微柱凝膠技術(shù)與其他輸血技術(shù)在臨床輸血中的實施效果比較分析

血液中抗體與抗原復(fù)雜，故輸血時可能會出現(xiàn)排異反應(yīng)，不僅可能延誤治療時間，甚至?xí)＜盎颊呱Ｒ虼嗽陟o脈輸血前，需要進行交叉配血試驗，其主要目的是檢查供血者和受血者的血液相容性，降低輸血風(fēng)險。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷突破，MPT逐漸成為了輸血檢驗中的常規(guī)方法，在一定程度上彌補了傳統(tǒng)檢驗技術(shù)的劣勢。而MGT亦是近年來常用的輸血技術(shù)，更是以操作簡單、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度強等優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用于多學(xué)科內(nèi)[?；诖耍狙芯窟x取安順市西秀區(qū)人民醫(yī)院2023年1—12月收治的120例接受臨床輸血的患者作為研究對象，旨在探討MGT和MPT應(yīng)用于臨床輸血前交叉配血試驗中的實施效果，報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取安順市西秀區(qū)人民醫(yī)院2023年1—12月收治的120例接受臨床輸血的患者作為研究對象，依據(jù)交叉配血試驗方法為分組原則，將采用MPT的患者納人對照組，將采用MGT的患者納入研究組，各60例。對照組男性40例，女性20例；年齡23＼～58歲，平均（ 40.25±7.88） ）歲。研究組男性31例，女性29例；年齡 24～60 歲，平均 （40.43±7.73）歲。2組患者的一般資料對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （Pgt;0.05） ，具有可比性。

納人標(biāo)準(zhǔn)：符合輸血治療指征者；年齡 ? 18歲者；認(rèn)知和交流功能無障礙者；患者和 （或）家屬簽署《輸血治療同意書》。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并凝血功能障礙者；合并血液傳染性疾病者；嚴(yán)重臟器功能障礙者；暈針、暈血者；合并輸血相關(guān)的禁忌證者。

1.2 方法

所有患者入院后均抽取 4mL 靜脈血，采用條碼對血樣試管進行標(biāo)識。

2組患者均采用鹽水試管法進行血型鑒定。（1）正定型處理。將1滴抗血清滴入 2%～5% 的紅細(xì)胞懸液中，充分混勻后離心（轉(zhuǎn)速 3400r/min） 處理 15s ，觀察并記錄結(jié)果。（2）反定型處理。將1滴紅細(xì)胞混懸液滴入2滴血清中，充分混勻后離心處理并記錄結(jié)果。（3）設(shè)置陰性對照管，并排除冷凝集。

對照組交叉配血試驗方式為MPT，研究組交叉配血試驗方式為MGT。

1.2.1 MPT

給血樣試管標(biāo)記主次側(cè)。將2滴受血者血漿（血清）滴入主側(cè)管，隨后滴人1滴供血者 3% ＼～5% 的紅細(xì)胞懸液，并于常溫環(huán)境下充分搖勻，靜置 1min 。在次側(cè)管中加入1滴受血者 3%～5% 的紅細(xì)胞懸液，隨后加入2滴供血者的血漿（血清），其余操作同主側(cè)管。采用離心機（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司，皖合械備20150107，型號KDC-4010）離心（轉(zhuǎn)速 3400r/min ，半徑 15cm） 10s后，輕斜并觀察試管，如果存在紅細(xì)胞凝集，需要重做。如果無凝集，主、次側(cè)試管中均加入0.6mL 的低離子溶液，充分搖勻后，在試管內(nèi)加入2滴Polybrene試劑（珠海貝索生物技術(shù)有限公司），再次充分搖勻后，采用離心機離心10s后去除上清液，血樣試管內(nèi)剩余 0.1mL 液體。采用合適的力度晃動試管，觀察紅細(xì)胞凝集情況，如果未發(fā)生凝集，重復(fù)前述操作；如果發(fā)生凝集，滴入2滴Resuspending試劑（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）充分搖勻并進行觀察。仔細(xì)觀察管內(nèi)情況，如果凝集散開時間 lt;60s ，則表明是由Polybrene試劑誘發(fā)的非特異性聚集，配血結(jié)果相合。如果凝集未散開，或 gt;60 s發(fā)生散開，則表明凝集非試劑誘導(dǎo)，配血結(jié)果不相合，不能輸血。如果檢驗技師認(rèn)為反應(yīng)可疑，將試管內(nèi)液體傾倒至玻片，采用顯微鏡進一步觀察。

1.2.2 MGT

采用相同方式，制作2支全新的主次側(cè)血樣試管（采用抗人球蛋白微柱凝膠卡兩孔，分別標(biāo)注主次側(cè)）。分離供血者和受血者的血漿和紅細(xì)胞，將兩者的紅細(xì)胞制作成 0.8% 的紅細(xì)胞懸液。在微柱凝膠卡上標(biāo)記主次側(cè)，將受血者的 25μL 血漿（血清）和供血者的 50μL 紅細(xì)胞懸液加入主側(cè)管（次側(cè)管與之相反）。采集完成后，孵育凝膠卡（ 37^°C ， 15min） ，采用專用離心機離心處理（轉(zhuǎn)速 1500r/min ，時間 3min） 。離心完成后取出試劑卡（上海潤普生物技術(shù)股份有限公司）。觀察樣本，如果 100% 的紅細(xì)胞沉降于凝膠管底層，表明兩者配血結(jié)果相合；如果紅細(xì)胞僅凝集于凝膠內(nèi)部或表面 （凝集強度在 ± 到 ⁴⁺ 之間），則表明配血結(jié)果不相合。

上述操作均由高年資的檢驗技師完成，并詳細(xì)記錄檢驗結(jié)果

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 試驗效率

記錄2種檢驗技術(shù)的臨床應(yīng)用時間、配血成功率 （輸血治療后未發(fā)生溶血反應(yīng)，即為成功）。

1.3.2主次側(cè)管符合率

對比2組患者接受交叉配血試驗后主側(cè)管和次側(cè)管的符合率4。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對本研究數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料以百分比表示，行 χ² 檢驗；計量資料以 表示，行 χ_t 檢驗。 Plt;0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1試驗效率對比

研究組一次性配血成功率高于對照組（ Plt; 0.05），見表1。

2.2 試驗時間對比

研究組交叉配血試驗時間長于對照組（ Plt; 0.05），見表2。

2.3主側(cè)管和次側(cè)管的符合率對比

研究組主側(cè)管符合率和次側(cè)管符合率均高于對照組 （Plt;0.05） ，見表3。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，研究組的配血成功率更高（Plt;0.05） 。這說明相較于MPT，研究組配血相合后，輸血成功率更高，即MGT的準(zhǔn)確性更強。分析原因，正常情況下，紅細(xì)胞之間的負(fù)電荷會排斥，不易發(fā)生凝集。但當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)中，其自身的負(fù)電荷會吸引陽離子，形成Zeta電位，該電位水平與紅細(xì)胞的排斥作用呈正相關(guān)。MPT依靠凝聚胺的特性降低Zeta電位的水平，進而減弱紅細(xì)胞的排斥作用。凝聚胺溶解后釋放大量正電荷，中和負(fù)電荷，減弱Zeta電位與紅細(xì)胞排斥作用。紅細(xì)胞間距迅速縮小，可逆性聚集，受到IgG抗體的作用時會發(fā)生凝集。此時試驗中加入含有大量負(fù)電荷的重懸液（本研究采用Resuspending試劑），試管內(nèi)負(fù)電荷水平上升，Zeta電位再次上升。若供血者和受血者的配血相合，紅細(xì)胞會因為電位的改變而提高排斥性，分散聚集。若兩者配血不相合，則表明二者的紅細(xì)胞發(fā)生凝集并不依賴于Zeta電位，無法通過調(diào)控電荷數(shù)和電位分散紅細(xì)胞。MGT基于Coombs實驗，在微柱中進行抗原抗體反應(yīng)，借助凝膠中極小的過濾網(wǎng)促使紅細(xì)胞發(fā)生游離或凝集8。將紅細(xì)胞懸液加入抗球蛋白試劑中，若受血者和供血者的配血不相合，不完全抗體無法有效致敏紅細(xì)胞，會造成紅細(xì)胞表面的抗體球蛋白和試劑中的抗體發(fā)生特異性反應(yīng)，誘發(fā)紅細(xì)胞聚集。因此，MPT的步驟較多，且振蕩過程中需要嚴(yán)格把握力度，若檢驗技師用力振蕩，可能會造成凝集消失，干擾結(jié)果的準(zhǔn)確性。而MGT基本實現(xiàn)了儀器半自動化操作，可減小人為原因?qū)Y(jié)果的影響。另外，在MPT檢查過程中，若是弱凝集，則可能放置稍長時間凝集便會消失。此外，更重要的原因是，若患者存在特殊抗體，MPT無法準(zhǔn)確體現(xiàn)出IgG抗體的效價，從而提高結(jié)果的不確定性，所以，臨床應(yīng)用MPT時，必要情況下可采用抗球蛋白對結(jié)果進行再確認(rèn)。而MGT可檢查出全部的IgG抗體和大部分IgM抗體，顯著提高靈敏度。

本研究中，研究組主側(cè)管和次側(cè)管的符合率均處于更高水平 （Plt;0.05） 。通常情況下，若主側(cè)試驗?zāi)?，則表明不能輸血；若次側(cè)試驗發(fā)生凝集，則表明需嚴(yán)格控制并降低輸血量o]。若患者處于妊娠期或存在輸血史，其體內(nèi)存在2種血液樣本，紅細(xì)胞表面會黏附異體血漿蛋白，使得次側(cè)管不符合。但若患者患有血液系統(tǒng)疾病或腫瘤，機體所產(chǎn)生的抗體發(fā)生異常，會減弱血型抗原體，后者會吸附于患者紅細(xì)胞上，出現(xiàn)主側(cè)管凝集現(xiàn)象[1-2]。因此面對特殊患者時，MPT的側(cè)管符合率會下降。但相較之下，MGT可憑借凝膠顆粒組成的濾網(wǎng)和儀器自動調(diào)節(jié)離心速度，將特殊紅細(xì)胞抗體排阻分離，讓正常紅細(xì)胞順利通過微柱間隙，強化主次側(cè)管的符合率。

本研究結(jié)果還顯示，研究組的交叉配血試驗時間更長（ （Plt;0.05） 。雖然MGT的操作步驟較為簡單，但在檢驗過程中需要 30min 左右的離心機輔助，會大幅度延長檢驗時間。對于急診重癥患者或手術(shù)室患者，過長的檢驗時間可能會延誤搶救時機。此外，MGT需要孵育，因此對儀器的要求較高，設(shè)備的價格亦較為昂貴，難以在基層醫(yī)院有效普及。

綜上所述，MGT相較于其他輸血技術(shù)，如MPT，可進一步提升檢驗效能，提高配血成功率、主次側(cè)管符合率。但MGT耗時較長且價格昂貴，會限制應(yīng)用率，提高患者的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。因此在臨床應(yīng)用中，需根據(jù)患者的具體情況酌情選擇，避免輸血檢驗的局限性。

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