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    復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對小鼠急性高尿酸血癥的影響

    2014-05-04 11:17:22鐘舒紅等
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年4期
    關(guān)鍵詞:高尿酸血癥

    鐘舒紅等

    摘要:通過腹腔注射氧嗪酸鉀人工復(fù)制小鼠急性高尿酸血癥模型,研究復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平的影響以及探索其降尿酸的機制。結(jié)果顯示,與空白對照組相比,陽性對照組小鼠血清尿酸值極顯著升高(P<0.01),表明應(yīng)用氧嗪酸鉀造模取得成功;與陽性對照組相比,復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒高、中、低劑量組和別嘌醇對照組小鼠血清尿酸值均極顯著降低(P<0.01),表明兩藥均有良好的降尿酸作用,且復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒降尿酸作用呈一定的量效關(guān)系;各給藥組小鼠肝臟勻漿中黃嘌呤氧化酶(XOD)活性與模型組相比,高、中劑量組顯著降低(P<0.05),低劑量組差異不顯著,提示復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒降尿酸作用可能與降低XOD活性有關(guān)。

    關(guān)鍵詞:復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒;高尿酸血癥;黃嘌呤氧化酶

    中圖分類號:R965 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2014)04-0860-03

    Effect of Compound Herba sarcandra Particles on Acute Hyperuricemia Mice

    ZHONG Shu-hong1,HE Jia-kang1,HU Ting-jun1,SU Zi-jie1,LI Jing-ling1,SU Min1,YANG Shan-zhong2

    (1.College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China;

    2.Guangxi BDX Animal Drugs Co. Ltd., Nanning 530003, China)

    Abstract: The effects of compound Herba sarcandra particles on serum uric acid level in mice with acute hyperuricemia induced potassium oxonate were studied by intraperitoneal injection. The results showed that the level of serum uric acid in positive control group was significantly Lower(P<0.01) than that of normal control group, indicating that potassium oxonate could be used to make a model of hyperuricemia. Compared with the positive control, the level of serum uric acid in four treatment groups were significantly lower(P<0.01). It is indicated that compound Herba sarcandra particles and allopurinol were effective on decreasing uric acid. The compound Herba sarcandra particles had dose-effect. The activities of xanthine oxidase (XOD) in the liver homogenate of high-dose and medium-dose groups were significantly lower (P<0.05) than that of control group. It is indicated that the effects of compound Herba sarcandra particles on descending uric acid might be related with XOD activity decreasing.

    Key words: compound Herba sarcandra particles; hyperuricemia; xanthine oxidase

    痛風(fēng)是一種嘌呤代謝紊亂的代謝性疾病,其主要的生化特性就是產(chǎn)生高尿酸血癥。痛風(fēng)反復(fù)發(fā)作可產(chǎn)生尿酸鹽沉積,關(guān)節(jié)畸形和腎結(jié)石,具有較高的危害?;瘜W(xué)藥物在治療痛風(fēng)和高尿酸血癥時,能不同程度地緩解高尿酸血癥,控制病情發(fā)展,但是具有嚴(yán)重的不良反應(yīng),在一定程度上限制了其安全使用。從天然藥物中尋找新型抗痛風(fēng)和高尿酸血癥藥物依然是藥學(xué)研究的一個熱點,加強對痛風(fēng)疾病防治藥物的研究近年來日益重要。

    復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒以腫節(jié)風(fēng)、射干、甘草為主要原料。處方中重用腫節(jié)風(fēng),取其祛風(fēng)通絡(luò)、活血化瘀、消腫散結(jié)之功效作為方中主藥;取射干降火化痰、消腫散結(jié)之功效作為輔藥;甘草調(diào)和諸藥,兼具有清熱化痰、緩急止痛之功,可使三藥合用共奏清化痰濁,活血通絡(luò),消腫散結(jié)之功。本研究從藥效學(xué)角度評價復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒抗小鼠急性高尿酸血癥的效果,以及探索該藥物制劑降低尿酸的作用機制。

    1 材料與方法

    1.1 試驗動物

    SPF級昆明種小鼠110只,雄性,6周齡,體重(20±2) g,由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,分籠飼養(yǎng),自由飲水和進食。

    1.2 藥物與試劑

    復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒:廣西大學(xué)與廣西北斗星動物保健品有限公司聯(lián)合研制,廣西北斗星動物保健品有限公司中試生產(chǎn)(批號:20101201,規(guī)格:250 g/袋,1 g相當(dāng)于原生藥1.6 g)。

    別嘌醇片:對照藥物,重慶青陽藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H50021422)。試驗用去離子水溶解,配制成終濃度為0.8 mg/mL混懸液。

    氧嗪酸鉀(批號:101240383,SIGMA-ALORICH),用0.8%羧甲基纖維素鈉配制成終濃度為30 mg/mL混懸液。

    尿酸(UA)檢測試劑盒、黃嘌呤氧化酶(XOD)檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

    1.3 主要儀器

    微量離心機(SIGMA公司);臺式低速離心機(湖南凱達科學(xué)儀器有限公司);電熱恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司);旋渦混合器(林貝爾儀器制造公司);紫外分光光度計(型號UA-1800,北京瑞利分析儀器公司)。

    1.4 試驗方法

    1.4.1 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對正常小鼠血清尿酸值的影響 50只小鼠隨機分成5組,每組10只。分別為復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒高、中、低劑量組,別嘌醇對照組,空白對照組。各給藥組每天早上空腹灌胃給藥,給藥時間為5 d;空白對照組給予等量的滅菌生理鹽水。第5天早上各組給藥后1 h,小鼠眼球后靜脈叢采血,室溫條件下自然凝血,4 ℃靜置過夜,3 500 r/min離心10 min,分離血清,按照試劑盒說明測定各組小鼠UA值。試驗分組以及給藥方案見表1。

    1.4.2 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠的影響 參照國內(nèi)外相關(guān)文獻[1-4],選用氧嗪酸鉀為尿酸酶抑制劑,抑制小鼠體內(nèi)尿酸酶活性,增高其血清尿酸(UA)水平,人工復(fù)制小鼠急性高尿酸血癥模型。60只雄性昆明種小鼠隨機分成6組,每組10只。分別為復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒高、中、低劑量組,別嘌醇對照組,陽性對照組,空白對照組。陽性對照組和空白對照組每天上午空腹灌胃(ip)等量滅菌生理鹽水,其余藥物治療組分別灌胃不同藥物,連續(xù)用藥5 d,最后1次灌胃給藥前1 h,空白對照組腹腔注射(ig)滅菌生理鹽水,劑量為每千克體重10 mL;其余各組腹腔注射氧嗪酸鉀鹽混懸液,劑量為每千克體重10 mL。各組灌胃給藥1 h后小鼠眼球后靜脈叢采血,室溫條件下自然凝血,4 ℃靜置過夜,3 500 r/min離心10 min,分離血清,按照試劑盒說明測定小鼠血清UA值;取肝臟制成10%組織勻漿,取上清液按照試劑盒說明測定肝臟中XOD活性。試驗分組以及給藥方案見表2。

    1.4.3 數(shù)據(jù)處理 試驗結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示,采用SPSS 17.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理,采用單因素方差(ANOVA)分析,用Duncan法進行多重比較。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對正常小鼠血清UA值的影響

    復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對正常小鼠血清UA值的影響結(jié)果見表3。由表3可見,各給藥組小鼠血清UA值與空白對照組相比,別嘌醇對照組極顯著降低(P<0.01),高劑量組顯著降低(P<0.05),中、低劑量組差異不顯著。這表明復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒在一定程度上具有降低正常小鼠血清UA值的作用。

    2.2 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠的影響

    2.2.1 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠血清UA值的影響 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠血清UA值的影響結(jié)果見表4。由表4可見,與空白對照組相比,陽性對照組小鼠血清UA值極顯著升高(P<0.01),表明本研究人工復(fù)制小鼠急性高尿酸血癥模型成功;各給藥組小鼠血清UA值與陽性對照組相比,均極顯著降低(P<0.01),表明復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒能很好的降低急性高尿酸血癥小鼠血清UA值,且其降尿酸作用呈一定的量效關(guān)系。

    2.2.2 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠肝臟中XOD活性的影響 復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒對急性高尿酸血癥小鼠肝臟中XOD活性的影響結(jié)果見表5。由表5可見,與空白對照組相比,陽性對照組小鼠肝臟中XOD活性差異不顯著;各給藥組小鼠肝臟中XOD活性與陽性對照組比較,別嘌醇對照組極顯著降低(P<0.01),高、中劑量組顯著降低(P<0.05),低劑量組差異不顯著。

    3 小結(jié)與討論

    家禽痛風(fēng)是一種蛋白質(zhì)代謝障礙引起的高尿酸血癥,系禽體內(nèi)尿酸產(chǎn)生過多或排泄障礙導(dǎo)致機體血尿酸水平急劇升高,進而尿酸鹽沉積在關(guān)節(jié)囊、軟骨、胸、腹腔等各內(nèi)臟器官表面或者其他組織中的一種代謝性疾病[5,6]。各日齡段家禽均可發(fā)生,尤以集約化養(yǎng)殖場產(chǎn)蛋雞的發(fā)病率更高,病雞瘦弱,生產(chǎn)性能下降,給養(yǎng)殖戶帶來較大的經(jīng)濟損失。目前對家禽痛風(fēng)的治療辦法不多,療效也不夠滿意[7]。引起體內(nèi)尿酸升高主要有兩個原因:一是體內(nèi)尿酸生成增加,二是體內(nèi)尿酸排泄障礙。氧嗪酸鉀是一種尿酸酶抑制劑,作為化學(xué)誘導(dǎo)劑可以抑制尿酸的分解,增加機體內(nèi)血清尿酸水平,從而造成動物的高尿酸血癥模型[3]。該方法具有操作簡單、重復(fù)性好等特點,在國際上已經(jīng)普遍用此模型評價藥物的抗高尿酸血癥以及痛風(fēng)作用[1,8,9]。

    黃嘌呤氧化酶(XOD)是一種氧化還原酶,廣泛存在于各種生物體內(nèi),以肝臟中含量最多[10],在嘌呤代謝中起著非常重要的作用,其在體內(nèi)的代謝路徑為:非嘌呤類前體物質(zhì)在生物體內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的生物轉(zhuǎn)化生成嘌呤類核苷酸黃嘌呤、次黃嘌呤,進一步分解生成次黃嘌呤和黃嘌呤,最后經(jīng)過黃嘌呤氧化酶的連續(xù)氧化最終生成尿酸[3,11]。因此,機體內(nèi)黃嘌呤氧化酶的活性大小直接調(diào)控著體內(nèi)尿酸水平的高低。本試驗結(jié)果表明,高劑量的復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒和別嘌醇都能極顯著地降低急性高尿酸血癥小鼠體內(nèi)血清尿酸值,且都能極顯著地抑制小鼠肝臟勻漿中XOD活性;中、低劑量均可將急性高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平恢復(fù)至正常,且中劑量顯著地抑制急性高尿酸血癥肝臟勻漿中XOD活性,低劑量組的XOD活性與空白對照組差異顯著,以上表明復(fù)方腫節(jié)風(fēng)顆粒具有很好的降尿酸作用,其降尿酸的強度具有一定的量效關(guān)系,并且其降尿酸的作用機制可能與其抑制XOD活性有關(guān)。

    參考文獻:

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