基于性狀及特征性成分的不同采收期蓮須分析研究

【中圖分類(lèi)號(hào)】R282.71 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1007-8517（2025）11-0043-05

DOI： 10.3969/j . issn.1007-8517.2025.11. zgmzmjyyzz202511009

Analysisand StudyonDiferent Harvesting StagesofLianxu BasedonCharactersand CharacteristicComponents

ZHANLiqin1，2MA Jie1.2FANG Lei1，2SUNHui1，2LI Wenli1.2DING Ye1，2* 1．Hunan Institute of Drug Inspection and Testing，Changsha 41OOO1，China; 2.Hunan Engineering amp;Technology Research Center for Pharmaceutical Quality Evaluation，Changsha 410o01，China

Abstract：ObjectiveStudyonthecharacteristicsandcharacteristiccomponentsofquercetinandkaempferolindiffrentharvestingperiodsofLianxu.MethodsThetraditionalcharacteridentificationmethodwasusedtocompareandobservethecharactersofLianxu，andthecontentsofquercetinandkaempferolidiferentharvestingperodswerecomparedbyHC.ResultsTereweredifer encesinthecolorofLianxuatdiferentharvestingperiods.ThecontentsofquercetinandkaempferolrangedfromO.3693to0.299 mg?g^-1 and from 1.118 3 to 1.6052mg?g^-1 in the samples collected at flowering stage.The contents of quercetin and kaempferol were 0.0509mg?g^-1 to 0.4025mg?g^-1 and 0.0984mg?g^-1 to 1.4597mg?g^-1 in the samples collected at Lianfang near maturity.Conclusion TheharvestperiodhassignificantefectonthecharacterandcontentofLianu.Thisstudycan providereferencefor the quality control of Lianxu.

Keywords：Lianxu；The HarvestingPeriod;Character;Quercetin；Kaempferol

蓮須為睡蓮科植物蓮NelumbonuciferaGaertn.的干燥雄蕊，夏季花開(kāi)時(shí)選晴天采收，味甘、澀，性平，具有固腎澀精的功效[1]。蓮須主產(chǎn)于湖南、湖北、福建、江蘇、浙江、江西等地。文獻(xiàn)[2-4]顯示蓮須含有豐富天然色素和黃酮類(lèi)化合物，主要成分包括有槲皮素、山柰酚、木犀草素、異槲皮苷、棕櫚酸等。目前，主要采用加熱回流和萃取法直接提取蓮須樣品中的黃酮苷元類(lèi)化合物，操作相對(duì)復(fù)雜，而且忽視了樣品中黃酮苷類(lèi)化合物的存在[5]。蓮須藥理作用多集中在其提取物中，具有收縮子宮、抗腹瀉等作用[6]。蓮須的現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為《中國(guó)藥典》2020年版一部，無(wú)含量測(cè)定的相關(guān)規(guī)定。

中藥材的外觀性狀鑒別是中藥材質(zhì)量鑒別的中藥依據(jù)。顏色是中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要因素，不同顏色通常反映著藥材質(zhì)量差異，是評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量重要依據(jù)[7]。課題組前期研究中發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)蓮須樣本顏色差異明顯，并分析采收期可能是造成顏色差異的重要因素。本研究采用傳統(tǒng)性狀鑒別及高效液相色譜法，比較研究不同采收期的蓮須性狀，比較研究特征成分槲皮素與山柰酚的含量，為蓮須的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1材料

儀器WatersE2695高效液相色譜儀（2998PDA檢測(cè)器）、島津LC20－AT高效液相色譜儀（DAD檢測(cè)器）、色譜柱WelchLPC18（ 250mm×4.6mm 5μm ）、電子分析天平（METTLERAE24O，MET-TLER TOLEDO XSE205DU）。

試藥槲皮素（批號(hào)：100081-201610；純度 99.1% ）山奈酚（批號(hào)：110861－202013；純度 93.2% ）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；甲醇［霍尼韋爾貿(mào)易（上海）有限公司]、水為純凈水［華潤(rùn)怡保飲料（中國(guó)）有限公司]、其他試劑均為分析純。

本研究通過(guò)自采方式共收集蓮的干燥雄蕊10批，均由丁野主任中藥師鑒定為蓮須（NELUMBINISSTAMEN），典型樣品如圖1所示。

2 方法與結(jié)果

2.1傳統(tǒng)性狀研究結(jié)合體視顯微鏡對(duì)樣品進(jìn)行性狀觀察，比較和記錄。結(jié)果顯示，不同采收期蓮須的形狀、大小無(wú)差異，且花藥均包含多數(shù)黃色花粉粒。但在顏色方面差異明顯，具體表現(xiàn)為花開(kāi)期采收蓮須樣本（LX-1、LX-3、LX-5、LX-7、LX-9）顏色均為黃色或黃棕色，蓮房近成熟期采收蓮須樣本（LX-2、LX-4、LX-6、LX-8、LX-10）顏色均為棕褐色。詳細(xì)見(jiàn)表1。

2.2 特征性成分研究

2.2.1溶液的制備對(duì)照品溶液：取槲皮素對(duì)照品 12.67mg ，精密稱(chēng)定，置 25mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得槲皮素對(duì)照品儲(chǔ)備液（ 0.5022mg?mL^-1， 。稱(chēng)取山柰酚對(duì)照品11.87mg ，精密稱(chēng)定，置 25mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得山柰酚對(duì)照品儲(chǔ)備液 （0.4425mg?mL^-1） 。

供試品溶液[8：取本品粉末（過(guò)二號(hào)篩）約1.0g ，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 -25% 鹽酸溶液（4：1）混合溶液 50mL ，密塞，稱(chēng)定重量，加熱回流 ，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜（ 0.45μm ）濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.2 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性色譜柱：WelchLP C₁₈ （ 250mm×4.6mm ， 5μm ）；流動(dòng)相：甲醇（A） -1% 冰醋酸溶液（B）（32：68）；流速：1.0mL/min ；檢測(cè)波長(zhǎng)： 257nm ；柱溫： 30^qC ；理論塔板數(shù)按槲皮素峰和山柰酚峰計(jì)算均不低于 ?3000 。典型圖如圖2所示。

2.2.3線性關(guān)系考察分別精密吸取槲皮素和山柰酚對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，加甲醇稀釋定容，制成混合對(duì)照品線性系列溶液 ① （槲皮素濃度：（20號(hào) 50.2238μg?mL^-1 ；山柰酚濃度： 44.1513μg ：mL^-1 ）、溶液 ② （槲皮素濃度： 25.1119μg?mL^-1 5山柰酚濃度： 22.1256μg?mL^-1 ）、溶液 ③ （槲皮素濃度： 12.5559μg?mL^-1 ；山柰酚濃度： 11.0628μg ： mL^-1 ）、溶液 ④ （槲皮素濃度： 6.2779μg?mL^-1 ：山柰酚濃度： 5.5314μg?mL^-1 ）、溶液 ⑤ （槲皮素濃度： 3.1389μg?mL^-1 ；山奈酚濃度： 2.7657μg ：mL^-1 ）、溶液 ⑥ （槲皮素濃度： 1.5694μg?mL^-1 山柰酚濃度： 1.3828μg?mL^-1 ）、溶液 ⑦ （槲皮素濃度： 0.7847μg?mL^-1 ；山柰酚濃度： 0.6914μg^. mL^-1 ）、溶液 ⑧ （槲皮素濃度： 0.392 3μg?mL^-1 山柰酚濃度： 0.3457μg?mL^-1. ）。吸取上述系列線性溶液 20μL ，按“2.2.2”法測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，槲皮素和山柰酚的回歸方程分別為： y=67 574x-43 198，r=0.9990 . y=81572x-15784r=1 ，結(jié)果表明槲皮素在 0.3923～50.2238μ_o^g?mL^-1 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，山柰酚在 0.3457～44.1513μ_o^g?mL^-1 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.4精密度、 24h 穩(wěn)定性試驗(yàn)取蓮須供試品溶液（編號(hào)：LX-5），按“2.2.2”法連續(xù)進(jìn)樣6次，每次 20μL ，記錄色譜峰面積，計(jì)算槲皮素、山柰酚精密度的RSD（ n=6 ）分別為 0.1% 、 0.8% ；取蓮須供試品溶液（編號(hào)： LX-5 ，分別于配制后的0h，4h，8h，12h，24h ，按“2.2.2”法精密吸取20μL ，記錄色譜峰面積，計(jì)算槲皮素、山柰酚穩(wěn)定性的RSD（ n=6 ）分別為 3.2% ！ 2.2% ；表明方法的精密度、 24h 穩(wěn)定性良好。

2.2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取蓮須粉末（編號(hào)：LX-5）約 1.0g （6份），按“2.2.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.2”項(xiàng)下方法測(cè)定，并計(jì)算槲皮素的平均含量為 0.45mg?g^-1 ，RSD（ n=6 ）為2.4% ；山柰酚的平均含量為 1.69mg?g^-1 ，RSD（ n=6 ） 2.0% ，表明方法的重復(fù)性良好。

2.2.6加樣回收率試驗(yàn)取已知槲皮素和山柰酚含量的樣品（LX-5）約 0.5g （6份），精密稱(chēng)定置錐形瓶中，精密加入槲皮素和山柰酚混合對(duì)照品溶液的儲(chǔ)備液（濃度分別為 0.5022mg/mL ）0.4425mg/mL ） 0.5mL ，揮干溶劑，按“2.2.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.2”項(xiàng)下方法測(cè)定，結(jié)果槲皮素平均加樣回收率為 95.9% ，RSD（ n=6 ）為 1.9% ；結(jié)果山柰酚平均加樣回收率為97.9% ，RSD（ n=6 ）為 1.4% 。

2.2.7樣品測(cè)定按照“2.2.2”項(xiàng)方法測(cè)定收集的10批蓮須樣本，結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果顯示，花盛開(kāi)期采收蓮須的槲皮素含量范圍為 0.369 3～ 0.6299mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.088 2mg?g^-1 ：山柰酚含量范圍為 1. 118 3～1. 605 2mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.1852mg?g^-1 ；槲皮素和山柰酚的總量范圍為 1.487 6～2.235 1mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為0.2519mg?g^-1 。蓮房近成熟期采收蓮須的槲皮素含量范圍為 0.0509～0.4025mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.1576mg?g^-1 ，山柰酚含量范圍為 0.0984～ （20號(hào) 1.4597mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.6140mg?g^-1 ；槲皮素和山柰酚的總量范圍為 0. 149 3～1. 803 6 mg?g^-1 ，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.768 0mg?g^-1 。可知花盛開(kāi)期采收蓮須樣品中的槲皮素和山柰酚的含量范圍較小，且離散程度較小，蓮須質(zhì)量較穩(wěn)定；蓮房近成熟期采收蓮須樣品中的槲皮素和山柰酚的含量范圍較大，且離散程度相對(duì)較大，蓮須質(zhì)量差異較大。

對(duì)10份蓮須樣本按照產(chǎn)地分組，共分成5組，組1包括編號(hào)LX-1和LX-2；組2包括編號(hào)LX-3和LX-4；組3包括編號(hào)LX-5和LX-6；組4包括編號(hào)LX-7和LX-8；組5包括編號(hào)LX-9和LX^-10 。對(duì)產(chǎn)地相同、采收期不同的蓮須進(jìn)行組內(nèi)比較分析，可知花盛開(kāi)期采收蓮須樣本中的槲皮素和山柰酚含量均高于蓮房近成熟期采收蓮須樣本。同時(shí)，通過(guò)組間分析，可知不同產(chǎn)地蓮須的槲皮素和山柰酚含量也存在一定差異，可能因產(chǎn)地不同、蓮的種類(lèi)存在差異所致，詳細(xì)數(shù)據(jù)如圖3和圖4所示。

3分析與結(jié)果

3.1采收期分析課題組在前期進(jìn)行蓮須性狀顯微研究，發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)收集蓮須樣本顏色差異較大。本研究通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研、實(shí)地考察采樣等方式，探索蓮須顏色差異造成的可能原因，比較分析結(jié)果顯示相同產(chǎn)區(qū)花開(kāi)期采收蓮須樣本均為黃色或黃棕色，蓮房近成熟期采收樣本顏色均為棕褐色。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)中觀察到不同采收期蓮須的花藥中均含多數(shù)黃色花粉粒，與文獻(xiàn)調(diào)研一致[4]

3.2實(shí)驗(yàn)條件分析實(shí)驗(yàn)前期考察了提取方式（超聲、加熱回流）、提取時(shí)間（ 30min 、1h、^2h ）、酸水解對(duì)槲皮素及山柰酚的含量影響，最后確定供試品中槲皮素及山柰酚在經(jīng)酸水解加熱回流 ^2h 的提取效果最優(yōu)。

3.3結(jié)果通過(guò)性狀研究，可知在花盛開(kāi)期采收的蓮須樣本性狀穩(wěn)定，顏色均為黃色或黃棕色；通過(guò)特征性成分比較研究，花盛開(kāi)期采收的蓮須樣本槲皮素和山柰酚含量整體均較高；與傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為的蓮須藥材以黃棕色為佳一致[9]。采收期對(duì)中藥質(zhì)量具有顯著影響[10]，嚴(yán)格按照正確采收期“夏季花盛開(kāi)時(shí)”采樣[1，4]，有利于保證蓮須藥材質(zhì)量的穩(wěn)定，有利于蓮須藥材產(chǎn)業(yè)的健康高質(zhì)量發(fā)展。

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