細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系研究

周波　黃麗梅　甘偉山　楊帆　丁德先

【摘要】 目的：探討細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系。方法：選取2017年7月-2018年6月就診于本院門診細(xì)菌性陰道?。˙V）患者350例為BV陽性組，同時按1︰1配對，選擇同一時期在該醫(yī)院同科室就診的其他疾病患者350例作為BV陰性組，調(diào)查BV發(fā)生率，以及BV患者中高危型HPV感染流行概況，探討HPV感染危險因素，分析細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系。結(jié)果：BV陽性組高危HPV陽性率6.57%（23/350）高于BV陰性組3.14%（11/350）;高危HPV陽性患者BV陽性率67.65%（23/34）高于高危HPV陰性患者49.10%（327/666）;Logisitic回歸分析顯示年齡、避孕方式、宮頸柱狀上皮外移、BV陽性是宮頸高危型HPV感染發(fā)生的影響因素;BV陽性患者隨訪1年宮頸高危型HPV轉(zhuǎn)陰率為34.78%（8/23）低于BV陰性組72.73%（8/11）。結(jié)論：年齡、避孕方式、宮頸柱狀上皮外移、BV陽性是宮頸高危型HPV感染發(fā)生的影響因素，細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染有關(guān)，BV陰性者宮頸高危型HPV感染轉(zhuǎn)陰率更高。

【關(guān)鍵詞】 細(xì)菌性陰道病 人乳頭瘤病毒 關(guān)系

[Abstract] Objective： To explore the relationship between bacterial vaginosis （BV） and high-risk cervical HPV infection. Method： A total of 350 BV patients who were treated in outpatient department of the hospital from July 2017 to June 2018 were enrolled as positive BV group. Another 350 patients with other diseases who were treated in the same department of the hospital during the same period were enrolled as negative BV group. The incidence of BV and prevalence of middle and high-risk HPV infection in BV patients were investigated. The risk factors of HPV infection were explored. The relationship between BV and high-risk cervical HPV infection was analyzed. Result： The positive rate of high-risk HPV in positive BV group was higher than that in negative BV group [6.57% （23/350） vs 3.14% （11/350）]. The positive rate of BV in high-risk positive HPV patients was higher than that in high-risk negative HPV patients [67.65% （23/34） vs 49.10% （327/666）]. Logisitic regression analysis showed that age， contraceptive methods， cervical columnar epithelium migration and positive BV were the influencing factors of high-risk cervical HPV infection. After 1 year of follow up， negative conversion ratio of high-risk cervical HPV in positive BV patients was lower than that in negative BV patients [34.78 % （8/23） vs 72.73% （8/11）]. Conclusion： Age， contraceptive methods， cervical columnar epithelium migration and positive BV are the influencing factors of high-risk cervical HPV infection. BV is related to high-risk cervical HPV infection. The negative conversion ratio of high-risk cervical HPV infection is higher in negative BV patients.

[Key words] Bacterial vaginosis Human papillomavirus Relationship

First-authors address： Kuiyong Peoples Hospital in Dapeng New District， Shenzhen 518119， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.16.008

宮頸癌為婦科常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居世界范圍內(nèi)女性生殖道惡性腫瘤中的第二位[1-2]。依據(jù)大量分子生物學(xué)以及流行病學(xué)研究結(jié)果表明高危型人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）持續(xù)性感染是導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變以及宮頸癌發(fā)生的必要條件[3-4]。HPV作為女性生殖道常見的病原微生物，絕大多數(shù)會自行清除，然而有較少的一部分可能發(fā)生持續(xù)性的感染。依照HPV基因型和宮頸癌相關(guān)程度，可分為高危型和低危型[5-6]。低危型HPV可引起患者肛門與生殖器疣的輕度病變，而高危型HPV持續(xù)性感染的發(fā)生則可致使患者子宮頸以及肛門鱗狀上皮發(fā)生高度病變，并有可能逐步發(fā)展為子宮頸癌或肛門癌[7-8]。細(xì)菌性陰道?。˙acterial vaginosis，BV）主要臨床特征為陰道pH升高、陰道中乳桿菌減少甚至消失，其他相關(guān)微生物明顯增多[9]。本研究對細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系進(jìn)行研究，以確定BV感染的發(fā)生是否增加HPV持續(xù)感染風(fēng)險，旨在了解本地區(qū)育齡婦女HR-HPV感染流行現(xiàn)狀及其相關(guān)危險因素，為降低HPV感染率，減少宮頸癌發(fā)生提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年7月-2018年6月就診于深圳市大鵬區(qū)葵涌人民醫(yī)院婦產(chǎn)科門診細(xì)菌性陰道病患者為病例組，同時按1︰1配對，選擇同一時期在該醫(yī)院同科室就診的其他疾病患者為對照組，要求年齡、民族、職業(yè)等相近或一致。患者知情同意前提下，填寫調(diào)查問卷，內(nèi)容包括年齡、文化程度、職業(yè)、婚姻狀況、懷孕次數(shù)、流產(chǎn)次數(shù)、分娩次數(shù)、初次懷孕年齡、初次性生活年齡、性生活頻率、煙酒史、惡性腫瘤、家族史等。所有研究對象均行陰道分泌物涂片及HPV-DNA（HC2）檢測。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①非妊娠期女性，平時月經(jīng)規(guī)律;②年齡≥15歲;③未接受過抗HPV治療;④自愿接受陰道分泌物檢測。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①就診時或1年內(nèi)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查異常;②陰道異常出血;③合并內(nèi)外科疾病或免疫系統(tǒng)疾病;④近1個月內(nèi)使用過抗生素、性激素以及免疫抑制劑者;⑤陰道分泌物取樣檢查前3 d有性生活、陰道上以及陰道灌洗者;⑥急性生殖道感染或生殖道腫瘤者;⑦子宮全切或次全切術(shù)者。

1.2 標(biāo)本的采取及運(yùn)送 取材時間多為月經(jīng)來潮前10 d以內(nèi)，暴露宮頸，取陰道上1/3側(cè)壁分泌物行生殖道微生態(tài)檢測;無菌刷在宮頸表面順時針?biāo)?圈，樣本留作HC2檢測。（標(biāo)本不能混有血液及反復(fù)凍融）。

1.3 實驗方法

1.3.1 生殖道微生態(tài)檢測 用1根無菌棉拭子于陰道側(cè)壁近穹窿處取陰道分泌物，于載玻片中央涂成薄層，經(jīng)革蘭染色后置于油鏡下鏡檢觀察相關(guān)指標(biāo)（清潔度、pH值、念珠菌、線索細(xì)胞及乳酸桿菌等）。

1.3.2 HPV-DNA檢測 采用亞能生物科技有限公司基因芯片PCR反向雜交法測定HPV分型，型別包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83。

1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn) （1）HPV陽性：HC2檢查結(jié)果RLU/CO>1.0 pg/mL。（2）BV陽性：①陰道分泌物涂片清潔度為I或Ⅱ度，線索細(xì)胞陽性，胺臭味實驗陽性，陰道pH>4.5，陰道均質(zhì)稀薄分泌物（其中至少3項陽性可診斷）;②宮頸液基細(xì)胞學(xué)未見宮頸上皮內(nèi)病變及惡變[3]。

1.5 觀察指標(biāo) （1）BV患者中的HPV感染率、非BV患者中的HPV感染率;（2）HPV陽性者中BV感染率、HPV陰性者中BV感染率;（3）分析BV與HPV感染率的相關(guān)性;（4）分析育齡婦女HPV感染危險因素;（5）對合并細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的患者進(jìn)行門診隨訪12個月，觀察高危型HPV感染轉(zhuǎn)歸情況。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 19.0進(jìn)行分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，比較采用字2檢驗，進(jìn)行相對危險度（OR）分析，采用Logisitic回歸模型進(jìn)行多因素分析，計算OR值與可信區(qū)間（95%CI），以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系 350例BV陽性者中高危HPV陽性23例，350例BV陰性者中高危HPV陽性11例，BV陽性組高危HPV陽性率6.57%（23/350）高于BV陰性組3.14%（11/350）（字2=4.452，P=0.035）。34例高危HPV陽性者中BV陽性23例，666例高危HPV陰性者中BV陽性327例，高危HPV陽性患者BV陽性率67.65%（23/34）高于高危HPV陰性患者49.10%（327/666）（字2=4.452，P=0.035）。

2.2 影響宮頸高危型HPV感染發(fā)生的單因素分析 高危HPV陽性組與陰性組患者經(jīng)濟(jì)收入、吸煙史、飲酒史、初次性生活年齡、妊娠次數(shù)比較（P>0.05）;年齡26～40歲、每月性生活次數(shù)≥9次、宮頸炎癥史、宮頸柱狀上皮外移史、BV陽性患者高危HPV發(fā)生率高于其他患者，使用避孕套作為避孕方式患者高危HPV發(fā)生率低于其他患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3 影響宮頸高危型HPV感染發(fā)生的多因素分析 將上述因素差異有統(tǒng)計學(xué)意義項納入多因素Logistic回歸模型，以宮頸高危型HPV感染發(fā)生作為因變量，以上述差異有統(tǒng)計學(xué)意義項作為自變量，并進(jìn)行賦值：年齡（≤25歲=0，26～40歲=1，≥41歲=2）、每月性生活次數(shù)（≤4次=0，5～8次=1，≥9次=2）、避孕方式（無=0，避孕藥=1，避孕套=2，節(jié)育環(huán)=3）、宮頸柱狀上皮外移（否=0，是=1）、宮頸炎癥（否=0，是=1）、BV陽性（否=0，是=1）。Logisitic回歸分析顯示年齡、避孕方式、宮頸柱狀上皮外移、BV陽性是宮頸高危型HPV感染發(fā)生的影響因素。見表2。

2.4 細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV轉(zhuǎn)陰率的關(guān)系 BV陽性患者隨訪1年宮頸高危型HPV轉(zhuǎn)陰率為34.78%（8/23）低于BV陰性組72.73%（8/11）（字2=4.300，P=0.038）。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計，2015年我國宮頸癌新發(fā)病例將近10萬例，并有超過3萬例婦女死于宮頸癌，且現(xiàn)階段我國宮頸癌發(fā)病率仍處于上升趨勢[10]。持續(xù)性感染高危型HPV是導(dǎo)致宮頸癌前病變和宮頸癌發(fā)生的主要原因，在目前已知的200多個HPV亞型中，和生殖道感染相關(guān)的型別超過40個[11]。

BV感染和盆腔炎、不孕不育、流產(chǎn)、婦科及產(chǎn)科術(shù)后感染、早產(chǎn)、胎膜早破、新生兒感染等系列事件的發(fā)生有關(guān)[12]。BV發(fā)生時，機(jī)體自行清除HPV感染的機(jī)制遭到損壞，再加上細(xì)菌與真菌黏附導(dǎo)致的上皮細(xì)胞損傷，增加了HPV侵入上皮細(xì)胞率[13-14]。細(xì)菌與真菌刺激患者免疫系統(tǒng)，激活巨噬細(xì)胞，乳酸桿菌減少，上皮細(xì)胞中HPV的負(fù)荷量相應(yīng)增加，生殖道感染率增加，不利于HPV感染的清除[15]。目前，國內(nèi)外關(guān)于細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的相關(guān)性研究不多，主要集中在常見陰道感染與HPV感染、轉(zhuǎn)歸及子宮頸上皮內(nèi)瘤變相關(guān)性研究。本研究對深圳市大鵬新區(qū)育齡婦女細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染的關(guān)系進(jìn)行研究。

本研究中BV陽性組高危HPV陽性率6.57%高于高危HPV陽性3.14%，提示BV與高危HPV感染之間存在關(guān)系，陰道局部免疫包括非特異性免疫及特異性免疫，BV感染導(dǎo)致陰道正常菌群破壞，機(jī)體內(nèi)局部具備防御功能的抗微生物多肽缺乏，增加生殖道HPV感染率，患者陰道內(nèi)局部Th1細(xì)胞功能受到抑制，細(xì)胞免疫功能不足，增加了病毒易感性[16]。與此同時BV患者陰道分泌物中存在大量磷脂酶C和A2，后者可明顯增加HPV易感性。謝建萍等[17]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性陰道病的發(fā)生影響高危型HPV轉(zhuǎn)陰狀態(tài)。本研究中BV陽性患者隨訪1年宮頸高危型HPV轉(zhuǎn)陰率為34.78%低于BV陰性組72.73%，BV陰性者宮頸高危型HPV感染轉(zhuǎn)陰率更高，與其研究結(jié)果一致。

本研究分析影響宮頸高危型HPV感染發(fā)生的危險因素，BV陽性是導(dǎo)致高危HPV感染發(fā)生的危險因素之一。與此同時本研究發(fā)現(xiàn)26～40歲年齡段患者高危HPV陽性率明顯高于其他年齡段，這可能是由于此年齡段女性處于生育年齡，性生活頻繁，易導(dǎo)致HPV感染的發(fā)生，臨床上應(yīng)加強(qiáng)此年齡段女性宮頸癌篩查力度[18-19]。性生活頻率也是HPV感染的危險因素之一，性生活頻率越高的女性，可能由于高危性行為以及衛(wèi)生保健措施較差，而增加HPV感染率。盧永麗等[20]研究結(jié)果宮頸柱狀上皮外移Ⅰ度與Ⅱ度患者HPV感染率低于Ⅲ度患者，并提示宮頸柱狀上皮外移與HPV感染的發(fā)生具有相關(guān)性，且隨著異位程度的增加，感染率呈現(xiàn)增高趨勢，本研究中宮頸柱狀上皮外移是高危型HPV發(fā)生的危險因素，與其研究結(jié)果一致。本研究中使用避孕套避孕患者HPV感染率較低，說明避孕套對預(yù)防生殖道感染有一定作用。

綜上所述，年齡、避孕方式、宮頸柱狀上皮外移、BV陽性是宮頸高危型HPV感染發(fā)生的影響因素，細(xì)菌性陰道病與宮頸高危型HPV感染有關(guān)，BV陰性者宮頸高危型HPV感染轉(zhuǎn)陰率更高，臨床上應(yīng)進(jìn)行高危型HPV和細(xì)胞學(xué)的聯(lián)合篩查，早期預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

[1]李松，王運(yùn)賢.宮頸癌化療后骨髓抑制與免疫水平和生存質(zhì)量的相關(guān)性研究[J].中國地方病防治雜志，2017，14（9）：1048-1049.

[2]林麗，李喜梅，毛郁蕾，等.高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染患者陰道菌群與宮頸局部免疫功能改變[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2019，15（5）：564-566.

[3] Rabaan A A，Alfaraj S A，Alkhalifah M A.Comparison of the Cepheid Xpert HPV test and the HC2 High-Risk HPV DNA Test for detection of high-risk HPV infection in cervical smear samples in SurePath preservative fluid[J].Journal of Medical Microbiology An Official Journal of the Pathological Society of Great Britain & Ireland，2018，30（6）：41-42.

[4] Lu Y F，Chen G Q，Chen R，et al.Relationship of high-risk HPV infection with MEKK3 and NF-κB expression in cervical intepithelial neoplasia tissue[J].Journal of Hainan Medical University，2017，23（5）：46-47.

[5]武麗蕊，王蘭朋，李紅霞，等.免疫細(xì)胞及腫瘤標(biāo)志物與高危型HPV感染宮頸癌患者HPV水平的相關(guān)性及與預(yù)后的關(guān)系[J].癌癥進(jìn)展，2019，17（11）：1342-1346.

[6]陳思凱，史宏暉，冷金花.宮頸HPV感染與陰道內(nèi)細(xì)菌微環(huán)境/免疫微環(huán)境的關(guān)系[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2019，28（6）：711-716.

[7] Sonia M，Rodolfo R，Harmon S G，et al.Public health approach to prevent cervical cancer in HIV-infected women in Kenya：Issues to consider in the design of prevention programs[J].Gynecologic Oncology Reports，2017，22（5）：82-88.

[8]王月云，林威，吳波，等.2014-2016年深圳市子宮頸癌篩查中HPV陽性者HPV高危亞型分布及相關(guān)因素[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2018，52（5）：480-485.

[9]劉瑩，慕慶玲，李婧，等.伴高危型HPV感染的LSIL患者HPV清除與陰道微生態(tài)間的關(guān)系[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2019，31（3）：344-346.

[10]張展，張岱，肖冰冰，等.高危型HPV感染與陰道菌群及子宮頸菌群關(guān)系的初步研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2018，53（7）：471-480.

[11]許惠惠，朱海燕，章彤彤，等.高危型人乳頭狀瘤病毒感染在宮頸病變進(jìn)展中的風(fēng)險研究[J].中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2017，31（4）：302-306.

[12]羅秀清，任保輝，謝蕓.陰道微生態(tài)檢測與高危型HPV感染的710例臨床報告分析[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2018，19（5）：441-442.

[13]馮彩紅，張菁，吳林玲，等.細(xì)菌性陰道病合并人乳頭瘤病毒感染的影響因素[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2019，31（5）：560-563.

[14]韓欽，郭紅燕，耿力.宮頸癌機(jī)會性篩查人群中高危型HPV感染狀況及其與宮頸病變關(guān)系的研究[J].實用婦產(chǎn)科雜志，2018，34（3）：194-197.

[15] Ghebre R G，Grover S，Xu M J，et al.Cervical cancer control in HIV-infected women： Past， present and future[J].Gynecologic Oncology Reports，2017，21（6）：101-108.

[16]張鳶，韓一栩，周小飛，等.某醫(yī)院就診女性人群HPV感染率及亞型分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2018，28（19）：124-127.

[17]謝建萍，楊志紅，伊芳，等.宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道菌群及宮頸局部免疫功能的關(guān)系[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2017，27（10）：2336-2339.

[18]王榮祺，李巖，邊春紅，等.高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道常見微生物感染的相關(guān)性研究[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2019，38（5）：833-836.

[19] Pushpa Sodhani，Sanjay Gupta，Ruchika Gupta，et al.Bacterial Vaginosis and Cervical Intraepithelial Neoplasia： Is there an Association or is Co-Existence Incidental？[J].Asian Pacific Journal of Cancer Prevention Apjcp，2017，18（5）：1289-1292.

[20]盧永麗，程娟，周雅萍.高危型人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸柱狀上皮異位的相關(guān)性研究[J].中國婦幼保健，2017，32（11）：2325-2327.

（收稿日期：2019-11-06） （本文編輯：周亞杰）