枯草桿菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊對(duì)結(jié)直腸腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的影響

聶剛

【摘要】 目的：觀察結(jié)直腸腺瘤患者的腸道菌群變化以及枯草桿菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊（美常安）對(duì)結(jié)直腸腺瘤復(fù)發(fā)的影響。方法：選取60例結(jié)直腸腺瘤患者，以20例健康體檢者作對(duì)照（正常組），采集糞便標(biāo)本，測(cè)定腸道菌群，觀察不同組患者腸道菌群構(gòu)成變化。將60例結(jié)直腸腺瘤患者隨機(jī)分為兩組：對(duì)照組30例，結(jié)腸鏡術(shù)后未予特殊處理；觀察組30例，結(jié)腸鏡治療后給予美常安口服（2粒/次，3次/d，4周為1個(gè)療程），共12個(gè)療程，觀察治療前后糞便中腸道菌群變化及結(jié)直腸腺瘤復(fù)發(fā)情況。結(jié)果：結(jié)直腸腺瘤患者存在腸道菌群紊亂，與正常組相比，結(jié)直腸腺瘤患者糞便中的糞腸球菌、雙歧桿菌及乳桿菌數(shù)量均明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），大腸桿菌及擬桿菌數(shù)量比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與正常組和對(duì)照組對(duì)比，美常安治療后患者糞便中的乳桿菌數(shù)量上調(diào)，而大腸桿菌數(shù)量降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），雙歧桿菌數(shù)目較對(duì)照組有所上升，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），擬桿菌數(shù)量在美常安治療前后比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在結(jié)腸鏡治療12個(gè)月后復(fù)查電子結(jié)腸鏡，對(duì)照組和觀察組的結(jié)直腸腺瘤復(fù)發(fā)率分別為23.3%和13.3%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ 字2=4.356，P=0.047）。結(jié)論：結(jié)直腸腺瘤患者存在腸道菌群改變，微生態(tài)制劑可降低結(jié)直腸腺瘤患者腺瘤復(fù)發(fā)率，微生態(tài)制劑在結(jié)直腸腺瘤的治療中有重要的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 大腸癌； 結(jié)直腸腺瘤； 腸道菌群； 微生態(tài)制劑

The Live Combined Bacillus Subtilis and Enterococcus Faecium Enteric-coated Capsules Effect on the Postoperative Recurrence of Colorectal Adenomas/NIE Gang.//Medical Innovation of China，2016，13（31）：113-116

【Abstract】 Objective：To observe patients with colorectal adenoma of the intestinal flora changes as well as live combined Bacillus subtilis and Enterococcus faecium enteric-coated capsules （Medilac-s） effect on the recurrence of colorectal adenomas.Method：60 cases of colorectal adenoma were selected，20 cases of healthy persons as control（the normal group），collected stool samples，the determination of intestinal flora，observation of different groups of patients with intestinal flora composition changes.Then patients with colorectal adenomas were divided into two groups，the control group contains 30 cases of colonoscopy surgery without other special treatments，the observation group contains 30 cases given Medilac-s after colonoscopy surgery（two times a day，three times a day，4 weeks for 1 course），a total of 12 courses，the changes of intestinal flora and the recurrence of colorectal adenomas were observed.Result：Intestinal flora disorder exists in patients with colorectal adenoma，compared with normal group，colorectal adenoma in the stool of patients with Enterococcus faecalis，the number of Bifidobacteria and Lactobacillus were significantly decreased，the differences were statistically significant（P<0.05），the number of Escherichia coli and Bacteroides showed no significant difference（P>0.05）.With the normal group and the control group，the number of Lactobacillus raised Medilac-s after treatment in feces，and reduced the number of Escherichia coli，the differences were statistically significant（P<0.05），the number of Bifidobacteria increased compared with the control group，but the difference was not statistically significant（P>0.05），the number of Bacteroides in no significant difference before and after the Medilac-s treatment（P>0.05）.The recurrence rates of colorectal adenomas in the control group and the observation group were 23.3% and 13.3%，respectively，the difference was statistically significant between the two groups（ 字2=4.356，P=0.047）.Conclusion：There is a change of intestinal flora in patients with colorectal adenoma，micro ecological agents can reduce the recurrence rate of colorectal adenoma patients，micro ecological agents in the treatment of colorectal adenoma has important clinical significance.

【Key words】 Colorectal cancer； Colorectal adenomas； Intestinal flora； Micro ecological preparation

First-authors address：University-Town Hospital of Chongqing Medical University，Chongqing 401331，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.31.033

大腸癌是歐美國(guó)家常見的消化系腫瘤，在我國(guó)其發(fā)病率也已升至惡性腫瘤發(fā)生率的第4～6位，其中約3/4患者系由大腸腺瘤發(fā)展而來[1]。國(guó)內(nèi)外推薦的結(jié)直腸腺瘤（colorectal adenoma，CRA）的主要治療手段是內(nèi)鏡下息肉切除治療，全美息肉研究機(jī)構(gòu)證實(shí)，結(jié)腸鏡切除腺瘤性息肉可預(yù)防結(jié)直腸癌的發(fā)生[2]。雖然通過內(nèi)鏡早期發(fā)現(xiàn)大腸腺瘤樣息肉摘除可減少部分大腸癌的發(fā)生，但復(fù)發(fā)率高達(dá)40%～50%[3]。腸道菌群與人體健康密切相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)大腸腫瘤患者存在腸道菌群改變[4]。研究表明補(bǔ)充益生菌可調(diào)節(jié)腸道免疫、修復(fù)腸上皮屏障功能、抑制腫瘤細(xì)胞增殖等作用[5-6]。目前關(guān)于預(yù)防性服用益生菌對(duì)結(jié)直腸腺瘤的再發(fā)的影響的研究尚無相關(guān)報(bào)道。本課題擬通過觀察大腸腺瘤內(nèi)鏡切除后服用益生菌對(duì)CRA再發(fā)的影響，指導(dǎo)患者行化學(xué)預(yù)防，以期減少結(jié)腸腺瘤的復(fù)發(fā)，從而減少結(jié)腸癌的發(fā)生。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2014年5月-2015年5月收集的正常人群20例、結(jié)直腸腺瘤患者60例，結(jié)直腸腺瘤患者均符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。將上述對(duì)象分為三組，正常人群為正常組，結(jié)直腸腺瘤患者隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組。正常組20例，年齡26～59歲；對(duì)照組30例，年齡30～68歲；觀察組30例，年齡27～69歲。三組研究對(duì)象年齡、性別、結(jié)直腸腺瘤數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見表1。研究方案通過醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)審核，并獲得患者知情同意書。所選患者在采樣前1個(gè)月未使用抗生素、微生態(tài)活菌制劑和聚乙二醇等瀉藥。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）家族性腺瘤性息肉病或遺傳性非息肉病結(jié)腸癌患者；（2）合并心、腦、血管、肝、腎、肺、胰腺、內(nèi)分泌和造血系統(tǒng)嚴(yán)重原發(fā)性疾病，以及患有其他疾病正在用藥治療，影響試驗(yàn)藥物觀察的患者；（3）準(zhǔn)備妊娠、已妊娠或哺乳期婦女、精神病患者；（4）年齡在18歲以下，70歲以上；（5）不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定用藥，無法判斷療效，資料不全而影響療效安全性者。

1.3 方法 所有結(jié)直腸腺瘤均采用常規(guī)腸鏡進(jìn)行檢查，進(jìn)鏡后觀察病變組織的位置及大小，采用內(nèi)鏡下黏膜切除/剝離（EMR/ESD）術(shù)，將切除組織進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。對(duì)照組在結(jié)直腸腺瘤內(nèi)鏡下切除后不另做治療。觀察組在結(jié)直腸腺瘤內(nèi)鏡下切除后，口服美常安（含枯草桿菌、腸球菌二連活菌腸溶膠囊，北京韓美制藥公司生產(chǎn)），2粒/次，3次/d，

4周為1個(gè)療程，共12個(gè)療程。診療前、治療第12個(gè)療程后查大便細(xì)菌計(jì)數(shù)、行腸鏡檢查，了解結(jié)直腸息肉復(fù)發(fā)情況。療程中禁用其他對(duì)消化系統(tǒng)有影響的藥物，平時(shí)多食新鮮、粗纖維食物，忌食辛辣、炙博、肥膩及腌制品。

1.4 糞便培養(yǎng)及計(jì)數(shù) 正常人群組及結(jié)直腸腺瘤患者在治療前后均留取糞便標(biāo)本。取新鮮糞便0.1 g于EP管中并盡快送檢（時(shí)間<30 min），加入0.9 mL生理鹽水，震蕩混勻，用接種環(huán)分別接種至不同的培養(yǎng)基上，需氧菌放置于37 ℃有氧條件下培養(yǎng)24～48 h計(jì)數(shù)，厭氧菌采用抽氣換氣法培養(yǎng)72 h后計(jì)數(shù)，使用ALB半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)（法國(guó)生物梅里埃公司）行細(xì)菌鑒定，結(jié)果以每克糞便中菌落形成單位的對(duì)數(shù)值（CFU/g）表示，代表菌群有：需氧菌2種（大腸桿菌、糞腸球菌），厭氧菌3種（雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌）。

1.5 觀察指標(biāo) 觀察所有結(jié)腸腺瘤患者的結(jié)腸腺瘤復(fù)發(fā)率、數(shù)目、腸道菌群數(shù)量變化等情況。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組腸道菌群比較 結(jié)直腸腺瘤患者存在腸道菌群紊亂，與正常組相比，對(duì)照組糞便中的糞腸球菌、雙歧桿菌及乳酸桿菌數(shù)量均明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），大腸桿菌及擬桿菌數(shù)量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與正常組和對(duì)照組對(duì)比，美常安治療后的患者糞便中的乳酸桿菌數(shù)量上調(diào)，大腸桿菌數(shù)量明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），雙歧桿菌數(shù)目雖較對(duì)照組有所上升，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），三組擬桿菌數(shù)量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.2 兩組術(shù)后復(fù)發(fā)情況比較 治療后12個(gè)月復(fù)查電子結(jié)腸鏡，對(duì)照組和觀察組分別有7例和4例患者發(fā)生結(jié)直腸腺瘤復(fù)發(fā)，對(duì)照組和觀察組的復(fù)發(fā)率分別為23.3%和13.3%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ 字2=4.356，P=0.047）。

3 討論

結(jié)直腸癌已嚴(yán)重危害人類的健康，而結(jié)腸腺瘤是臨床上常見的消化道類疾病，是一種結(jié)腸的良性腫瘤，被公認(rèn)為癌前病變[7]。目前普遍認(rèn)為，大腸腺瘤在大腸癌形成發(fā)展過程中不可避免，積極根除大腸腺瘤是可以降低大腸癌的發(fā)生率[8]，但是由于其在結(jié)腸鏡下易發(fā)生穿孔、大出血等現(xiàn)象，結(jié)腸腺瘤復(fù)發(fā)的概率較大[9]。

腸道菌群失調(diào)是誘發(fā)結(jié)腸癌的關(guān)鍵因素[10]。多項(xiàng)研究報(bào)道證實(shí)，結(jié)腸癌人群與健康人群腸道微生物存在構(gòu)成差異，表現(xiàn)為明顯的菌群穩(wěn)態(tài)失衡。Scanlan等[4]通過對(duì)結(jié)直腸癌和腺瘤性息肉病患者腸道菌群構(gòu)成進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌及腺瘤性息肉病患者腸道菌群多樣性和優(yōu)勢(shì)菌群降低，提示腸道菌群結(jié)構(gòu)組成的改變可能對(duì)結(jié)腸癌的發(fā)生有促進(jìn)作用。目前認(rèn)為腸道菌群是影響CRC發(fā)生的環(huán)境因素之一，與之相關(guān)的主要功能包括調(diào)控腸上皮細(xì)胞增殖、分化，合成必需營(yíng)養(yǎng)成分和/或生物活性成分，抑制病原體過度繁殖并激活腸道免疫系統(tǒng)等。腸道菌群失調(diào)和結(jié)腸癌之間的關(guān)系近年來已受到國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注，對(duì)于腸道菌群失調(diào)參與結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展也有了一定的認(rèn)識(shí)，腸道菌群的作用已成為CRC發(fā)病機(jī)制研究中新的熱點(diǎn)[11]。目前認(rèn)為，腸道菌群紊亂失調(diào)會(huì)釋放大量的細(xì)菌毒素，誘發(fā)結(jié)腸炎等炎性腸病，腸道屏障功能的損傷會(huì)引起非致病性細(xì)菌的轉(zhuǎn)位，進(jìn)而影響免疫系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)，導(dǎo)致腸道黏膜促炎癥反應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制異常，使其向致癌相關(guān)的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)變，進(jìn)而誘導(dǎo)結(jié)腸癌的發(fā)生[12]。同時(shí)，腸道微生物參與營(yíng)養(yǎng)代謝過程中的某些產(chǎn)物對(duì)腸道上皮細(xì)胞具有毒性作用，致使受損腸道黏膜上皮瘤化。目前學(xué)術(shù)界認(rèn)為，腸道內(nèi)微生物所致的局部和全身的慢性炎癥是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的主要機(jī)制[13]。

微生態(tài)制劑已被廣泛應(yīng)用于多種疾病的防治。Shadnoush等[14]研究證實(shí)，腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定可以通過益生菌來維持。體外研究亦發(fā)現(xiàn)，益生菌能夠影響結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖、凋亡和黏附等惡性生物學(xué)行為[15]。美常安是含有高濃縮枯草桿菌、屎腸球菌的新型微生態(tài)制劑，目前已在腹瀉及潰瘍性結(jié)腸炎等疾病的防治中起到重要作用。本文對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者及正常人群的腸道菌群結(jié)構(gòu)進(jìn)行了簡(jiǎn)單的分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸腺瘤患者存在腸道菌群紊亂，糞腸球菌、雙歧桿菌及乳桿菌數(shù)量明顯下降，而服用微生態(tài)制劑美常安治療后，患者糞便中的乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量上調(diào)，而大腸桿菌數(shù)量降低，考慮為美常安中的枯草桿菌利用生物奪氧作用降低腸道定植部位的氧濃度，造成適合厭氧菌群生長(zhǎng)的環(huán)境，促進(jìn)雙歧桿菌等有益菌的生長(zhǎng)，從而抑制大腸桿菌等致病菌的生長(zhǎng)。同時(shí)，結(jié)腸腺瘤切除術(shù)后長(zhǎng)期服用美常安可降低腺瘤的復(fù)發(fā)率，提示微生態(tài)制劑在結(jié)直腸腺瘤的治療中有重要的臨床意義，為臨床防治結(jié)直腸腺瘤提供新的思路和治療手段。

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（收稿日期：2016-09-16） （本文編輯：郎威）