鮮竹瀝中1個新的萘酚

喻何云，趙敏敏，任琦，姚金龍，羅躍華，付輝政

1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監(jiān)督管理局中成藥質量評價重點實驗室，江西省藥品與醫(yī)療器械質量工程技術研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省醫(yī)藥學校，江西 南昌 330001

鮮竹瀝是一味獨具特色的傳統(tǒng)中藥，《本草衍義》稱之為“痰家之圣劑”，為單方制劑鮮竹瀝和復方制劑復方鮮竹瀝液的主要原料，臨床應用廣泛［1-2］。鮮竹瀝始載于梁代陶弘景的《本草經集注》，收載在1977年版《中國藥典》一部［3］，之后歷版藥典均未收載，現(xiàn)被《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》（1992年）中藥材（第一冊）收載，其標準中制法為禾本科植物粉綠竹、凈竹、毛竹及同屬的數(shù)種植物的鮮桿經加熱后自然瀝出的液體，有清熱化痰作用。臨床應用于肺熱咳嗽、痰多、中風舌強、小兒驚風、氣喘胸悶等癥狀［4］?，F(xiàn)行標準中涉及的檢驗項目有性狀、以酪氨酸為對照的薄層色譜鑒別以及pH 值、總固體、相對密度檢查項［4］，標準較低，產品質量不易得到有效控制。國家藥典會將藥材鮮竹瀝列為2019年國家藥品標準提高品種，研究表明，鮮竹瀝主要含有酚酸、木脂素、氨基酸、糖等成分［5-12］。然而，目前對于鮮竹瀝的炮制工藝機制以及表征其炮制工藝的質量標志物還沒有確定，為了揭示其炮制工藝機制，建立反映其內在質量并符合工藝特點的質量標準，使得鮮竹瀝價值能夠得以充分挖掘，筆者在課題組化學成分和藥理作用的前期研究基礎上［13-18］，繼續(xù)運用現(xiàn)代先進的分析手段，從藥材鮮竹瀝活性部位乙酸乙酯中分離得到了1個化合物，確定為5-（4-羥基-3，5-二甲氧基苯基）-1，3-二甲氧基-2-萘酚，該化合物為新化合物。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UltiMate 3000 高效液相色譜儀（美國賽默飛公司）；Varian UNITY INOVA 600 超導核磁共振儀（美國Varian 公司）；島津20-AR 型半制備色譜儀（日本島津公司）；Buchi 中壓制備色譜儀（瑞士Buchi公司）；Micromass ZabSpec 質譜儀（美國Micromass公司）；EYELA SB-1000 旋轉蒸發(fā)儀（日本EYELA公司）；UV-260 紫外分光光度儀（日本島津公司）；XT5B 熔點儀（天津天光光學儀器有限公司）。C18填料為日本YMC 產品，制備色譜柱為YMC（5 μm，250 mm×20 mm）；柱層層析硅膠、薄層層析硅膠（青島海洋化工廠）。

1.2 試藥

CD3OD 為美國劍橋公司產品，水為Milli-Q 超純水，甲醇和二氯甲烷為分析級試劑。毛竹采自江西省宜春市銅鼓縣，由江西省林業(yè)科學院余林博士鑒定為禾本科剛竹屬植物毛竹P.edulis（Carr.）J.Houz.的新鮮桿莖。標本現(xiàn)于江西省藥品檢驗檢測研究院中藥標本館存放。

2 方法與結果

2.1 提取和制備方法

取新鮮毛竹（5 t），先進行切斷成1 米長左右并開片，將處理好的竹片放置在密閉不銹鋼罐中，用生物燃料加熱，收集濾出的液體，將液體濃縮得到鮮竹瀝浸膏。取浸膏，用等量乙酸乙酯溶劑萃取3 次，合并萃取液，低溫減壓濃縮后得乙酸乙酯萃取部位干膏280 g。將干膏用硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（10∶1～6∶4）洗脫，薄層色譜檢視合并洗脫液，得流分Fr.1～Fr.9。Fr.2（13.6 g）進一步采用硅膠層析柱分離，二氯甲烷-甲醇（60∶1～30∶1）洗脫，薄層色譜檢視合并洗脫液，得流分Fr.2-1～Fr.2-15。Fr.2-9（2.3 g）再經過中壓ODS 柱色譜分離，以30%～60%甲醇為流動相梯度洗脫，經高效液相色譜檢測，合并洗脫液得流分Fr.2-9-1～Fr.2-9-10。Fr.2-9-5（56.9 mg）經反相半制備液相色譜，以甲醇-水（30∶70）為流動相，得到化合物1（21 mg，tR=78.5 min）。

2.2 化學成分鑒定

化合物1：白色粉末，易溶于甲醇、丙酮、吡啶。mp 192～193 ℃；UV（CH3OH）λmax204 nm 和295 nm。HR-ESI-Q-TOF-MS 質譜給出準分子離子峰m/z:355.116 4［M-H］-（計算值為C20H19O6，355.118 2），根據(jù)氫譜和碳譜數(shù)據(jù)，確定化合物1的分子式為C20H20O6。

在化合物1 的1H-NMR 譜中，顯示了一組ABC 鄰位偶合系統(tǒng)苯環(huán)質子信號：δH7.22（1H,d,J=7.2 Hz），7.34（1H,t,J=8.4,7.2 Hz），7.90（1H,d,J=8.4 Hz）；一組A2苯環(huán)質子信號：δH6.73（2H,s）；一個苯環(huán)5 取代的單峰質子信號：δH7.12（1H,s）；4個甲氧基信號：δH3.96（3H,s），3.81（3H,s），3.87（6H,s）。在化合物1 的13C-NMR 譜中，顯示20個碳信號，其中16個苯環(huán)碳信號；4個甲氧基碳信號。根據(jù)上述數(shù)據(jù)初步推測化合物1 可能為萘酚類化合物，將化合物1 與文獻［19］所報道的Annulated HS結構比較，分子式一致，且結構基本相似，唯一不同的是4-羥基-3,5-二甲氧基苯基與萘環(huán)的連接位置不同。

在化合物1 的HMBC 中（圖1），H-2',6'（δH6.73）與C-4（δC101.8）、C-5（δC140.8）、C-6（δC126.2）、C-9（δC127.8）相關，表明4-羥基-3,5-二甲氧基苯基連接在萘環(huán)的C-5 位。另外，1-OMe（δH3.81）與C-1（δC142.1）存在相關聯(lián)、3-OMe（δH3.96）與C-3（δC151.0）存在相關聯(lián)，說明2個甲氧基分別與C-1 和C-3位相連接。另外，OMe-3'，5'（δH3.87）與C-3''，5''（δC149.4）相關，表明2個甲氧基位于C-3'和C-5'位。

綜上所述，化合物1 結構鑒定為5-（4-羥基-3,5-二甲氧基苯基）-1,3-二甲氧基-2-萘酚，結構和主要的HMBC 相關圖見圖1。詳細核磁數(shù)據(jù)見表1。

表1 化合物1的1H-NMR 和13C-NMR波譜數(shù)據(jù)（600/150 MHz，CD3OD）

圖1 化合物1的結構和主要的HMBC相關圖

3 結論

鮮竹瀝作為一味療效確切且獨具特色的傳統(tǒng)中藥，其發(fā)揮作用的藥效物質還不明確，制約了對其進行深度開發(fā)與利用。本課題組在原來研究基礎上繼續(xù)對鮮竹瀝化學成分進行研究，首次從鮮竹瀝中獲得1個新的萘酚類化合物，通過多種核磁波譜手段確定了其準確結構，命名為鮮竹瀝素A，豐富了天然產物結構，也為揭示鮮竹瀝鎮(zhèn)咳祛痰功效提供了物質基礎。