狗脊飲片不同炮制品中原兒茶酸的含量測定

陳 征，李文莉，童 珂

（湖南省藥品檢驗所，湖南 長沙 410001）

狗脊為常用中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品[1]。《中華人民共和國藥典》一部各版均有收載。具有祛風(fēng)濕，補肝腎，強腰膝的功能。用于風(fēng)濕痹痛，腰膝酸軟，下肢無力[2]。中醫(yī)臨床運用確有療效。除藥材狗脊片外，主要炮制品有燙狗脊、蒸狗脊[3]。其主成分為原兒茶酸。為了探討狗脊飲片不同炮制品的內(nèi)在質(zhì)量，筆者收集了深圳、長沙、邵東、亳州四個地區(qū)使用的部分狗脊飲片，按檢驗順序編號，參照《中華人民共和國藥典》2010年版一部狗脊飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，逐一進行含量測定?，F(xiàn)將實驗方法及結(jié)果報道如下。

1 實驗材料

1.1 儀器

高效液相色譜儀：Agilent1100系列四元梯度泵、Agilent1100手動進樣器、Agilent1100系列二極管陣列檢測器、萬分之一電子分析天平（Adventurer）。

1.2 試藥

乙腈為色譜純，水為注射用水；其余試劑均為分析純。原兒茶酸對照品 （由中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用，110809-200604），對照藥材（由中國藥品生物制品檢定所提供供鑒別用，121071-200602）。

1.3 狗脊樣品

分別從深圳、長沙、邵東、亳州當(dāng)?shù)刂兴庯嬈净蛑兴幍曩徣?，?jīng)周新蓓副主任藥師鑒定為蚌殼蕨科植物金毛狗脊Cibofium barooomet(L.)j.Sm.的干燥根莖。

2 炮制方法[3]

狗脊片：取原藥材，除去雜質(zhì)，洗凈，潤透，切厚片，干燥，篩去碎屑。

燙狗脊片：取砂子置鍋內(nèi)，武火炒至油砂滑利時，投入狗脊片，照燙法 （《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》2010 年版附錄 1）［3］燙至鼓起，取出，篩去砂子，攤涼，除去殘存絨毛。

蒸狗脊片：取凈狗脊片，加酒拌勻，照蒸法（《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》附錄1）蒸4～6 h，悶6～8 h，取出，干燥。每100 kg狗脊，用黃酒15 kg。

3 含量測定

3.1 色譜條件

色譜柱：Hypersil ODS C18（4.6 mm×100 mm，5 μm）；流動相：乙腈-1%冰醋酸溶液(5∶95)，檢測波長：260 nm；柱溫：25 ℃；流速：1.0 mL/min。

3.2 對照品溶液的制備

取原兒茶酸對照品約6 mg，精密稱定，加甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液制成每1 mL含60.1μg的溶液，即得。

3.3 供試品溶液的制備

取狗脊藥材與狗脊不同炮制品粉末（過三號篩）各1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液25 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇-1%冰醋酸溶液(70∶30)混合溶液補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

3.4 樣品的測定

分別精密吸取原兒茶酸對照品與狗脊供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀中，按上述色譜條件測定。測定結(jié)果見圖1及表1。

圖1 狗脊不同炮制品高效液相色譜圖

表1 15個批次狗脊飲片中原兒茶酸含量測定結(jié)果 ，n=5）

表1 15個批次狗脊飲片中原兒茶酸含量測定結(jié)果 ，n=5）

注：與狗脊片組相比 *P＜0.05，**P＜0.01；與燙狗脊片組相比△P＜0.05。

樣品編號樣品來源湖南長沙批號20100109 20101020 20101027 20110107 20110228 20100110 20110309 20100922 20101021 20101215 20101223 20101224 20100824 20101227 20110108狗脊片mg/g RSD(%)燙狗脊片mg/g RSD(%)蒸狗脊片mg/g RSD(%)湖南邵東安徽亳州1234567891 0廣東深圳11 12 13 14 15 0.031 0.026 0.028 0.027 0.030 0.022 0.025 0.031 0.030 0.033 0.028 0.026 0.028 0.024 0.026 1.05 0.71 0.80 0.77 0.81 0.97 0.74 1.09 0.75 0.72 0.94 0.86 1.02 0.87 0.71 0.045 0.038 0.040 0.048 0.042 0.032 0.038 0.044 0.040 0.047 0.035 0.042 0.037 0.033 0.034 0.68 0.91 1.13 0.72 0.84 1.03 0.75 0.93 0.81 0.73 0.79 0.87 0.88 0.92 0.96 0.055 0.051 0.053 0.057 0.050 0.041 0.045 0.056 0.053 0.057 0.047 0.052 0.052 0.046 0.049 0.81 0.97 0.74 1.04 0.91 0.82 0.96 0.93 0.71 0.83 0.98 1.05 1.01 0.76 0.87

4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 15.0軟件進行統(tǒng)計，方差齊者，兩組比較用t檢驗，多組樣本間比較用單因素方差分析，組間比較用LSD法檢驗；方差不齊者用近似檢驗（t’檢驗）。

5 討論

試驗結(jié)果表明，狗脊片、燙狗脊片、蒸狗脊片中原兒茶酸的含量 (平均值)分別為0.028%、0.040%、0.051%，從高到低依次為：蒸狗脊片＞燙狗脊片＞狗脊片。與狗脊片組相比，另外兩組均高于狗脊片組（P＜0.05，P＜0.01），說明炮制后可提高原兒茶酸的含量；與燙狗脊片組相比，蒸法原兒茶酸含量高于燙法（P＜0.05），說明蒸法與燙法差異有統(tǒng)計學(xué)意義，蒸法優(yōu)于燙法。

本實驗15個批次的狗脊飲片原兒茶酸的含量差異，不僅是不同炮制品中有差異，同一炮制品中也存在差異。如：狗脊片中原兒茶酸高者0.033%,低者0.022%；燙狗脊片中原兒茶酸高者0.048%,低者0.032%；蒸狗脊片中原兒茶酸高者0.057%,低者0.041%。因素分析：（1）狗脊亙貨藥材本身存在質(zhì)量差異；（2）飲片在加工炮制與貯藏保管方面存在差異。通過對15個批次的狗脊飲片中原兒茶酸的含量測定，筆者認(rèn)為：中藥人員在中藥飲片炮制操作過程中，要嚴(yán)格遵守中藥炮制操作規(guī)程，盡可能減少中藥材主成分或中藥有效成分的損失；中藥庫房應(yīng)全面做好中藥飲片保管工作，確保中藥飲片質(zhì)量。

[1]肖培根.新編中藥志[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2002：611-614.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：209.

[3]湖南省食品藥品監(jiān)督管理局.湖南省中藥飲片炮制規(guī)范[M].長沙：湖南科技出版社，2010：45.