氣相色譜法測定三七傷藥片中冰片的含量

楊亞麗 吳 芳 陜西省食品藥品檢驗(yàn)所(西安 710061)

三七傷藥片由三七、制草烏、雪上一枝蒿、冰片、骨碎補(bǔ)、紅花、接骨木、赤芍八味中藥組成,收載于《中國藥典》2010版一部。具有舒筋活血、散瘀止痛之功效。用于治療跌打損傷,風(fēng)濕瘀阻,關(guān)節(jié)痹痛,急慢性扭挫傷,神經(jīng)痛等癥。其中冰片作為處方中的君藥具有開竅醒神,清熱止痛的功效。近年來通過對(duì)市場抽檢樣品的檢測,我們發(fā)現(xiàn)含冰片制劑中冰片的質(zhì)量相差很大,有的甚至以樟腦代替冰片投料。為了更有效的控制三七傷藥片的內(nèi)在質(zhì)量,建立了該制劑中冰片的含量測定方法,從而保證臨床療效。

1 儀器、試藥及試劑 1.1儀器 Agilent 6890N氣相色譜儀,FID檢測器;Sartorius AG ME 235S型電子分析天平。

1.2 對(duì)照品及試劑 冰片對(duì)照藥材(批號(hào)為110743-200504)購自中國藥品生物制品檢定所;水楊酸甲酯和乙酸乙酯等試劑均為分析純。

1.3 樣品 三七傷藥片由生產(chǎn)企業(yè)提供。

2 色譜條件 采用彈性石英毛細(xì)管柱(柱長30m,內(nèi)徑 0.320mm,膜厚度 0.50 μ m)DB-W AX(聚乙二醇 -20M,Agilent公司);程序升溫:初始溫度120℃,以每分鐘 10℃的速率升溫至 180℃,保持3min;進(jìn)樣口溫度為 220℃,檢測器溫度為 250℃;分流比為 5:1。

3 方法與結(jié)果 3.1內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密稱取水楊酸甲酯 2.0183g,置于 1000m L容量瓶中,加入乙酸乙酯至刻度,搖勻;精密稱取以上溶液 125m L,置于 500mL容量瓶中,加入乙酸乙酯至刻度,搖勻即得.濃度為 0.5046mg/mL。

3.2 對(duì)照品溶液制備及校正因子計(jì)算 取冰片對(duì)照藥材適量,精密稱定兩份,分別置 25mL容量瓶中,加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密吸取2 μL,注入氣相色譜儀,以龍腦和異龍腦峰面積之和計(jì)算校正因子。平均值為 0.6804,RSD為 1.28%。結(jié)果見表 1。

表1 校正因子計(jì)算

3.3 供試品溶液的制備 取三七傷藥片樣品適量,研勻,精密稱取適量,置錐形瓶中,精密量取內(nèi)標(biāo)溶液 10mL,稱定重量,超聲 15min,放冷,稱定重量,用內(nèi)標(biāo)溶液補(bǔ)足減失的重量,搖勻,即得。

3.4 線性關(guān)系 精密稱取冰片對(duì)照藥材適量,置25mL容量瓶中,加內(nèi)標(biāo)溶液至刻度,搖勻,制成 4.9024mg/m L的溶液;精密吸取上述溶液依次加內(nèi)標(biāo)溶液進(jìn)行稀釋。以上溶液分別精密吸取 2 μ L,注入氣相色譜儀,測定峰面積。以溶液的濃度為橫坐標(biāo),以冰片的峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明線性關(guān)系良好。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果見表 2。

表2 冰片對(duì)照藥材(2 μ l)線性關(guān)系

3.5 專屬性試驗(yàn) 取對(duì)照藥材溶液、樣品溶液、陰性對(duì)照溶液,按本文條件分別進(jìn)樣,色譜圖見圖 1,結(jié)果表明,本條件下,陰性無干擾。

3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取三七傷藥片供試品溶液,每隔一定時(shí)間進(jìn)樣一次。因溶劑和待測成分均具有揮發(fā)性,故測定溶液在約 24h內(nèi)的峰面積,分別統(tǒng)計(jì)龍腦、異龍腦及冰片的峰面積。結(jié)果表明樣品溶液在 24h內(nèi)穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果見表 4。

圖1 對(duì)照藥材溶液、樣品溶液、陰性對(duì)照溶液色譜圖1 異龍腦 2 龍腦 3 水楊酸甲酯

表3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

3.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取三七傷藥片樣品,按供試品溶液制備方法制備 7份供試液并依次編號(hào) 1～ 7。同法進(jìn)樣,計(jì)算含量。結(jié)果表明重復(fù)性良好。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié) 果見表 5。

表4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

3.8 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取三七傷藥片樣品 0.1g,共稱 7份,分別置于錐形瓶中并依次編號(hào) 1～ 7;精密稱取冰片對(duì)照藥材 21mg,置于錐形瓶中,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液(含水楊酸甲酯為 0.504575mg/mL)100mL溶解,精密量取 10m L分別加入 1～ 7號(hào)錐形瓶中,各精密吸取 2 μL注入氣相色譜儀,計(jì)算加樣回收率。結(jié)果表明加樣回收率良好。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果見表 6。

表5 回收率實(shí)驗(yàn)

3.9 含量測定實(shí)驗(yàn) 取三七傷藥片樣品,按照供試品溶液處理方法制備供試液并測得峰面積進(jìn)行計(jì)算。測試結(jié)果見表 7。

表6 樣品含量測定結(jié)果

3.10 含量測定限度制定 根據(jù)樣品測定結(jié)果及處方中冰片的量,樣品含量測定限度暫定為:本品每片含冰片以龍腦(C10H18O)和異龍腦(C10H18O)的總量計(jì)不得少于 1.05mg。

4 討 論 4.1超聲時(shí)間決定了有效成分的析出 在實(shí)驗(yàn)過程中,研究了超聲時(shí)間對(duì)冰片含量的影響,確定超聲 15min為最佳條件。

4.2 根據(jù)三七傷藥片處方 冰片為 1.05g制成1000片,即每片含 1.05mg。生產(chǎn)廠家 3有一批樣品未檢出冰片;另外生產(chǎn)廠家 4雖檢出一定量的冰片,但同時(shí)檢出樟腦。根據(jù)測定結(jié)果,中藥制劑中冰片的投料存在問題比較突出,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)需要改進(jìn)和提高,以對(duì)制劑質(zhì)量進(jìn)行科學(xué)合理的控制。

[1] 中國藥典委員會(huì).中國藥典(一部 )[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:136.

[2] 張 磊.氣相色譜法測定一次性使用輸液器中環(huán)氧乙烷殘留量 [J].安徽醫(yī)藥,2009,13(10):1189-1190.