快速冰凍切片技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用評價

李延新　杜雄　劉永霞

【摘要】目的：探索快速冰凍切片技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用價值。方法：選取我院病理科收集的已經(jīng)確診腫瘤的60例患者的病理組織樣本，所有樣本都使用傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)和快速冰凍切片技術(shù)進行處理，比較分析兩種方法的診斷準(zhǔn)確性和切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)的綜合評分。結(jié)果：快速冰凍切片的診斷準(zhǔn)確率為96.66%，高于傳統(tǒng)石蠟切片的診斷準(zhǔn)確率83.33%（P<0.05）;快速冰凍切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)綜合評分（8.64±1.03）分高于傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)的（6.27±1.94）分（P<0.05）。結(jié)論：與傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)相比，快速冰凍切片技術(shù)的診斷準(zhǔn)確率更高、切片質(zhì)量更好，值得在臨床診斷中推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】快速冰凍切片技術(shù);傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù);病理診斷

病理診斷是臨床中最重要的環(huán)節(jié)之一，它的準(zhǔn)確度請直接影響到后續(xù)的治療。隨著醫(yī)療水平發(fā)展，出現(xiàn)了較傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)更為先進的快速冰凍切片技術(shù)，是指在特定的溫度下，將組織樣本進行冷凍，等到樣本達到規(guī)定硬度后進行檢測。這種方法簡單易行，可以提高檢驗效率。本次就對快速冰凍切片技術(shù)的應(yīng)用價值進行了研究探討，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取我院病理科收集的已經(jīng)確診腫瘤的60例患者的病理組織樣本作為研究對象，其中男性病理切片樣本33例，女性病理切片樣本27例;卵巢組織16例，乳腺組織10例，甲狀腺組織34例。以上病理切片組織采用傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)和快速冰凍切片技術(shù)處理。

1.2方法

1.2.1傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)（1）取材時，選取新鮮活體組織，取樣大小為15厘米乘25厘米，厚度為0.3到0.5厘米，如果厚度過小薄，切割時會損傷支撐組織頭部，影響切片效果。（2）將10%濃度的福爾馬林加入活體組織中，然后進行組織脫水和透明處理，再將組織浸泡于石蠟溶液內(nèi)，溶液溫度為70攝氏度，浸泡時間3小時。（3）包埋、制片。（4）對切片上的組織分布情況用肉眼進行觀察，掌握大致情況。大組織周圍的小組織也不可以漏查。（5）使用顯微鏡，重點觀察病變組織細胞，觀察細胞外形、細胞清晰度、細胞胞漿、細胞間的排列關(guān)系。同時要對患者的臨床病史進行反復(fù)核對檢查，作為臨床閱片參考。

1.2.2快速冰凍切片技術(shù)（1）選取新鮮活體組織，取樣時避開壞死組織和出血點。注意清理樣品中的脂肪、毛發(fā)，取樣大小為15厘米乘25厘米，厚度為0.3到0.5厘米，樣品組織不可出現(xiàn)褶皺。（2）將組織樣本冷凍，根據(jù)不同組織的耐寒性不同，設(shè)定合適的溫度和冷凍時間，保證合適的冰晶形成速度。如果冷凍時間過長，會導(dǎo)致組織皮層變得脆硬，損傷細胞核，影響診斷結(jié)果。例如甲狀腺組織選擇零下19-零下17攝氏度;乳腺組織選擇零下29-零下21攝氏度。甲狀腺組織冷凍2.5分鐘，乳腺和卵巢均冷凍3分鐘l 2l。（3）冷凍后，將組織切片放置在載玻片上，滴入一定量的固定液，固定兩分鐘。（4）用蘇木素對樣本染色兩分鐘。（5）沖洗染色后的組織，在沖洗的清水變?yōu)樗{色兩分鐘后，滴入水溶性伊紅染色。（6）用乙醇二甲苯脫水透明，再用中性樹脂封片，封片時保持膠量適中，避免出現(xiàn)氣泡或者膠水溢出，最后進行觀察。

1.3觀察指標(biāo)

（1）對兩種檢驗方法的檢驗準(zhǔn)確率進行統(tǒng)計分析。（2）由我院的兩名資深病理科醫(yī)師作為評委，對兩組切片從清晰度、細胞結(jié)構(gòu)、細胞形態(tài)方面進行評分，滿分10分，比較兩組的綜合評分。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行X²檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)綜合評分比較

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快速冰凍切片的切片技術(shù)相關(guān)指標(biāo)綜合評分（8.64±1.03）分，高于傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)的（6.27±1.94）分（P<0.05），t=8.357。

2.2兩組切片方法診斷準(zhǔn)確率比較

快速冰凍切片的檢驗總準(zhǔn)確率為96.66%，大于傳統(tǒng)石蠟切片的83.33%，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3討論

病理診斷技術(shù)是疾病診斷中最主要的手段之一，通過切片技術(shù)將組織樣品切片檢驗，傳統(tǒng)的石蠟切片技術(shù)花費時間較長，大約需要耗時24小時至48小時，效率很低，難以滿足臨床需要。而隨著醫(yī)療水平發(fā)展，出現(xiàn)了現(xiàn)代化的快速冷凍切片技術(shù)，該技術(shù)不需要進行樣品的固定、脫水以及石蠟包埋等步驟，可以將檢驗時間縮短至45分鐘，大大提高了診斷效率，滿足了患者及患者家屬迫切想知道診斷結(jié)果的心理;同時，快速冰凍切片技術(shù)還可以有效地保證組織切片樣品的結(jié)構(gòu)和酶活性，能夠保證較高的確診率，減少誤診的情況發(fā)生，為患者的下一步治療提供可靠依據(jù)，有助于主治醫(yī)師不斷改進治療方案。

本次研究就對快速冰凍切片技術(shù)進行了分析，結(jié)果顯示，相對于傳統(tǒng)石蠟切片技術(shù)，冰凍切片技術(shù)診斷準(zhǔn)確率更高，清晰度、細胞結(jié)構(gòu)、細胞形態(tài)三個方面的綜合評分也更高。另一方面，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確性，要求相關(guān)人員的冷凍操作技術(shù)嫻熟，能夠準(zhǔn)確掌握冷凍溫度、冷凍時間、切片厚度等指標(biāo)，保證檢驗?zāi)軌蝽樌M行。

綜上所述，在臨床病理診斷中，快速冰凍切片技術(shù)可以大大縮短報告生成時間，提高診斷準(zhǔn)確率，為后續(xù)的治療提供可靠依據(jù)，值得在臨床推廣使用。