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    巴戟天防治骨質(zhì)疏松癥的研究進(jìn)展

    2017-01-16 08:38:13李鉞謝煒星晉大祥溫龍飛丁金勇徐繼禧
    中國骨質(zhì)疏松雜志 2017年4期
    關(guān)鍵詞:巴戟天含藥骨細(xì)胞

    李鉞 謝煒星 晉大祥 溫龍飛 丁金勇 徐繼禧

    廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,廣東 廣州 510405

    骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP) 是以骨量減少,骨質(zhì)量受損及骨強度降低,導(dǎo)致骨脆性增加、易發(fā)生骨折為特征的全身性骨病[1]。臨床表現(xiàn)主要體現(xiàn)為骨密度降低,骨皮質(zhì)發(fā)生變化變薄,髓腔逐漸增寬,骨小梁數(shù)目減少,容易發(fā)生骨折[2]。根據(jù)骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機制的不同,臨床治療藥物主要分為基本補充劑、抗骨吸收藥物和促骨形成藥物[3]。但是西藥治療中仍然存在著藥物的不良反應(yīng)、患者不耐受以及一些藥物療效的不確切等問題。近年來,中藥對骨質(zhì)疏松治療的研究日益增多,并且在治療上突顯其優(yōu)勢。巴戟天為茜草科多年生攀援木質(zhì)藤本植物,肉質(zhì)根入藥,是我國著名的四大南藥之一,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》:“巴戟天,味辛,微溫。生山谷。治大風(fēng)邪氣,陰痿不起,強筋骨,安五臟,補中增志益氣”[4]。近年來研究表明,巴戟天具有多方面的藥理作用,如提高機體免疫力、抗骨質(zhì)疏松、抗氧化、強壯骨骼、抗炎鎮(zhèn)痛、補血及促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖和分化等作用[5]。近年來人們對巴戟天防治骨質(zhì)疏松癥進(jìn)行了深入的研究,筆者在此綜述了近幾年來巴戟天防治骨質(zhì)疏松癥的研究進(jìn)展,并對其作用于骨細(xì)胞、動物、臨床個體水平防治骨質(zhì)疏松癥的療效、作用機理進(jìn)行總結(jié)與歸納。

    1 巴戟天防治骨質(zhì)疏松骨細(xì)胞水平的研究

    1.1 對成骨細(xì)胞的影響

    洪懿燚等[6]研究發(fā)現(xiàn)巴戟天提取物能促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖,上調(diào)抑制凋亡基因Bcl-2及下調(diào)促進(jìn)細(xì)胞凋亡基因Bax表達(dá),從而抑制成骨細(xì)胞的凋亡,此外他們還提出巴戟天的提取物能促進(jìn)Cbfα1的表達(dá)及促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌骨鈣素,這在防治骨質(zhì)疏松癥的方向上發(fā)揮一定作用。崔可賾等[7]通過觀察巴戟天多糖含藥血清對體外成骨細(xì)胞活性及DKK-1表達(dá)的影響發(fā)現(xiàn),巴戟天多糖含藥血清可以明顯增加成骨細(xì)胞的增殖和分化能力,同時,可降低DKK-1蛋白的表達(dá),提出這可能就是巴戟天多糖防治骨質(zhì)疏松的機理。

    1.2 對破骨細(xì)胞的影響

    何劍全等[8]觀察巴戟天含藥血清對原代破骨細(xì)胞RANK和CA ⅡmRNA表達(dá)的影響,他們將大鼠分為正常組,骨質(zhì)疏松組,骨質(zhì)疏松+雌激素組,骨質(zhì)疏松+巴戟天含藥血清組,最后發(fā)現(xiàn)巴戟天可降低骨質(zhì)疏松大鼠破骨細(xì)胞RANK和CA ⅡmRNA的表達(dá),從而達(dá)到抑制骨質(zhì)疏松的作用。王青華[9]將去勢大鼠原代破骨細(xì)胞并分為4組:A組為正常對照組,B組給予17β雌二醇10-6mmol/L,C組給予1.0 mmol/L巴戟天,D組給予17β雌二醇10-6mmol/L雌二醇和1.0mmol/L巴戟天進(jìn)行培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)B組破骨細(xì)胞數(shù)量、骨吸收陷窩面積相、CA Ⅱ、RANK mRNA基因表達(dá)水平均低于A組,說明巴戟天可有效抑制骨質(zhì)疏松大鼠破骨細(xì)胞CA Ⅱ、RANK mRNA基因表達(dá),降低大鼠骨吸收,抑制骨質(zhì)疏松。

    1.3 對成骨-破骨細(xì)胞共育體系的影響

    鄭素玉等[10]取24h內(nèi)新生SD乳鼠頭蓋骨分離培養(yǎng)成骨細(xì)胞,取5周齡SD大鼠四肢長骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞,誘導(dǎo)培養(yǎng)破骨細(xì)胞,體外建立成骨、破骨細(xì)胞共育體系。使用高、中、低3種濃度巴戟天含藥血清組培養(yǎng)共育體系,干預(yù)3d后,檢測共育體系中CA Ⅱ、NFAT2 mRNA的表達(dá),發(fā)現(xiàn)不同濃度的巴戟天含藥血清對CA Ⅱ、NFAT2 mRNA均有抑制作用,且其抑制作用表現(xiàn)出一定的濃度依賴性,提示巴戟天含藥血清有抑制共育體系中破骨細(xì)胞成熟及其發(fā)揮骨吸收功能作用。黃慧等[11]取健康5周齡SD大鼠的四肢長骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞,誘導(dǎo)培養(yǎng)破骨細(xì)胞,用24內(nèi)新生SD乳鼠頭蓋骨分離體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞。共育2天后,分別改用不同濃度巴戟天含藥血清與不含藥血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),并設(shè)低、中、高濃度組及對照組,培養(yǎng)3天后提取各組總RNA,RT-PCR結(jié)果示,中、高濃度組RANKLmRNA表達(dá)量均低于對照組,而OPGmRNA表達(dá)量顯著高于對照組,提示巴戟天含藥血清可上調(diào)共育體系中OPGmRNA表達(dá),并下調(diào)RANKLmRNA 表達(dá),且中高濃度呈劑量依賴關(guān)系,以高濃度表達(dá)最明顯??梢宰C明,巴戟天能夠以O(shè)PG和RANKL作為靶點之一,調(diào)控基因表達(dá),發(fā)揮防治骨質(zhì)疏松的作用。

    2 巴戟天防治骨質(zhì)疏松動物水平的研究

    2.1 去勢大鼠的骨微結(jié)構(gòu)及礦物質(zhì)的變化

    王瑩等[12]在實驗中發(fā)現(xiàn),切除大鼠卵巢后,模型組的骨量主要標(biāo)志的骨小梁體積百分比(TBV%)顯著降低,而代表骨吸收參數(shù)的骨小梁吸收表面百分比(TRS%)以及代表骨形成參數(shù)的骨小梁形成表面百分比(TFS%)、骨小梁礦化率(MAR)、類骨質(zhì)平均寬度(OSW)和骨皮質(zhì)礦化率(mAR)均顯著增高,表明卵巢切除所造成的是一種骨吸收大于骨形成的高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松模型。劉亦恒等[13]研究發(fā)現(xiàn)大鼠切除卵巢后,模型組的骨密度(BMD)和骨鈣、骨磷含量下降,血清1,25-二羥基維生素D3水平下降。這是由于雌激素減少,骨平衡被破壞,骨轉(zhuǎn)換增加,骨量及礦物質(zhì)的丟失增多,從而形成骨質(zhì)疏松。

    2.2 巴戟天防治去勢大鼠引起骨質(zhì)疏松的機理

    白細(xì)胞介素1和腫瘤壞死因子均為體內(nèi)具有多種功能的細(xì)胞因子,可促進(jìn)骨吸收,抑制骨基質(zhì)膠原合成,從而影響骨的形成。朱孟勇等[14]研究表明,巴戟天多糖處理過的去勢大鼠,其白細(xì)胞介素1和腫瘤壞死因子的表達(dá)水平均降低,說明巴戟天可能通過降低白細(xì)胞介素1和腫瘤壞死因子的表達(dá)水平發(fā)揮升高血清護(hù)骨素表達(dá)水平的作用,從而發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松的作用。5-羥色胺(5-HT)是存在于骨組織內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)之一,與骨代謝密切相關(guān)[15]。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)具有雙向調(diào)節(jié)作用的因子,可同時作用于成骨和破骨細(xì)胞,保持兩者動態(tài)平衡,研究已經(jīng)證實,VEGF促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和遷移,促進(jìn)破骨作用[16]。劉汝銀等[17]用不同劑量的巴戟天多糖干預(yù)去勢大鼠,5-HT、VEGF的含量,結(jié)果顯示巴戟天多糖可明顯提高機體血清5-HT與VEGF水平,且呈劑量依賴性關(guān)系,這表明巴戟天多糖能明顯上高血清中5-HT、VEGF含量,治療骨質(zhì)疏松。

    3 巴戟天防治骨質(zhì)疏松臨床水平的研究

    3.1 巴戟天治療骨質(zhì)疏松的臨床效果

    龍華等[18]選取50例腎陽虛型骨質(zhì)疏松癥患者,隨機分兩組,治療組予單味巴戟天煎液口服,對照組給予口服阿侖磷酸鈉片,6個月后,檢測發(fā)現(xiàn)患者腰椎和髖部骨密度值、血清雌二醇和血清堿性磷酸酶水平都明顯優(yōu)于對照組,表明巴戟天可有效阻止骨質(zhì)丟失,促進(jìn)鈣鹽沉積,從而改善骨質(zhì)疏松的癥狀。宋娟[19]在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用單味中藥巴戟天煎液口服治療骨質(zhì)疏松癥,治療結(jié)束后,治療組臨床總有效率為85%明顯好于對照組的57.1%,同時治療組骨密度、血清骨鈣素 (BGP)、尿吡啶酚 (PYD) 等也明顯好于對照組,表明單味中藥巴戟天煎液口服治療骨質(zhì)疏松癥,療效尚可。

    3.2 巴戟天治療骨質(zhì)疏松的臨床機理

    陳彩英等[20]研究發(fā)現(xiàn)Mn是人體必需的微量元素,人體缺錳時,破骨細(xì)胞活性增強,成骨細(xì)胞活性降低,動態(tài)平衡破壞,從而出現(xiàn)骨質(zhì)疏松。而巴戟天中錳元素含量高達(dá)559 μg/g,錳參與活化硫酸軟膏素合成的酶系統(tǒng),促進(jìn)骨骼的形成,防止骨質(zhì)疏松的發(fā)生。絕經(jīng)后雌激素水平下降是骨質(zhì)疏松癥發(fā)病的主要原因,何劍全[4]等發(fā)現(xiàn)使用 E-SCREEN法,巴戟天提取物既能顯著地促進(jìn) MCF-7細(xì)胞的增殖,同時在與ICll 82, 780雌激素受體拮抗劑共同作用下, 又能顯著地抑制原來藥物對 MCF-7細(xì)胞的增殖作用,說明了巴戟天提取物表現(xiàn)出了強烈的植物雌激素樣作用,減緩骨質(zhì)疏松的發(fā)生。

    4 展望

    通過文獻(xiàn)綜述,巴戟天的各種提取物都具有一定的抗骨質(zhì)疏松活性,而關(guān)于其抗骨質(zhì)疏松的機制和靶點,目前尚不十分清楚。所以應(yīng)該加強以下各方面的研究:(1)深入研究巴戟天對骨相關(guān)細(xì)胞的代謝信號通路的作用,明確巴戟天防治骨質(zhì)疏松的機理;(2)雖然關(guān)于巴戟天提取物抗骨質(zhì)疏松的細(xì)胞實驗已有較多報道 ,但相關(guān)藥理活性的動物實驗仍較少,建議多在此方向深入研究;(3)目前研究多以動物實驗為主,缺少多中心、大樣本的臨床對照研究,建議加強臨床上的互相協(xié)作,集中研究,為該藥物的深入開發(fā)和利用提供參考,并期待能早日設(shè)計開發(fā)出安全、高效、低廉的抗骨質(zhì)疏松新藥。

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