• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    牛樟樹精油遞送載體構(gòu)建及抑菌性能研究

    2025-07-29 00:00:00戴嘉寧馮玥強(qiáng)晟超湯家祥梁寶翠肖玉娟李華祥
    美食研究 2025年2期
    關(guān)鍵詞:糖基化樟樹精油

    中圖分類號(hào):TS972.123.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):2095-8730(2025)02-0066-08

    牛樟樹(CinnamomumkanehiraeHay)是一種隸屬于樟科、樟屬的喬木。此樹喜愛高溫、濕潤(rùn)、向陽(yáng)的環(huán)境,壽命通常較長(zhǎng),一些老樹能存活數(shù)百年之久[1]。此外,牛樟樹也是野生牛樟芝(Antro-diacamphorata)唯一的天然宿主。牛樟芝是一種珍稀藥食兩用蕈菌,通常生長(zhǎng)在牛腐朽樟樹的中空部位或倒伏樹干的濕潤(rùn)表面。近年來(lái),藥食同源養(yǎng)生理念備受青睞,藥食同源亦被廣泛用于預(yù)防和治療慢性疾病[2]。隨著研究的深人,人們不斷從牛樟芝子實(shí)體、菌絲體或發(fā)酵液中分離出活性物質(zhì),包括多糖、三萜類化合物、酚類化合物、蛋白質(zhì)及氨基酸等[3-4]。這些發(fā)現(xiàn)不僅彰顯了牛樟芝的珍貴價(jià)值,也為其藥用研究和應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。許多研究已經(jīng)證實(shí),牛樟芝具有保護(hù)肝臟、抗腫瘤、抗氧化、抗炎癥及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性作用,并在治療腫瘤、糖尿病及心血管疾病方面有較大潛力[5]

    據(jù)報(bào)道,牛樟樹枝勻漿可通過(guò)調(diào)節(jié)參與三萜生物合成的關(guān)鍵基因Hmgr和Sqs的表達(dá)來(lái)促進(jìn)三萜合成;牛樟樹葉乙醇提取物還可有效促進(jìn)樟芝菌絲體的生長(zhǎng)及酚類化合物的合成;牛樟樹甲醇、乙酸乙酯、水提取物對(duì)食源性致病菌有顯著抑制作用,有助于開發(fā)新型食源性致病菌抑菌制劑8];牛樟樹水提物也可以促進(jìn)樟芝菌絲體的生長(zhǎng);牛樟樹中的桉葉油醇及赤鮮糖醇都能顯著促進(jìn)樟芝深層發(fā)酵無(wú)性產(chǎn)孢[1°]。此外,研究者們還從牛樟樹中分離出了芝麻素、苯甲酸-2-甲基丙酯、芫花素、香豆素、類固醇、木脂素等1活性物質(zhì),并證實(shí)這些活性物質(zhì)具有抗癌、驅(qū)蟲[12]等作用。

    植物精油作為一種天然的抑菌劑,在食品防腐保鮮及食品安全中表現(xiàn)出巨大潛力。它不僅能夠有效延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期,還能顯著提升食品的整體品質(zhì),滿足消費(fèi)者對(duì)健康、安全食品的追求[13]。但對(duì)于精油類物質(zhì)而言,由于其具有易揮發(fā)性,對(duì)溫度、熱、光的不穩(wěn)定性以及難溶于水等特性,因此在食品領(lǐng)域的應(yīng)用受到了很大的限制[14]。碳水化合物類、脂類、蛋白類、甾醇類和生物堿類等物質(zhì),不僅可以提高負(fù)載物的抗氧化能力和貯藏穩(wěn)定性,且負(fù)載工藝簡(jiǎn)單、成本較低,被廣泛應(yīng)用于食品領(lǐng)域中對(duì)功能性油脂進(jìn)行吸附和緩釋,也可作為食品添加劑應(yīng)用于功能性食品的開發(fā)[15]。運(yùn)用包埋技術(shù)并采用合適的物質(zhì)對(duì)這些精油類物質(zhì)進(jìn)行包裹,可以顯著提高其穩(wěn)定性和抑菌性能,使其在食品工業(yè)中廣泛應(yīng)用成為可能[14] 。

    大豆分離蛋白不僅營(yíng)養(yǎng)豐富,易于人體消化與吸收,還因其獨(dú)特的物理特性(如高濁度、低沉淀及適中黏度等)受到廣泛關(guān)注[16]。此外,大豆分離蛋白具有乳化性能,為植物精油的乳化或包埋提供了潛在的應(yīng)用價(jià)值[17。超聲波處理作為新型的改性技術(shù)因具有高效率、易控制、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛用于肌原纖維蛋白的乳化特性、結(jié)構(gòu)特性以及凝膠特性的改性[18]。糖基化改性是增強(qiáng)蛋白質(zhì)功能特性的有效手段,這一技術(shù)通過(guò)美拉德反應(yīng),有效地將蛋白質(zhì)與還原糖進(jìn)行交聯(lián),從而生成蛋白質(zhì)-糖共價(jià)復(fù)合物,為大豆分離蛋白在食品工業(yè)中的多樣化應(yīng)用開辟了新的路徑[9]。改性過(guò)程不添加任何試劑,是一種綠色、安全的改性技術(shù),對(duì)蛋白質(zhì)的功能特性具有十分顯著的提升效果[20],并且還可以降低某些食物蛋白質(zhì)的致敏性[21]。據(jù)報(bào)道,大豆分離蛋白和 β 環(huán)糊精作為復(fù)合壁材,對(duì)木姜子精油進(jìn)行微膠囊包埋處理后能夠有效減緩精油的揮發(fā)速度,降低精油氧化程度[22];葛向珍[23]用糖基化大豆蛋白包載大高良姜精油后,巧妙地設(shè)計(jì)智能響應(yīng)載體以應(yīng)對(duì)食品復(fù)雜的包裝環(huán)境,并將精油包封體系與復(fù)合膜結(jié)合,改善膜結(jié)構(gòu)并賦予膜功能性,將其應(yīng)用于食品的保鮮。本研究通過(guò)超聲糖基化改性大豆分離蛋白,并用于構(gòu)建牛樟樹精油(CEO)遞送載體,以緩解牛樟樹精油的揮發(fā)并改善其溶解性,進(jìn)而提高其在抑制食源性致病菌中的應(yīng)用潛力。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    1. 1.1 菌種

    金黃色葡萄球菌(C1CC21600)、蠟樣芽孢桿菌(C1CC21261)、福氏志賀菌(C1CC21534)、沙門氏菌(C1CC21513)、阪崎腸桿菌(C1CC21545)、大腸桿菌(C1CC10664)、黑曲霉菌(Aspergillusni-ger)指狀青霉菌(Penicilliumdigitatum)及桔青霉菌(Citrinin)均由大學(xué)食品質(zhì)量與安全實(shí)驗(yàn)室提供。

    1. 1. 2 主要試劑

    牛樟樹精油(純度 gt;99.5% ):永鑫盛企業(yè)有限公司;大豆分離蛋白(純度 gt;99.5% ):商丘耕道電子商務(wù)有限公司;低聚木糖(XOS)(純度 gt; 95% ):上海源葉生物科技有限公司;馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基:生工生物工程(上海)股份有限公司;磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、無(wú)水乙醇、鹽酸及氫氧化鈉等常規(guī)試劑(純度均為分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    1. 1. 3 儀器與設(shè)備

    ME104E分析天平:梅特勒-托利多公司集團(tuán);RCD-IA均質(zhì)乳化機(jī):常州越新儀器制造有限公司;DHT-450A高溫鼓風(fēng)干燥箱:上海漢道實(shí)業(yè)有限公司;HH-1型恒溫水浴鍋:金壇市科析儀器有限公司;HJ-6多頭磁力加熱攪拌器:常州金南儀器制造有限公司;XO-650NA超聲波細(xì)胞破碎儀:南京先歐儀器制造有限公司;5022F型激光光散射儀:德國(guó)ALV公司;PHS-3C型 pH 計(jì):上海雷磁科學(xué)儀器廠;TU-1810紫外可見分光光度計(jì):北京普析通用儀器有限責(zé)任公司; 670-IR+610 -IR傅里葉變換紅外系統(tǒng):安捷倫科技有限公司;GeminiSEM300蔡司場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡:蔡司集團(tuán);ES90Nano馬爾文粒子分析儀:英國(guó)馬爾文儀器有限公司;YXQ-50SII高壓滅菌器:上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1. 2. 1 牛樟樹精油對(duì)細(xì)菌的抑制作用

    將金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、福氏志賀菌、大腸桿菌、沙門氏菌以及阪崎腸桿菌接種至LB 培養(yǎng)基中,于 37°C 靜置培養(yǎng) 12h 。隨后,采用無(wú)菌生理鹽水10倍梯度稀釋涂布法(共進(jìn)行10個(gè)梯度的稀釋,每個(gè)稀釋梯度均設(shè)置3個(gè)重復(fù)樣本)對(duì)這些培養(yǎng)好的細(xì)菌進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。根據(jù)所得的菌落計(jì)數(shù)結(jié)果,對(duì)各菌液使用無(wú)菌生理鹽水進(jìn)一步稀釋,直至菌體濃度達(dá)到 5lg(CFU/mL) ,以備后續(xù)試驗(yàn)使用。隨后,用濾紙片法[24]測(cè)定不同濃度牛樟樹精油( 100% T 50% ! 25% ! 12.5% 、6.25% ,溶劑為正丁醇)對(duì)6種食源性致病菌的抑制效果。從稀釋好的各細(xì)菌菌懸液中吸取 100μL 菌液,均勻涂布在LB固體瓊脂平板上。隨后,再分別吸取 10μL 的不同濃度的牛樟樹精油,滴加在直徑為 6mm 的無(wú)菌濾紙片上,在無(wú)菌環(huán)境下,將這些紙片放入培養(yǎng)皿中,同時(shí)使用正丁醇作為溶劑對(duì)照。再將平板放入恒溫培養(yǎng)箱中, 37°C 靜置培養(yǎng) 12h ,并用游標(biāo)卡尺記錄抑菌圈的直徑。根據(jù)測(cè)量到的抑菌圈直徑大小,判斷牛樟樹精油對(duì)測(cè)試菌的抑制效果。

    1.2.2 牛樟樹精油對(duì)真菌的抑制作用

    用固體稀釋法[25]測(cè)定牛樟樹精油對(duì)黑曲霉、指狀青霉及桔青霉的抑制效果。先用移液器吸取200μL 牛樟樹精油并均勻涂抹于PDA培養(yǎng)基的表面,隨后使用打孔器在真菌平板上制取菌塊,并將此供試菌瓊脂塊接種于涂有精油的平血中央。隨后,采用蒸餾水作為空白對(duì)照,通過(guò)定期(每隔2d)用游標(biāo)卡尺測(cè)量生長(zhǎng)斑的大小,評(píng)估牛樟樹精油對(duì)真菌生長(zhǎng)的抑制性能,

    1. 2.3 大豆蛋白樣品(SPI)的制備

    參照夏爽[26的方法并稍做修改。先配置0.2mol/L 磷酸緩沖液的配制( ?pH7.0} ,再將適量大豆分離蛋白溶于上述磷酸鹽緩沖液中并使大豆蛋白的最終質(zhì)量濃度為 20mg/mL ,室溫下攪拌 2h ,再用均質(zhì)機(jī) 10000r/min 處理 1min ,靜置 12h 備用。

    1.2.4糖基化改性大豆蛋白(XOS-SPI)的制備

    參照夏爽[26]和MA 等[27]的方法并稍做修改。將前期制備的大豆分離蛋白樣品溶液的 ΔpH 值調(diào)至9.0,再在250W的超聲功率條件下處理20min 。處理完畢后,立即將樣品轉(zhuǎn)移至冰水浴中冷卻 5min 。隨后,將超聲處理后的大豆分離蛋白與低聚木糖的糖基化產(chǎn)物分別按質(zhì)量比1:1加熱混合, 120qC 加熱 120min ,再分散于濃度為10mmol/L,pH 6.8 的磷酸鹽緩沖溶液中,室溫下攪拌 2h 后,用 1mol/L 的HCl溶液將pH值調(diào)至6.8,凍干備用。

    1.2.5 糖基化大豆蛋白-牛樟樹精油膠體顆粒的制備

    參考LI等[28]和RAO等[29]的方法并稍做修改。實(shí)驗(yàn)步驟如下:配置 10mL 的XOS-SPI溶液,并離心( 6000r/min,10min) 取上清液。再根據(jù)油壁比(即精油和大豆蛋白的質(zhì)量之比) 1:1 、2:1,1:2,1:4 及1:8(分別標(biāo)記為組別1、2、3、4、5組)的比例將牛樟樹精油加入上清液中,置于磁力攪拌器上攪拌 3h 后,將材料置于冰箱中過(guò)夜,制備成糖基化大豆蛋白-牛樟樹精油(XOS-SPI-CEO)凝膠。用均質(zhì)乳化機(jī)以 11 000r/min 的速度攪拌該凝膠 3min ,使其均勻。再用超聲波細(xì)胞破碎儀以功率600W,3s開啟 ?3s 關(guān)閉的脈沖模式持續(xù)處理 15min ,對(duì)凝膠進(jìn)行進(jìn)一步的納米級(jí)均勻化處理。隨后,將納米化的凝膠進(jìn)行冷凍干燥制成納米顆粒。最后,將冷凍干燥后的凝膠密封,并在 4°C 條件下保存,直至后續(xù)分析使用。

    1.2.6 粒徑、聚合物分散性指數(shù)和Zeta電位檢測(cè)

    采用粒子分析儀測(cè)量SPI膠粒、XOS-SPI膠粒和XOS-SPI-CEO膠粒在動(dòng)態(tài)光散射下的粒徑、聚合物分散性指數(shù)(PDI)、Zeta電位。檢測(cè)溫度為25℃,散射角為90°,平衡時(shí)間為120 s[0] 。

    1. 2. 7 傅里葉變換紅外光譜分析

    將樣品壓成片劑后用傅里葉變換紅外系統(tǒng)檢測(cè)。光譜范圍從500到 4000cm-1 ,平均掃描32次,分辨率為 4cm-1 ,波數(shù)精度為 0.01cm-1 ,測(cè)定溫度為25℃[31]

    1.2.8 掃描電子顯微鏡觀察

    參照STORM等[32]的方法,使用掃描電鏡觀察SPI膠粒、XOS-SPI膠粒和XOS-SPI-CEO膠粒的微觀結(jié)構(gòu),加速電壓為 20kV 。

    1. 2.9 穩(wěn)定性分析

    將5種不同濃度的XOS-SPI-CEO膠粒轉(zhuǎn)移到10mL 的螺旋蓋透明小瓶中,于 4°C 遮光儲(chǔ)存 28d 后,用粒子分析儀分析儲(chǔ)存前后乳液粒徑及PDI的變化情況。變化越小,表明穩(wěn)定性越好,反之亦然。1.2.10XOS-SPI-CEO凝膠顆粒的抑菌活性檢測(cè)采用平板菌落計(jì)數(shù)法研究XOS-SPI-CEO的抑菌活性,以金黃色葡萄球菌為例,以 1.5mL 離心管為容器,LB培養(yǎng)基的裝液量為 800μL ,接入100μL 濃度為 5lg(CFU/mL) 的金黃色葡萄球菌菌液,再加入 100μL 的XOS-SPI-CEO凝膠、XOS-SPI或CEO,將試管置于 37°C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng), 24h 后取出樣品進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)設(shè)置一個(gè)空白對(duì)照組,該組試管中添加 900μL 的LB培養(yǎng)基和 100μL 的菌液。為了確保結(jié)果的可靠性,每組實(shí)驗(yàn)均設(shè)置了至少3個(gè)生物重復(fù)。

    1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

    所有數(shù)據(jù)均為基于至少3個(gè)生物學(xué)重復(fù)實(shí)驗(yàn)獲得的平均值,用Origin Pro8.5 軟件進(jìn)行繪圖,用SPSSStatistics22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1牛樟樹精油的抑菌效果

    2. 1. 1 牛樟樹精油對(duì)細(xì)菌的抑制效果

    采用濾紙片法測(cè)定不同濃度(正丁醇作為溶劑對(duì)照)牛樟樹精油對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌、腸沙門氏菌腸亞種和福氏志賀菌抑菌性能,結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明,牛樟樹精油對(duì)6株測(cè)試細(xì)菌都有明顯的抑制作用,且抑制效果與牛樟樹精油的質(zhì)量濃度成正比,其中純精油(質(zhì)量濃度為 100% )的抑菌效果最好。此外,牛樟樹精油對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果最強(qiáng),抑菌圈直徑達(dá)到( 6.83± 1.61)mm ,而正丁醇溶劑對(duì)照對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌直徑僅為 (0.87±0.01)mm 。

    圖1不同濃度牛樟樹精油對(duì)細(xì)菌的抑制效果

    2.1.2牛樟樹精油對(duì)真菌的抑制效果

    不同質(zhì)量濃度的牛樟樹精油對(duì)真菌的抑制效果如圖2所示,結(jié)果表明,接種5d后,牛樟樹精油對(duì)指狀青霉、黑曲霉和桔青霉這3種真菌均表現(xiàn)出不同程度的抑制作用。其中,對(duì)桔青霉的抑制效果最為突出,接種的菌體全部致死,無(wú)明顯生長(zhǎng)跡象。

    2.2 XOS-SPI-CEO膠粒的結(jié)構(gòu)表征

    2.2.1 膠粒的粒徑、PDI、Zeta電位及貯藏穩(wěn)定性

    2.2.1.1 膠粒貯藏28d前后的外觀及狀態(tài)

    蛋白質(zhì)膠粒的貯藏穩(wěn)定性差是其在食品應(yīng)用中的主要問題。高穩(wěn)定性是應(yīng)對(duì)環(huán)境壓力、滿足加工、儲(chǔ)存和消費(fèi)的理想特性[33]。XOS-SPI-CEO膠粒貯藏 28d 內(nèi)的狀態(tài)及粒徑變化如圖3和表1所示。結(jié)果表明,放置28d后,XOS-SPI-CEO膠粒均無(wú)可見沉淀產(chǎn)生(圖3),初步表明XOS-SPI-CEO膠粒具有較好貯藏穩(wěn)定性。

    圖2牛樟樹精油對(duì)3種真菌的抑制效果(培養(yǎng)5d)
    圖3不同油壁比包埋膠粒貯藏0d和28d的形態(tài)

    2.2.1. 2 膠粒貯藏28d前后的粒徑、PDI及Zeta電位

    粒徑和Zeta電位是衡量膠體穩(wěn)定性的重要指標(biāo)[34]。膠粒粒徑的大小決定了液滴的總界面面積,有研究表明,粒徑越小、膠粒中液滴的總界面面積越大越有利于脂溶性物質(zhì)在體內(nèi)的吸收[35]。PDI表示體系的分散均勻度,與粒徑分布范圍有關(guān)[36]。Zeta 電位表示液滴所帶電荷的種類與數(shù)量,與液滴間的靜電排斥力強(qiáng)弱有關(guān)[37]SPI、XOS-SPI膠粒和XOS-SPI-CEO膠粒的平均粒徑、多分散指數(shù)如表1所示。SPI膠粒的平均粒徑為 (414.57±27.23)nm ,而XOS-SPI膠粒的粒徑降至 (186.87±6.53)nm ,且其Zeta電位絕對(duì)值也高于SPI膠粒,這是因?yàn)樘腔^(guò)程增強(qiáng)了其靜電斥力[38]。在5種XOS-SPI-CEO 膠粒中,隨著包埋精油濃度的降低,平均粒徑和PDI呈現(xiàn)上升趨勢(shì),Zeta電位絕對(duì)值逐漸降低。

    此外,5種XOS-SPI-CEO 膠粒的粒徑在貯藏28d 后均呈現(xiàn)增大趨勢(shì)(表1)。其中,XOS-SPI-CEO2膠粒的粒徑由( 16.34±0.05)m m增長(zhǎng)到( 18.53±0.08)nm ,增幅僅為 13.4% ,表明XOS-SPI-CEO膠粒的貯藏穩(wěn)定性較好??梢姡捅诒葹?:1時(shí)的XOS-SPI-CEO2相對(duì)較為穩(wěn)定。

    表1SPI、XOS-SPI和XOS-SPI-CEO 膠粒貯藏 0d 和 28d 的粒徑、PDI及Zeta電位
    注:“一”表示未檢測(cè);同列不同字母上標(biāo)表示數(shù)值間差異顯著( Plt;0.05) 。

    2.2.2 行 膠粒的傅里葉紅外光譜

    不同膠粒的傅里葉紅外光譜如圖4所示,結(jié)果表明,在波數(shù) 3700~3200cm-1 范圍內(nèi),峰形顯著增強(qiáng),這一現(xiàn)象可能是在美拉德反應(yīng)過(guò)程中,蛋白質(zhì)側(cè)鏈引入了低聚木糖分子從而增加了羥基,使-OH 數(shù)量增多, ,3200cm-1 附近-OH鍵伸縮振動(dòng)強(qiáng)度變大,進(jìn)而導(dǎo)致羥基振動(dòng)峰增強(qiáng)[39]。同時(shí),在波數(shù)范圍 1500~800cm-1 內(nèi),峰的強(qiáng)度和形狀呈現(xiàn)出顯著的變化。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)和糖分子通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合后,在 1260~800cm-1 區(qū)間內(nèi)出現(xiàn)典型的吸收特性[40]。由圖4可知,糖基化產(chǎn)物在此區(qū)間內(nèi)存在一定的吸收,這表明在美拉德反應(yīng)前后,低聚木糖分子以共價(jià)鍵的形式與蛋白成功結(jié)合[26]。

    此外,在波數(shù) 1237cm-1?1441cm-1 及1481cm-1 處,分別對(duì)應(yīng)于樟樹精油的 CH2 、 C=C 及-CH基團(tuán),在XOS-SPI-CEO中這三個(gè)吸收峰的振動(dòng)強(qiáng)度相對(duì)較弱,這表明膠粒外層是大豆蛋白,且樟樹精油已被XOS-SPI成功包埋。

    圖4SPI膠粒、XOS-SPI膠粒和XOS-SPI-CEO 膠粒的FTIR光譜圖

    2.2.3 膠粒的掃描電子顯微鏡觀察

    100×.500× 和 1 000× 放大倍率下不同樣品的SEM圖像見圖5。結(jié)果表明,SPI在冷凍干燥

    處理后呈現(xiàn)出松散和多孔的微球,且微球大小不一致,顆粒不均勻。XOS-SPI經(jīng)超聲糖基化處理后,比SPI蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)更加緊湊,表面較光滑。

    XOS-SPI包埋CEO形成納米顆粒后,相比于SPI膠粒和XOS-SPI膠粒形態(tài)差異巨大,表面粗糙呈現(xiàn)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),這可能是因?yàn)榧尤隒EO后,改變了蛋白質(zhì)膠體的原有結(jié)構(gòu),表明CEO和蛋白質(zhì)納米體實(shí)現(xiàn)了成功結(jié)合。

    圖5SPI、XOS-SPI和XOS-SPI-CEO的電鏡掃描結(jié)果

    2.3 XOS-SPI-CEO膠粒的抑菌效果

    為探究經(jīng)超聲糖基化修飾處理的牛樟樹精油對(duì)食源性致病菌的抑制性能,以金黃色葡萄球菌為代表,采用平板菌落計(jì)數(shù)法對(duì)不同處理組的菌落總數(shù)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見圖6,涂有XOS-SPI-CEO膠粒的菌落總數(shù)最少,為 7.48lg(CFU/mL) ,而XOS-SPI和CEO分別為 )和8.20lg(CFU/mL) ??梢?,XOS-SPI-CEO 膠粒的抑菌性最好,且明顯高于未被超聲糖基化大豆蛋白修飾的牛樟樹精油。此外,XOS-SPI膠粒未檢測(cè)出明顯的抑菌性,由此可排除XOS-SPI-CEO膠粒抑菌性來(lái)自XOS-SPI的可能性。

    3 結(jié)論

    牛樟樹精油本身對(duì)6株食源性致病菌及3株真菌有較好的抑菌效果,但牛樟樹精油不溶于水,且揮發(fā)性較強(qiáng),大大限制了其實(shí)際應(yīng)用前景。本研究通過(guò)超聲處理及低聚果糖糖基化改性大豆蛋白并用于包埋牛樟樹精油,顯著提高了牛樟樹精油的溶解性及穩(wěn)定性,同時(shí)顯著增強(qiáng)了牛樟樹精油的抑菌效果,這大幅提高了牛樟樹精油在抑制食源性致病菌中的應(yīng)用潛力并拓展了其應(yīng)用范圍,為開發(fā)新型植物源抑菌劑、防腐劑或包裝材料提供了理論依據(jù)和實(shí)踐基礎(chǔ)。

    圖6XOS-SPI-CEO膠粒及其組分的抑菌效果注:XOS-SPI-CEO、XOS-SPI及CEO的體積濃度相同,均為 10% 。

    參考文獻(xiàn):

    [1]WUSH,KIRKPM,REDHEADSA,etal.Resolutionof the nomenclature for Niu-Chang-chih (Taiwanofunguscamphoratus),an important medicinal polypore[J].Tax-on,2012,61(6):1305-1310.

    [2]高鳴遠(yuǎn),任晨汐,馮怡寧,等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子模擬的“黃芪補(bǔ)肺飲”協(xié)同氧化及3D打印研究[J].美食研究,2024,41(3):88-96.

    [3]LIUXF,YUSZ,ZHANGY,etal.A review on the pro-

    tective effect of active components in Antrodia camphorata against alcoholic liver injury[J].Journal of Ethnopharmacology,2023,300:115740.

    [4] LI H X,WANG JJ,LU C L,et al. Review of bioactivity, isolation,and identification of active compounds from Antrodia cinnamomea[J]. Bioengineering,2022,9(10): 494.

    [5]HO C L,CHENG H,CHEN M C,et al. Antroquinonol to block Ras and Rho signaling via the inhibition of protein isoprenyltransferase activity in cancer cells[J]. Journal of Clinical Oncology,2015,33(15_suppl) :e18526.

    [6] ZHANG Z,WANG Y,YUAN X L,et al. Effects of culture mechanism of Cinnamomum kanehirae and C . camphora on the expression of genes related to terpene biosynthesis in Antrodia cinnamomea [J]. Mycobiology, 2022,50(2) :121-131.

    [7] ZENG W W,CHEN T C,LIU C H,et al. Identification and isolation of an intermediate metabolite with dual antioxidant and anti - proliferative activity present in the fungus Antrodia cinnamomea cultured on an alternative medium with Cinnamomum kanehirai leaf extract[J]. Plants,2021,10(4) :737.

    [8]石瑀,張雨佳,任怡琳,等.牛樟樹提取物對(duì)食源性致 病菌的抑制效果[J].食品科技,2021,46(4):168- 172,179.

    [9] SHEN Y C,CHOU CJ,WANG Y H,et al. Anti-inflammatory activity of the extracts from mycelia of Antrodia camphorata cultured with water- soluble fractions from five different Cinnamomum species[J]. FEMS Microbiology Letters,2004,231(1) :137 -143.

    [10]王娟娟.牛樟樹提取物促進(jìn)樟芝深層發(fā)酵無(wú)性產(chǎn)孢 及發(fā)酵液抑菌作用[D].:大學(xué),2023: 22 -23.

    [11] LIN C L,KAO C L,LI W J,et al. Secondary metabolites from the stems of Cinnamomum kanehirai [J]. Chemistry of Natural Compounds,2018,54(4): 762 -763.

    [12]CHANG S T,CHENPF,WANG SY,et al. Antimite activity of essential oils and their constituents from Taiwania cryptomerioides[J]. Journal of Medical Entomology,2001,38(3) :455-457.

    [13]鄭渝川,陳方方,成會(huì)如,等.植物精油抗菌機(jī)理及 其在食品中的應(yīng)用[J].生物化工,2020,6(1): 148 - 153.

    [14] HADIDI M,POURAMIN S,ADINEPOUR F,et al. Chitosan nanoparticles loaded with clove essential oil: Characterization,antioxidant and antibacterial activities [J]. Carbohydrate Polymers,2020,236:116075.

    [15]馮朵,丁振,曹盼盼,等.預(yù)處理輔助酶解制備多孔 淀粉及其在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].美食研究, 2022,39(2) :87 -94.

    [16]劉靜媛,王睿粲,呂瑩,等.磷酸化和糖基化對(duì)大豆 蛋白體外消化性的影響[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào),2021, 21(2) :89 -99.

    [17]朱秀清,宋溢涵,郭汝杞,等.冷凍處理對(duì)大豆蛋白 凝膠性和乳化性的影響及抗凍改善研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué),2024,45(24) :339-347.

    [18]趙雯靜,石旺濱,王洋,等.超聲頻率對(duì)黑魚肌原纖 維蛋白結(jié)構(gòu)、乳化和凝膠特性的影響[J].美食研 究,2023,40(2) :80-86.

    [19]趙玉茹.豌豆分離蛋白凝膠和組織化特性的改性研 究[D].濟(jì)南:齊魯工業(yè)大學(xué),2024:15-22.

    [20]任孟珂,布冠好,左穎昕.葡聚糖接枝對(duì)大豆蛋白功 能特性及結(jié)構(gòu)的影響[J].食品研究與開發(fā),2020, 41(6) :6 -12.

    [21]布冠好,張楠,陳復(fù)生.大豆蛋白-木糖復(fù)合物的抗 原性、致敏性及結(jié)構(gòu)特性研究[J].現(xiàn)代食品科技, 2015,31(11) :33 -38,91.

    [22]張麗紅,黃夢(mèng),王桂瑛,等.木姜子精油微膠囊制備 工藝優(yōu)化及其品質(zhì)分析[J].食品工業(yè)科技,2022, 43(2) :157 - 165.

    [23]葛向珍.大高良姜精油智能控釋型活性包裝復(fù)合膜 的構(gòu)建及在食品保鮮中的應(yīng)用[D].楊凌:西北農(nóng)林 科技大學(xué),2023:67-69.

    [24]周謝捷,孟慶航,潘瑞,等.核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合材料的制 備及抑菌性能研究[J].化工與醫(yī)藥工程,2024,45 (6) :16 -21.

    [25]楊態(tài)嬌,張威,羅建梅,等.薇甘菊提取物對(duì)稻瘟病菌 的抑菌活性[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2025,46(1): 81-88.

    [26]夏爽.超聲:糖基化改性對(duì)大豆分離蛋白的影響及 應(yīng)用[D].天津:天津科技大學(xué),2019:17 -18.

    [27]MAY,LIUY,YUHY,etal.Biological activitiesand in vitro digestion characteristics of glycosylated α -lactalbumin prepared by microwave heating: Impacts of ultrasonication[J]. LWT,2022,158:113141.

    [28]LI P S,JIN Y G,SHENG L. Impact of microwave assisted phosphorylation on the physicochemistry and rehydration behaviour of egg white powder[J].Food Hydrocolloids,2020,100:105380.

    [29]RAO S Q,XU G W,ZENG H W,et al. Physicochemical and antibacterial properties of fabricated ovalbumincarvacrol gel nanoparticles[J]. Food amp; Function, 2020,11(6) :5133-5141.

    [30] CHEN J Y,REN Y X,ZHANG K S,et al. Phosphorylation modification of myofibrillr proteins bysodium pyrophosphate affects emulsion gel formation and oxidativestability underdifferentpH conditions[J].Food amp; Function,2019,10(10) :6568-6581.

    [31]LIUQ,CUIHP,MUHOZAB,etal.Mild enzyme-induced gelation method for nanoparticle stabilization : effect of transglutaminase and laccase cross - linking [J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2021, 69(4) :1348 -1358.

    [32]STORMG,BELLIOTSO,DAEMENT,etal.Surface modification of nanoparticles to oppose uptake by the mononuclear phagocyte system[J].Advanced Drug DeliveryReviews,1995,17(1):31-48.

    [33]劉逸佳,楊濤,傅志軒,等.表沒食子兒茶素沒食子酸 酯-牛血清白蛋白-高酯果膠Pickering乳液構(gòu)建 和穩(wěn)定性差異[J/OL].食品與發(fā)酵工業(yè),1-10 [2025-01-07]. https://doi.org/10.13995/j.cnki. 11 -1802/ts. 041068.

    [34]孫美玲.磷酸化蛋清蛋白膠粒遞送肉桂皮精油載體的構(gòu)建及抑菌性能研究[D].:大學(xué),2022:37-38.

    [35]羅慧芬.乳清分離蛋白/氧化淀粉復(fù)合膠粒設(shè)計(jì)及Pickering乳液流變與消化性能調(diào)控[D].廣州:華南理工大學(xué),2022:35-36.

    [36]林麗萍,陳金印,向妙蓮,等.響應(yīng)面法制備肉桂醛納米乳及其對(duì)紐荷爾臍橙的貯藏保鮮效果研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2024,46(6):1419-1435.

    [37]吳軍,施兆娟,袁傳勛,等.N-乙?;潭葘?duì)殼聚糖穩(wěn)定Pickering乳液乳化性能的影響[J].食品科學(xué),2024,45(24) :36 -44.

    [38]龐慧慧,劉芳蓉,王宇,等.糖基化乳清分離蛋白制備共軛亞油酸水包油乳液穩(wěn)定性分析[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2024,15(21):235-242.

    [39]BAI Y Y,XIAO L P,SUN R C.Microwave-assistedconversion of biomass derived hemicelluloses into xylo-oligosaccharides by novel sulfonated bamboo-based cata-lysts[J].Biomassand Bioenergy,2015,75:245-253.

    [40]XUWH,LIUBY,YANGHS,et al.Effect of γ -irradi-ation on the physicochemical properties of mixed soyprotein isolate/starch material[J].African Journal ofBiotechnology,2012,11:7238-7246.

    Abstract:The filter paper method was used to assess the antibacterial activities of diferent concentrations of Cinnamomum kanehirae essential oil (CEO)against 6 foodborne pathogenic bacteria and 3 fungal strains. It was shown that high concentrations ( ?50% )of CEO significantly inhibited all tested microorganisms. Subsequently,CEO was encapsulated using ultrasonic treatment combined with xylo-oligosaccharide-glycosylated soybean protein (XOS-SPI),and XOS-SPI-CEO encapsulated material was characterized and evaluated for antibacterial activity. When the mass ratio of CEO to XOS-SPI was , the XOS-SPI-CEO microspheres exhibited the smalest particle size and optimal stability,and significantly improved the antibacterial performance compared to CEO. This study demonstrates that CEO as a safe and healthy natural bacteriostatic agent, exhibits extensive prospects in food preservation and food safety.

    Key words: Cinnamomum hanehirae essential oil; soybean protein; glycosylation modification; delivery carrier;antibacterial activity

    (責(zé)任編輯:趙 勇)

    猜你喜歡
    糖基化樟樹精油
    5種菊科入侵植物精油對(duì)紅火蟻的生物活性
    5種植物精油對(duì)稻曲病菌的抑菌活性比較及薰衣草精油抑菌機(jī)制分析
    番茄潛葉蛾感覺神經(jīng)元膜蛋白SNMP基因的鑒定及特性分析
    美味的樟樹港辣椒
    植樹記
    植物精油對(duì)煙草多種病原菌的抑制效果
    控釋型植物精油微膠囊的制備及其機(jī)理研究現(xiàn)狀
    常青
    結(jié)直腸癌的血漿糖蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    大耳朵妖怪阿卷
    大片电影免费在线观看免费| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产精品免费大片| 精品久久蜜臀av无| 人妻久久中文字幕网| 91大片在线观看| 日本一区二区免费在线视频| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美日韩乱码在线| 日韩欧美免费精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久精品国产清高在天天线| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲精品在线观看二区| 18禁观看日本| 丝瓜视频免费看黄片| av天堂在线播放| 日本欧美视频一区| 久久久精品免费免费高清| www.精华液| 国产激情久久老熟女| 国产高清国产精品国产三级| 757午夜福利合集在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 成在线人永久免费视频| 国产区一区二久久| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲全国av大片| 精品国产一区二区三区四区第35| videos熟女内射| 免费黄频网站在线观看国产| 午夜福利乱码中文字幕| 日本黄色日本黄色录像| 天天添夜夜摸| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 日韩人妻精品一区2区三区| 18在线观看网站| 午夜精品在线福利| aaaaa片日本免费| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 最新在线观看一区二区三区| 成人国语在线视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 丝袜人妻中文字幕| 欧美精品人与动牲交sv欧美| a在线观看视频网站| 国产色视频综合| aaaaa片日本免费| 国产成人啪精品午夜网站| 真人做人爱边吃奶动态| 曰老女人黄片| 亚洲精品国产区一区二| 精品一区二区三卡| 十八禁高潮呻吟视频| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲少妇的诱惑av| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲av成人av| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 9色porny在线观看| 国产区一区二久久| av天堂久久9| 三级毛片av免费| 国产成人啪精品午夜网站| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 一区二区三区国产精品乱码| 老司机亚洲免费影院| 欧美日韩精品网址| 妹子高潮喷水视频| 日本黄色视频三级网站网址 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品久久久久久久毛片微露脸| 69av精品久久久久久| 99riav亚洲国产免费| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲七黄色美女视频| av福利片在线| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 在线播放国产精品三级| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 国产午夜精品久久久久久| 亚洲av熟女| 人人妻人人澡人人看| 两个人看的免费小视频| 午夜福利影视在线免费观看| 一区二区三区激情视频| 在线永久观看黄色视频| 日本黄色日本黄色录像| 91成年电影在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产国语露脸激情在线看| 国产精品欧美亚洲77777| 99热网站在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| a在线观看视频网站| aaaaa片日本免费| 国产精品一区二区免费欧美| 乱人伦中国视频| 国产有黄有色有爽视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| av不卡在线播放| 午夜福利欧美成人| 中文欧美无线码| 脱女人内裤的视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| cao死你这个sao货| 人人澡人人妻人| 18禁观看日本| 欧美激情高清一区二区三区| 久久午夜综合久久蜜桃| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产高清videossex| 热re99久久精品国产66热6| 黄色视频不卡| 99久久综合精品五月天人人| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲久久久国产精品| 99热国产这里只有精品6| 咕卡用的链子| 久久狼人影院| 99香蕉大伊视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男人操女人黄网站| 超碰成人久久| 一二三四社区在线视频社区8| av福利片在线| 欧美激情久久久久久爽电影 | 少妇 在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 欧美日韩视频精品一区| 亚洲午夜理论影院| 成年动漫av网址| 久久性视频一级片| 又黄又粗又硬又大视频| 深夜精品福利| 精品久久蜜臀av无| 成人av一区二区三区在线看| 久久99一区二区三区| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲 国产 在线| 精品国产乱码久久久久久男人| 日韩欧美在线二视频 | 女人精品久久久久毛片| 国产视频一区二区在线看| 日本黄色日本黄色录像| 首页视频小说图片口味搜索| 久久精品国产综合久久久| 三上悠亚av全集在线观看| 99国产精品免费福利视频| 最新的欧美精品一区二区| 国产精品永久免费网站| 9热在线视频观看99| 亚洲专区中文字幕在线| 久久中文看片网| 久久久久国内视频| av网站在线播放免费| av不卡在线播放| ponron亚洲| 亚洲av成人av| 嫁个100分男人电影在线观看| 操美女的视频在线观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 人妻久久中文字幕网| 欧美日韩黄片免| 黄色 视频免费看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 欧美在线黄色| 天天添夜夜摸| 十分钟在线观看高清视频www| 人妻久久中文字幕网| 久久人妻av系列| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 91精品国产国语对白视频| 午夜视频精品福利| 国产精品影院久久| 天堂动漫精品| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲少妇的诱惑av| 丝袜美腿诱惑在线| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久久国产一区二区| 午夜91福利影院| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久久国产成人精品二区 | 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲专区中文字幕在线| 天堂√8在线中文| 后天国语完整版免费观看| 国产成人啪精品午夜网站| 女性被躁到高潮视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 搡老乐熟女国产| 亚洲专区国产一区二区| 国产av一区二区精品久久| 亚洲人成电影观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲色图av天堂| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产精品一区二区在线观看99| 精品国产一区二区久久| 国产99久久九九免费精品| 国产一区二区三区视频了| 亚洲第一青青草原| 18在线观看网站| www.熟女人妻精品国产| av不卡在线播放| 免费少妇av软件| 黑丝袜美女国产一区| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 老司机靠b影院| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久久国产一区二区| av不卡在线播放| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产精品一区二区在线观看99| 99香蕉大伊视频| 久久久久久久久免费视频了| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 99re在线观看精品视频| 一夜夜www| aaaaa片日本免费| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 妹子高潮喷水视频| 午夜福利,免费看| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲avbb在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 999久久久国产精品视频| 91精品三级在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲免费av在线视频| 久久精品国产综合久久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产成人精品在线电影| 一区在线观看完整版| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产高清视频在线播放一区| 国产三级黄色录像| 精品无人区乱码1区二区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产男女内射视频| 久热爱精品视频在线9| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲人成电影观看| 国产精品免费大片| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产av一区二区精品久久| 国产成人免费观看mmmm| 成人国产一区最新在线观看| 一区二区三区精品91| 9191精品国产免费久久| 村上凉子中文字幕在线| 大陆偷拍与自拍| 女人精品久久久久毛片| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| av欧美777| 操出白浆在线播放| 热re99久久国产66热| av中文乱码字幕在线| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 美女视频免费永久观看网站| 在线观看午夜福利视频| 免费观看精品视频网站| 亚洲伊人色综图| 久久中文字幕人妻熟女| 一级片'在线观看视频| netflix在线观看网站| 涩涩av久久男人的天堂| 免费在线观看黄色视频的| 黄色成人免费大全| 亚洲av欧美aⅴ国产| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 欧美日本中文国产一区发布| 欧美久久黑人一区二区| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲综合色网址| 99久久人妻综合| 欧美日韩视频精品一区| 动漫黄色视频在线观看| 18在线观看网站| 757午夜福利合集在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲在线自拍视频| av视频免费观看在线观看| 少妇的丰满在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 精品免费久久久久久久清纯 | 在线观看免费视频网站a站| 最新在线观看一区二区三区| 精品亚洲成a人片在线观看| 在线观看日韩欧美| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美成狂野欧美在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 天堂中文最新版在线下载| 精品卡一卡二卡四卡免费| 一二三四社区在线视频社区8| 久久久久精品国产欧美久久久| 美女午夜性视频免费| 欧美黄色淫秽网站| 欧美av亚洲av综合av国产av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 美女国产高潮福利片在线看| 99国产精品一区二区蜜桃av | 亚洲av日韩在线播放| 黄片播放在线免费| 亚洲 国产 在线| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 老司机亚洲免费影院| 久久久国产精品麻豆| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲色图av天堂| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产精品一区二区在线观看99| 国产亚洲欧美精品永久| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 中文字幕人妻丝袜一区二区| e午夜精品久久久久久久| 国产精品亚洲一级av第二区| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 免费看十八禁软件| 精品福利观看| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲欧美激情在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产成人影院久久av| a级毛片黄视频| 性色av乱码一区二区三区2| av电影中文网址| 久久香蕉国产精品| 丝袜美足系列| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 黄色视频不卡| 在线国产一区二区在线| 极品教师在线免费播放| 国产成人av激情在线播放| 精品视频人人做人人爽| www.999成人在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 天天影视国产精品| 久久久久久久久久久久大奶| 久久国产亚洲av麻豆专区| 啦啦啦免费观看视频1| 成人黄色视频免费在线看| 欧美人与性动交α欧美软件| 宅男免费午夜| 精品一区二区三区四区五区乱码| av不卡在线播放| www.999成人在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 一二三四社区在线视频社区8| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 五月开心婷婷网| 国产99久久九九免费精品| 久久久久精品人妻al黑| 91精品国产国语对白视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一区二区三区国产精品乱码| 俄罗斯特黄特色一大片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 色精品久久人妻99蜜桃| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 午夜精品在线福利| 亚洲全国av大片| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 免费看a级黄色片| 国产亚洲欧美98| 男女午夜视频在线观看| 777米奇影视久久| 成年动漫av网址| 黄色丝袜av网址大全| 久久精品国产清高在天天线| 免费观看精品视频网站| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲一码二码三码区别大吗| 一级a爱视频在线免费观看| 99riav亚洲国产免费| 热re99久久精品国产66热6| 国产欧美日韩一区二区精品| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲成国产人片在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 午夜影院日韩av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美日韩精品网址| 亚洲五月天丁香| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | av天堂在线播放| 久久久国产成人精品二区 | 交换朋友夫妻互换小说| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久99一区二区三区| 国产精品99久久99久久久不卡| 最新的欧美精品一区二区| 不卡一级毛片| 在线天堂中文资源库| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久国产精品大桥未久av| 无限看片的www在线观看| 亚洲av熟女| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 中文欧美无线码| 日韩免费av在线播放| av片东京热男人的天堂| av在线播放免费不卡| 久久久久精品国产欧美久久久| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 99国产精品99久久久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久香蕉激情| 精品久久久久久,| av网站在线播放免费| 国产欧美日韩一区二区三| 91老司机精品| 黑丝袜美女国产一区| 成人永久免费在线观看视频| tube8黄色片| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产精品久久电影中文字幕 | 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 十分钟在线观看高清视频www| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人影院久久| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美日韩精品网址| 一区在线观看完整版| 嫩草影视91久久| 久久久国产成人精品二区 | 最新的欧美精品一区二区| 欧美日韩亚洲高清精品| 两人在一起打扑克的视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 交换朋友夫妻互换小说| 国产一区二区三区视频了| aaaaa片日本免费| 精品视频人人做人人爽| 精品国产乱子伦一区二区三区| 黑丝袜美女国产一区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 香蕉国产在线看| 国产精品影院久久| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 男女床上黄色一级片免费看| 韩国av一区二区三区四区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲一区高清亚洲精品| 1024香蕉在线观看| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲五月天丁香| 成人av一区二区三区在线看| 中出人妻视频一区二区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产单亲对白刺激| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲国产欧美网| 国产成人精品久久二区二区91| 在线观看www视频免费| 极品人妻少妇av视频| 国产淫语在线视频| 国产99久久九九免费精品| 久久人妻熟女aⅴ| 天堂俺去俺来也www色官网| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产高清激情床上av| 99精品在免费线老司机午夜| 最近最新中文字幕大全免费视频| 动漫黄色视频在线观看| 女人被狂操c到高潮| 久久精品国产清高在天天线| 91在线观看av| 18在线观看网站| 亚洲伊人色综图| 男女高潮啪啪啪动态图| 色94色欧美一区二区| 午夜激情av网站| 99热国产这里只有精品6| 午夜福利欧美成人| 日日夜夜操网爽| 大型av网站在线播放| 免费在线观看影片大全网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲,欧美精品.| 9191精品国产免费久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 乱人伦中国视频| www.熟女人妻精品国产| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| bbb黄色大片| 一区福利在线观看| 国产1区2区3区精品| 大型av网站在线播放| 少妇粗大呻吟视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 大香蕉久久网| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 日韩欧美一区视频在线观看| 在线观看免费高清a一片| 老鸭窝网址在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| svipshipincom国产片| 90打野战视频偷拍视频| 国产亚洲av高清不卡| 免费不卡黄色视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 91九色精品人成在线观看| 最新的欧美精品一区二区| 男女午夜视频在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品国产高清国产av | 一区二区三区激情视频| 美女视频免费永久观看网站| 国产主播在线观看一区二区| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 欧美日韩一级在线毛片| 国产深夜福利视频在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲专区中文字幕在线| x7x7x7水蜜桃| 亚洲少妇的诱惑av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 99re6热这里在线精品视频| 无限看片的www在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 国产又色又爽无遮挡免费看| 一级毛片高清免费大全| 一级,二级,三级黄色视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| xxx96com| 满18在线观看网站| 91字幕亚洲| 午夜久久久在线观看| av国产精品久久久久影院| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 日韩欧美在线二视频 | 激情在线观看视频在线高清 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲中文日韩欧美视频| a级毛片在线看网站| 乱人伦中国视频| 国产精品一区二区免费欧美| 国产成人精品久久二区二区91| 自线自在国产av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 999久久久国产精品视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 婷婷成人精品国产| svipshipincom国产片| 国产有黄有色有爽视频| 少妇粗大呻吟视频| av一本久久久久| 国产亚洲精品久久久久5区| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 一夜夜www| 成人国产一区最新在线观看| 久久热在线av| 亚洲黑人精品在线| 男女午夜视频在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 精品久久久久久久久久免费视频 | 国产欧美日韩一区二区精品| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产精品久久久久成人av| 国产国语露脸激情在线看| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美不卡视频在线免费观看 |