蒸狗脊質量標準研究

楊德泉 佘永紅 唐 慶 吉林芳 丁 野

1.湘西土家族苗族自治州食品藥品檢驗所，湖南 吉首 416000；2.湖南省藥品檢驗檢測研究院，湖南 長沙 410001

狗脊為蚌蕨科植物金毛狗脊Cibotiumbarometz(L.) J. Sm.的干燥根莖，別名：金毛狗脊、金毛狗、金狗脊、金毛獅子、猴毛頭、黃狗頭[1-2]。是歷代常用中藥，《神農本草經(jīng)》列為中品。性溫，味苦、甘。歸肝、腎經(jīng)。具有補肝腎、強腰脊、祛風濕的功效。臨床用于治療腰膝酸軟、下肢無力、風濕痹痛。狗脊的炮制飲片有凈狗脊片、燙狗脊、蒸狗脊等規(guī)格。其中，蒸狗脊為凈狗脊片加黃酒拌勻，經(jīng)蒸制4～6 h，悶6～8 h，取出，干燥所得的飲片[3]。中藥炮制理論認為，酒制狗脊具有增強“補肝腎，強腰膝”的作用[4]?，F(xiàn)代藥理研究[5]表明，狗脊能夠改善佐劑性關節(jié)炎大鼠及腎陽虛佐劑性關節(jié)炎大鼠血液流變性，通過活血化瘀起到一定的治療作用。狗脊及其炮制品和狗脊毛具有鎮(zhèn)痛作用和不同程度的活血作用[6]。狗脊各炮制品的正丁醇提取部位對于成骨細胞的增殖作用顯著[7]。蒸狗脊在抗骨質疏松癥作用方面有效[8]。趙敏杰等[9]報道，狗脊中總酚酸和多糖的含量經(jīng)酒制蒸炮制后由0.25%增加至1.38%，符合制狗脊“補肝腎作用增強”的傳統(tǒng)炮制理論。蒸狗脊收載于《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》2010年版，為進一步提升蒸狗脊的質量，筆者對蒸狗脊標準進行完善和提高研究，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 KM5200DE 型超聲波清洗器(昆山美美超聲儀器有限公司)；AUW220D電子天平( 日本島津公司)；GoodSee-10型薄層色譜成像儀(上海科哲生化科技有限公司)。

1.2 材料 蒸狗脊飲片(樣品編號1、2、3為湖南博世康中醫(yī)藥有限公司提供；樣品編號4、5、6為湖南振興中藥有限公司提供；樣品編號7、8、9為湖南衡岳中藥飲片有限公司提供)。狗脊對照藥材(中國食品藥品檢定研究院，批號：121071-201706)，原兒茶醛(中國食品藥品檢定研究院，批號：110810-201608)，原兒茶酸(中國食品藥品檢定研究院，批號：110809-200503)。所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 成品性狀 本品呈不規(guī)則塊狀，表面褐色或暗褐色，較平滑。近邊緣1～4 mm處有一條棕褐色隆起的環(huán)紋或條紋，中間淺棕褐色，滿布小點，周邊不整齊，偶有金黃色絨毛殘留。質地堅硬，角質。微有香氣，味微甘。如圖1所示。

2.2 薄層色譜鑒別 取本品粉末2 g，加甲醇 50 mL，超聲處理 30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取狗脊對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。取原兒茶醛對照品、原兒茶酸對照品，加甲醇制成每1 mL各含0.5 mg的溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2020年版四部0502)試驗，吸取供試品溶液3～6 μL、對照藥材溶液 4 μL、對照品溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1∶1)(臨用配制)，放置至斑點顯色清晰。實驗結果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點(圖2)。

2.3 檢查

2.3.1 水分 照《中國藥典》2020年版四部0832水分測定法第二法測定，平均值為9.97%，以平均值的120%設限，為12.0%，參考《中國藥典》2020年版一部狗脊項下該項目的限度，建議蒸狗脊的水分限度定為“不得過13.0%”。結果見表1。

2.3.2 總灰分 照《中國藥典》2020年版四部通則2302，測定9批蒸狗脊樣品的總灰分，平均值為2.11%，以平均值的120%設限，為2.5%，參考《中國藥典》2020年版一部狗脊項下該項目的限度，建議蒸狗脊的總灰分限度定為“不得過3.0%”。總灰分實驗結果見表1。

表1 蒸狗脊飲片浸出物測定數(shù)據(jù)

2.3.3 浸出物測定 照《中國藥典》2020年四部通則2201水溶性浸出物測定法熱浸法，測定9批蒸狗脊飲片的浸出物，平均值為34.69%，以平均值的80%設限，為27.8%，建議蒸狗脊的浸出物限度定為“不得少于27.0%”。浸出物實驗結果見表1。

3 討論

3.1 蒸狗脊薄層色譜鑒別的對照品選擇 狗脊主要化學成分[10-13]有原兒茶酸、原兒茶醛、金毛狗脊苷、金粉蕨素、金粉蕨素-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷醇、β-谷甾醇、β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷，胡蘿卜苷、正丁基-β-D-吡喃果糖苷、正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷、(3R)-去-O-甲基毛狄潑老素、山奈素、對羥基乙酰苯胺、香草醛、齊墩果酸、熊果酸、阿魏酸等成分。其中原兒茶酸、原兒茶醛為《中國藥典》2020年版狗脊的含量測定成分[14]，本次研究中以這兩個成分和狗脊藥材為對照品，定性鑒別蒸狗脊，結果得到的色譜圖清晰，斑點分離度良好。

3.2 蒸狗脊浸出物方法的選擇 《湖南省中藥飲片炮制規(guī)范》[3]2010年版蒸狗脊的浸出物測定采用以70%稀乙醇為溶劑，規(guī)定浸出物不得少于18.0%。本次研究采用水溶性浸出物測定法——熱浸法測定浸出物，浸出物的平均值為34.7%，更能體現(xiàn)蒸狗脊飲片成分在湯劑中的綜合煎出率情況，檢驗溶劑成本更低，是蒸狗脊質量控制的可靠方法。

蒸狗脊炮制歷史久遠?！独坠谥苏摗酚涊d:“凡修事，細銼了，酒拌，蒸，從已至申，出，曬干用?！薄短交菝窈蛣┚址健费裕骸胺彩?，先以猛火燎去毛，令凈，以酒浸一宿，蒸過焙干用?！惫芳挂蚪?jīng)蒸制或酒拌蒸后，補肝腎、強腰膝的作用增強，故為歷代醫(yī)藥家所重視，而應用至今。蒸狗脊的質量是其臨床療效的重要保證，本研究建立的蒸狗脊的性狀、鑒別、檢查(水分、總灰分)、浸出物測定方法，從定性和定量兩個方面，為蒸狗脊的質量控制提供了科學的方法。