桑菊飲顆粒劑的制備及4種化學(xué)成分的含量測定

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007－8517（2025）12-0039-06

DOI： 10.3969/j .issn.1007-8517.2025.12.zgmzmjyyzz202512010

Abstract：ObjectiveToexplore thepreparationprocessofSangjuYingranulesandestablishahigh-performanceliquidchromatography（HPLC）metodforsimultaneousdetemnationfchrogenicaid，uteoloside，utinandpllyincontentinSngjuYin granules.Methods Prepare Sangju Yingranulesthroughwet granulationprocess；HPLCmethodwasused todeterminethecontentsof chlorogenicacid，luteoloside，rutin，and philyrin in SangjuYingranules.The chromatographic column wasODS -C₁₈ column，and the mobile phase was acetonitrile 0.4% phosphoric acid water. Gradient elution was performed with a volume flow rate of 1.0mL/min The column temperature is 30^qC ，the detection wavelengths are 348 nm and 277 nm，and the injection volume is 5μL .Results The preparation process of Sangju Yin granules is Sangju Yin extract： corn starch： sucrose .The obtained granules have a light brownappearance，uniformparticlesize，onsistentcolor，andgodsolubilityTelinearrangesofchlorogeniccid，uteolosdeu tin，and phillyrin are 7.03-140.67μg/mL 6.40-128.00μg/mL ， 6.03-120.67μg/mL ，and 5.87-117.33μg/mL ，respectively，withcoelatiocoeficints（r）of.9998，.9998，.98，and1，spctively；everagesampleecoeryateswer 101.09v% ， 100.98% ， 99.34% ，and 100.34% ，respectively，with RSDsof 1 60% ，1. 87% ， 2.67% ，and 2，40% ，respectively. ConclusionsThepreparationprocessofSangjuYingranulesisstableandfeasible，andthemethodsfordeterminingthecontentsof chlorogenicacid，uteoloside，rutin，andphilyrinareacurateandreliable，whichcanbeusedforqualitycontrolofteales.

KeyWords：Sangju Yin Granules；HPLC；Chlorogenic acid;Luteoloside；Rutin；Phillyrin

桑菊飲為中藥傳統(tǒng)復(fù)方，屬辛涼解表之輕劑，源于清代溫病學(xué)家吳鞠通所著《溫病條辨》卷一上焦篇，書中記載“此辛甘化風(fēng)，辛涼微苦之方也”[1]。該方由桑葉 （7.5g） 、菊花（ （3g） 、苦杏仁 （6Π₆） 、連翹（ （5g） 、薄荷（ （2.5g） 、桔梗（6g）、甘草 （2.5g） 、蘆根（ ）組成，全方具有疏風(fēng)清熱，宣肺止咳之功效，主治風(fēng)溫初起，表征輕癥，臨床上用于治療肺炎[2]、新型冠狀病毒肺炎[3]、急性支氣管炎[4]、上呼吸道感染[5]、急性肺損傷[6等。桑菊飲傳統(tǒng)用藥為湯劑，作為中醫(yī)治療疾病的主要劑型，湯劑組方靈活、可以隨證加減用藥，且起效速度快，但存在口感較差、體積較大、攜帶不便等缺點[7]。

顆粒劑不僅具有服用方便、外觀美觀、口感較好，而且藥物溶出迅速、吸收快、生物利用度也高，能夠被大多數(shù)患者接受。目前，關(guān)于桑菊飲顆粒劑的制備及多種成分的含量測定尚未見到報道，因此本研究采用傳統(tǒng)的水煎煮法最大程度保持與原湯劑制備方法和藥用物質(zhì)基礎(chǔ)的一致性，采用濕法制粒，制備桑菊飲顆粒劑，并采用HPLC法測定制劑中綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷的含量。本研究可為桑菊飲顆粒劑的制備及其質(zhì)量控制提供參考。

1儀器與材料

1.1儀器Agilent1260InfinityII液相色譜儀（美國安捷倫公司），AL204型電子天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司），DZKW－4型水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）， KQ-250DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2材料中藥材桑葉、菊花、苦杏仁、連翹、薄荷、桔梗、甘草和蘆根均購自河南張仲景大藥房；綠原酸（批號：B20782）、木犀草苷（批號：B20527）、蘆?。ㄅ枺築20771）和連翹苷（批號：B20725）對照品均購自上海源葉生物科技有限公司；色譜級磷酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；色譜級乙腈晴（德國默克公司）；水為超純水；其他均為分析級試劑。

2方法與結(jié)果

2.1桑菊飲顆粒劑的制備

2.1.1桑菊飲浸膏的制備稱取桑葉 75g 、菊花30g 、苦杏仁 60g 、連翹 50g 、薄荷 25g 、桔梗60g 、甘草 25Δ_g 和蘆根 60g ，置于不銹鋼鍋中，加人10倍量蒸餾水，浸泡 30min ，大火煎煮至沸騰，然后小火煎煮 ¹h ，用紗布過濾，再次加入8倍量蒸餾水，煎煮 ^1h ，過濾，合并兩次濾液，并濃縮為浸膏，備用。

2.1.2桑菊飲顆粒劑的制備采用濕法制粒，步驟如下： ① 填充劑混合均勻； ② 加入桑菊飲浸膏； ③ 制軟材，制粒； ④ 干燥； ⑤ 整粒。最終確定桑菊飲顆粒劑制備條件為浸膏：玉米淀粉：蔗糖 =5：10：5 。2.2色譜條件參考相關(guān)文獻并修改[8-9]，色譜柱：AgilentZORBAX SB-C₁₈ 色譜柱（ 4.6mm× 250mm ， 5μm ）；流動相：乙睛 -0.4% 磷酸水，進行梯度洗脫 95min ；檢測波長： 277nm 和348nm ；體積流量： 1.0mL/min ；進樣量： 5μL ；柱溫： 30^qC 。流動相洗脫程序見表1。

表1流動相洗脫程序表

2.3 溶液配制

2.3.1混合對照品溶液的配制精密稱取一定量的對照品綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷，用甲醇定容至 10mL ，配制成質(zhì)量濃度為 140.67μg/mL 128.00μg/mL ： 120.67μg/mL 和 117.33μg/mL 對照品混合溶液，備用。

2.3.2供試品溶液的配制精密稱取桑菊飲顆粒粉末約 1g ，置于 50mL 錐形瓶中，加入 30mL 甲醇，稱定重量，超聲處理 30min ，再次稱重，并補足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4方法學(xué)考察

2.4.1系統(tǒng)適用性試驗取混合對照品和供試品溶液，按照“2.2”色譜條件進樣分析，記錄色譜圖，結(jié)果如圖1和圖2。由圖1和圖2可知，在該色譜條件下綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷的分離度均大于1.5，表明該方法系統(tǒng)適用性良好。

圖1混合對照品（A）、供試品（B）的HPLC圖（ 348nm）

圖2混合對照品（C）、供試品（D）的HPLC圖（ 277nm ）

2.4.2線性關(guān)系考察取“2.3.1”項下混合對照品溶液，逐級稀釋，綠原酸質(zhì)量濃度分別為140.67μg/mL 、 70.33μg/mL 、 35.17μg/mL 、 14.07μg mL ！ 7.03μg/mL ，木犀草苷質(zhì)量濃度分別為128.00μg/mL 7 64.00μg/mL 、 32.00μg/mL 、 12.80μg/ mL ！ 6.40μg/mL ，蘆丁木犀草苷質(zhì)量濃度分別為120.67μg/mL 、 60.33μg/mL 、 30.17μg/mL 、12. 07μg/mL， 6.03μg/mL ，連翹苷質(zhì)量濃度分別為117.33μg/mL 、 58.67μg/mL 、 29.33μg/mL 、11.73μg/mL 、 5.87μg/mL ，按照“2.2”色譜條件依次進樣分析，記錄各色譜峰峰面積。以對照品質(zhì)量濃度（ μg/mL ）為橫坐標 （X） ，峰面積（mAU）為縱坐標（Y，繪制線性回歸方程，結(jié)果見表2，其濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

表2各成分線性關(guān)系表

2.4.3精密度試驗取“2.3.2”項下混合對照品溶液，按照“2.2”色譜條件連續(xù)進樣6次，每次進樣 5μL ，記錄色譜峰面積，計算綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷色譜峰峰面積的RSD分別為 1.66% 、 0.87% 、 1.24% 和 2.12% ，表明該儀器的精密度良好。

2.4.4穩(wěn)定性試驗取“2.3.2”項下供試品溶液，于 ^0h 、2h、 、 ^6h 、 、 ^12h 在“2.2”色譜條件下進樣分析，記錄各色譜峰峰面積，計算綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷色譜峰峰面積RSD分別為 0.89% 、 0.91% 、 1.23% 和1.90% ，表明供試品溶液在 12h 內(nèi)的穩(wěn)定性良好。

2.4.5 重復(fù)性試驗取同一批桑菊飲粉末，6份，每份約 1g ，精密稱定，按“2.3.2”方法制備供試品溶液，在“2.2”色譜條件進樣分析，記錄各色譜峰峰面積，計算結(jié)果顯示綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷的平均含量分別為 78.78μg/g 、235.83μg/g ！ 56.73μg/g ： 312.82μg/g ，RSD值分別為 2.83% 、 2.41% 、 1.23% 、 0.98% ，表明方法重復(fù)性良好。

2.4.6加樣回收率試驗取同一批桑菊飲粉末6份，每份約 0.5g ，精密稱定。分別精密加入等量的對照品，按照“2.3.2”方法制備供試品溶液，在“2.2”色譜條件進樣分析，記錄各色譜峰峰面積，計算得出綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷的均回收率。結(jié)果見表3。

表34種成分的加樣回收率試驗結(jié)果表

表3（續(xù)）

2.5樣品的含量測定取6個批次桑菊飲粉樣品粉末，各3份，每份 1g ，按“2.3.2”方法制備供試品溶液，在“2.2”色譜條件進樣分析，記錄各色譜峰峰面積，計算各成分的含量，結(jié)果見表4。由表4可知，在桑菊飲顆粒劑中連翹苷的含量最高，其次是木犀草苷，蘆丁含量最低。

表4樣品含量測定結(jié)果表（μg/g）

3討論

3.1指標成分的選擇桑菊飲由8味中藥構(gòu)成，其中桑葉和菊花為君藥，薄荷、苦杏仁、桔梗為臣藥，連翹、蘆根為佐藥，甘草為使藥。本研究參照中藥質(zhì)量標志物質(zhì)選取原則，以君藥桑葉和菊花所含成分為首選，同時兼顧佐藥連翹所含成分為質(zhì)量控制指標。桑葉具有抗炎、抗氧化[10]、抗菌[]、抗病毒[12]等作用，2020年版《中國藥典》規(guī)定蘆丁為其含量控制指標性成分；菊花的抗氧化[13]、抗炎[13-14]、抗菌[15-16]、抗病毒[15]等作用，綠原酸和木犀草昔為其主要成分；連翹具有抗炎、抗菌和抗病毒等作用[]，連翹苷為其主要成分之一。因此，本研究選擇綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹苷4個成分作為桑菊飲顆粒劑的指標性成分。

3.2檢測波長的選擇參照 2020 年版《中國藥典》和文獻報道[7-8]，本研究考察了4種成分分別在 277nm 、 348nm 和 358nm 波長處色譜峰的響應(yīng)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，綠原酸、木犀草苷、蘆丁3個成分在 348nm 波長處色譜峰響應(yīng)值較大且分離度良好，滿足分析要求，但連翹苷無響應(yīng)值；連翹苷在 277nm 波長處色譜峰響應(yīng)值較大且分離度良好，滿足分析要求，但綠原酸、木犀草苷、蘆丁3個成分色譜峰響應(yīng)值較小且分離效果較差，無法滿足分析要求。因此，本研究選擇 277nm 和 348nm 雙波長作為4種成分含量測定的檢測波長。

3.3流動相的選擇參照2020 年版《中國藥典》和文獻報道[8-9]，本研究考察了乙腈－水、乙腈－乙酸水和乙腈-磷酸水三種流動相。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)選擇乙腈 -0.4% 磷酸水時樣品中4個成分色譜峰分離效果最好，滿足分析要求。因此，本研究選擇乙腈 -0.4% 磷酸水作為流動相進行梯度洗脫。

3.4樣品含量測定結(jié)果本研究共計測定了6個批次桑菊飲顆粒劑中綠原酸、木犀草苷、蘆丁和連翹昔4個成分，結(jié)果表明連翹苷含量最高為（312.46±1.52 ） μg/g ，其次是木犀草苷為（ 234.93±1.30? μg/g ，蘆丁含量最低為（ 56.28±0.69 ） μg/g ，綠原酸含量為（ （77.98±0.73 ） μg/g 。

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（收稿日期：2024-09-06編輯：陶希睿）