摘要為探討外源物質(zhì)DCPTA[2-(3,4-二氯苯氧基)三乙胺]對番茄幼苗在低溫及恢復(fù)常溫下葉綠素?zé)晒馓匦院涂寡趸富钚缘挠绊?,以L-403番茄為材料,于4葉1心時(shí)對其幼苗分別噴施 0.10,30,50mg/L 的DCPTA,并進(jìn)行5(L)/5(D)℃低溫處理,處理2d后再恢復(fù)至25(L)/18(D) C 常溫處理,分別測定低溫處理第2天及恢復(fù)常溫第2天幼苗的葉綠素含量、光化學(xué)量子產(chǎn)率(ΦPSII)、最大光化學(xué)效率( Fv/Fm )以及SOD、POD、CAT等活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),噴施 10Ω.30Ω.50mg/L 的 DCPTA 對低溫下幼苗葉綠素含量、ΦPSII、CAT 活性影響不顯著,而10和 50mg/L DCPTA顯著提高了幼苗葉片的 Fv/Fm 和 SOD 活性,30 和 50mg/L DCPTA 顯著抑制幼苗 POD 活性;恢復(fù)常溫后, 10mg/L DCPTA顯著提高了幼苗的POD活性。研究認(rèn)為, 10mg/L DCPTA可以提高低溫下番茄幼苗的 Fv/Fm 和 SOD 活性,以及恢復(fù)常溫后幼苗的POD活性。
關(guān)鍵詞DCPTA;番茄;低溫;葉綠素?zé)晒馓匦?;抗氧化酶活?/p>
中圖分類號(hào)S641.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A
文章編號(hào) 0517-6611(2025)13-0024-04
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2025.13.006
開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):
EfectsofExogenousDCPTAon ChlorophyllFluorescence CharacteristicsandAntioxidantEnzymeActivityofTomatoSeedlingsat Low Temperature and Subsequent Recovery to Normal Temperature
CAO Zhen12ONG_Zhale(1.JanJingUrbanCostructionIvestentGropCo,d,anShadong250;JianEn trepreneurial HighwayEngineeringCo.,Ltd.,Jinan,Shandong0)
Abstract In order to investigate the effects of exogenous DCPTA( 2-(3,4- dichlorophenoxy)triethylamine)on chlorophyll fluorescence charactersticsndntioidanteectisinoatodlingdertmpaturendsubseentoverytoaltmpate 403tomatovarityasudasateal,tenseedlingsatthefour-landoe-harttagewrespradwitO,0,O,ndOg/, respectively,and then subjected to low-temperature treatment at 5(L)/5(D)C for2days,followed by recovery to normal temperature at 25(L)/18(D) C for 2 days. Chlorophyll content,photochemical quantum yield ( ΦPSII ),maximum photochemical efficiency of PSII ( Fv/ Fm ),andactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),peroxidase(PO),andcatalase(CAT)were measuredontheseconddayfowteperaturetreatmentandhesecoddayofrecoerytooalmperature.Teresultsshoedataplicatioof3Oand5Og/LAad nosignificantefsocrophllotet,I,ndCActivitderwmpratureodio.Hower,nd5 significantly increased Fv/Fm and SOD activity,while 30 and 50mg/L DCPTA significantly inhibited POD activity.After recovery to normal temperature, 10mg/L DCPTA significantly enhanced POD activity. The study concluded that 10mg/L DCPTA could improve Fv/Fm and SOD activity in tomato seedlingsunder lowtemperature stress and enhance POD activityafter recovery to normal temperature.
KeywordsDCPTA;Tomato;Low temperature;Chlorophyllfluorescencecharacteristics;Antioxidant enzymeactivities
番茄(SolamumlycopersicumL.)起源于南美洲,是我國設(shè)施栽培中廣泛種植的一種蔬菜作物[1]。番茄作為典型喜溫植物,對溫度要求嚴(yán)格,當(dāng)溫度低于 10°C 時(shí),番茄生長發(fā)育受到限制;當(dāng)溫度低于 5°C 時(shí),番茄就會(huì)停止生長[2]。在我國番茄冬春茬和春季育苗季節(jié),由于突發(fā)寒潮、強(qiáng)降溫、倒春寒、連續(xù)低溫陰天等引起的溫度驟降,會(huì)使番茄生長發(fā)育受到阻礙,影響番茄產(chǎn)量和品質(zhì),嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致番茄死亡[3-4]。
目前,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上可通過選育耐低溫品種、改善栽培環(huán)境措施(如增施有機(jī)肥)、施用外源物質(zhì)等栽培措施和生理調(diào)控手段來降低低溫脅迫對植物生長的不良影響。其中植物生長調(diào)節(jié)劑因具有效率高、毒性低的特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用,如聚糠萘合劑[5]、ALA[6]多效唑[7]、油菜素內(nèi)酯[8]、褪黑素[9-10]等植物生長調(diào)節(jié)劑,甜菜堿[11]、海藻糖[12]等細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)物,以及鉀、磷、鈣等礦質(zhì)元素[13-16]均可以在一定程度上緩解冷害的脅迫損傷。
2-(3,4-二氯苯氧基)三乙胺[2-(3,4-dichlorophenoxy)triethylamine,DCPTA]又稱增產(chǎn)胺,是一種新型生物調(diào)節(jié)劑,具有提高植物蛋白質(zhì)合成,提升植物酶活,改善器官功能,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等作用[17-18]。近年來,關(guān)于DCPTA 提高植物抗逆性的研究已有大量報(bào)道。朱恒光等[19]發(fā)現(xiàn),在低溫條件下,噴施DCPTA后玉米幼苗的抗氧化能力明顯增強(qiáng),而MDA含量則明顯下降。李麗潔等2研究發(fā)現(xiàn),DCPTA處理可以顯著提高低溫下玉米幼苗葉片的葉綠素含量和PSI最大光化學(xué)效率( (Fv/Fm )以及SOD、POD、CAT、APX等活性,從而有效緩解低溫對玉米幼苗的傷害。適宜濃度的DCPTA有助于提高玉米種子萌發(fā)過程中的耐旱能力,加快內(nèi)部水分的存儲(chǔ),減輕干旱造成的損害,促進(jìn)水分脅迫下玉米種子萌發(fā),提高其抗旱性[21-22]。外源噴施 DCPTA 可以改善銅脅迫下黃瓜幼苗的光合作用、增強(qiáng)抗氧化酶活性和促進(jìn)礦質(zhì)元素吸收,從而緩解銅脅迫損害[23]。DCPTA浸種對黑麥草和紫羊茅草幼苗的生長均具有一定的促進(jìn)作用[24-25]。DCPTA 處理可以提高吉綠10號(hào)和白綠11號(hào)綠豆的株高和葉面積,增加植株的干物質(zhì)量,增強(qiáng)葉片中SOD、POD和CAT活性,從而顯著增加這2個(gè)綠豆品種的產(chǎn)量[26]
然而,關(guān)于DCPTA對低溫脅迫下番茄葉片葉綠素?zé)晒馓匦院涂寡趸富钚苑矫娴难芯枯^少。為此,筆者通過對番茄幼苗噴施不同質(zhì)量濃度的DCPTA,研究其在低溫及恢復(fù)常溫后幼苗葉片的葉綠素?zé)晒馓匦砸约翱寡趸富钚裕接慏CPTA在番茄幼苗響應(yīng)低溫脅迫過程中的作用機(jī)制,為進(jìn)一步開發(fā)利用DCPTA以及指導(dǎo)冬春季節(jié)設(shè)施番茄栽培提供理論和實(shí)踐借鑒。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料 番茄品種為L-402,購于遼寧園藝種苗有限公司。
1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)DCPTA質(zhì)量濃度分別設(shè)置為0、10、30.50mg/L(0mg/L 為對照),對4葉1心 L-402 番茄幼苗分別噴施以上4個(gè)質(zhì)量濃度DCPTA。噴施結(jié)束后立即置于5(L)/5(D)C ,光周期 14(L)/10(D)h 的光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行低溫處理2d,隨后將幼苗再放置于 25(L)/18(D)C 常溫下進(jìn)行恢復(fù)常溫處理2d,光周期同上,分別于低溫處理第2天和恢復(fù)常溫處理第2天,選取自植株頂端向下第3片葉,用于葉綠素?zé)晒饣緟?shù)和SOD、POD、CAT等活性的測定。
1.3測定指標(biāo)與方法葉綠素含量采用乙醇浸提法測定[27];使用便攜式Hansatech/F葉綠素?zé)晒鈨x進(jìn)行葉綠素?zé)晒鈪?shù)光化學(xué)量子產(chǎn)率(ΦPSI)、最大光化學(xué)量子產(chǎn)量(Fv/Fm) 的測定[28];采用氮藍(lán)四唑法[29]測定SOD活性;采用愈創(chuàng)木酚法[29]測定POD 活性;采用李合生[29]的方法測定CAT活性。
1.4數(shù)據(jù)分析 利用Microsoft Excel 2010、SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。
2結(jié)果與分析
2.1低溫及恢復(fù)常溫處理下DCPTA對番茄幼苗形態(tài)的影響低溫處理第2天和恢復(fù)常溫第2天,噴施不同質(zhì)量濃度DCPTA的幼苗表型見圖1。低溫處理第2天,對照番茄幼苗萎蔫程度較嚴(yán)重,而 10,30,50mg/L DCPTA處理的幼苗葉片萎蔫程度較輕?;謴?fù)常溫第2天,所有處理的番茄幼苗萎蔫程度得到緩解,幼苗基部葉片均出現(xiàn)少量黃葉,但均恢復(fù)正常生長狀態(tài)。
圖1不同處理下番茄幼苗形態(tài)表現(xiàn)
Fig.1Morphological characteristicsof tomato seedlingsunderdifferent treatments
2.2低溫及恢復(fù)常溫處理下DCPTA對番茄幼苗葉綠素含量的影響從圖2可以看出,低溫處理第2天,對照組幼苗葉綠素含量為 3.52mg/g ,外施 10,30,50mg/L 的 DCPTA處理的幼苗葉片葉綠素含量與對照組無顯著差異,葉綠素含量分別為3.74、3.71和 3.45mg/g 。恢復(fù)常溫處理第2天,4個(gè)處理的葉綠素含量均升高,但含量均無顯著差異。
2.3低溫及恢復(fù)常溫處理下DCPTA對番茄幼苗葉片ΦPSⅡ的影響圖3為低溫及恢復(fù)常溫后不同DCPTA處理下番茄幼苗葉片的ΦPSI。低溫處理第2天,對照組番茄幼苗葉片ΦPSI為0.21,外施 10,30,50mg/L DCPTA的3個(gè)處理幼苗葉片的ΦPSI分別為0.25、0.32和0.32,與對照組無顯著差異。恢復(fù)常溫處理第2天,4個(gè)處理幼苗的ΦPSI均顯著高于低溫處理,且各處理間無顯著差異
2.4低溫及恢復(fù)常溫處理下DCPTA對番茄幼苗葉片 Fv/ Fm 的影響不同處理下番茄幼苗葉片的 Fv/Fm 見圖4,低溫處理第2天, 10,50mg/L 的 DCPTA處理幼苗葉片的 Fv Fm 分別為0.43和0.47,二者分別比對照組顯著提高了 53% 和 57% ,但均與 30mg/LDCPTA 處理的 Fv/Fm 無顯著差異。恢復(fù)常溫第2天,所有處理的 Fv/Fm 均顯著增加,但處理間差異不顯著。
注:不同小寫字母表示不同處理間差異顯著( Plt;0.05) 0
Note:Different lowercaseletters indicate significant difference between differenttreatments( Plt;0.05) 》
圖2不同處理下番茄幼苗葉片葉綠素含量變化
Fig.2Changesinchlorophyllcontentoftomato seedlingleaves underdifferenttreatments
2.5低溫及恢復(fù)常溫下DCPTA對番茄葉片SOD活性的影響不同質(zhì)量濃度的DCPTA對番茄 SOD 的活性影響如圖5所示,在低溫處理第2天,噴施 10.50mg/L DCPTA的番茄葉片 SOD活性均較對照顯著提高,而噴施 30mg/L DCPTA時(shí)SOD的活性與對照相比差異不顯著;恢復(fù)常溫第2天,各處理間的SOD活性差異不顯著
2.6低溫及恢復(fù)常溫下DCPTA對番茄葉片POD活性的影響從圖6可以看出,在低溫處理第2天,噴施 10mg/L DCPTA與對照相比,其POD的活性無顯著差異,而噴施30、50mg/L DCPTA的POD活性顯著降低;在恢復(fù)常溫處理第2天,噴施30 和 50mg/L DCPTA葉片的POD活性與低溫處理時(shí)相比無顯著變化,而在 0.10mg/L DCPTA處理下POD活性顯著降低,但恢復(fù)常溫處理下, 10mg/L DCPTA處理的POD 活性顯著高于對照,30 和 50mg/L DCPTA處理與對照無顯著差異。
2.7低溫及恢復(fù)常溫下DCPTA對番茄葉片CAT活性的影響從圖7可以看出,在低溫處理第2天,噴施10、30、50mg/L DCPTA幼苗葉片的CAT的活性均與對照差異不顯著;在恢復(fù)常溫下處理第2天,與低溫處理相比, 50mg/L DCPTA處理下葉片CAT活性顯著提高,而 0.10,30mg/L DCPTA處理無顯著變化,且恢復(fù)常溫后,不同質(zhì)量濃度注:不同小寫字母表示不同處理間差異顯著( Plt;0.05 。
3結(jié)論與討論
番茄是世界范圍內(nèi)廣泛栽培種植的園藝作物,也是茄科作物中的典型代表和研究模式植物[30]。番茄在我國南北方均可栽培,可露地栽培也可設(shè)施栽培。番茄在生長發(fā)育過程中常遇到如低溫、干旱、高溫、鹽漬化、創(chuàng)傷等逆境脅迫,其中低溫是我國北方地區(qū)越冬栽培的主要逆境,嚴(yán)重制約了設(shè)施番茄周年均衡供應(yīng)[31-32]。因此,開展減緩番茄低溫傷害研究,保障設(shè)施栽培番茄的產(chǎn)量和生產(chǎn)品質(zhì),是目前研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn)。
葉綠素是綠色葉片在光合作用時(shí)吸收和傳遞光能的重要色素,其含量在一定程度上與光合作用密切相關(guān)[33]。李麗杰等[20]和謝騰龍等[22]研究發(fā)現(xiàn),DCPTA在一定程度上能夠緩解玉米幼苗在水分脅迫和低溫脅迫下的葉綠素?fù)p傷。該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),外施DCPTA對L-403番茄幼苗低溫以及恢復(fù)常溫處理下葉片葉綠素含量無顯著影響,這可能是低溫處理時(shí)間較短,DCPTA處理效果尚未顯現(xiàn),
葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)可快速且無創(chuàng)地檢測出植物葉片對外界逆境脅迫的敏感性強(qiáng)弱[34]。其參數(shù) ΦPSI|,F(xiàn)v/Fm 的變化可以反映植物光系統(tǒng)Ⅱ反應(yīng)中心在光能吸收、利用方面的情況。ΦPSI是光系統(tǒng)Ⅱ光化學(xué)量子產(chǎn)率,其大小可以反映出植物的光合性能[35]; Fv/Fm 是指光系統(tǒng)Ⅱ最大光化學(xué)效率,是反映植物光合器官受損傷程度的重要指標(biāo)[20]。研究發(fā)現(xiàn),外施DCPTA可顯著提高寒地玉米幼苗的光系統(tǒng)II反應(yīng)中初始熒光值 (Fo) 和 Fv/Fm[36] 。低溫脅迫下,噴施 DCPTA 顯著提高了玉米幼苗葉片的 Fv/Fm[20] 。大豆上的研究發(fā)現(xiàn),噴施 40mg/L DCPTA提高了 Fv/Fm 、最大熒光量( ?Fm )和光化學(xué)淬滅系數(shù) (dP) ,減少了非光化學(xué)淬滅系數(shù) (qN)[37] 。該研究發(fā)現(xiàn),低溫處理下噴施10和 50mg/L DCPTA提高了番茄幼苗的 Fv/Fm ,因此,適宜質(zhì)量濃度的DCPTA提高了番茄幼苗低溫下PSII的穩(wěn)定性,保持了反應(yīng)活性,說明DCPTA增加了番茄對低溫環(huán)境的抗性,這與上述玉米和大豆上的研究結(jié)論一致。
SOD、POD、和CAT等酶在植物抵御低溫氧化損傷方面起著重要的作用[38]。其中SOD可以通過歧化反應(yīng)清除 02- ,POD 和CAT可有效分解因逆境脅迫產(chǎn)生的 。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),噴施DCPTA提高了寒地玉米幼苗的SOD和POD活性[36]。DCPTA 也可以增強(qiáng)綠豆葉片中 SOD、POD 和CAT活性[26]。低溫脅迫下,噴施DCPTA 顯著提高了玉米幼苗葉片的SOD、POD、CAT、APX等活性[20]。外源噴施DCPTA可以增強(qiáng)黃瓜幼苗SOD、CAT、APX和GR等抗氧化酶的活性,從而緩解銅脅迫傷害[23]。該研究發(fā)現(xiàn),在低溫處理第2天,噴施 10.50mg/L DCPTA番茄幼苗的SOD的活性顯著提高,恢復(fù)常溫后,噴施 10mg/L DCPTA幼苗POD活性也有所提高,這與上述玉米和黃瓜幼苗在脅迫條件下的研究結(jié)論一致。而低溫下不同質(zhì)量濃度的DCPTA處理對番茄幼苗的CAT活性無顯著作用,噴施30、50mg/LDCPTA使得POD活性降低,與上述研究結(jié)論有所不同,可能是由于物種不同,或者脅迫處理時(shí)間不同而造成的。
該試驗(yàn)研究了不同質(zhì)量濃度DCPTA對番茄幼苗在低溫2d及恢復(fù)常溫2d條件下葉綠素?zé)晒鈪?shù)及抗氧化酶活性的影響。結(jié)果表明 10mg/L DCPTA可顯著增強(qiáng)低溫下番茄幼苗的 Fv/Fm 和SOD活性,恢復(fù)常溫后可提高幼苗的POD活性,該研究為DCPTA在番茄生產(chǎn)上的應(yīng)用提供了初步指導(dǎo)。
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