腦脊液實(shí)驗(yàn)室檢查在顱內(nèi)感染診斷中的應(yīng)用

陶蕾　孫成英　徐菲菲

[摘 要] 目的：比較各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)在不同類型顱內(nèi)感染患者腦脊液（Cerebrospinal fluid，CSF）中的差異，探討其對(duì)于顱內(nèi)感染鑒別診斷的臨床價(jià)值。方法：選取我院2013年3月～2015年3月收治的41例結(jié)核性腦膜炎患者、69例化膿性腦膜炎患者、51例病毒性腦膜炎患者及同期50例未發(fā)生顱內(nèi)感染患者，分別納入結(jié)核性腦膜炎（T組）、化膿性腦膜炎組（P組）、病毒性腦膜炎組（C組）及正常對(duì)照組（NC組），回顧性分析各組患者CSF降鈣素原（PCT）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、乳酸脫氫酶（LDH）、腺苷脫氨酶（ADA）、干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL）細(xì)胞因子等檢查結(jié)果差異，探討其臨床診斷意義。結(jié)果：T組LA、ADA、IgA、IgG高于其他各組，其LDH、IGM低于P組，但高于V組；P組PCT、CRP、LDH、IgM高于其他各組，其LA、ADA、IgA、IgG高于V組；V組僅LDH、IgM顯著高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。T組IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、1L-10、IL-15均高于其他各組，其IL-12、TNF-α高于V組；P組GM-CSF高于其他各組，其IL-1β、IL-10均低于其他各組；V組IL-4、IL-12均高于其他各組，其GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、TNF-α均高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：通過(guò)綜合各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果有助于判斷顱內(nèi)感染類型，對(duì)化膿性、結(jié)核性及病毒性顱內(nèi)感染的鑒別診斷有一定的參考價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 腦脊液；顱內(nèi)感染；鑒別診斷

中圖分類號(hào)：R446 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2016）03-070-03

DOI：10.11876/mimt201603026

顱內(nèi)感染包括化膿性、結(jié)核性及病毒性三種類型，是神經(jīng)外科術(shù)后常見并發(fā)癥之一，發(fā)生率約為2.6% [1]。腦脊液（Cerebrospinal fluid，CSF）細(xì)菌培養(yǎng)是診斷顱內(nèi)感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但該方法存在培養(yǎng)耗時(shí)久、檢出陽(yáng)性率低等弊端，可能延誤針對(duì)性治療，影響患者預(yù)后[2]。然而，不同病原體引發(fā)的顱內(nèi)感染早期缺乏特征性改變，且CSF生化和常規(guī)檢查往往無(wú)法為臨床提供全面的參考信息[3]。本研究以我院收治的211例患者為研究對(duì)象，探討CSF中PCT、CRP、乳酸脫氫酶（LDH）、腺苷脫氨酶（ADA）及IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、1L-10、IL-15等實(shí)驗(yàn)室檢查診斷顱內(nèi)感染的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 病例資料

自我院2013年3月—2015年3月經(jīng)病原學(xué)檢查確診[4] 顱內(nèi)感染患者中選取未合并其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性、未合并腦血管疾病、惡性腫瘤、免疫性疾病及炎性疾病患者進(jìn)行研究。41例結(jié)核性腦膜炎（T 組）、69例化膿性腦膜炎（P組）、51例病毒性腦膜炎（V組），同期未發(fā)生顱內(nèi)感染者50例作為對(duì)照（NC組），4組患者年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 標(biāo)本采集及檢測(cè)

通過(guò)腰椎穿刺、腦室引流獲取CSF標(biāo)本，以4000 r/min離心5 min，取上清液，保存于-80℃冰箱中備用[5]。

檢測(cè)指標(biāo)包括降鈣素原（PCT）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、乳酸（LA）、乳酸脫氫酶（LDH）、腺苷脫氨酶（ADA）、免疫球蛋白（Ig）等，均使用Cobas?6000生化免疫分析儀（美國(guó)羅氏公司）檢測(cè)，其中PCT檢測(cè)使用免疫測(cè)定夾心法和最終熒光檢測(cè)法（ELFA），CRP檢測(cè)使用顆粒增強(qiáng)免疫比濁法，LA使用終點(diǎn)法，LDH、ADA檢測(cè)使用酶法，Ig使用免疫比濁法[6]。使用LuminexTM200多功能流式熒光點(diǎn)陣儀（美國(guó)Luminex公司），采用液相芯片法[7]檢測(cè)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子（GM-CSF）、干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL）等細(xì)胞因子。

上述檢測(cè)過(guò)程均嚴(yán)格按照檢驗(yàn)科標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序（SOP）規(guī)范[8]，由我院兩名檢驗(yàn)醫(yī)師在雙盲狀態(tài)下操作，取其平均值作為研究數(shù)據(jù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進(jìn)行分析，以（x±s）表示，并采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以P<0.01為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組生化指標(biāo)比較

T組LA、ADA、IgA、IgG高于其他各組，其LDH、IGM低于P組，但高于V組；P組PCT、CRP、LDH、IgM高于其他各組，其LA、ADA、IgA、IgG高于V組；V組僅LDH、IgM顯著高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 各組患者細(xì)胞因子指標(biāo)比較

T組IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、1L-10、IL-15均高于其他各組，其IL-12、TNF-α高于V組；P組GM-CSF高于其他各組，其IL-1β、IL-10均低于其他各組；V組IL-4、IL-12均高于其他各組，其GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、TNF-α均高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

CSF病原體培養(yǎng)是顱內(nèi)感染診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但該方法僅對(duì)細(xì)菌性感染診斷作用較佳，無(wú)法獲得病毒類病原體，且易受污染菌干擾，影響結(jié)核性感染的診斷[9]。此外，病原體培養(yǎng)耗時(shí)較久、結(jié)果滯后，在培養(yǎng)結(jié)果得出之前只能實(shí)施經(jīng)驗(yàn)性治療，往往導(dǎo)致治療過(guò)度或不足，對(duì)預(yù)后造成不良影響[10]。

PCT是降鈣素前體物質(zhì)，是細(xì)菌性感染的早期標(biāo)志物，也是目前臨床公認(rèn)的膿毒癥早期診斷指標(biāo)[11]。在健康人群血清中，PCT表達(dá)量極低，即便是嚴(yán)重的病毒感染亦無(wú)法引起PCT的明顯升高。本研究結(jié)果示，化膿性腦膜炎患者CSF中PCT水平顯著高于其他各組，印證了上述結(jié)論。李建民等[12]指出，以0.05～0.50 ng/mL為閾值，可有效鑒別化膿性腦膜炎與其他類型顱內(nèi)感染，且其半衰期長(zhǎng)達(dá)25～30 h，體外穩(wěn)定性佳，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、可靠、耗時(shí)較短，對(duì)于顱內(nèi)感染的早期鑒別診斷及治療策略的制定與實(shí)施均有著良好指導(dǎo)作用。

CRP是機(jī)體創(chuàng)傷或細(xì)菌感染后反應(yīng)最為明顯的急性時(shí)相蛋白，本研究結(jié)果示，僅有化膿性腦膜炎患者CSF中CRP顯著升高，表明該項(xiàng)指標(biāo)對(duì)化膿性腦膜炎的診斷價(jià)值較高。但Ziu等[13]指出，CSF中CRP升高時(shí)間較PCT偏晚，且易受多種疾病因素影響，因此，若將CRP用于顱內(nèi)感染的鑒別診斷，應(yīng)綜合患者基礎(chǔ)疾病狀態(tài)謹(jǐn)慎判斷。

LA是葡萄糖厭氧反應(yīng)的最終產(chǎn)物，顱內(nèi)感染導(dǎo)致的腦組織缺血缺氧可引發(fā)血流速度下降，并導(dǎo)致粒細(xì)胞和細(xì)菌代謝受阻[14]，故本研究結(jié)核性腦膜炎、化膿性腦膜炎患者CSF中LA水平均顯著升高，但病毒性腦膜炎患者CSF中LA水平與NC組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮與病毒性腦膜炎LA升高多發(fā)生于病情中晚期，而本研究所選患者均處于病程早期有關(guān)。

LDH、ADA分別參與糖酵解、核酸代謝過(guò)程，其中，多數(shù)LDH無(wú)法通過(guò)血腦屏障，故CSF中LDH水平升高可反映中樞神經(jīng)受損[15]，本研究結(jié)核性、化膿性、病毒性腦膜炎患者CSF中LDH水平均顯著高于NC組，印證了上述結(jié)論；ADA主要分布于淋巴細(xì)胞組織，在機(jī)體免疫活性的維持中扮演了重要角色，結(jié)核桿菌入侵引發(fā)的細(xì)胞免疫應(yīng)答可導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著上升，繼而引發(fā)ADA水平增加[16]，本研究結(jié)核性腦膜炎患者CSF中ADA水平顯著高于其他各組，與上述結(jié)論一致，表明依據(jù)ADA水平變化有助于結(jié)核性腦膜炎的早期診斷。同時(shí)，本研究結(jié)果示，聯(lián)合檢測(cè)IgA、IgG及IgM亦可為顱內(nèi)感染的鑒別提供參考，如Ig表達(dá)水平的升高提示存在顱內(nèi)感染，IgA、IgG水平較高提示結(jié)核性腦膜炎，IgM水平較高則提示化膿性腦膜炎。

無(wú)論是結(jié)核性、化膿性腦膜炎還是病毒性腦膜炎，病原體入侵后引發(fā)的免疫反應(yīng)均由Th1介導(dǎo)，并釋放TNF-α、IL-12等細(xì)胞因子，故本研究顱內(nèi)感染患者上述因子水平均顯著高于NC組。Walti等[17]研究發(fā)現(xiàn)，Th2介導(dǎo)的免疫反應(yīng)參與了化膿性腦膜炎發(fā)展的全過(guò)程，而Th2細(xì)胞分泌的IL-4、IL-6、IL-10等細(xì)胞因子在拮抗病原體的同時(shí)，可下調(diào)IFN-γ的產(chǎn)生。在本次研究中，我們發(fā)現(xiàn)，P組CSF中IFN-γ、IL-1β水平與NC組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且其IL-6、IL-10水平均顯著低于T組，與Meira等[18]結(jié)論一致。因此，我們認(rèn)為，通過(guò)檢測(cè)顱內(nèi)感染患者CSF細(xì)胞因子的變化狀態(tài)，能夠明確其免疫病理過(guò)程特點(diǎn)，并在指導(dǎo)免疫治療方面發(fā)揮一定的作用。

綜上所述，綜合檢測(cè)CSF中PCT、CRP、LA、LDH、ADA、Ig、細(xì)胞因子等各項(xiàng)指標(biāo)有助于早期明確顱內(nèi)感染類型，為臨床治療方案的制定提供參考，建議對(duì)疑似顱內(nèi)感染患者，在行CSF病原學(xué)培養(yǎng)的同時(shí)應(yīng)完善CSF實(shí)驗(yàn)室檢查，以早期明確其病變特點(diǎn)，及時(shí)予以對(duì)癥治療。

參 考 文 獻(xiàn)

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