不同產(chǎn)地龍腦樟枝葉化學(xué)成分分析及體外抑菌研究

李思琪　江芊　黃英　胡璇　王凱　官玲亮　于福來　龐玉新

關(guān)鍵詞：龍腦樟；右旋龍腦；相對含量；抑菌活性；天然冰片

中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

龍腦樟[Cinnamomum camphora （L.） Presl]是樟科樟屬樟的多種化學(xué)型[1]之一，通體以枝葉經(jīng)陰干后提取的產(chǎn)物中右旋龍腦含量最高[2]。天然冰片是近乎純凈的右旋龍腦[3]，原為龍腦香科龍腦香的樹干經(jīng)水蒸氣蒸餾而得的白色結(jié)晶[4]，現(xiàn)為植物樟同法而得，具有提神醒腦、清熱止痛[5]之功效，可用于治療熱癥神昏、驚癇痰迷、燒燙傷以及氣閉耳聾等一系列五官閉癥，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、美容以及食品等行業(yè)。由于其主要原產(chǎn)地蘇門答臘已禁止伐樹取腦[6]導(dǎo)致產(chǎn)量下降，進(jìn)口價格上升，而天然冰片過去在我國無本地出產(chǎn)，鑒于此，20 世紀(jì)末我國科研人員找到3 種可高效提取天然冰片的樟科植物，分別為龍腦樟、油樟以及陰香[7]，研究發(fā)現(xiàn)這3 種植物以龍腦樟提取的產(chǎn)物中天然冰片純度最高，右旋龍腦含量在85%以上，因此可將其作為提取天然冰片的首選材料。

目前，龍腦樟的相關(guān)研究主要集中在天然冰片提取、組織培養(yǎng)及質(zhì)量評價等方面，在產(chǎn)地方面的研究相對較少，不同產(chǎn)地的生境條件不同，生長的龍腦樟中化學(xué)成分含量具有一定差異，作為提取天然冰片的最佳植物，這種差異是影響天然冰片臨床藥效的重要因素。因此，尋找龍腦樟的最佳產(chǎn)地是今后規(guī)范種植和實現(xiàn)天然冰片自產(chǎn)的基礎(chǔ)。張宇思等[8]對湖南、江西、浙江以及福建4 個產(chǎn)地的龍腦樟進(jìn)行成分分析，而龍腦樟喜溫喜濕，南方大部分地區(qū)氣候均適宜其種植；在體外抑菌研究方面，楊鵬飛等[9]、丁雄等[10]圍繞多個菌種展開研究，發(fā)現(xiàn)龍腦樟枝葉提取物對這些菌種均表現(xiàn)出不同程度的抑菌活性，尤其對能引起肺曲霉病、皮膚感染以及食物發(fā)霉等的煙曲霉、白色念珠菌以及球毛殼霉的抑菌效果更為顯著，但未見對常見的食源性腸道傳染性致病菌傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌的報道，更無產(chǎn)地間的類比研究。

因此，本研究擬采用GC-MS 技術(shù)對國內(nèi)8個產(chǎn)地龍腦樟枝葉提取物進(jìn)行成分分析，并分別對3 株需氧菌傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、大腸桿菌進(jìn)行產(chǎn)地間體外抑菌活性比較研究，旨在為龍腦樟枝葉提取物的品質(zhì)評價及天然冰片的資源開發(fā)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料與試劑 2～3 年生[11]龍腦樟枝葉，2021 年11 月至2022 年2 月采自湖南新晃縣魚市鎮(zhèn)（湖南魚市）、湖南新晃縣波州鎮(zhèn)（湖南波州）、江西安福、江西吉水、江西都昌、廣東乳源、浙江余杭以及湖北遠(yuǎn)安，經(jīng)廣東藥科大學(xué)龐玉新研究員鑒定為樟科樟屬植物龍腦樟[Cinnamomumcamphora （L.） Presl]的新鮮枝葉，保存于中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所的-80 ℃冰箱內(nèi)。腸炎沙門氏菌亞種（Salmonella enteritidissubsp， G-），傷寒沙門氏菌（Salmonella typhi， G-），腸道產(chǎn)毒素性的大腸桿菌（Escherichia coli， G-）均購自北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院。

色譜純甲醇，北京百靈威科技有限公司；氨芐青霉素（AMP 70080200），Biosharp 生物公司；100%乙醇（分析醇），國藥集團化學(xué)試劑有限公司；水為滅菌蒸餾水；水解酪蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（MHA）與水解酪蛋白胨肉湯培養(yǎng)基（MHB）購自青島高科技工業(yè)園海博生物科技有限公司；胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）與胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備 手提式高速粉碎機（YC-04A），廣州金本機械設(shè)備有限公司；水蒸氣蒸餾裝置， 上海予申儀器有限公司； 氣質(zhì)聯(lián)用儀（7890A/5975C），美國Agilent 公司；恒溫振蕩培養(yǎng)箱（HZQ-X160），太倉市豪誠實驗儀器制造有限公司；紫外可見分光光度計（N4S），上海儀電分析儀器有限公司；SpectraMax Plus384 酶標(biāo)（SpectraMax Plus384），美國Molecular Devices公司；電子天平（BSA124S-CW），賽多利斯科學(xué)儀器（ 北京） 有限公司； 立式蒸汽滅菌鍋（DGL-50GI），江蘇登冠醫(yī)療器械有限公司；凈化工作臺（SW-CJ-IF），蘇州廣源凈化科技有限公司；電熱恒溫培養(yǎng)箱（DNP-9052BS-Ⅲ），上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司。

1.2 方法

1.2.1 天然冰片的提取 采用水蒸氣蒸餾法提取龍腦樟提取物（天然冰片），用無菌蒸餾水清洗龍腦樟新鮮枝葉表面雜質(zhì)，然后用白色紗布吸干水分，并于環(huán)境溫度（20±2）℃下通風(fēng)、避光處陰干后[12]剪碎，每個產(chǎn)地樣品稱取400 g 置于2000 mL圓底燒瓶中，加入適量無菌水與沸石，料水比1︰12[13]，連接蒸餾裝置，加熱至沸騰后，設(shè)置電熱套額定溫度為160～169 ℃，保持微沸3 h，至不再有晶體析出，再將提取物取出置于小棕瓶內(nèi)稱重，并于-4 ℃冰箱內(nèi)保存。

1.2.2 供試品溶液的配制 將提取物用色譜純甲醇配制成濃度為1 mg/mL 的供試品溶液，再經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜過濾[14]后注入色譜瓶。

1.2.3 GC-MS 分析 色譜條件： 色譜柱為CYCLOSIL-B（0.25 mm×30 m， 0.25 μm）毛細(xì)管柱， 色譜柱流速1 mL/min， 載氣為高純氦氣（99.999%），載氣流速15 mL/min，進(jìn)樣量1 μL，進(jìn)樣口溫度220 ℃，程序升溫：以60 ℃為起始溫度，保持2 min，5 ℃/min 升至130 ℃，保持5 min，再以5 ℃/min 升至175 ℃，后運行1 min，分流比20︰1。

質(zhì)譜條件：EI 源，溶劑延遲6 min，離子源溫度230 ℃， 進(jìn)樣口溫度220 ℃， 掃描范圍45～500 amu。

1.2.4 供試菌懸浮液的制備 在無菌操作條件下，將低溫保存的標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌接種至滅菌后的MHB 液體培養(yǎng)基內(nèi)，傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌接種至滅菌后的TSB 液體培養(yǎng)基內(nèi)，并于37 ℃培養(yǎng)12 h，再蘸取菌液于固體培養(yǎng)基中劃線，然后將接種板于37 ℃培養(yǎng)24 h，使之能形成單菌落，挑取典型單個菌落分別接種至滅菌后的MHB 和TSB 培養(yǎng)基中，于37 ℃培養(yǎng)18～24 h，用紫外分光光度計測定菌液濃度OD600 為0.6～0.7，檢驗純度后用相應(yīng)的培養(yǎng)液將菌液稀釋成1×10⁷CFU/mL 的菌懸液，備用。

1.2.5 抑菌圈測定 在無菌操作條件下，將高溫高壓滅菌后的MHA/TSA 培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，待其凝固后將60 μL 菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面，靜置30 min，吸取20 μL 各產(chǎn)地藥液分別滴在藥敏紙片上，靜置30 s 后，放在已涂菌液的培養(yǎng)基上，封口，倒放，恒溫培養(yǎng)12 h，游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑并記錄。以直徑大小作為判定抑菌敏感度的指標(biāo)，將游標(biāo)卡尺測量結(jié)果取平均值，并按《藥理實驗方法學(xué)》中的標(biāo)準(zhǔn)來判別[15]：直徑均值小于10 mm 為抗藥，等于10 mm 為輕度敏感，11～15 mm 之間為中度敏感，16～20 mm 之間為高度敏感。將20 μL 氨芐青霉素（AMP）與100%乙醇分別滴在藥敏紙片上，分別作為陰性對照組和陽性對照組。

1.2.6 最低抑菌濃度（MIC）測定 在無菌操作條件下，取96孔微量板，用移液槍向每排1～11孔各加入100 μL 對應(yīng)的滅菌培養(yǎng)基；再吸取100 μL 相應(yīng)濃度的各產(chǎn)地藥液至第1 孔中，以此孔為起始濃度，對倍稀釋至第10 孔后，吸取100 μL 棄去；然后吸取100 μL 已配置的菌懸液依次加至第1～11 孔中，充分混勻[16]。1～10 孔為試驗組，第11 孔不加藥液為對照組，吸取200μL培養(yǎng)基加至第12 孔，此為空白組。共8 個產(chǎn)地3個菌種，每個產(chǎn)地重復(fù)3 次，每個菌種重復(fù)2 次。隨后將96 微量孔板置于37 ℃培養(yǎng)，12 h 后取出，采用酶標(biāo)儀測定OD600 值，與陽性、陰性對照組比較計算，抑菌率達(dá)到80%的樣品濃度就為該受試菌種的最低抑菌濃度。將氨芐青霉素（AMP）和100%乙醇分別與菌液1︰1（各100 μL）加入空余孔內(nèi)，分別作為陽性對照組和陰性對照組。

1.2.7 最低殺菌濃度（MBC）測定 在無菌操作條件下，將MIC 濃度及上下各一個濃度組的上述混合液各取出50 μL，置于裝有相應(yīng)培養(yǎng)基的平板內(nèi)涂開，于37 ℃培養(yǎng)12 h，觀察有無菌體生長。以無菌生長相應(yīng)孔中的最低濃度即為龍腦樟粗體物對該受試菌種的最低殺菌濃度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

結(jié)合質(zhì)譜對龍腦樟枝葉提取物成分進(jìn)行分析，質(zhì)譜分析結(jié)果在NIST 14.L 譜庫進(jìn)行檢索，對比定性，采用峰面積歸一化法檢測出各化合物的相對含量，并計算重復(fù)實驗數(shù)據(jù)均值。通過SPSS 21.0 軟件采用單因素方差分析（one-wayANOVA）對龍腦樟枝葉提取物的抑菌圈直徑進(jìn)行差異分析（P<0.05）。采用Excel 2022 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 8 個產(chǎn)地龍腦樟化學(xué)成分的相對含量分析

通過GC-MS 分析，得到8 個產(chǎn)地龍腦樟的總離子流疊加色譜圖（圖1）。各組分的質(zhì)譜數(shù)據(jù)經(jīng)計算機檢索標(biāo)準(zhǔn)譜庫，采用峰面積歸一化法檢測出了各個化合物的相對含量，所有產(chǎn)地數(shù)據(jù)歸納匯總見表1，相對含量在0.1%以下的化合物未列出。結(jié)果表明，不同產(chǎn)地龍腦樟葉提取物在其組成和相對含量上均具有一定差異。8 個產(chǎn)地的共有化學(xué)成分有8 種，分別為右旋龍腦、樟腦、d-α-蒎烯、莰烯、d-檸檬烯、α-葎草烯、桉葉油醇以及4-萜烯醇。2020 版《中國藥典》[17]規(guī)定天然冰片中右旋龍腦的含量不得低于96%，右旋龍腦也是影響天然冰片的臨床藥效的主要成分，其成分在8 個產(chǎn)地中的相對含量由高到低依次為湖北遠(yuǎn)安（82.47%）、江西安福（82.23%）、江西都昌（79.57%）、江西吉水（78.55%）、湖南波州（73.88%）、湖南魚市（70.77%）、浙江余杭（70.74%）、廣東乳源（41.63%）。結(jié)合其他共有成分可知，湖北遠(yuǎn)安的提取物中以右旋龍腦含量最高，α-葎草烯含量最低；廣東乳源的提取物中以右旋龍腦含量最低，樟腦含量最高。此外，在其他組成成分中，相對含量較高的成分有樟腦、桉葉油醇、d-檸檬烯、α-葎草烯、1-乙烯基-1-甲基-4-丙-2-亞基-2-丙-1-烯-2-基環(huán)己烷、（1，7，7-3 甲基降冰片烷-2-YL）乙酸等。另外，α-葎草烯在浙江余杭龍腦樟中的含量明顯高于其他7 個產(chǎn)地，樟腦在廣東乳源龍腦樟中的含量明顯高于其他7 個產(chǎn)地，對傘花烴僅在江西吉水樣品中有檢測出來，α-蒎烯僅在江西安福樣品中未檢出，β-月桂烯僅在湖南波州樣品中未檢出，檜烯和石竹烯僅在湖北遠(yuǎn)安樣品中未檢出。

2.2 龍腦樟枝葉提取物的體外抑菌活性

2.2.1 抑菌圈直徑8個產(chǎn)地的龍腦樟枝葉提取物對3 個受試菌種的抑菌圈直徑見表2，在1000 mg/mL 濃度下，均呈現(xiàn)出不同程度的抑制敏感性，在6 mm 藥敏紙片周圍均出現(xiàn)大小不同的清晰抑菌圈，且直徑均大于10 mm，表現(xiàn)為中高度敏感。由表2 可知，8 個產(chǎn)地的龍腦樟枝葉提取物對腸炎沙門氏菌表現(xiàn)出的藥敏性最強，其次為大腸桿菌，對傷寒沙門氏菌的藥敏性相對較弱，所有產(chǎn)地提取物的抑菌圈與陽性對照氨芐青霉素比較均有顯著性差異，而陰性對照100%乙醇并未表現(xiàn)出藥敏性。江西吉水的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌的抑菌敏感性高于江西都昌、廣東乳源以及湖南波州（P<0.05）；湖北遠(yuǎn)安的龍腦樟枝葉提取物對傷寒沙門氏菌的抑菌敏感性高于江西都昌、江西吉水、廣東乳源、浙江余杭以及湖南波州（P<0.05）；湖北遠(yuǎn)安的龍腦樟枝葉提取物對腸炎沙門氏菌的抑菌敏感性高于江西都昌、江西安福、江西吉水、廣東乳源、浙江余杭以及湖南波州（P<0.05）。因此，江西吉水和湖北遠(yuǎn)安2 個產(chǎn)地的龍腦樟枝葉提取物分別對大腸桿菌、傷寒沙門氏菌以及腸炎沙門氏菌的抑菌敏感度高于其他產(chǎn)地，且湖北遠(yuǎn)安產(chǎn)龍腦樟同時對2 種菌種均表現(xiàn)出較強的抑菌活性。抑菌圈直徑大小在一定程度上直觀地反映了抑菌活性敏感度的強弱，直徑越大代表抑菌敏感度越強，而整體抑菌活性需結(jié)合其最低抑菌濃度和最低殺菌濃度來綜合判斷。

2.2.2 最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC） 8 個產(chǎn)地的龍腦樟枝葉提取物對3 個菌種均呈現(xiàn)出不同的抑制作用，MIC 值在250～1250 μg/mL 之間。其中，江西安福的龍腦樟枝葉提取物抑菌效果最好（MIC 值在250～500 μg/mL之間），以江西吉水的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌和腸炎沙門氏菌，江西安福和湖北遠(yuǎn)安對傷寒沙門氏菌的抑制效果最好（表3）。8 個產(chǎn)地中，以湖南魚市、廣東乳源、浙江余杭以及湖南波州的龍腦樟枝葉提取物對3 個受試菌種的殺菌效果最佳（MBC 值均為500 μg/mL），而江西安福的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌的殺菌效果相對較差，湖北遠(yuǎn)安和江西吉水的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌，江西安福對傷寒沙門氏菌以及江西都昌和江西安福對腸炎沙門氏菌無殺菌效果（表4）。

研究結(jié)果表明，不同產(chǎn)地龍腦樟對不同菌種的抑菌活性具有一定差異，其中，對大腸桿菌的抑菌效果表現(xiàn)為：江西吉水>江西都昌=湖南魚市=江西安福=廣東乳源=浙江余杭=湖南波州>湖北遠(yuǎn)安；對傷寒沙門氏菌的抑菌效果表現(xiàn)為：湖北遠(yuǎn)安=江西安福>江西都昌=湖南魚市>江西吉水=湖南波州>廣東乳源=浙江余杭；對腸炎沙門氏菌的抑菌效果表現(xiàn)為：江西吉水>江西都昌=湖南魚市=湖北遠(yuǎn)安=江西安福=廣東乳源=浙江余杭>湖南波州。殺菌效果方面，除湖北遠(yuǎn)安和江西吉水的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌無殺菌效果外，其余產(chǎn)地表現(xiàn)為：江西都昌=湖南魚市=廣東乳源=浙江余杭=湖南波州>江西安福；除江西安福的龍腦樟枝葉提取物對傷寒沙門氏菌無殺菌效果外，其余產(chǎn)地殺菌效果良好且無明顯差異；除江西都昌和江西安福的龍腦樟枝葉提取物對腸炎沙門氏菌無殺菌效果外，其余產(chǎn)地殺菌效果良好且無明顯差異。

3 討論

本研究采用水蒸氣蒸餾法提取龍腦樟枝葉提取物，簡單有效，所提取的天然冰片化學(xué)成分種類多樣，其中絕大多數(shù)為萜類化合物，其中以單萜和倍半萜為主，與張宇思等[8]、付宇新等[18]的研究結(jié)果一致，但在含量上存在差異，這可能與不同產(chǎn)地的海拔、光溫水氣等生長環(huán)境、種植方式以及采集方法有關(guān)。在產(chǎn)地研究方面，除湖南新晃和江西吉安2 個傳統(tǒng)產(chǎn)地外，新增了湖北遠(yuǎn)安、江西都昌、浙江余杭以及廣東乳源等地，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)這8 個產(chǎn)地中，右旋龍腦的相對含量超過80%的僅有湖北遠(yuǎn)安（82.47%）和江西安福（82.23%），超過70%的有江西都昌（79.57%）、江西吉水（78.55%）、湖南波州（73.88%）、湖南魚市（70.77%）以及浙江余杭（70.74%），僅廣東乳源（41.63%）低于55%。其中，僅湖北遠(yuǎn)安含有異龍腦（0.32%），含有樟腦成分分別為湖北遠(yuǎn)安（5.41%）、江西安福（5.00%）、江西都昌（ 1.39% ）、江西吉水（ 1.60% ）、湖南波州（ 16.90% ）、湖南魚市（ 15.84% ）、浙江余杭（12.09%）以及廣東乳源（46.65%），其他共有成分的相對含量無明顯差異。

在抑菌活性方面，與其他產(chǎn)地相比，江西吉水的龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌抑菌效果最好，其中抑菌圈直徑與楊鵬飛等[9]的研究結(jié)果基本一致，最低抑菌濃度（MIC）與楊鵬飛等[9]、丁雄等[10]的研究結(jié)果基本一致，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了最低殺菌濃度（MBC），發(fā)現(xiàn)江西都昌、湖南魚市、浙江余杭以及湖南波州的龍腦樟枝葉提取物在500 μg/mL 濃度均下有殺菌作用；此外新增傷寒沙門氏菌與腸炎沙門氏菌2 個常見致病菌，研究結(jié)果顯示，江西安福和湖北遠(yuǎn)安的龍腦樟枝葉提取物對傷寒沙門氏菌抑菌效果最佳，江西都昌、湖北遠(yuǎn)安、湖南魚市、江西吉水、浙江余杭以及湖南波州的龍腦樟枝葉提取物在500 μg/mL 濃度下可殺滅傷寒沙門氏菌，湖北遠(yuǎn)安的龍腦樟枝葉提取物綜合抑菌效果最好；對于腸炎沙門氏菌，以湖北遠(yuǎn)安的龍腦樟枝葉提取物抑菌敏感性最高，以江西吉水的抑菌效果最好，湖北遠(yuǎn)安、湖南魚市、江西吉水、浙江余杭以及湖南波州在500 μg/mL 濃度下均有殺菌作用，湖北遠(yuǎn)安和江西吉水的綜合抑菌效果最好。不同產(chǎn)地的龍腦樟枝葉提取物對不同菌種的抑菌效果不同，這可能與生境條件、種植方式以及菌力強弱等因素有關(guān)，如生長在云南、廣西、海南[19]等地的穿心蓮抑菌效果最好，是由于這些地區(qū)的生境條件溫暖濕潤，適宜穿心蓮的生長發(fā)育。

綜上所述，8 個產(chǎn)地龍腦樟枝葉提取物對大腸桿菌、傷寒沙門氏菌以及腸炎沙門氏菌均有抑制作用，其中對大腸桿菌的研究結(jié)果與前人基本一致。而8 個產(chǎn)地龍腦樟枝葉提取物的抑菌活性差異可能與右旋龍腦和樟腦的相對含量和配比有關(guān)，湖北遠(yuǎn)安、江西安福以及江西吉水的抑菌活性優(yōu)于其他產(chǎn)地，這幾個產(chǎn)地的龍腦樟枝葉中右旋龍腦相對含量較高，分別達(dá)82.47%、82.23%、78.55%，而樟腦含量較低，分別為5.41%、5.00%、1.60%。

傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌均屬于革蘭氏陰性菌。前者的內(nèi)毒素注射可引起發(fā)熱、白細(xì)胞減少，大量注射可引起死亡；后者是可引起急性胃腸炎[20]的人畜共患病原體，由此菌引起的急性胃腸炎在世界各國有增加的趨勢，有調(diào)查表明，這與食用含此致病菌的雞蛋和家禽有關(guān)[21]。雞蛋和家禽是人類常用食物，從雞蛋中檢測出的沙門氏菌多種多樣，其中腸炎沙門氏菌的檢出率最高，為最主要的血清型[22]。因此本研究有助于降低腸炎沙門氏菌、傷寒沙門氏菌以及大腸桿菌的感染風(fēng)險。

天然冰片在其原產(chǎn)地印尼、菲律賓以及馬來西亞等東南亞地區(qū)的產(chǎn)量非常有限，并且隨著歐盟及美國宣布禁用進(jìn)口以合成冰片為原料藥品[23]，天然冰片自主產(chǎn)業(yè)化發(fā)展已成為必然趨勢，而自主產(chǎn)業(yè)化發(fā)展是建立在確定道地產(chǎn)區(qū)、規(guī)范化種植的基礎(chǔ)上的，目前尚未確定龍腦樟的道地產(chǎn)區(qū)。本研究在前人的研究基礎(chǔ)上擴大了龍腦樟產(chǎn)地的范圍，并且探究了不同產(chǎn)地間龍腦樟提取物的抑菌活性差異。據(jù)悉，國內(nèi)關(guān)于龍腦樟的栽培有確切產(chǎn)地的有貴州、江蘇、福建以及臺灣等[24]。本研究中的8 個產(chǎn)地雖涵蓋了大部分的龍腦樟種植地，但尚不全面，今后將開展更深入全面的研究，以期為龍腦樟的種植發(fā)展和臨床應(yīng)用提供有力支撐。