替代寄主狀態(tài)及飼養(yǎng)空間對東方平腹小蜂繁殖的影響

摘要

東方平腹小蜂Anastatus orientalis是斑衣蠟蟬Lycorma delicatula卵期的優(yōu)勢寄生性天敵。為提高東方平腹小蜂人工繁殖的生產(chǎn)效率，本研究探索了替代寄主柞蠶Antheraea pernyi交尾狀態(tài)和卵獲取方式（剖腹或自產(chǎn)）、柞蠶雌蛾貯存溫度和時長、寄主卵的消毒濃度和時間以及繁育空間大小對東方平腹小蜂寄生能力和雌性占比的影響。結(jié)果表明，東方平腹小蜂在非選擇性和選擇性條件下，均對未交尾剖腹柞蠶卵的寄生率最高，分別為36.8%和54.0%。當(dāng)柞蠶雌蛾貯存1 d時，東方平腹小蜂對其剖腹卵的寄生率在貯存溫度5～25℃范圍內(nèi)呈先增加后降低趨勢，并于20℃時達(dá)到最大值（81.3%）;當(dāng)雌蛾貯存3 d時，東方平腹小蜂的寄生率隨貯存溫度的升高而呈下降趨勢，5℃時寄生率最高（66.3%）。對柞蠶卵消毒時消毒液濃度和消毒時間對東方平腹小蜂的寄生率均具有顯著影響，其中以2%的苯扎溴銨溶液消毒處理5 min時寄生率最高。在單位寄生時間內(nèi)，東方平腹小蜂在小號養(yǎng)蟲盒（直徑5 cm，高度2 cm）中的寄生率最高（73.4%），并顯著高于大號養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度15 cm;56.4%）。柞蠶卵的交尾狀態(tài)和獲取方式、消毒濃度和時間以及繁育空間大小均對東方平腹小蜂的雌性占比無顯著影響。研究結(jié)果為提高利用柞蠶卵繁育寄生蜂的效率提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞

東方平腹小蜂; 斑衣蠟蟬; 柞蠶; 替代寄主; 人工繁殖

中圖分類號：

S 476.3

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2024460

Effects of substitute host conditions and rearing space on the reproduction of Anastatus orientalis

BAO Kexin1#， MAIMAITIJIANG·Rouzi2#， ZHUANG Yutong1，3， DANG Yingqiao1， WANG Xiaoyi1*

（1. Key Laboratory of Forest Protection of National Forestry and Grassland Administration， Ecology and Nature

Conservation Institute， Chinese Academy of Forestry， Beijing 100091， China; 2. Xinjiang Forestry School，

Urumqi 830026， China; 3. College of Forestry， Northeast Forestry University， Harbin 150040， China）

Abstract

Anastatus orientalis is a predominant egg parasitoid of Lycorma delicatula. To enhance the production efficiency of artificially reared A.orientalis， the effects of substitute host conditions， including the mating status and egg acquisition method （dissected or selflaid） of Antheraea pernyi， storage temperature and duration of female moths， egg disinfection concentration and time， and rearing space size， on the parasitism rate and female ratio of A.orientalis. The results showed that under both nonchoice and choice conditions， A.orientalis exhibited the highest parasitism rates on unmated， dissected A.pernyi eggs， reaching 36.8% and 54.0%， respectively. When female moths were stored for one day， parasitism rates on dissected eggs increased with temperature up to 20℃ （peak at 81.3%） and then declined. For storage of three days， parasitism decreased with increasing temperature， peaking at 5℃ （66.3%）. Both the concentration and duration of egg disinfection significantly affected parasitism， with the highest rate observed when eggs were treated with 2% benzalkonium bromide solution for five minutes. Regarding rearing space， the highest parasitism rate （73.4%） was achieved in a small rearing box （diameter 5 cm， height 2 cm）， significantly higher than in a large box （diameter 8.5 cm， height 15 cm; 56.4%）. Neither host mating status and egg acquisition method nor disinfection conditions and space size significantly affected the female ratio of A.orientalis. These findings provide valuable insights for improving the mass rearing of A.orientalis using A.pernyi eggs as a substitute host.

Key words

Anastatus orientalis; Lycorma delicatula; Antheraea pernyi; substitute host; mass rearing

斑衣蠟蟬Lycorma delicatula屬半翅目Hemiptera蠟蟬科Fulgoridae。最早記錄起源于中國，現(xiàn)廣泛分布于中國、日本、印度、孟加拉國和越南等國［1］，并已擴(kuò)散至韓國和美國［24］，成為一種國際檢疫性害蟲［5］。該害蟲主要為害臭椿Ailanthus altissima、香椿Toona sinensis和刺槐Robinia pseudoacacia等園林行道樹種以及葡萄Vitis vinifera、櫻桃Prunus pseudocerasus、獼猴桃Actinidia chinensis［68］和蘋果Malus pumila等經(jīng)濟(jì)樹種［68］。斑衣蠟蟬不僅可以直接吸食寄主植物的汁液，導(dǎo)致植株衰弱;同時也是柿屬Diospyros spp.植物柿瘋病的傳播媒介，嚴(yán)重時甚至導(dǎo)致柿樹死亡［910］。此外，斑衣蠟蟬的排泄物還可以引起寄主植物的煤污病，從而影響寄主植物的光合作用［11］，導(dǎo)致樹勢衰弱。目前斑衣蠟蟬的防治主要以化學(xué)防治為主，這不僅不利于保護(hù)生物多樣性和自然環(huán)境，還會給食品安全和人類健康帶來威脅［1213］。而與化學(xué)防治手段相比，生物防治具有安全、環(huán)保和控害作用持久等優(yōu)勢［1415］。研究人員發(fā)現(xiàn)，利用天敵進(jìn)行生物防治是控制斑衣蠟蟬種群密度、阻止柿瘋病傳播的重要手段之一［16］。

東方平腹小蜂Anastatus orientalis屬膜翅目Hymenoptera旋小蜂科Eupelmidae，是斑衣蠟蟬的一種卵期寄生蜂［1718］。自然條件下，東方平腹小蜂對斑衣蠟蟬卵塊的平均寄生率為30%～40%，室內(nèi)人工繁殖時可達(dá)77.3%［1617］，在生物防治斑衣蠟蟬中具有較大的應(yīng)用潛力［16，18］。利用原始寄主飼養(yǎng)東方平腹小蜂

是實(shí)現(xiàn)室內(nèi)擴(kuò)繁的主要手段［1920］。然而，研究人員在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，作為原始寄主的斑衣蠟蟬存在生活周期長、人工繁殖成活率低和卵塊難以大量獲取等問題［21］，致使東方平腹小蜂在人工繁育過程中受到了自然寄主卵較少的限制。

柞蠶Antheraea pernyi屬鱗翅目Lepidoptera大蠶蛾科Saturniidae柞蠶屬Antheraea，因具有卵粒大、易于繁殖和便于儲運(yùn)等特點(diǎn)，已成為多種卵寄生蜂替代寄主的首選［2223］。在中國，柞蠶卵已被廣泛應(yīng)用于平腹小蜂的人工繁殖，以促進(jìn)該寄生蜂在生物防治中的研究進(jìn)展［16，24］。目前，常用的繁殖方法是通過解剖獲取未交尾雌蛾的腹內(nèi)卵，再用0.1%苯扎溴銨溶液表面消毒10 min，最后清水沖洗并風(fēng)干卵體備用［2526］。然而，尚不清楚上述方法是否為東方平腹小蜂的最佳人工繁殖技術(shù)。已有研究表明，寄主卵的狀態(tài)對寄生蜂的繁殖具有重要影響。例如，陳巧賢等［27］研究發(fā)現(xiàn)，柞蠶卵的洗滌方法與卵內(nèi)失水量密切相關(guān)，進(jìn)而影響寄生蜂的繁殖效果。Wang等［28］明確了柞蠶卵的交尾狀態(tài)對寄生蜂的寄生率存在顯著影響。Zhao等［26］則發(fā)現(xiàn)寄主冷藏時間越長，寄生蜂后代羽化率越低。Liu等［29］研究結(jié)果也表明，柞蠶卵的不同消毒處理對寄生蜂的寄生率和羽化率均具有顯著影響。

盡管目前已有利用柞蠶卵成功繁育出東方平腹小蜂的報道，但這些研究主要集中于探究環(huán)境因子對該寄生蜂生物學(xué)特性的影響［19， 3032］，而對于替代寄主的不同處理以及繁育空間對東方平腹小蜂繁育效果的評估至今未見報道。鑒于此，本研究探索了替代寄主柞蠶交尾狀態(tài)和卵的獲取方式、雌蛾貯存溫度和時長、寄主卵的消毒濃度和時間以及繁育空間的大小對東方平腹小蜂寄生能力和雌性比的影響。研究結(jié)果旨在優(yōu)化利用柞蠶卵繁育東方平腹小蜂的條件，為今后大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)東方平腹小蜂天敵產(chǎn)品提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試蟲來源

1.1.1 東方平腹小蜂

東方平腹小蜂初始種源來自于北京市海淀區(qū)中國林業(yè)科學(xué)研究院（40°00′N， 116°23′E）臭椿樹上。采集后置于25℃、光周期L∥D=14 h∥10 h、相對濕度（60±5）% 的恒溫培養(yǎng)箱（PRX250B，寧波賽福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）內(nèi)，以柞蠶卵繁育3代以上備用。

1.1.2 寄主卵

供試柞蠶蛹購自遼寧寬甸紅石印象有限公司，于25℃、光周期L∥D=16 h∥8 h、RH 60%條件下飼養(yǎng)柞蠶蛹至羽化。將不同處理的寄主卵粒分別均勻置于涂有白乳膠的牛皮紙上，制備成卵卡（5 cm×5 cm）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 寄主的交尾狀態(tài)及卵獲取方式對東方平腹小蜂寄生能力和雌性比的影響

將已展翅、未交尾且小于1日齡的柞蠶蛾于原飼養(yǎng)環(huán)境中分別做以下4種處理：1）將雌蛾和雄蛾按照1∶1的比例置于紗網(wǎng)養(yǎng)蟲籠（20 cm×20 cm×20 cm，下同）中使其交尾48 h，收集雌蛾所產(chǎn)卵粒（交尾自產(chǎn)卵）;2）按照1）中的處理，柞蠶雌蛾交尾48 h后，取其剖腹卵（交尾剖腹卵）;3）將未交尾的雌蛾單獨(dú)置于紗網(wǎng)養(yǎng)蟲籠48 h后，收集雌蛾自產(chǎn)卵粒（未交尾自產(chǎn)卵）;4）將雌蛾單獨(dú)置于紗網(wǎng)養(yǎng)蟲籠48 h后，取其剖腹卵（未交尾剖腹卵）。試驗(yàn)中所獲得的柞蠶卵均用清水漂洗3遍，取出雜質(zhì)后晾干備用。

1.2.1.1 非選擇性試驗(yàn)

收集當(dāng)日獲得的4種處理的柞蠶卵各50粒，每處理單獨(dú)制備1張卵卡，

分別置于養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度8 cm）內(nèi)，盒內(nèi)事先放入2頭已交尾的雌性東方平腹小蜂，盒內(nèi)頂部涂布10%的蜂蜜水，養(yǎng)蟲盒置于25℃、光周期L∥D=12 h∥12 h、RH 60%、光照強(qiáng)度8 000 lx的條件下，寄生5 d后移除雌蜂。待子代羽化后，分別記錄羽化出的雌、雄蜂數(shù)量（A），直至連續(xù)7 d內(nèi)無東方平腹小蜂羽化為止。同時，在體視顯微鏡下解剖檢查柞蠶卵內(nèi)未羽化的寄生蜂數(shù)量（B）。按照公式分別統(tǒng)計并計算寄生率和雌性比，每個處理重復(fù)10次。

寄生率=A+B寄主卵總數(shù)×100%；

雌性比=羽化出的雌性寄生蜂數(shù)量羽化出的寄生蜂總數(shù)量。

1.2.1.2 選擇性試驗(yàn)

收集當(dāng)日獲得的4種處理的柞蠶卵各50粒，

每處理單獨(dú)制備1張卵卡，共制得4張卵卡

，同時置于內(nèi)有8頭已交尾的雌性東方平腹小蜂的養(yǎng)蟲盒中。共1個處理，重復(fù)5次。其余處理同1.2.1.1。

1.2.2 雌蛾的貯存溫度和時長對東方平腹小蜂寄生能力的影響

根據(jù)1.2.1的試驗(yàn)結(jié)果，選取未交尾剖腹的柞蠶卵作為寄主，即：將已展翅、未交尾的1日齡柞蠶雌蛾分別置于5、10、15、20℃和25℃下，每個溫度分別貯存1 d和3 d后，取其剖腹卵作為寄主。將已交尾的2頭雌性東方平腹小蜂分別置于內(nèi)有100粒不同處理的柞蠶卵卡的養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度8 cm）內(nèi)，盒內(nèi)頂部涂布10%的蜂蜜水，并于25℃、光周期L∥D=12 h∥12 h條件下寄生5 d后移除雌蜂，記錄并統(tǒng)計不同處理下東方平腹小蜂的寄生率。共10個處理，每處理重復(fù)4次。

1.2.3 寄主的消毒濃度和時間對東方平腹小蜂寄生能力和雌性比的影響

根據(jù)1.2.2的試驗(yàn)結(jié)果，將未交尾的1日齡柞蠶雌蛾置于20℃下發(fā)育1 d后，取其剖腹卵，用清水漂洗3遍，取出雜質(zhì)。將剖腹卵分別浸泡于0、0.1%、1%、2%或3%濃度的苯扎溴銨溶液［26］中5、10、15 min或20 min后，再用清水清洗3次。取2頭已交尾的雌性東方平腹小蜂按照1.2.2中的方法使其寄生100粒不同消毒處理的柞蠶卵制備的卵卡5 d，5個消毒濃度和4個時間，共20個處理，每處理重復(fù)5次。記錄并統(tǒng)計不同處理下東方平腹小蜂的羽化數(shù)量和雌性比。

1.2.4 繁育空間大小對東方平腹小蜂寄生能力和雌性比的影響

根據(jù)1.2.3的試驗(yàn)結(jié)果，以2%的苯扎溴銨溶液浸泡5 min后的柞蠶卵作為寄主。取20℃下發(fā)育1 d的未交尾1日齡柞蠶剖腹卵100粒，制備成1張卵卡。將卵卡分別置入3種不同規(guī)格飼養(yǎng)容器：小號養(yǎng)蟲盒（直徑5 cm，高度2 cm）;中號養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度8 cm）;大號養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度15 cm）中，分別接入2頭已交尾的雌性東方平腹小蜂，盒內(nèi)頂部涂布10%的蜂蜜水。寄生5 d后移除雌蜂，記錄并統(tǒng)計不同處理下東方平腹小蜂的寄生率和雌性比。共3個處理，每處理重復(fù)5次。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2016和JMP 10.0軟件對所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計和分析，采用Origin 2018繪圖。利用卡方檢驗(yàn)（χ2）比較分析寄主的交尾狀態(tài)和卵的獲取方式、貯存溫度和時長、消毒濃度和時間以及繁育空間的大小對東方平腹小蜂寄生率和雌性比的影響。

2 結(jié)果與分析

2.1 柞蠶的交尾狀態(tài)及卵的獲取方式對東方平腹小蜂寄生率和雌性比的影響

柞蠶的交尾狀態(tài)和卵的獲取方式對東方平腹小蜂的寄生率具有顯著影響。如圖1所示，在非選擇性和選擇性條件下卵的來源與東方平腹小蜂的寄生率顯著相關(guān)（非選擇：df=3，χ2=34.75，P＜0.001;選擇：df=3，χ2=90.33，P＜0.001）。東方平腹小蜂均對柞蠶未交尾剖腹卵的寄生率最高，其次為交尾剖腹卵和未交尾自產(chǎn)卵，而交尾自產(chǎn)卵最低。其中，在非選擇性試驗(yàn)中，無論柞蠶交尾與否，東方平腹小蜂對剖腹卵的寄生率均顯著高于自產(chǎn)卵;而在選擇性試驗(yàn)中，東方平腹小蜂對未交尾剖腹卵的寄生率最高，為54.0%。由圖2所示，不同交尾狀態(tài)和獲取方式下的柞蠶卵繁育出的東方平腹小蜂雌性比無顯著差異（非選擇：df=3，χ2=1.80，P=0.615;選擇：df=3，χ2=0.374，P=0.946）。

2.2 柞蠶雌蛾的貯存溫度和時長對東方平腹小蜂寄生率的影響

柞蠶雌蛾貯存溫度、時長以及兩因素的交互作用均對東方平腹小蜂的寄生率產(chǎn)生了顯著的影響（貯存溫度：df=4，χ2=178.19，P＜0.001;貯存時長：df=1，χ2=166.40，P＜0.001;兩因素的交互作用：df=2，χ2=345.52，P＜0.001）（表1）。在各雌蛾貯存時長下，不同貯存溫度對東方平腹小蜂的寄生率均存在顯著差異（1 d：df=4，χ2=403.74，P＜0.001;3 d：df=2，χ2=142.22，P＜0.001）。當(dāng)貯存時長為1 d時，隨著溫度的升高，東方平腹小蜂寄生率呈先上升后下降趨勢，于20℃達(dá)到最大值;但當(dāng)貯存時長為3 d時，隨著溫度的升高，東方平腹小蜂寄生率呈下降趨勢。

在各雌蛾貯存溫度下，貯存時長對東方平腹小蜂寄生率的影響也均存在顯著差異（5℃：df=1，χ2=167.02，P＜0.001;10℃：df=1，χ2=18.231，P＜0.001;15℃：df=1，χ2=166.396，P＜0.001）。在最低溫度（5℃）時，隨著貯存時長的延長，東方平腹小蜂的寄生率有所增加;但在10℃和15℃條件下，寄生率隨著貯存時長的延長而下降;在20℃和25℃條件下，雌蛾貯存時長為3 d時，雌蛾卵均自產(chǎn)出，腹部幾乎無卵。

2.3 寄主卵的消毒濃度和時間對東方平腹小蜂寄生率和雌性比的影響

柞蠶卵消毒濃度和消毒時間對東方平腹小蜂的寄生率均具有顯著影響（消毒濃度：df=4，χ2=35.31，P＜0.001;消毒時間：df=3，χ2=47.67，P＜0.001），但兩因素的交互作用并無顯著影響（df=12，χ2=10.94，P=0.53）。如圖3所示，在濃度為2%的苯扎溴銨消毒液處理下，東方平腹小蜂對消毒5 min（17.0%）和10 min（15.8%）柞蠶卵的寄生率顯著高于15 min（10.2%）和20 min（7.8%;df=3，χ2=27.04，P＜0.001）。同時，

使用3%苯扎溴銨消毒時，消毒時間對東方平腹小蜂的寄生率具有顯著影響（df=3，χ2=11.96，P＜0.01）。其中，消毒5 min處理的柞蠶卵寄生率最高（11.0%）。但在0、0.1%、1%的苯扎溴銨消毒液濃度中，各消毒時間下的東方平腹小蜂寄生率均無顯著差異（0：df=3，χ2=4.77，P=0.19;0.1%：df=3，χ2=7.65，P=0.05;1%：df=3，χ2=7.09，P=0.07）;當(dāng)寄主卵消毒時間為10 min和15 min時，不同濃度的苯扎溴銨消毒處理對東方平腹小蜂的寄生率具有顯著影響（10 min：df=4，χ2=20.48，P＜0.001;15 min：df=4，χ2=10.05，P＜0.05），但消毒5 min和20 min的柞蠶卵在各消毒濃度處理下東方平腹小蜂的寄生率均無顯著差異（5 min：df=4，χ2=7.71，P=0.10;20 min：df=4，χ2=8.18，P=0.09）。

柞蠶卵消毒濃度、消毒時間及兩因素的交互作用均對東方平腹小蜂的雌性比無顯著影響（消毒濃度：df=4，χ2=7.32，P=0.12;消毒時間：df=3，χ2=2.70，P=0.44;兩因素的交互作用：df=12，χ2=15.27，P=0.227）（圖4）。

2.4 繁育空間的大小對東方平腹小蜂的寄生率和雌性比的影響

如圖5所示，不同繁育空間大小對東方平腹小蜂的寄生率具有顯著影響（df=2，χ2=32.49，P＜0.001）。在一定寄生時間內(nèi)，東方平腹小蜂的寄生率隨著繁育空間的減小呈增高趨勢。其中，在小號養(yǎng)蟲盒（直徑5 cm，高度2 cm，73.4%）和中號養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度8 cm，66.8%）中，東方平腹小蜂的寄生率顯著高于大號養(yǎng)蟲盒（直徑8.5 cm，高度15 cm，56.4%）。但不同繁育空間的大小對東方平腹小蜂的雌性比并無顯著影響（df=2，χ2=1.02，P=0.60），飼養(yǎng)在小號、中號和大號養(yǎng)蟲盒中東方平腹小蜂的雌性比分別為0.89、0.92和0.90。

3 結(jié)論與討論

已有研究表明，寄主狀態(tài)和繁育空間大小對平腹小蜂的寄生效率具有顯著影響［15， 24， 33］。本研究發(fā)現(xiàn)，無論在非選擇性和選擇性條件下，東方平腹小蜂均能寄生所有處理下的柞蠶卵，但不同寄主狀態(tài)和飼養(yǎng)空間下的寄生率存在一定差異。其中，以柞蠶雌蛾于20℃貯存1 d后，取其剖腹卵，并用2%的苯扎溴銨溶液消毒5 min處理下的卵繁育東方平腹小蜂的效率最高;同時，東方平腹小蜂在小號養(yǎng)蟲盒（直徑5 cm，高度2 cm）中的寄生率最高。

鱗翅目昆蟲在交尾后，雄蟲精液中的一些物質(zhì)可對雌成蟲的卵巢發(fā)育具有顯著促進(jìn)作用，而交尾與未交尾的雌成蟲卵巢管長度、總卵粒數(shù)和成熟卵粒數(shù)均具有顯著變化［3435］，即發(fā)生所謂的交尾效應(yīng)。目前國內(nèi)外學(xué)者主要對鱗翅目卵的受精狀態(tài)對寄生蜂繁殖的影響開展了一系列研究。宋瓊婷［36］發(fā)現(xiàn)松毛蟲赤眼蜂Trichogramma dendrolimi對未受精的亞洲玉米螟Ostrinia furnacalis卵的寄生率顯著高于受精卵。Wang等［28］研究表明未受精的柞蠶卵更適合繁育松毛蟲赤眼蜂。Wang等［37］明確了短梗長尾嚙小蜂Aprostocetus brevipedicellus寄生未受精柞蠶卵的羽化率顯著高于受精卵。但寄主雌蛾的交尾狀態(tài)對繁殖寄生蜂的影響未見報道。本研究利用交尾與未交尾的雌蛾卵繁育東方平腹小蜂發(fā)現(xiàn)，無論是自產(chǎn)卵或剖腹卵，柞蠶雌蛾的交尾狀態(tài)對東方平腹小蜂的寄生率并無顯著影響。但東方平腹小蜂對柞蠶雌蛾剖腹卵的選擇性和寄生能力優(yōu)于自產(chǎn)卵，這與松毛蟲赤眼蜂［28］和短梗長尾嚙小蜂［37］的研究結(jié)果一致。已有研究表明，柞蠶卵殼的硬度與厚度是繁育某些寄生蜂的限制因素［28， 3840］，張敏玲［41］通過對比寄主卵殼厚度對擬澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum壽命和產(chǎn)卵量的影響，明確了寄主卵殼的厚度與寄生蜂的壽命和產(chǎn)卵量成反比。林英［42］也發(fā)現(xiàn)松毛蟲赤眼蜂在柞蠶自產(chǎn)卵上的發(fā)育歷期顯著高于剖腹卵，推測東方平腹小蜂對柞蠶剖腹卵的偏好寄生可能是由于柞蠶自產(chǎn)卵的卵殼厚于剖腹卵所致。

利用柞蠶卵繁育寄生蜂時，明確柞蠶卵的最佳成熟期尤為關(guān)鍵。初展翅的柞蠶腹中卵尚未完全成熟，若此時進(jìn)行剖腹取卵，因有大量未成熟卵，其無法成功繁育出寄生蜂，從而造成資源浪費(fèi)。另一方面，若取卵時間過晚，柞蠶會自行產(chǎn)卵，而自產(chǎn)卵會減低寄生蜂的寄生率。因此，明確柞蠶卵的最佳發(fā)育成熟期對于提高寄生蜂繁育效率具有重要意義。研究表明，在利用柞蠶卵作為替代寄主繁育寄生蜂時，科研人員多選用初羽化、未交配且完全展翅的柞蠶剖腹卵作為寄主。張晨等［43］以未交尾且完全展翅的柞蠶卵作為寄主繁育黏蟲赤眼蜂Trichogramma leucaniae。田春雨等［44］選用初羽化且完全展翅的柞蠶卵作為寄主，繁育玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae和松毛蟲赤眼蜂。劉鵬程［45］和魏曉燕［24］利用初羽化的柞蠶剖腹卵分別繁育出了日本平腹小蜂Anastatus japonicus和舞毒蛾卵平腹小蜂Anastatus disparis。然而，初展翅的柞蠶腹內(nèi)卵并未完全成熟，此時取雌蛾剖腹卵需剔除未成熟的綠色卵粒，造成大量寄主浪費(fèi)［46］。本研究探討了雌蛾貯存溫度和時長對柞蠶卵成熟度的影響，明確了最佳的柞蠶雌蛾貯存處理條件。在柞蠶雌蛾展翅后，將其置于15～25℃貯存1 d，未成熟的綠色卵可繼續(xù)發(fā)育至白色成熟的卵，可顯著提高雌蛾腹內(nèi)卵的成熟度，從而增加寄主卵的利用率，提高東方平腹小蜂的寄生能力、降低其繁育成本。

寄生蜂在寄生過程中依賴于寄主提供的養(yǎng)分和生長條件，以完成其生命周期［4748］。然而，當(dāng)寄主受到病原菌侵染時，其養(yǎng)分和生長條件會受到破壞，從而影響寄生蜂子代的生長發(fā)育［4950］，因此寄主前期的消毒滅菌處理尤為重要。通過有效的消毒滅菌處理，可以減少病原菌在寄主體內(nèi)的數(shù)量，降低其對寄主和寄生蜂的影響，提高寄生蜂的寄生效率和子代成活率。目前寄主卵常用的消毒劑包括福爾馬林、苯扎溴銨和氫氧化鈉等，不同消毒溶液所用的消毒濃度、時間和消毒對象不同，消毒效果也會存在很大差異。靳春成［51］將柞蠶卵置于3%福爾馬林消毒溶液中消毒30 min，可達(dá)到滅菌效果。唐振洪［52］研究表明，使用2.5%的福爾馬林浸泡木薯蠶Philosamia cynthia卵20 min，消毒效果最佳。本研究結(jié)果顯示，以2%的苯扎溴銨溶液浸泡5 min的柞蠶卵繁育出的東方平腹小蜂數(shù)量最多，該結(jié)論可為今后寄主卵的消毒處理提供參考依據(jù)。

在室內(nèi)擴(kuò)繁天敵時，繁育空間的大小亦對天敵的繁殖具有重要的影響。過于狹小的繁育空間會導(dǎo)致天敵個體間的激烈競爭，并出現(xiàn)打斗行為，影響親代壽命;過大空間則會增加天敵對寄主的尋找時間，降低尋找效率［53］，并導(dǎo)致資源浪費(fèi)，增加管理成本。劉曉虹等［54］探究了繁育空間大小對繁殖深點(diǎn)食螨瓢蟲Stethorus punctillum的影響，結(jié)果顯示較大的空間更利于提高深點(diǎn)食螨瓢蟲的產(chǎn)卵量。樊夢希等［55］也發(fā)現(xiàn)隨著繁育空間的增大，中華螯蜂Dryinus sinicus的存活率和結(jié)繭率呈現(xiàn)上升趨勢。然而，楊扇舟蛾Clostera anachoreta在較小的空間下更利于提高其產(chǎn)卵量［56］，這與本研究結(jié)果一致。東方平腹小蜂在小號（19.63 cm3/頭）、中號（226.87 cm3/頭）和大號（425.37 cm3/頭）養(yǎng)蟲盒中，其寄生率隨著每頭蜂所占繁育空間的減小而逐漸提高。其中，當(dāng)每頭寄生蜂所占繁育空間大于226.87 cm3時，東方平腹小蜂的寄生率則會顯著下降。推測可能是較小的空間更利于東方平腹小蜂尋找寄主，繼而在一定時間內(nèi)提高了寄生數(shù)量。不同的天敵昆蟲對繁育空間的需求也不同，應(yīng)針對不同種類的天敵，提供適宜繁育的空間大小。

綜上所述，東方平腹小蜂是斑衣蠟蟬卵期的重要寄生性天敵，可通過人工繁殖釋放方法，增加天敵的種群數(shù)量，進(jìn)而降低害蟲的種群密度。柞蠶作為價格低廉、便于運(yùn)輸和貯存的優(yōu)質(zhì)替代寄主，在東方平腹小蜂的人工繁殖中起到非常重要的作用。人工繁育東方平腹小蜂時，應(yīng)優(yōu)先選用柞蠶未受精的剖腹卵作為寄主;柞蠶雌蛾羽化當(dāng)日，于溫度20℃下貯存1 d時，其剖腹卵繁育出的東方平腹小蜂羽化數(shù)量最高;對寄主柞蠶卵消毒時，可選用2%的苯扎溴銨消毒液，消毒時間控制在5～10 min為佳;繁育東方平腹小蜂時，應(yīng)選用較小的空間，更利于其尋找寄主，提高其寄生效率。東方平腹小蜂能夠成功寄生磷翅目的柞蠶卵，與斑衣蠟蟬屬于不同目，說明該寄生蜂的寄主?；圆粡?qiáng)，寄主范圍較大，可能存在對非目標(biāo)害蟲的控制作用，需要進(jìn)一步深入研究。

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