min ，取上清液。按照ELISA試劑盒說明書方法檢測各組隨機(jī)選取的3只大鼠血清中的IL-6、IL-13、TNF- σ?α∝ 、IFN- ?γ 含量。

2.6 肺組織病理學(xué)形態(tài)觀察

各組大鼠取血后處死，分離肺組織。隨后，各組隨機(jī)選取3只大鼠的肺組織左下葉，用 4% 多聚甲醛溶液固定 24h ;取部分組織，經(jīng)梯度乙醇脫水、石蠟包埋后切片，然后進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，最后使用顯微鏡觀察大鼠的肺泡、支氣管形態(tài)變化以及炎癥浸潤情況。

2.7 肺組織中IL-6、IL-13、TNF- α_αα_β∝α_β 、IFN- y. TSLP、TLR4mRNA表達(dá)檢測

采用熒光定量PCR法進(jìn)行檢測。各組隨機(jī)選取3只大鼠的肺組織左上葉，用Trizol法提取RNA，檢測RNA的濃度與純度后，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR體系（ 15μL 為 2×qPCR Mix 7.5μL，2.5μmol/L 的正、反向引物共 1.5μL ，cDNA模板 2μL ，無核酶水 4μL 。反應(yīng)條件為 95^°C 預(yù)變性30s; 95^°C 變性 15s，60^°C 退火/延伸 30s ，共40個循環(huán)。PCR引物由武漢賽維爾生物科技有限公司提供，引物序列與產(chǎn)物長度見表1。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）為內(nèi)參，采用 2^-ΔΔCT 法計算IL-6、IL-13、TNF- ∝ 、IFN- γ 、TSLP、TLR4mRNA的表達(dá)水平。

表1引物序列與產(chǎn)物長度

2.8肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)檢測

采用Westernblot法進(jìn)行檢測。各組隨機(jī)選取3只大鼠的肺組織右上葉，制成勻漿，冰浴靜置 30min ，加人RIPA裂解液 30min 后，于 4^°C 以 12000r/min 離心20min ，提取蛋白上清，檢測蛋白濃度，于沸水中變性15min ，放入 -20^°C 冷凍，待用。取變性后的蛋白樣品，電泳、分離、轉(zhuǎn)膜、封閉后，加入TSLP、TLR4 ??β -actin抗體（稀釋比例分別為 1：1000，1：1000，1：5000 ）， 4^°C 孵育過夜；第2天加入二抗（稀釋比例為1：10000），室溫孵育2.5h ，用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光試劑顯色、曝光，凝膠成像系統(tǒng)拍攝。以 β -actin為內(nèi)參，用ImageJ軟件進(jìn)行分析，以目的蛋白與內(nèi)參的灰度值比值作為目的蛋白的表達(dá)水平。

2.9 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS21.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以 表示，組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK- ?q 檢驗。檢驗水準(zhǔn) α=0.05 。

3結(jié)果

3.1大鼠一般行為學(xué)比較

與空白組比較，模型組大鼠從第5天開始出現(xiàn)抓耳撓腮、咳嗽、情緒躁動等表現(xiàn)，霧化激發(fā)期（第 15～22 天）出現(xiàn)了體重減輕、進(jìn)食量減少以及嚴(yán)重咳喘、扎堆蜷縮、精神萎靡、呼吸短促等哮喘典型癥狀。與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組只有少數(shù)大鼠出現(xiàn)呼吸短促、咳喘、躁動以及精神萎靡等哮喘典型癥狀。

3.2 大鼠肺功能指標(biāo)比較

各組大鼠造模前（第1天）的Raw、FRC、PEF、EF50% 比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（ Pgt;0.05 ，數(shù)據(jù)略）。末次給藥后（第22天），與空白組比較，模型組大鼠Raw、FRC均顯著升高，PEF、EF 50% 均顯著降低 （Plt;0.05） ；與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組大鼠Raw、FRC均顯著降低，PEF、 EF50% 均顯著升高（Plt;0.05） 。結(jié)果見表 2（1cmH₂O≈0.098kPa） 。

表2各組大鼠末次給藥后的肺功能指標(biāo)比較 n=5 ）

a：與空白組比較， Plt;0.05：6 ：與模型組比較， .Plt;0.05 O

3.3大鼠血清中IL-6、IL-13、TNF- α（α，IFN-γγ） 含量比較

與空白組比較，模型組大鼠血清中IL-6、IL-13、TNF- ∝ 含量均顯著升高， IFN-γ 含量顯著降低 （Plt; 0.05）；與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組大鼠血清中IL-6、IL-13、TNF- σ?α∝ 含量均顯著降低，IFN- ?γ 含量均顯著升高 （Plt;0.05 。結(jié)果見表3。

表3各組大鼠血清中炎癥因子含量比較 pg/mL ）

a：與空白組比較， Plt;0.05;b; 與模型組比較， .Plt;0.05 。

3.4大鼠肺組織病理學(xué)形態(tài)比較

空白組大鼠肺組織無異樣。與空白組比較，模型組大鼠肺組織中可見充血等炎癥現(xiàn)象，支氣管及肺泡周圍有大量炎癥細(xì)胞浸潤，支氣管管壁增厚，肺泡塌陷嚴(yán)重；與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組大鼠肺組織損傷明顯減輕，肺泡結(jié)構(gòu)相對完整，支氣管管壁無明顯增厚，炎癥細(xì)胞浸潤減輕。結(jié)果見圖1。

3.5大鼠肺組織中IL-6、IL-13、TNF- α?αα IFN- ΨΨ 、TSLP、 TLR4mRNA表達(dá)比較

與空白組比較，模型組大鼠肺組織中IL-6、IL-13、TNF- σ?α∝ 、TSLP、TLR4mRNA表達(dá)水平均顯著升高， IFN-γ mRNA表達(dá)水平顯著降低（ ?Plt;0.05 ；與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組大鼠肺組織中IL-6（麻黃-桂枝低劑量組除外）、IL-13、TNF- σ?α∝ 、TSLP（麻黃-桂枝低劑量組除外）、TLR4mRNA表達(dá)水平均顯著降低， IFN-γ mRNA表達(dá)水平均顯著升高（ 1lt;0.05 。結(jié)果見表4。

紅色箭頭：支氣管；黑色箭頭：炎癥細(xì)胞。

表4各組大鼠肺組織中IL-6、IL-13、TNF- α（x，IFN-γγ 、TSLP、TLR4mRNA表達(dá)比較 ）

a：與空白組比較， Plt;0.05：6 ：與模型組比較， ?Plt;0.05 。

3.6大鼠肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)比較

與空白組比較，模型組大鼠肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)水平均顯著升高 （Plt;0.05） ；與模型組比較，地塞米松組和麻黃-桂枝低、中、高劑量組大鼠肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)水平均顯著降低（ ΔPlt;0.05 。結(jié)果見圖2和表5。

圖2各組大鼠肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)的電泳圖

I：空白組;I：模型組；II：地塞米松組;IV：麻黃-桂枝低劑量組； V：麻黃-桂枝中劑量組;VI：麻黃-桂枝高劑量組。

表5各組大鼠肺組織中TSLP、TLR4蛋白表達(dá)比較 （204號

a：與空白組比較， ?Plt;0.05 ；b：與模型組比較， ΔPlt;0.05Δ

4討論

哮喘是一種常見的慢性氣道炎癥性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及多種炎癥細(xì)胞、細(xì)胞因子和信號通路的異常激活。寒飲蘊肺證是哮喘的一種常見證型，其病理機(jī)制主要為“寒飲內(nèi)停、肺氣不宣”“形寒飲冷”導(dǎo)致氣道炎癥加重和呼吸功能障礙?！秲?nèi)經(jīng)》有“形寒飲冷則傷肺”“重寒傷肺”等論述，形寒和寒飲兩種寒邪相互作用，內(nèi)外皆傷，導(dǎo)致肺氣上逆，出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等癥狀，說明寒冷環(huán)境與寒涼飲食相結(jié)合，易導(dǎo)致肺臟與支氣管的損傷，進(jìn)而引發(fā)氣道炎癥，促使哮喘的發(fā)生[2，9]。近年來，隨著對中藥作用機(jī)制的深人研究，麻黃-桂枝藥對在治療哮喘寒飲蘊肺證中的潛在療效逐漸受到關(guān)注。

呼吸功能的改善是評估哮喘治療效果的重要指標(biāo)之一。在哮喘寒飲蘊肺證中，氣道阻塞導(dǎo)致呼氣不完全，氣體滯留于肺泡內(nèi)導(dǎo)致功能殘氣量升高，氣道狹窄導(dǎo)致呼氣峰流速顯著下降[10]。本研究結(jié)果顯示，麻黃-桂枝藥對能夠顯著改善哮喘寒飲蘊肺證大鼠的呼吸功能，具體表現(xiàn)為Raw、FRC均顯著降低，PEF、EF 50% 均顯著升高。

炎癥因子IL-6、IL-13、TNF- ∝ 和IFN- γ 在哮喘中形成調(diào)控機(jī)制，IL-13主導(dǎo)Th2型炎癥和氣道重塑，IL-6驅(qū)動Th17型炎癥和全身反應(yīng)，TNF- ∝ 放大炎癥關(guān)聯(lián)，而IFN- ?γ 則通過免疫平衡發(fā)揮保護(hù)作用，上述炎癥因子相互作用所產(chǎn)生的整體效應(yīng)體現(xiàn)在肺部的病理特征為嚴(yán)重的炎癥細(xì)胞浸潤與杯狀細(xì)胞異常增生[]。本研究結(jié)果顯示，麻黃-桂枝藥對能顯著改善哮喘寒飲蘊肺證大鼠氣道中的炎癥細(xì)胞浸潤及支氣管的異常變化，可顯著降低血清中IL-6、IL-13、TNF- α_?∝ 含量以及肺組織中IL-6、IL-13、TNF- α mRNA表達(dá)水平，提高血清中IFN- ?γ 含量和肺組織中 IFN-γmRNA 表達(dá)水平，提示麻黃-桂枝藥對能夠緩解哮喘氣道炎癥。

在機(jī)體中，Th1/Th2調(diào)控機(jī)制失衡是引發(fā)慢性支氣管哮喘最重要的環(huán)節(jié)之一。有研究顯示，在Th2哮喘發(fā)病機(jī)制中，TSLP是引發(fā)炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因子，抑制TSLP表達(dá)可使體內(nèi)Th2型細(xì)胞因子產(chǎn)生減少，從而緩解Th1/Th2失衡[12-13]。TLR4可促進(jìn)細(xì)胞因子合成與釋放，參與炎癥反應(yīng)以及哮喘的發(fā)生[4]。激活TLR4可觸發(fā)核因子 κB 信號通路，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，刺激TNF- σ?α?α?α?α IL-6、IL-4、IL-5等炎癥因子的表達(dá)[5]。本研究結(jié)果顯示，麻黃-桂枝藥對能顯著抑制哮喘寒飲蘊肺證大鼠肺組織中TSLP、TLR4mRNA及蛋白的表達(dá)，降低Th2細(xì)胞因子的合成，緩解Th1/Th2失衡，進(jìn)而減輕哮喘大鼠的炎癥反應(yīng)，改善哮喘癥狀。

綜上所述，麻黃-桂枝藥對能顯著改善哮喘寒飲蘊肺證大鼠的呼吸功能，減輕氣道炎癥，其作用機(jī)制可能與抑制TLR4/TSLP信號通路、調(diào)節(jié)Th1/Th2失衡有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

[1]MARTIN-GONZALEZ E，HERNANDEZ-PEREZJ M，PEREZ PEREZ JA，et al. Alpha-1 antitrypsin deficiencyand Pi^*S and Pi^*Z SERPINAl variants are associatedwithasthma exacerbations[J].Pulmonology，2025，31（1）：2416870.

[2］王曉旭，田或瀟，趙東升，等.從\"形寒飲冷則傷肺”論細(xì)胞自噬在哮喘寒飲蘊肺證發(fā)病及治療中的作用[J].遼寧中醫(yī)雜志，2023，50（7）：75-78.

[3］胡藝馨，李敏超.薄荷醇通過激活瞬時受體電位M8（TRPM8）促進(jìn)BEAS-2B人支氣管上皮細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2021，37（7）：577-584.

[4]喬俊英，宋麗，張艷麗，等.哮喘小鼠HMGB1/TLR4/NF-KB信號通路及維生素D的作用[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2017，19（1）：95-103.

[5]SMOLINSKA S，ANTOLIN-AMERIGO D，POPESCU FD，etal. Thymic stromal lymphopoietin（TSLP），its iso-forms and the interplay with the epithelium in allergy andasthma[J]. Int JMol Sci，2023，24（16）：12725.

[6]向雙娣，程林輝，喻強(qiáng)強(qiáng)，等.益氣溫陽護(hù)衛(wèi)湯調(diào)控PI3K/Akt/mTOR自噬途徑治療支氣管哮喘大鼠機(jī)制[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2023，29（14）：38-46.

[7］常興，張慶祥，劉燕，等.基于\"肺陽虛”理論探析溫陽化飲方對哮喘寒飲蘊肺證細(xì)胞自噬的作用機(jī)制[J].中華中醫(yī)藥雜志，2020，35（2）：650-654.

[8］范曉璇，顏培正，張慶祥.黃芪甲苷通過LC3/Beclin1干預(yù)哮喘寒飲蘊肺證大鼠細(xì)胞自噬的機(jī)制[J].中華中醫(yī)藥雜志，2024，39（11）：6037-6042.

[9]王琳君，李耀輝，鐘珍，等.形寒寒飲則傷肺述評[J].河北中醫(yī)，2023，45（1）：122-124.

[10]謝素馨，徐依婷，湯杰.麻黃-桂枝藥對治療呼吸系統(tǒng)疾病的臨床應(yīng)用[J].世界中醫(yī)藥，2024，19（14）：2191-2195，2202.

[11]呂士申，張忠文，邵淑琳.金合歡素對哮喘幼年大鼠的改善作用及機(jī)制[J].中國藥房，2024，35（20）：2466-2470.

[12]王志剛，申改青，黃玉煥.咳嗽變異性哮喘患兒外周血miR-138及RUNX3對Th1/Th2平衡的調(diào)節(jié)作用[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2021，23（10）：1044-1049.

[13]周巧，徐尤年，趙睿含，等.胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素在哮喘發(fā)病機(jī)制和治療中的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2022，28（1） ：1-6.

[14]楊艷，薛征.TLR4基因敲除對哮喘小鼠氣道炎癥的影響[J].中國免疫學(xué)雜志，2021，37（24）：2945-2949.

[15]樸穎，王重陽，宋藝蘭，等.朝醫(yī)麻黃定喘湯對OVA誘導(dǎo)的過敏性哮喘豚鼠模型HMGB1/TLR4/NF- σ_κB 信號通路的影響[J].中國病理生理雜志，2022，38（5）：913-919.

（編輯：鄒麗娟）