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    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠免疫功能的影響

    2013-09-05 14:22:08張榮泉呂方趙亞新羅威郭大生
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2013年7期
    關(guān)鍵詞:試物沖劑麥芽

    張榮泉,呂方,趙亞新,羅威 ,郭大生

    (1.天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所,天津 300020;2.天津市新天馬企業(yè)發(fā)展有限公司,天津 300221)

    硒是人和動(dòng)物所必需的微量元素,有多種重要的生物學(xué)功能。硒幾乎存在于所有免疫細(xì)胞中,補(bǔ)充硒可提高機(jī)體免疫力,從而起到防病的效果。自然界中,以0價(jià)態(tài)存在的硒是單質(zhì)硒,難以被生物吸收利用,生物學(xué)作用極低;無(wú)機(jī)硒中硒的價(jià)態(tài)是4+,6+,常見(jiàn)的這類化合物有Na2SeO3,Na2SeO4;有機(jī)硒中硒的價(jià)態(tài)通常是以-2存在,或者是與其他物質(zhì)以絡(luò)合態(tài)存在。硒的毒性就依賴于其化學(xué)形式[1]。

    有機(jī)硒,特別是通過(guò)植物、微生物轉(zhuǎn)化富集的有機(jī)硒,具有毒性低、吸收率高、生物利用率高及對(duì)環(huán)境污染小等優(yōu)點(diǎn),成為當(dāng)前研究和開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。

    麥苗具有的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要大于麥籽粒,利用其種芽生長(zhǎng)代謝迅速,營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化較快的特點(diǎn),可將無(wú)機(jī)硒富集轉(zhuǎn)化成為有機(jī)硒,有研究報(bào)道,這種富硒大麥苗的原汁可以提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力和抗雞紅細(xì)胞抗體的效價(jià)等免疫功能指標(biāo)[2]。富硒麥芽干粉還含一定量VE和VC前體,其毒性試驗(yàn)顯示急性毒性為實(shí)際無(wú)毒,三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)均為陰性結(jié)果[3]。

    為便于保存,方便食用,本實(shí)驗(yàn)將富硒麥芽苗的干粉為原料,制備成富硒麥芽沖劑,通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)觀察富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。

    1 材料與方法

    1.1 樣品與試劑

    富硒麥芽沖劑:批號(hào) 20110706,Se 0.667 mg/kg,天津市醫(yī)藥研究開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn);MTT、RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液:Gibco公司;小牛血清:中科院血液學(xué)研究所;綿羊紅細(xì)胞(SRBC)、補(bǔ)體(豚鼠血清)、SA緩沖液、Hank's液、雞紅細(xì)胞、Giemsa染液、PBS緩沖液、LDH基質(zhì)液、HCI、YAC-1細(xì)胞等。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    SPF級(jí)昆明種小鼠(雌性,160只,體重 18 g~22 g):中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所提供,合格證號(hào):SCXK-(軍)2009-003 0000371。

    1.3 方法

    動(dòng)物免疫功能實(shí)驗(yàn)方法按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003版)》規(guī)定進(jìn)行[4]。

    1.3.1 劑量選擇和分組

    本試驗(yàn)設(shè)3個(gè)劑量組,分別為1.0 g/kg·BW(低劑量組)、2.0 g/kg·BW(中劑量組)、4.0 g/kg·BW(高劑量組),各組分別稱取富硒麥芽沖劑10.0、20.0、40.0g,加蒸餾水至200 mL,混合均勻;每天灌胃一次,每次0.2 mL/10g·BW,對(duì)照組給予等量蒸餾水,連續(xù)30 d,末次給受試物后24 h測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。

    將小鼠隨機(jī)分為4個(gè)大組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ),每大組40只小鼠,每大組小鼠又分為4個(gè)小組,分別為對(duì)照組和低、中、高3個(gè)劑量組,每組10只;Ⅰ組進(jìn)行HC50測(cè)定、抗體生成細(xì)胞檢測(cè)和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng);Ⅱ組進(jìn)行小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞血紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和臟器/體重比值測(cè)定;Ⅲ組進(jìn)行碳廓清實(shí)驗(yàn);Ⅳ在進(jìn)行小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和NK細(xì)胞活性測(cè)定。

    1.3.2 半數(shù)溶血值(HC50)的測(cè)定

    給予受試物第25天后,每只動(dòng)物腹腔注射2%SRBC0.2 mL,再繼續(xù)給受試物至第30天時(shí),眼內(nèi)眥取血,離心收集血清,SA緩沖液稀釋300倍。管內(nèi)加入1 mL稀釋的血清、0.5 mL 10%SRBC和1 mL補(bǔ)體。另設(shè)不加血清對(duì)照管,37℃水浴20 min后,冰浴終止反應(yīng)。離心取1 mL上清,加3 mL都氏試劑為樣品管,同時(shí)加25 mL 10%SRBC加都氏試劑至4 mL用以測(cè)定SRBC半數(shù)溶血時(shí)的光密度值,充分混勻,放置10 min后,540 nm處測(cè)定各管光密度值。

    1.3.3 抗體生成細(xì)胞檢測(cè)

    給予受試物第25天后,每只動(dòng)物腹腔注射2%SRBC的0.2 mL,繼續(xù)給予受試物第30天后,脫臼處死小鼠取脾臟,制成細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL。將表層培養(yǎng)基加熱溶解,45℃水浴保溫,與等量2倍濃度Hank's液混合,分裝小試管,每管0.5 mL,加入50 μL 10%SRBC,20 μL 脾細(xì)胞懸液,混勻倒片,CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)1 h~1.5 h,加入用SA緩沖液稀釋的補(bǔ)體(1∶10),繼續(xù)培養(yǎng)1 h,計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。

    抗體生成細(xì)胞數(shù)(103/全脾)=觀察空斑數(shù)×稀釋倍數(shù)(400)/1 000

    1.3.4 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足跖增厚法)

    給予受試物第25天后,每只鼠腹腔注射0.2 mL 2%SRBC,再繼續(xù)給受試物至第30天時(shí)測(cè)量左后足距部厚度,同時(shí)在測(cè)量部位注射20 μL 20%SRBC,注射24 h后測(cè)量左后足距部厚度,同一部位測(cè)量三次,取平均值。

    攻擊前后足趾厚度差值(mm)=攻擊后足趾厚度-攻擊前足趾厚度

    1.3.5 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞血紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(半體內(nèi)法)

    給予受試物第32天,各組小鼠腹腔注射1mL20%雞紅細(xì)胞懸液,30 min后頸椎脫臼處死小鼠,腹腔注射生理鹽水2 mL,按揉腹壁1 min,吸出1 mL腹腔洗液,分滴于2片載玻片,置37℃孵育30 min,沖洗、固定,Giemsa染液染色計(jì)數(shù)。每張片計(jì)數(shù)100個(gè),按照下式計(jì)算吞噬指數(shù)和吞噬百分率[9]:

    1.3.6 臟器/體重比值測(cè)定

    給予受試物第30天,取胸腺、脾臟,分別稱出胸腺、脾臟重量,計(jì)算臟器/體重比值。

    1.3.7 小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)

    給予受試物31 d后,尾靜脈注射3.5倍稀釋的印度墨汁(0.1 mL/10 g·BW),分別于第 2、10分鐘眼內(nèi)毗取血20μL,加入到2.98mL0.1%碳酸鈉溶液中,600nm處測(cè)定各管光密度值。另取肝、脾稱重,按下式計(jì)算吞噬指數(shù)。

    1.3.8 ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT法)

    給予受試物33 d,無(wú)菌取脾,制成單細(xì)胞懸液。用Hank's液洗3次,每次1 000 r/min離心10 min,調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106個(gè)/mL,并將細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中,每孔 1 mL,一孔加75 μL ConA液(100 μg/mL),另一孔為對(duì)照,置 5%CO2,37℃孵箱中培養(yǎng)72 h。結(jié)束前,每孔吸去上清液0.7 mL,加入0.7 mL不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液,同時(shí)加入MTT(5 mg/mL)50 μL/孔,繼續(xù)培養(yǎng)。結(jié)束后,分裝 96孔培養(yǎng)板中,每個(gè)孔作3個(gè)平行孔,用酶標(biāo)儀以570 nm波長(zhǎng)測(cè)定光密度值。按下式計(jì)算光密度差值。

    光密度(ABS)差值=加ConA孔光密度-未加ConA孔光密度

    1.3.9 NK細(xì)胞活性測(cè)定(乳酸脫氫酶測(cè)定法)

    試驗(yàn)前24小時(shí)將YAC-1細(xì)胞(靶細(xì)胞)進(jìn)行傳代培養(yǎng),用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為4×105個(gè)/mL。無(wú)菌取脾,制成單細(xì)胞懸液。調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107個(gè)/mL。取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100 μL(效靶比50∶1),加入96孔培養(yǎng)板,靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100 μL,靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1%NP40各100 μL,設(shè)3個(gè)平行孔,37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h,每孔吸取上清液100 μL置96孔培養(yǎng)板中,同時(shí)加入100 μL LDH基質(zhì)液,反應(yīng)3 min,每孔加入30 μL 1mol/L的HCl,在酶標(biāo)儀492 nm按下式計(jì)算NK細(xì)胞活性:

    1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

    數(shù)據(jù)用SPSS11.5 for windows進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組采用方差分析,如方差不齊者采用數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換,轉(zhuǎn)換后仍不齊采用非參數(shù)統(tǒng)計(jì)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠體重的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠體重的影響,見(jiàn)表1。

    表1 受試物對(duì)免疫Ⅰ組小鼠體重增重的影響(g,±s)Table 1 The impact of test sample on weight gain of mice in ImmuneⅠgroup(g,x ±s)

    表1 受試物對(duì)免疫Ⅰ組小鼠體重增重的影響(g,±s)Table 1 The impact of test sample on weight gain of mice in ImmuneⅠgroup(g,x ±s)

    組別 劑量/(g/kg·BW)ⅠⅡⅢⅣ(n=10)對(duì)照組 0 16.4±1.0 16.3±1.0 16.7±1.1 16.3±0.7低劑量組 1.0 16.2±0.7 16.4±0.9 16.7±1.1 16.2±1.2中劑量組 2.0 16.7±0.6 15.9±0.7 16.0±0.9 16.6±0.9高劑量組 4.0 16.1±0.8 16.9±0.8 16.2±0.7 16.4±0.5(n=10) (n=10) (n=10)

    由表1可見(jiàn),經(jīng)口給予不同劑量的富硒麥芽沖劑30 d后,各組動(dòng)物生長(zhǎng)活動(dòng)良好,各劑量組動(dòng)物增重與對(duì)照組比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.2 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠臟器/體重比值的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠臟器/體重比值的影響,見(jiàn)表2。

    由表2可見(jiàn),各劑量組動(dòng)物脾臟、胸腺與對(duì)照組比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    表2 受試物對(duì)小鼠臟器/體重比值的影響(±s)Table 2 The impact of test sample on organ/body weight ratio of mice(±s)

    表2 受試物對(duì)小鼠臟器/體重比值的影響(±s)Table 2 The impact of test sample on organ/body weight ratio of mice(±s)

    脾臟/體重比值/%對(duì)照組 0 10 27.5±1.6 39.8±2.9低劑量組 1.0 10 28.2±2.0 39.1±3.2中劑量組 2.0 10 26.9±2.6 40.1±2.6高劑量組 4.0 10 27.8±1.4 38.5±3.1組別 劑量/(g/kg·BW) 動(dòng)物數(shù)/只 胸腺/體重比值/%

    2.3 富硒麥芽沖劑對(duì)體液免疫的影響

    2.3.1 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響,見(jiàn)表3。由表3可見(jiàn),高劑量組的小鼠半數(shù)溶血值(HC50)高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),中、低劑量組小鼠半數(shù)溶血值(HC50)與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    表3 受試物對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響(g,平均值±s)Table 3 The impact of test sample on half hemolysis value(HC50)of mice(±s)

    表3 受試物對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響(g,平均值±s)Table 3 The impact of test sample on half hemolysis value(HC50)of mice(±s)

    注:*與對(duì)照組比較P<0.05。

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只HC50對(duì)照組 0 10 170.9±24.5低劑量組 1.0 10 176.7±15.0中劑量組 2.0 10 193.9±24.9高劑量組 4.0 10 216.9±27.3

    2.3.2 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞試驗(yàn)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞試驗(yàn)的影響,見(jiàn)表4。

    表4 受試物對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞的影響(±s)Table 4 The impact of test sample on the antibody-producing cells of mice(±s)

    注:*與對(duì)照組比較P<0.05。

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只溶血空斑數(shù)(×103/全脾)對(duì)照組 0 10 34.4±10.7低劑量組 0.25 10 41.6±12.7中劑量組 0.50 10 46.8±10.5*高劑量組 1.00 10 49.7±8.7*

    由表4可見(jiàn),中、高劑量組的小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),低劑量組小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.4 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響

    2.4.1 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足距增厚法)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足距增厚法)的影響,見(jiàn)表5。

    表5 受試物對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足距增厚法)的影響(±s)Table 5 The impact of test sample on the delayed allergy of mice(foot from thickening method)(±s)

    表5 受試物對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足距增厚法)的影響(±s)Table 5 The impact of test sample on the delayed allergy of mice(foot from thickening method)(±s)

    注:*與對(duì)照組比較P<0.05。

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只攻擊前后足趾厚度差值/mm對(duì)照組 0 10 0.37±0.09低劑量組 1.0 10 0.39±0.11中劑量組 2.0 10 0.43±0.07高劑量組 4.0 10 0.49±0.08*

    由表5可見(jiàn),高劑量組的小鼠攻擊前后足趾厚度差值高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),中、低劑量組小鼠攻擊前后足趾厚度差值與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.4.2 富硒麥芽沖劑對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT法)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT法)的影響,見(jiàn)表6。

    表6 受試物對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響(±s)Table 6 The impact of test sample on the mice splenic lymphocyte transformation by ConA induction(±s)

    表6 受試物對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的影響(±s)Table 6 The impact of test sample on the mice splenic lymphocyte transformation by ConA induction(±s)

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只光密度差值對(duì)照組 0 10 0.247±0.032低劑量組 1.0 10 0.260±0.038中劑量組 2.0 10 0.251±0.032高劑量組 4.0 10 0.274±0.022

    由表6可見(jiàn),低、中、高三個(gè)劑量組小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化與對(duì)照組比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.5 富硒麥芽沖劑對(duì)單核一巨噬細(xì)胞功能的影響

    2.5.1 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)的影響,見(jiàn)表7。

    表7 受試物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)的影響(±s)Table 7 The impact of test sample on the mice peritoneal macrophage phagocytosing chicken red blood cell test(±s)

    表7 受試物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)的影響(±s)Table 7 The impact of test sample on the mice peritoneal macrophage phagocytosing chicken red blood cell test(±s)

    組別 劑量/(g/kg·BW) 動(dòng)物數(shù)/只 動(dòng)物數(shù)吞噬百分率/% 吞噬指數(shù)對(duì)照組 0 10 23.7±4.6 0.274±0.041低劑量組 0.25 10 24.6±5.1 0.286±0.055中劑量組 0.50 10 25.1±4.9 0.291±0.045高劑量組 1.00 10 22.5±3.5 0.269±0.031

    由表7可見(jiàn),三個(gè)劑量組小鼠的吞噬百分率及吞噬指數(shù)與對(duì)照組比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.5.2 富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠碳廓清試驗(yàn)的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠碳廓清試驗(yàn)的影響,見(jiàn)表8。

    表8 受試物對(duì)小鼠碳廓清試驗(yàn)的影響(±s)Table 8 The impact of test sample on mice carbon clearance test(±s)

    表8 受試物對(duì)小鼠碳廓清試驗(yàn)的影響(±s)Table 8 The impact of test sample on mice carbon clearance test(±s)

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只吞噬指數(shù)a對(duì)照組 0 10 5.80±0.88低劑量組 0.25 10 5.98±1.02中劑量組 0.50 10 6.21±0.85高劑量組 1.00 10 5.94±0.65

    由表8可見(jiàn),低、中、高三個(gè)劑量組的小鼠吞噬指數(shù)與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.6 富硒麥芽沖劑對(duì)NK細(xì)胞活性的影響

    富硒麥芽沖劑對(duì)NK細(xì)胞活性的影響,見(jiàn)表9。

    表9 受試物對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響(乳酸脫氫酶測(cè)定法)(±s)Table 9 The impact of test sample on the activity of natural killer cells in mice(lactate dehydrogenase assay)(±s)

    表9 受試物對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響(乳酸脫氫酶測(cè)定法)(±s)Table 9 The impact of test sample on the activity of natural killer cells in mice(lactate dehydrogenase assay)(±s)

    注:*與對(duì)照組比較P<0.05。

    組別劑量/(g/kg·BW)動(dòng)物數(shù)/只NK細(xì)胞活性/%對(duì)照組 0 10 20.9±6.1低劑量組 0.25 10 19.1±7.9中劑量組 0.50 10 31.7±7.1*高劑量組 1.00 10 32.7±10.2*

    由表9可見(jiàn),NK細(xì)胞活性檢測(cè)顯示中、高劑量組的NK細(xì)胞活性高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),低劑量組的NK細(xì)胞活性與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    經(jīng)口給予不同劑量的富硒麥芽沖劑30 d后,各組動(dòng)物生長(zhǎng)活動(dòng)正常。小鼠半數(shù)溶血值(HC50)試驗(yàn)顯示,高劑量組的半數(shù)溶血值(HC50)高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);小鼠抗體生成生成試驗(yàn)顯示,中、高劑量組的小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)顯示,高劑量組小鼠攻擊前后足距厚度差值高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);NK細(xì)胞活性檢測(cè)顯示,中、高劑量組NK細(xì)胞活性高于對(duì)照組(P<0.05)。其它各項(xiàng)試驗(yàn)未見(jiàn)免疫抑制現(xiàn)象。

    3 結(jié)果與討論

    植物中存在的有機(jī)硒主要是硒蛋氨酸,與無(wú)機(jī)硒源亞硒酸鈉相比,不具有氧化性,且在機(jī)體組織內(nèi)沉留率較高,安全范圍較大。秦秦的研究結(jié)果顯示,富硒麥芽的有機(jī)硒,毒性低于亞硒酸鈉[2]。

    研究認(rèn)為,硒在機(jī)體內(nèi)有兩個(gè)代謝庫(kù),硒蛋氨酸(Se-Mef)庫(kù)和其它形式硒庫(kù)。硒蛋氨酸可儲(chǔ)存于“Se-Mef庫(kù)”中,其他形式的硒不能轉(zhuǎn)化為Se-Mef儲(chǔ)存體內(nèi),因此欲維持機(jī)體有一定量的硒儲(chǔ)備,用硒蛋氨酸形式為佳。目前已測(cè)定出小麥、玉米和酵母等所含的硒,以硒蛋氨酸形式為主。植物中的有機(jī)硒種類很多,可從中篩選出安全有效的原料或添加劑[5-6]。

    富硒麥芽與其它硒產(chǎn)品比較,除含硒外,還含有膳食纖維、胡蘿卜素、尼克酸和維生素、葉綠素等活性物質(zhì),特別還含有豐富的酶。富硒麥芽中的酶提高所含硒的吸收利用率,又增強(qiáng)所含硒的生理功能,硒和酶的相互協(xié)同作用。

    已有富硒麥芽對(duì)腫瘤方面的作用研究報(bào)道[7-9],對(duì)小鼠免疫功能方面研究的報(bào)道使用的是新鮮富硒大麥苗原汁[2],與富硒麥芽原汁、富硒麥芽粉比較,將富硒麥芽粉制備成富硒麥芽沖劑,功效成分含量差異較小,使硒的食用劑量準(zhǔn)確安全可控;服用方便,特別適合有吞咽障礙或困難的人群,使用者服用的依從性好;便于保存、攜帶和運(yùn)輸。

    本試驗(yàn)以富硒麥芽粉為原料,制備成富硒麥芽沖劑,進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)觀察其對(duì)免疫功能的影響。結(jié)果顯示:富硒麥芽沖劑對(duì)小鼠體液免疫作用明顯,體液免疫指標(biāo),半數(shù)溶血值(HC50)測(cè)定中的高劑量組及抗體生成細(xì)胞檢測(cè)中的中、高劑量組結(jié)果均高于對(duì)照組(P<0.05);在細(xì)胞免疫指標(biāo),遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)顯示,高劑量組小鼠攻擊前后足距厚度差值高于對(duì)照組(P<0.05);在NK細(xì)胞活性檢測(cè)的中、高劑量組結(jié)果均高于對(duì)照組(P<0.05);其它各項(xiàng)試驗(yàn)未見(jiàn)免疫抑制現(xiàn)象;富硒麥芽為原料制備的富硒麥芽沖劑,同樣具有增強(qiáng)動(dòng)物免疫力功能的作用。

    [1]牟維鵬.不同化學(xué)形式硒的毒性作用機(jī)制[J].醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè),2001,28(4):202-205

    [2]肖顏顏,王曉潔,戴小曼,等.富硒大麥苗對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)[J].食品科學(xué),2009,30(23):401-405

    [3]秦秦,閻向東.有機(jī)硒富硒麥芽與無(wú)機(jī)硒亞硝酸鈉的毒性比較[J].衛(wèi)生毒理學(xué)雜志,1988,2(3):170-171

    [4]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003年版).[S].北京:衛(wèi)生部,2003:22-34

    [5]牟維鵬,田園,樸建華,等.亞硒酸鈉和硒蛋氨酸毒性的比較[J].衛(wèi)生研究,2004,33(6):700-703

    [6]果秀敏,牛君仿,方正,等.植物中硒的形態(tài)及其生理作用[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,26(增刊):142-143

    [7]劉家國(guó),趙圣.富硒麥芽對(duì)黃曲霉毒素B1致肝腫瘤大鼠抗氧化作用及γ-GT酶活性的影響[J].農(nóng)村.農(nóng)業(yè).農(nóng)民,2005(1):85-89

    [8]劉艷娟,譚勛,劉家國(guó),等.富硒麥芽對(duì)肝癌間質(zhì)微血管密度及癌細(xì)胞增殖的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,32(3):110-114

    [9]諸亞君,陳望秋,曹祿森,等.富硒麥芽粉對(duì)黃曲霉毒素誘導(dǎo)外周血白細(xì)胞DNA非程序合成的影響[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),1996,l2(3):248-251

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