中圖分類號S482.2文獻標識碼A文章編號 0517-6611(2025)12-0108-05
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2025.12.025
開放科學(資源服務)標識碼(OSID):
TheVirulence Tests and Field Efficacy Trials of Eight Fungicides Against Maize Ear Rot
WANGLiang-fang,YANG Xiao-long,WUZh-taoetal(GansuAgriculturalEngineeringTechnologyResearchIntitute/Wuwei City MaizePestGrenPreventonandControlTechnologyovationCenter/GansuProvinceMaizePestsGreenPreventionandControlEnineing Research Center,Lanzhou,Gansu )
AbstractObectiveToselectefectivefungicidestoontrolaizerotMetodelabratoryviruleneof8fungicidesagaitaie earrotwasmeasuedusigteyelialgothateethod,ndeldcacyaclostroberductedungdesitoi tory toxicity.[Result]The result of Virulence tests indicated that 10% metconazole 5C,25% pyraclostrobin SC,30% propithiostazole SC and (204號 25% phenamacril SC had strong inhibitory effects on maize ear rot,and their EC50 were 0.001 5,0.016 3,0.031 4 and 0.0451mg/L ,respectively.Fieldtrialsesultsshowedthathe4fungicidesadgoodcontrolfectonmazearotandtheontroleectwereothoretan 60% , among which 30% prothiomethazole SC had the best control effect on maize ear rot,and the plant control effect was 69% .[Conclusion] The 4 fungicides can be used alternately in production.
Key wordsMaize ear rot;Fungicides; Virulence test;Field efficacy
玉米是世界三大作物之一,同時也是重要的糧食作物、飼料作物和工業(yè)原料。穗腐病是一種重要的真菌病害,在世界各玉米產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生,可由多種病原菌引起。國內(nèi)外學者對不同地區(qū)玉米穗腐病的致病菌進行了分離鑒定及致病性測定等研究,迄今已鑒定出40余種真菌可引起玉米穗腐病[],這些真菌單獨或復合侵染可引起該病害的發(fā)生[2]。目前,已報道的病原菌主要包括擬輪枝鐮孢菌(Fusariumvertcil-lioides)禾谷鐮孢菌(F.graminearum)、青霉菌(Penicilliumsp.)、曲霉菌(Aspergillussp.)等。在我國引起玉米穗腐的主要致病菌為鐮孢菌,且各地的病原組成差異較大,以擬輪枝鐮孢菌為優(yōu)勢種。
近年來玉米穗腐病的發(fā)病范圍和發(fā)病程度呈上升趨勢,一般年份發(fā)病率為 5%~10% ,嚴重時可達 30%~40% 。擬輪枝鐮孢菌侵染玉米果穗后,不僅造成籽粒腐爛,降低玉米產(chǎn)量,同時病原菌所產(chǎn)生的伏馬毒素嚴重影響玉米品質(zhì)3,該毒素能夠?qū)е埋R腦白質(zhì)軟化癥、豬的肺水腫、胸積水等[4-6]大大增加了對人畜的危害,嚴重者甚至死亡[7] 。
目前,玉米穗腐病抗病品種較少,化學防治仍是目前最為有效的防治措施之一,化學防治具有見效快、藥效顯著等特點,使用殺菌劑可在短期有效控制玉米穗腐病的發(fā)生和蔓延,明顯降低籽粒中毒素含量,但目前國內(nèi)暫未見登記用于玉米穗腐病防治的專用殺菌劑。因此,篩選低毒高效農(nóng)藥對于玉米穗腐病的有效防治變得十分迫切和尤為重要。
為了有效防治玉米穗腐病,筆者以擬輪枝鐮孢菌為供試菌種,采用菌絲生長速率法測定了8種殺菌劑對玉米穗腐病的室內(nèi)毒力,并在此基礎上對抑制毒力較強的4種殺菌劑進行田間藥效試驗,篩選出有效防治玉米穗腐病的殺菌劑,為玉米穗腐病的防治提供參考依據(jù)
1材料與方法
1.1試驗材料供試菌種為擬輪枝鐮刀菌(Fusariumverticil-lioides),由甘肅省農(nóng)業(yè)工程技術研究院植物病理學實驗室提供,為單孢分離后培養(yǎng)菌株。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基:馬鈴薯 200g ,葡萄糖20g ,瓊脂粉 17g ,蒸餾水定容至 。
8 種殺菌劑基本情況見表1。
1.2 試驗方法
1.2.1室內(nèi)毒力測定。采用菌絲生長速率法測定8種殺菌劑對玉米穗腐病病原擬輪枝鐮刀菌的室內(nèi)毒力,根據(jù)預試驗結果每種藥劑配制5個不同濃度,藥劑濃度見表2,分別將不同濃度的殺菌劑按照體積 1:9 的比例加入到冷卻至 50qC 的PDA培養(yǎng)基中,充分混勻制成含藥平板,每個處理3次重復,以添加等體積無菌水的PDA培養(yǎng)基為對照。用直徑 5mm 的無菌打孔器打取菌餅,接種于含藥培養(yǎng)基上,之后將培養(yǎng)皿置于光照培養(yǎng)箱中在 25°C 下培養(yǎng) 72h ,采用十字交叉法測量不同濃度藥劑處理菌落直徑,與對照比較計算各藥劑處理對菌絲生長的抑制率,分析不同殺菌劑對供試病菌菌絲生長的影響[8]
抑菌率 Σ=Σ (對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑) ×100%
將藥劑濃度換算成對數(shù)值作為自變量 x ,抑菌率的概率值作為因變量 y ,通過Excel軟件建立毒力回歸方程 y=A+ Bx ,利用此方程求得機率值為5(校正死亡率為 50% )時的濃度,即為 EC50 的濃度對數(shù)值,算出 EC50 值,根據(jù) EC50 值進行藥劑毒力大小比較, EC50 越小,說明病菌對該藥劑越敏感[9]
表2供試殺菌劑濃度
1.2.2田間藥效試驗。試驗地設在甘肅省農(nóng)業(yè)工程技術研究院黃羊鎮(zhèn)試驗田,歷年玉米穗腐病發(fā)病較重,土壤以砂壤土為主,肥力均勻,有機質(zhì)含量 16mg/kg ,前兩茬作物均為玉米。試驗地栽培管理條件一致均勻,玉米種植品種為益田809,種植密度82 500 株 /hm2 。
采用完全隨機區(qū)組設計,每個小區(qū)面積 25m2 ,根據(jù)室內(nèi)毒力測定結果,選擇室內(nèi)抑菌效果較好的4種藥劑進行田間藥效試驗,供試殺菌劑根據(jù)制劑田間推薦濃度使用,設置最大濃度、最小濃度、中間偏大濃度和中間偏小濃度4個濃度梯度,以噴施等量清水作對照,共17個處理,各處理3次重復,共51個小區(qū)。其中, 10% 葉菌唑濃度為240、360、480和600mL/hm2 25% 吡唑嘧菌酯濃度為150、260、370和480mL/hm2 30% 丙硫菌唑濃度為450、550、650 和 750mL/hm2 ,25% 氰烯菌酯濃度為 1490,1990,2490 和2 ??990mL/hm2 ,在玉米吐絲后5\~20d,選擇適宜果穗,將培養(yǎng)7d的病原菌打成8mm 的菌餅,用牙簽刮取菌餅上菌絲并排插入果穗中部進行人工接種,接種病原菌 48h 后采用衛(wèi)士16噴霧器將藥劑均勻噴施于果穗部,連續(xù)噴藥2次,間隔 7d。
在玉米完熟期,將各處理接種的玉米果穗剝?nèi)グ~,逐個調(diào)查記載發(fā)病穗數(shù)及發(fā)病級別,每小區(qū)調(diào)查30株,計算病情指數(shù),根據(jù)各藥劑處理的病情指數(shù)及空白對照組的病情指數(shù)計算防治效果。穗腐病的病情級別:1級為發(fā)病面積占果穗總面積的 0~1%;3 級為發(fā)病面積占果穗總面積的 2% \~10% ,5級為發(fā)病面積占果穗總面積的 11%~25%;7 級為發(fā)病面積占果穗總面積的 26%~50% ;9級為發(fā)病面積占果穗總面積的 51%~100% 。
病情指數(shù) =Σ (各級病穗數(shù) × 各級代表值)/(調(diào)查總穗數(shù) × 最高級代表值) ×100
防治效果 Σ=Σ [(發(fā)病對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/發(fā)病對照病情指數(shù)] ×100%
1.2.3室內(nèi)考種。每個處理取10個果穗裝入尼龍網(wǎng)袋中晾曬,晾干后進行室內(nèi)考種,測量處理果穗穗長、穗粗、穗行數(shù)、行粒數(shù)、百粒重、禿尖長、含水量和穗粒重,最后折合成實收產(chǎn)量。
1.3數(shù)據(jù)處理與分析采用MicrosoftExcel2003進行數(shù)據(jù)錄入、統(tǒng)計和回歸分析,采用統(tǒng)計軟件SPSS進行ANOVA單因素方差分析,處理間差異顯著以最小差數(shù)法(LSD)檢驗。
2 結果與分析
2.1不同藥劑對擬輪枝鐮刀菌菌絲生長的抑制效應從表3可以看出,8種殺菌劑對擬輪枝鐮刀菌菌絲生長的影響,隨著殺菌劑質(zhì)量濃度逐漸增大,對菌落直徑的抑制率逐漸增加,但不同藥劑對樣品菌落的抑制能力有所不同,在供試質(zhì)量濃度范圍內(nèi)抑制作用最好的是 10% 葉菌唑SC,其藥劑質(zhì)量濃度為 0.002 5~0.250 0mg/L ,抑制率為 52.86%~89.51% ,藥劑濃度較低時也有較強的抑制效果; 25% 吡唑醚菌酯SC效果次之,其藥劑質(zhì)量濃度為 0.025~2.500mg/L ,抑制率為55.09%~82.22% : 30% 丙硫菌唑SC其藥劑質(zhì)量濃度為0.000 25~0.250 00mg/L ,抑制率為 8.20%~48.12% 25% 氰烯菌酯SC其藥劑質(zhì)量濃度為 0.025~2.500mg/L ,抑制率為23.73%~94.54% 43% 氟菌·肟菌酯SC其藥劑質(zhì)量濃度為 0.0025~0.2500mg/L ,抑制率為 18.78%~46.95%;25g/L 咯 菌腈SC其藥劑質(zhì)量濃度為 0.005~0.500mg/L ,抑制率為 8.85%~72.52% 30% 肟菌·戊唑醇SC其藥劑質(zhì)量濃度為 0.0005~0.0500mg/L ,抑制率為 8.78%~34.45% 70% 噁霉 靈WP其藥劑質(zhì)量濃度為 0.025~2.500mg/L ,抑制率為 7.91%~80.94% 。
2.2 不同藥劑對玉米穗腐病菌擬輪枝鐮刀菌的室內(nèi)毒力通過回歸分析各處理藥劑濃度的對數(shù)值 (x) 和菌絲生長抑制率的概率值 (y) ,得到8種殺菌劑對擬輪枝鐮刀菌的毒力回歸方程、相關系數(shù) (R) 和抑制中濃度( EC50 )。 R 表示菌株的生長抑制率和藥劑質(zhì)量濃度之間呈正相關性的密切程度,從表4可以看出,8個毒力回歸方程相關系數(shù) R 均大于0.9,說明 x,y 高度相關,可以用來計算供試藥劑毒力。 EC50 表示當菌株的生長抑制率達 50% 時藥劑的質(zhì)量濃度, EC50 值越小,說明病菌對該藥劑越敏感,也表明該藥劑對病原菌的抑制作用越強。
從表4可以看出,8種藥劑在5個選定的濃度下對擬輪枝鐮刀菌具有較好的抑制效果。 10% 葉菌唑?qū)M輪枝鐮刀菌的抑制效果顯著優(yōu)于其他藥劑,其 EC50 值為 0.0015mg/L 5其次是 25% 吡唑醚菌酯,其 EC50 值為 0.0163mg/L ;其余6種供試藥劑抑制樣本菌落的毒力由強到弱依次為 30% 丙硫菌唑 25% 氰烯菌酯、 43% 氟菌菌酯、 25g/L 咯菌腈、 30% 肟菌·戊唑醇和 70% 噁霉靈, EC50 值分別為 0.031 4.0.045 1 、0.072 2、0.0883、0.118 7和
2.3不同藥劑對玉米穗腐病的田間防治效果由表5可知,4種殺菌劑在大田實際應用環(huán)境下,對擬輪枝鐮孢菌玉米穗腐病均有一定的防治效果,均能顯著降低穗腐病病情指數(shù)。在藥劑推薦劑量范圍內(nèi), 10% 葉菌唑防效為 69.44% \~80.56% 25% 吡唑醚菌酯防效為 61.11%~69.44% 30% 丙硫菌唑防效為 46.30%~50.93% 25% 氰烯菌酯防效為 64.81% 275.00% 。由此可見, 10% 葉菌唑田間防治效果最好, 25% 氰烯菌酯和 25% 吡唑醚菌酯田間防效次之, 30% 丙硫菌唑田間防效最低。
2.4不同藥劑對玉米產(chǎn)量及其構成因素的影響玉米收獲后晾干至玉米水分含量約 14% 后進行室內(nèi)考種,由表6可知,不同藥劑田間噴霧處理后,除 30% 丙硫菌唑產(chǎn)量增幅較小,其余各處理玉米產(chǎn)量均顯著高于對照,其中 25% 氰烯菌酯不同濃度處理下產(chǎn)量增加最大,分別為 825.23,900.92,906.13 和967.18kg/hm2 ,增產(chǎn) 27.21%.38.88%.39.68% 和 49.09% ,其次是10% 葉菌唑和 25% 吡唑醚菌酯不同濃度處理, 30% 丙硫菌唑各濃度處理下增產(chǎn)最高為 22.41% 。
根據(jù)表7室內(nèi)考種結果,對不同處理的玉米產(chǎn)量構成因素進行方差分析和多重比較,發(fā)現(xiàn)與清水對照相比,各處理玉米穗粗、穗長均無顯著差異,藥劑處理后,玉米禿尖長度略有變短,穗粒數(shù)顯著增多。
3結論與討論
玉米穗腐病可造成嚴重糧食減產(chǎn)和重大經(jīng)濟損失,尤其是真菌產(chǎn)生的毒素,對人類和其他動物的生命健康構成了嚴重威脅。由于引起玉米穗腐病的病原種類較多且各地優(yōu)勢菌株差異較大,導致選育抗病品種周期較長且抗性不持久,因此,目前防治玉米穗腐病最有效的方法仍是化學藥劑防治,但同一種化學藥劑的長期單一和過量使用,容易產(chǎn)生抗藥性,篩選對玉米穗腐病具有良好防效的多種新型殺菌劑供生產(chǎn)中交替輪換使用意義重大。
該研究通過室內(nèi)毒力測定和田間藥效試驗從8種目前市場主流化學殺菌劑中篩選出防治玉米穗腐病效果較好的化學殺菌劑,供生產(chǎn)中根據(jù)病害發(fā)生情況輪換用藥,避免病原菌產(chǎn)生抗藥性。從室內(nèi)毒力測定結果可知, 10% 葉菌唑、25% 吡唑醚菌酯 .30% 丙硫菌唑和 25% 氰烯菌酯對引起甘肅省玉米穗腐病的主要病原菌擬輪枝鐮刀菌菌絲生長均有較強的抑制作用,且其 EC50 均在 1mg/L 以下,其中 10% 葉菌唑?qū)M輪枝鐮刀菌的抑制效果顯著優(yōu)于其他藥劑,其 EC50 值為0.0015mg/L 進一步的田間藥效試驗表明,4種殺菌劑在大田實際應用環(huán)境下對擬輪枝鐮孢菌穗腐病均有一定的防治效果, 10% 葉菌唑田間防效最好,田間推薦劑量下,其防治效果達 80.56% 25% 氰烯菌酯和 25% 吡唑醚菌酯防效次之,田間推薦劑量用藥下,其防治效果分別達 75.00% 和 69.44% ,30% 丙硫菌唑田間防效最低。
赫丹等[0]發(fā)現(xiàn)葉菌唑可通過脂質(zhì)過氧化引起的細胞膜損傷和阻礙麥角甾醇生物合成等方式,對擬輪枝鐮刀菌表現(xiàn)出潛在的抗真菌活性,該試驗結果表明, 10% 葉菌唑在室內(nèi)毒力和田間藥效方面對擬輪枝鐮孢菌均具有很好的防治效果。吡唑醚菌酯是一種高活性的新型殺菌劑,郭聰聰?shù)萚]研究發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯對擬輪枝鐮孢菌產(chǎn)生的伏馬毒素有一定的抑制作用,而且也能抑制菌株菌絲生長及孢子萌發(fā),但未明確該種藥劑對擬輪枝鐮孢菌的田間防效。氰烯菌酯是一類2-氰基丙烯酸酯類殺菌劑,是國內(nèi)自主研發(fā)創(chuàng)制的專業(yè)防治鐮刀菌病害的農(nóng)藥,已登記用于小麥赤霉病和水稻惡苗病的防治[12-14],而玉米上尚未登記和大量使用,韓慶莉等[5]研究表明吡唑醚菌酯與氰烯菌酯混配對鐮刀菌的作用效果無拮抗作用。
綜上所述,以上3種藥劑對擬輪枝鐮孢菌引起的玉米穗腐病均有較好的防治效果,能夠減少玉米禿尖,增加玉米穗粒數(shù),從而增加玉米產(chǎn)量,而且對玉米產(chǎn)量構成因素都有一定的正向協(xié)調(diào)作用,可以在病害發(fā)生時交替輪換使用,避免病原菌產(chǎn)生抗藥性,吡唑醚菌酯與氰烯菌酯也可以嘗試混配施用以提高藥效。玉米穗腐病的發(fā)生與蟲害等多種因素相關,因此防治玉米穗腐病不僅要防治病原菌,同時還應防治相關害蟲,因此下一步可以篩選一些和這3種藥劑聯(lián)合施用的殺蟲劑,提高對玉米穗腐病的防治效果
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