基于LC－MS技術(shù)分析亞硒酸鈉毒害對水稻根系特征及酚酸類、黃酮類化合物積累動態(tài)的影響

中圖分類號：S511.01 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1002-1302（2025）11-0261-09

硒是人類和動物必需的微量營養(yǎng)元素[1]，世界衛(wèi)生組織建議人類飲食中硒攝人量為 50～55μg/d ，長期缺硒會導(dǎo)致人類心臟衰弱、關(guān)節(jié)軟骨組織萎縮壞死、甲狀腺功能異常等[2，食用富含硒的食物能夠降低這些疾病的發(fā)生。水稻是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一， 60% 人群將稻米作為主食。亞硒酸鈉是最常用的硒肥之一，施用硒肥能夠增加稻米中的硒含量[3]，但是硒對植物的重要性存在爭議，低劑量的硒可以保護(hù)植物免受各種非生物脅迫，促進(jìn)植物的生長發(fā)育；然而，高濃度的硒作為促氧化劑，將誘導(dǎo)植物的氧化應(yīng)激反應(yīng)或者形成畸形硒蛋白，造成植物硒中毒。Cartes等報(bào)道，低濃度的硒降低了鋁（Al）脅迫下黑麥草中過氧化氫（ H₂O₂ ）含量[4]；Cupta等研究發(fā)現(xiàn)，適量的硒濃度可以引發(fā)生長素的生物合成和運(yùn)輸，刺激煙草主根的伸長和側(cè)根的生長[5]。然而，Kapolna等研究發(fā)現(xiàn)，葉面噴施100mg/L 亞硒酸鈉造成胡蘿卜葉片壞死，肉質(zhì)根枯萎[;高濃度亞硒酸鈉能夠?qū)Ω收岙a(chǎn)生毒害效應(yīng)，導(dǎo)致根系活力降低、植株矮小、葉片枯黃等現(xiàn)象[7]

植物次生代謝物是一系列有機(jī)化合物，不直接參與植物的生長和發(fā)育，但在特定條件下發(fā)揮特殊功能，其缺乏會導(dǎo)致植物的生存能力受損[8]。酚酸類、黃酮類化合物作為廣泛存在于植物中的兩大類次生代謝產(chǎn)物，對于植物的生長發(fā)育具有重要的作用。暴露于不同的環(huán)境（干旱、重金屬、低溫/高溫、強(qiáng)光等）脅迫下，通過激活抗氧化防御系統(tǒng)，抑制產(chǎn)生活性氧（ROS）的酶活性，從而減少ROS的含量，保護(hù)植物的正常代謝活動[9-10]。干旱脅迫能夠調(diào)節(jié)酚酸和黃酮的生物合成途徑，導(dǎo)致這些化合物的積累增強(qiáng)，而這些物質(zhì)的增加可以防止植物免受缺水條件的不利影響[]。干旱脅迫增強(qiáng)了莧菜中酚酸含量，抗氧化能力增加[12]。Yang 等證明，干旱脅迫誘導(dǎo)黃酮類化合物的積累，從而促進(jìn)干旱馴化[13]。在重金屬脅迫下，酚酸類和黃酮類化合物可以增強(qiáng)金屬螯合過程，降低植物細(xì)胞中有害的羥基自由基水平[14-15]。Chen 等研究發(fā)現(xiàn)，酚酸（綠原酸、阿魏酸、咖啡酸）通過清除自由基和參與鎘（Cd）、鋅（ Zn^? ）的吸收過程，對緩解重金屬脅迫具有重要的地位[16]。鋁脅迫誘導(dǎo)山茶花中類黃酮代謝物（兒茶素、槲皮素等）顯著積累，進(jìn)而增強(qiáng)其鋁解毒能力[17]

盡管硒在調(diào)控植物的生長發(fā)育方面具有重要作用，但是水稻根系中酚酸類、黃酮類化合物對過量亞硒酸鈉的響應(yīng)機(jī)制鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)以哈育粳十一號為試驗(yàn)材料，采用不同濃度的亞硒酸鈉（0，40，80，400mg/L） 進(jìn)行葉片噴施處理;通過對水稻根系參數(shù)測定，篩選出對亞硒酸鈉脅迫處理反應(yīng)最顯著的樣品;同時(shí)，將 0mg/L 處理與其進(jìn)行廣泛靶向代謝組分析，比較2組樣品在亞硒酸鈉脅迫下酚酸類、黃酮類化合物含量的變化，以期為亞硒酸鈉在水稻分子育種中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試水稻品種為哈育粳十一號，由哈爾濱市農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究室提供。

于2023年4月在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部甜菜品質(zhì)檢驗(yàn)測試中心采用水培試驗(yàn)。用 5% 次氯酸鈉（NaCIO）溶液給種子表面消毒， 10min 后用蒸餾水清洗3次，將瀝干水分的種子均勻放入發(fā)芽盒（長 18cm× 寬 12cm× 高6cm ）中，每個(gè)發(fā)芽盒內(nèi)放置100粒種子，3次重復(fù)。發(fā)芽盒放置于恒溫培養(yǎng)箱（溫度： 25°C ，相對濕度：40% ）中進(jìn)行培育。7d后，將生長大小均勻一致的幼苗移入水培盒（長 30cm× 寬 20cm× 高 10cm ）中，每盆水培盒中移人30株幼苗，每盆重復(fù)3次，每周更換1次霍格蘭植物培養(yǎng)液（Hoagland's）。水稻幼苗生長條件為光一暗周期 16h-8h ，溫度 22‰ 。待幼苗長至4葉期時(shí)，參照饒玲的方法[18]對水稻幼苗葉片噴施不同濃度亞硒酸鈉溶液［0（CK）、40、 ，共噴施3次，水稻苗開始出現(xiàn)表型上的差異時(shí)收取樣品，每個(gè)處理挑選10株大小相同的水稻苗根部，收集的樣品立即放于 -80°C 冰箱保存。每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.2根系參數(shù)測定

根長：用直尺測量莖稈基部至整株根尖的距離；

根部鮮、干重：將整株根部表面的水分用濾紙吸干，稱量鮮重；然后于105 C 恒溫箱中殺青30min ，后將溫度降至 80°C 烘干至恒重，再稱量干重；

根系活力：采用氯化三苯基四氮唑（TTC）還原 法測定水稻根系活力[19]

1.3代謝物的檢測

將水稻根部樣品放置于LGJ-12A型凍干機(jī)（北京四環(huán)起航科技有限公司）中真空冷凍干燥，使用 KZ-III-FP 型高速低溫組織研磨儀（武漢塞維爾生物科技有限公司）將樣品研磨成粉末（粒徑 ? 0.25mm ）。稱取 50. 00mg 樣本粉末，加入預(yù)冷（ -20^°C 的 70% 甲醇水內(nèi)標(biāo)提取液 1.2mL ，使用渦旋振蕩儀將樣品混合均勻， 10000r/minΩ?⁴Φ^c 離心 10min 。取上清，過微孔濾膜（孔徑 0.22μm ，直徑13mm ），并保存于進(jìn)樣瓶中，上機(jī)測定[20]。UPLC－MS/MS操作參數(shù)和規(guī)格按照Wang等的設(shè)置[21]。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

使用Analyst1.6.3軟件處理質(zhì)譜數(shù)據(jù)，采用Excel2019、SPSS23.0、Origin2022軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析、繪圖。利用MetaboAnalyst（https：//www.metabpanalyst.ca/）在線平臺繪制主成分分析（PCA）圖和正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA）圖。

2 結(jié)果與分析

2.1亞硒酸鈉脅迫下水稻根系參數(shù)分析

由圖1可知， 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫處理后，哈育粳十一號的根系生長明顯受到抑制，與 0mg/L 處理相比， 400mg/L 亞硒酸鈉處理的水稻根長、根鮮重、根干重分別顯著下降了 33.09%.45.89% 、58.47% （ Plt;0.05 ）。其中，根系活性隨著亞硒酸鈉濃度的增加呈現(xiàn)明顯下降趨勢， 的亞硒酸鈉處理后，根系活性較 0mg/L 處理分別下降了28.63%.51.82% 。結(jié)果表明， 400mg/L 的亞硒酸鈉處理能夠顯著抑制水稻幼苗根系的生長。

2.2 0?400mg/L 亞硒酸鈉處理水稻根部代謝產(chǎn)物PCA分析和OPLS-DA分析

對樣品進(jìn)行PCA分析可知，PC1、PC2的方差貢獻(xiàn)率分別為 60.06% .14.31% ，CK與亞硒酸鈉脅迫處理間呈現(xiàn)明顯的分離趨勢，表明在亞硒酸鈉脅迫處理下水稻幼苗根部代謝物存在明顯差異（圖2-A）。

OPLS-DA分析可以與PCA分析互補(bǔ)，使組間區(qū)分最大化。對 0.400mg/L 亞硒酸鈉處理的水稻根部代謝產(chǎn)物進(jìn)行OPLS-DA組間差異性分析，結(jié)果再次證明，CK與 400mg/L 亞硒酸鈉處理之間的代謝物成分差異顯著，與PCA分析結(jié)果一致（圖2-B）。

2.3 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫下水稻幼苗根部代謝物分析

基于廣泛靶向代謝組分析測定在 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫下哈育粳十一號根部中代謝物和差異代謝物的成分。經(jīng)過質(zhì)量評估，共鑒定出1594種差異代謝產(chǎn)物（DAMs），被分為10類，其中次生代謝物主要有黃酮類、酚酸類、生物堿類、萜類化合物、有機(jī)酸類、木脂素、香豆素等。由圖3-A分析可知， 400mg/L 亞硒酸鈉處理后的大部分DAMs含量明顯低于 0mg/L 處理。

GO分析結(jié)果顯示，在代謝中，DAMs主要參與次生代謝物的生物合成代謝、輔助因子生物合成代謝和氨基酸生物合成；在基因信息處理中，DAMs主要參與硫傳遞系統(tǒng)和氨?；鵷RNA生物合成；在環(huán)境信息處理中，DAMs主要參與植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、磷脂酰肌醇信號系統(tǒng)和ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。京都基因與基因組百科全書（KEGG）分析結(jié)果顯示，共發(fā)現(xiàn)了90條代謝通路，DAMs富集最多的代謝通路主要為代謝通路、輔助因子的生物合成代謝、核苷酸代謝、ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等（圖3-B、圖3-C）。

2.4 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫下水稻幼苗根部中的關(guān)鍵差異代謝物分析

由圖4可知，以倍數(shù)變化（foldchange，F(xiàn)C） ?2 或 FC?0.5 且變量重要性投影（VIP值） gt;1 為條件篩選DAMs，在1594種DAMs中共鑒定出顯著變化的差異代謝物質(zhì)904種（803種下調(diào)表達(dá)，101種上調(diào)表達(dá)），顯著變化的差異次生代謝物包括黃酮類（140種， 15.4% ）、酚酸類（129種， 14.3% ）、生物堿類（87種， 9.6% ）、木脂素和香豆酸類（34種，3.8% ）、萜類（26種， 2.9% ）、有機(jī)酸類（67種，7.4% ）以及其他類代謝物（421種， 46.6% ）。這些代謝物的變化可能是為了抵抗ROS破壞，維持細(xì)胞滲透勢，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。

與 0mg/L 處理相比，在 400mg/L 亞硒酸鈉處理下酚酸類和黃酮類的差異代謝物含量最高，其中黃酮類代謝物主要成分包括黃酮（82種， 58.6% ）、黃酮醇（32種， 22.9% ）、二氫黃酮（11種， 7.9% ）、異黃酮（8種， 5.7% ）查爾酮（3種， 2.1% ）、二氫黃酮醇（2種， 1.4% ）黃烷醇類（2種， 1.4% ）。

2.5 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫下水稻幼苗根系中差 異代謝物質(zhì)的變化

從DAMs篩選中可以發(fā)現(xiàn)，鑒定出的顯著差異代謝物質(zhì)中黃酮類化合物和酚酸類代謝物的含量比例位于前列，因此本研究重點(diǎn)關(guān)注了酚酸類和黃酮類物質(zhì)的變化。

在 400mg/L 亞硒酸鈉處理下，水稻根系中鑒定出129種差異顯著的酚酸類物質(zhì)，包括110種酚酸下調(diào)表達(dá)：咖啡酸、2-氨基-3-甲氧基苯甲酸、綠原酸、2-羥基-3-苯基丙酸、阿魏酸、香豆酸甲酯、對香豆醇、丁香酸、2-0-咖啡酰蘋果酸、對香豆?？鼘幩帷⒔孀铀?、苯甲酰蘋果酸等，19種酚酸上調(diào)表達(dá)：肉桂酸、4-羥基-3-甲氧基苯甲醛、4-羥基苯甲醛、甲基丁香酚、間苯三酚、4-甲基苯甲酸、肉桂酸乙酯、香草酸乙酯等。

400mg/L 亞硒酸鈉脅迫后水稻幼苗根系中黃酮類化合物大部分呈現(xiàn)表達(dá)量下降的趨勢，有119種黃酮類下調(diào)表達(dá)，包含1種查爾酮（羥基異甘草素葡萄糖苷）、10 種二氫黃酮（圣草酚-8-C-葡萄糖苷 -4^′-O- 葡萄糖苷、6-碳葡萄糖基-2-羥基柚皮素等）1種二氫黃酮醇（二氫山柰酚-3-0-葡萄糖苷）、67種黃酮（香葉木素、金圣草黃素-5-0-葡萄糖苷、6，7，8-三羥基-5-甲氧基黃酮等）31種黃酮醇（鼠李檸檬素、山柰酚 -4^′- O-葡萄糖苷、槲皮素-3-0-洋槐糖苷、丁香亭等）1種黃烷醇類[沒食子兒茶素-（ ）-兒茶素]、8種異黃酮（8－甲氧基丙二?；⒈ㄜ铡⑷玖夏舅?-7-0- 半乳糖苷-鼠李糖 ?^2′- 羥基染料木素等）。21種黃酮類上調(diào)表達(dá)，包括15種黃酮[異甜橙黃酮、6-甲基黃酮、香葉木素 -8-C- （2^′-O- 阿拉伯糖基）葡萄糖苷 ，7，4^′- 二羥基黃酮等]、2種查爾酮（2，4-二羥基 -4^′- 甲氧基查爾酮、根皮素 -4^′-O- 葡萄糖苷），二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃酮醇苷、黃烷醇各1種，分別為 3^′，4^′，5，6 7-五甲氧基黃烷酮、二氫山柰酚-7-0-葡萄糖苷、異鼠李素、兒茶素。

本研究大部分酚酸類和黃酮類物質(zhì)表達(dá)下調(diào)，表明 400mg/L 亞硒酸鈉處理能夠明顯抑制水稻根系中黃酮和酚酸物質(zhì)的合成。

2.6亞硒酸鈉脅迫下水稻幼苗根系中差異代謝物的代謝途徑分析

2.6.1酚酸類物質(zhì)的代謝途徑分析苯丙烷代謝途徑是酚酸生物合成的主要途徑[22]，在該途徑中鑒定出10種表達(dá)變化明顯的酚酸類代謝物，包括L-酪氨酸、亞精胺、對香豆醇、綠原酸、對香豆酰奎尼酸、芥子酸、阿魏酸、咖啡酸，這8種酚酸物質(zhì)在400mg/L 亞硒酸鈉處理后均下調(diào)，而肉桂酸、甲基丁香酚表達(dá)上調(diào)。值得注意的是，對香豆?？鼘幩岵粌H參與苯丙烷代謝途徑的酚酸合成與代謝，也參與黃酮生物合成代謝途徑。表明各個(gè)代謝通路之

間具有一定的關(guān)聯(lián)性，DAMs既能參與某個(gè)特定的 明水稻幼苗根系遭遇亞硒酸鈉脅迫是一個(gè)復(fù)雜的代謝通路，也能在其他通路中發(fā)揮作用，進(jìn)一步闡 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)（圖5）。

2.6.2黃酮類物質(zhì)的代謝途徑分析本研究發(fā)現(xiàn)，參與黃酮類物質(zhì)的合成有2個(gè)關(guān)鍵代謝途徑，分別為黃酮類生物合成代謝途徑、黃酮和黃酮醇生物合成代謝途徑。在黃酮類生物合成代謝途徑中鑒定出7種明顯變化的黃酮類代謝產(chǎn)物，其中有5種黃酮類代謝物質(zhì)表達(dá)水平顯著下調(diào)，分別是木犀草素（3^′，4^′，5，7- 四羥基黃酮）、對香豆酰奎寧酸、4－香豆酰莽草酸酯、3，5，7-三羥基黃酮，而D-兒茶素和 ^7，4′- 二羥基黃酮這2種黃酮類代謝物顯著上調(diào)表達(dá)。同時(shí)，在黃酮和黃酮醇生物合成代謝途徑中也發(fā)現(xiàn)了7種顯著變化的黃酮類代謝產(chǎn)物，包括野漆樹苷、木犀草素、忍冬苦昔、三葉豆苷 ?3^′，5- 二羥基 ^{-3，4′，7-} 三甲氧基黃酮、蕓香苷、丁香素，這些代謝物質(zhì)均顯著下調(diào)表達(dá)。有趣的是，木犀草素同時(shí)參與黃酮類生物合成代謝途徑、黃酮和黃酮醇生物合成代謝途徑，該代謝物質(zhì)表達(dá)水平在2個(gè)黃酮類物質(zhì)合成關(guān)鍵途徑中均顯著下調(diào)?？偟膩碚f，這14種顯著變化的黃酮類代謝物質(zhì)大部分呈現(xiàn)表達(dá)水平下調(diào)的趨勢（圖6）。

3討論與結(jié)論

在高濃度亞硒酸鈉脅迫下，植物的表型性狀和生長狀態(tài)出現(xiàn)顯著變化，且地上部分指標(biāo)（株高、植物莖、葉物質(zhì)干重、生物量）和地下指標(biāo)（根長、根粗、根面積、生物量）更容易受到影響[22]。水稻吸收的亞硒酸鈉是稻田土壤中有效硒的主要形式之二[24]，被吸收后，大部分亞硒酸鈉被轉(zhuǎn)移到根細(xì)胞的質(zhì)體中，并在非酶促下還原為硒化物的谷胱甘肽，然后與其他反應(yīng)酶進(jìn)行結(jié)合生成硒代蛋氨酸和硒代半胱氨酸，這2個(gè)物質(zhì)可以中斷蛋白質(zhì)的正常功能并引起毒性[25]

根系活力泛指根的吸收能力、合成代謝等功能，可以直接反映植物根系的生長狀況，根系活力的強(qiáng)弱決定了植物對生長所需的礦質(zhì)元素和水分吸收能力，而礦質(zhì)元素和水分含量的增加可以促進(jìn)植物根系生長、增強(qiáng)養(yǎng)分吸收和氧化還原能力[26]與 0mg/L 處理相比，在 400mg/L 亞硒酸鈉處理下，根長、根鮮/干重和根系活力顯著下降。可能是高濃度的亞硒酸鈉阻礙了水稻根系對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、破壞了其氧化還原能力，進(jìn)而抑制根系的生長。

酚類化合物可以調(diào)節(jié)植物體內(nèi)生長素的代謝，改變生長素的含量，從而影響植物的生長發(fā)育[27]，酚酸類和黃酮類是酚類化合物的主要構(gòu)成物質(zhì)。酚酸類化合物參與控制不定根的形成和發(fā)育，在生根過程中通過抑制生長素（IAA）氧化酶系統(tǒng)來增強(qiáng)生長素活性，從而防止IAA 損傷[28]?？Х人崽幚砟軌蝻@著提高內(nèi)源IAA含量，提高牡丹生根率[29]

Mandal等研究發(fā)現(xiàn)，原兒茶酸、香豆酸和4-羥基苯甲醛也可以促進(jìn)根莖的形成和根系的生長發(fā)育[30]。黃酮類化合物被認(rèn)為可以調(diào)節(jié)側(cè)根發(fā)育[31]。IAA氧化酶活性受黃酮負(fù)向調(diào)節(jié)，生長素水平升高會增加細(xì)胞中活性氧（ROS）積累，從而抑制植物根毛的發(fā)育[32-33]。在擬南芥中，黃酮醇通過清除 ROS 調(diào)控側(cè)根的產(chǎn)生[34]

同時(shí)，酚酸和黃酮類化合物具有強(qiáng)大的抗氧化能力，在非生物脅迫下可以清除植物體內(nèi)的ROS^[35-36] 。例如，在鹽脅迫下提高植物體內(nèi)的酚酸類物質(zhì)含量能夠有效清除 O₂^- ·，提高植物的抗氧化能力[37]。在UV-B輻射處理下，增加小麥中酚酸類物質(zhì)的積累可以增強(qiáng)其抗氧化活性[38]。方紫雯等研究報(bào)道，適量的阿魏酸處理可以顯著提高楊山牡丹葉片中的抗氧化酶活性，降低ROS積累，從而減少干旱脅迫對植株的傷害[39]。在鹽脅迫中，過量積累黃酮類物質(zhì)的擬南芥表現(xiàn)出高抗氧化性，能夠減少ROS 積累，延長對鹽脅迫的耐性[40]。Jan 等的研究表明，熱脅迫下植物體內(nèi)的氧化損傷增加，而黃酮類含量的積累能夠減輕其損傷[41]

本研究結(jié)果表明，在 400mg/L 亞硒酸鈉脅迫下，水稻根系生物量明顯受到抑制（根長縮短、根鮮/干重下降、根活性降低），根系中大部分的酚酸類、黃酮類物質(zhì)表達(dá)量呈現(xiàn)下降趨勢，高濃度亞硒酸鈉處理可能已經(jīng)超過水稻根系耐受閾值，致使水稻根系中抑制IAA氧化酶系統(tǒng)物質(zhì)含量減少，生長素活性降低，導(dǎo)致內(nèi)源IAA含量顯著下降，水稻側(cè)根、不定根的形成和發(fā)育受到嚴(yán)重抑制或者抗氧化代謝產(chǎn)物積累的減少，驅(qū)動側(cè)根出現(xiàn)大量的超氧化物，削弱了水稻根部對過量亞硒酸鈉解毒能力，造成毒害物質(zhì)的大量增加，破壞了水稻根系的正常生長。

本研究以哈育粳十一號為試驗(yàn)材料，隨著亞硒酸鈉濃度的增加，水稻根長、根鮮/干重和根系活力逐漸呈現(xiàn)下降的趨勢，與 0mg/L 相比， 400mg/L 亞硒酸鈉處理下的水稻根長、根鮮重、根干重分別下降了 33.09%.45.89%.58.39% 。因此，將 0mg/L 和 400mg/L 亞硒酸鈉處理樣品進(jìn)行廣泛靶向代謝組測序，共鑒定出1594種DAMs，其中顯著變化的DAMs有904種，黃酮類化合物140種和酚酸類化合物129種。與 0mg/L 相比，在 400mg/L 濃度的亞硒酸鈉處理下酚酸類和黃酮類的差異代謝物下調(diào)表達(dá)最明顯。在差異代謝物KEGG功能注釋及富集上共發(fā)現(xiàn)了90條代謝通路，DAMs富集最多且顯著的代謝通路主要為代謝通路、輔助因子的生物合成、ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、碳代謝途徑等。在苯丙烷代謝途徑中鑒定出10種表達(dá)水平變化明顯的酚酸類代謝物；在黃酮類生物合成代謝途徑、黃酮和黃酮醇生物合成代謝途徑檢測到的140種中有14個(gè)DAMs含量變化顯著，這10種酚酸類化合物和14種黃酮類化合物大部分下調(diào)表達(dá)。以上結(jié)果為了解亞硒酸鈉脅迫下水稻根系次生代謝物的變化提供了理論依據(jù)。但是本研究屬于室內(nèi)研究結(jié)果，實(shí)際效果會受到自然因素（高溫、干旱、大風(fēng)、暴雨）的影響，須要進(jìn)行大規(guī)模的田間試驗(yàn)來驗(yàn)證實(shí)際應(yīng)用的效果。

參考文獻(xiàn)：

[1]Gui JY，Rao S，HuangXR，et al. Interaction between selenium and essential micronutrient elements inplants：a systematic review[J]. Science of the Total Environment，2022，853：158673.

[2]Benstoem C，GoetzenichA，Kraemer S，et al.Selenium and its supplementation in cardiovascular disease：what do we know？[J]. Nutrients，2015，7（5） ：3094-3118.

[3]Marques A C，Lidon F C，Coelho A RF，et al.Quantification and tissue localization of selenium inrice（Oryza SativaL.，Poaceae） grains：a perspective of agronomic biofortification[J].Plants，2020，9 （12） ：1670.

[4]CartesP，Jara A A，PinillaL，et al.Seleniumimprovesthe antioxidant ability against aluminium-induced oxidative stress in ryegrass roots[J].Annals of Applied Biology，2010，156（2）：297- 307.

[5]Gupta M，Gupta S. An overview of selenium uptake，metabolism，and toxicityinplants[J].FrontiersinPlant Science，2017，7：2074.

[6]KápolnaE，Hillestrom PR，Laursen KH，etal.Effect of foliar application of selenium on its uptake and speciation in carrot[J]. Food Chemistry，2009，115（4）：1357-136.

[7]JainR，Verma R，Singh A，et al.Influence of seleniumon metallothionein gene expression and physiological characteristicsof sugarcaneplants[J]. Plant Growth Regulation，2015，77（2）：109- 115.

[8]Isah T. Stress and defense responses in plant secondary metabolites production[J].Biological Research，2019，52（1） ：39.

[9]Sharma A，ShahzadB，Rehman A，et al.Responseof phenylpropanoid pathway and the role of polyphenols in plants under abiotic stress[J].Molecules，2019，24（13）：2452.

[10]Shomali A，Das S，Arif N，et al． Diverse physiological roles of flavonoids in plant environmental stress responses and tolerance[J]. Plants，2022，11（22） ：3158.

[11]Li M ，LiYM，ZhangWD，etal.Metabolomicsanalysisreveals that elevated atmospheric CO₂ alleviates drought stress in cucumber seedling leaves[J]. Analytical Biochemistry，2018，559：71-85.

[12]Sarker U，Oba S. Drought stress enhances nutritional and bioactive compounds，phenolic acidsand antioxidant capacity of Amaranthus leafy vegetable[J]. BMC Plant Biology，2018，18（1） ：258. biosynthesis of flavonoids in leaves and saikosaponins in roots of Bupleurum chinense DC[J]. Phytochemistry，2020，177：112434.

[14]Kisa D，Elmastas M，Ozturk L，et al. Responses of the phenolic compounds of Zea mays under heavy metal stress[J]．Applied Biological Chemistry，2016，59（6）：81320.

[15]Handa N，Kohli SK，Sharma A，et al．Selenium ameliorates chromium toxicity through modificationsinpigment system， antioxidative capacity，osmotic system，and metal chelatorsin Brassica juceaseedlings[J].South African Jouralof Botany， 2018，119：1-10.

[16]ChenS，LinRY，LuHL，et al.Effectsof phenolic acids on free radicalscavenging and heavy metal bioavailability in Kandelia obovata under cadmium and zinc stress[J]. Chemosphere，2020， 249：126341.

[17]Wang Y，Cheng JS，Wei SL，et al. Metabolomic study of flavonoids in Camellia drupifera under aluminum stress by UPLC -MS/MS [J].Plants，2023，12（7） ：1432.

[18]饒玲.不同外源硒對干旱脅迫下黃瓜生長的影響[D]．重 慶：西南大學(xué)，2017.

[19]趙世杰．植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M]．北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù) 出版社，1998.

[20]張琴，黃世安，林 欣，等．基于UPLC-MS/MS 的3個(gè)李品種 果實(shí)初生代謝物分析[J]：食品科學(xué)，2022，43（16）：226－234.

[21]WangX，Zhang XC，Hou HX，etal.Metabolomicsand gene expressionanalysisrevealtheaccumulationpattrnsof phenylpropanoidsand flavonoids in diffrent colored-grain wheats （Triticum aestivum L.）[J].Food Research International，2020， 138：109711.

[22]尚軍，吳旺澤，馬永貴．植物苯丙烷代謝途徑[J]．中國生物 化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)，2022，38（11）：1467－1476.

[23]Santos Vzquez M，Benavides Mendoza A，RuizTorres N，et al. Sodium selenite treatment of vegetable seeds and seedlings and the effect on antioxidant status[J].Emirates Journal of Food and Agriculture，2016，28（8） ：589.

[24]Zhang L H，Shi W M，Wang X C.Difference in selenite absorption between high- and low-selenium rice cultivars and its mechanism [J].Plant and Soil，2006，282（1）：183-193.

[25]Ng B H，Anderson JW.Synthesis of selenocysteine bycysteine synthases from selenium accumulator and non-accumulator plants [J].Phytochemistry，1978，17（12）：2069-2074.

[26]Freschet G T，Roumet C，Comas L H，et al. Root traits as drivers of plant and ecosystem functioning：current understanding，pitfalls and future research needs[J]. NewPhytologist，2021，232（3）：1123- 1158.

[27]Cheynier V，Comte G，Davies K M，etal.Plant phenolics;recent advances on their biosynthesis，genetics，and ecophysiology[J]. Plant Physiology and Biochemistry，2013，72：1-20. compoundsonadventitiousrootformationandoxidative decarboxylation of applied indoleacetic acid in Malus‘Jork 9'[J]. Plant Growth Regulation，2011，63（2）：175-185.

[29]Shang W Q， Wang Z，He S L，et al. Research on the relationship betweenphenolic acids and rooting of treepeony（Paeonia suffruticosa）plantletsin vitro[J].ScientiaHorticulturae，2017， 224 ：53 -60.

[30]Mandal S M，Mandal M，Das AK，et al.Stimulationof indoleacetic acid production in a Rhizobium isolate of Vigna mungo by root nodule phenolicacids[J]．Archives of Microbiology，2009，191 （4） ：389 -393.

[31]BrownDE，RashotteAM，MurphyA S，etal.Flavonoids act as negativeregulators of auxin transport in vivo in Arabidopsis[J]. PlantPhysiology，2001，126（2）：524-535.

[32]Gayomba S R，Muday G K. Flavonols regulate root hair development by modulating accumulation of reactive oxygen species in the root epidermis[J].Development，2020，147（8）：dev185819.

[33]PeerWA，ChengY，MurphyAS.Evidence of oxidative attenuation of auxin signalling[J].Journal of Experimental Botany，2013，64 （9） ：2629 -2639.

[34]Chapman JM，Muday G K.Flavonolsmodulate lateralroot emergence by scavenging reactive oxygen species in Arabidopsis thaliana[J]. Journal of Biological Chemistry，2021，296：100222.

[35]Sharma A，Shahzad B，RehmanA，et al.Responseof phenylpropanoid pathwayand the role of polyphenols in plants under abiotic stress[J].Molecules，2019，24（13）：2452.

[36]Dias MC，Pinto DC GA，Silva A MS. Plant flavonoids：chemical characteristics and biological activity[J]. Molecules，2021，26 （17） ：5377.

[37]Bistgani Z E，Hashemi M，DaCosta M ，et al. Effect of salinity stress onthe physiological characteristics，phenolic compoundsand antioxidant activity of Thymus vulgaris L. and Thymus daenensis Celak[J]. Industrial Crops and Products，2019，135;311-320.

[38]Chen ZJ，Ma Y，YangRQ，et al.Effects of exogenous Ca²⁺ on phenolic accumulation and physiological changes in germinated wheat（Triticum aestivum L.）under UV-B radiation[J].Food Chemistry，2019，288：368 -376.

[39]方紫雯，張夏燕，陶俊，等．阿魏酸對鳳丹干旱脅迫的緩解效 應(yīng)［J]．植物研究，2020，40（3）：353-359.

[40]LiQ，Yu H M，Meng X F，et al. Ectopic expression of glycosyltransferase UGT76E11 increases flavonoid accumulation and enhances abiotic stress tolerance in Arabidopsis[J]．Plant Biology，， 2018，20（1） ：10-19.

[41]Jan R，Kim N，Lee S H，et al.Enhanced flavonoid accumulation reduces combined salt and heat stress through regulationof transcriptional and hormonal mechanisms[J]．Frontiers in Plant Science，2021，12：796956.