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    川牛膝片產(chǎn)地趁鮮加工及其可行性

    2024-12-31 00:00:00郭曉亮穆森段媛媛胡昌強(qiáng)黃浩
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2024年11期
    關(guān)鍵詞:川牛膝浸出物化合物

    摘要:為了優(yōu)化川牛膝(Cyathulae Radix)片產(chǎn)地趁鮮切制加工工藝并驗(yàn)證其可行性,采用正交試驗(yàn)設(shè)計,考察初干溫度、初干程度、發(fā)汗時間及復(fù)干溫度對川牛膝片質(zhì)量與干燥時長的影響,并通過質(zhì)量評價與代謝組分析驗(yàn)證工藝的可行性。結(jié)果表明,4個因素均對干燥時長、浸出物含量存在顯著或極顯著影響;初干溫度對杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量存在顯著影響;復(fù)干溫度對前杯莧甾酮含量存在顯著影響。川牛膝片產(chǎn)地趁鮮切制加工最佳工藝:川牛膝鮮品切為單支后,先于50 ℃干燥至含水量41.2%,再發(fā)汗15~30 h、切片,后于70 ℃干燥至含水量不高于12.0%。趁鮮川牛膝片質(zhì)量優(yōu)于市售飲片(SSP)與傳統(tǒng)川牛膝片(CTP)。趁鮮川牛膝片(CXP)與傳統(tǒng)川牛膝片的化學(xué)成分相似性很高;相對于CTP,篩選出的36種差異代謝物中,CXP中有7種黃酮類化合物、5種皂苷類化合物含量上調(diào);有20種黃酮類化合物、2種皂苷類化合物和2種甾酮類化合物含量下調(diào)。因此,川牛膝片產(chǎn)地趁鮮加工取代傳統(tǒng)方法在一定程度上是可行的。

    關(guān)鍵詞:川牛膝(Cyathulae Radix)片; 產(chǎn)地趁鮮加工; 質(zhì)量; 代謝組; 可行性

    中圖分類號:R282" " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

    文章編號:0439-8114(2024)11-0114-08

    DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.11.020 開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識碼(OSID):

    The fresh processing technology and its feasibility of Cyathulae Radix slices

    GUO Xiao-liang1,MU Sen1,DUAN Yuan-yuan1,HU Chang-qiang2,HUANG Hao1

    (1.Institute of Chinese Herbal Medicines, Hubei Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Biology and Cultivation of Herb Medicine, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Enshi" 445000, Hubei,China;2. Chizhengtang Pharmaceutical(Enshi) Co.,Ltd., Enshi" 445000, Hubei,China)

    Abstract: In order to optimize the fresh processing technology of Cyathulae Radix slices, and verify its feasibility,the orthogonal experimental design was used to investigate the effects of initial drying temperature, initial drying degree, perspiration time and redrying temperature on the quality and drying time of Cyathulae Radix slices. The feasibility of the process was verified by quality evaluation and metabolome analysis. The results showed that the four factors all had significant or extremely significant effects on drying time and extract content; the initial drying temperature had significant effects on the content of cyasterone and precyasterone; the redrying temperature had significant effects on the content of precyasterone. The best process of fresh processing on origin of Cyathulae Radix slices was as follows: After the fresh product was cut into a single branch, it was initially dried at 50 ℃ to the water content of 41.2%, then sweated for 15~30 h, sliced, and then dried at 70 ℃ until the water content was not higher than 12.0%. The quality of the slices produced by fresh processing on origin was better than that of the slices available in the market(SSP) and the slices produced by traditional methods(CTP). The chemical composition of the slices produced by fresh processing and the slices produced by traditional methods was very similar. Compared with CTP, among the 36 different metabolites, the contents of 7 flavonoids and 5 saponins were up-regulated in CXP. The contents of 20 flavonoids, 2 saponins and 2 steroids were down-regulated. Therefore, it was feasible to replace the traditional method with fresh processing on origin of Cyathulae Radix slices.

    Key words: Cyathulae Radix slices; fresh processing on origin; quality; metabolome; feasibility

    中藥材川牛膝(Cyathulae Radix)為莧科植物川牛膝(Cyathula officinalis Kuan)的干燥根,具有逐淤通經(jīng)、通利關(guān)節(jié)、利尿通淋的功效[1]。川牛膝主要化學(xué)成分包含甾酮類、皂苷類及黃酮類[2],現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn),川牛膝具有抗炎、抗菌、抗癌、抗氧化、降血壓、降血糖、免疫抑制、保護(hù)神經(jīng)與肝腎等作用[3]。

    川牛膝片傳統(tǒng)的加工方法分為2步。第1步是在產(chǎn)地將新鮮川牛膝除去蘆頭、須根及泥沙,烘或曬至半干,堆放回潤,烘干或曬干為干藥材[4];第2步是將干藥材分檔,洗凈堆潤,軟化,切制圓片,干燥[5]。軒菲洋等[6]的研究表明,已有數(shù)十種中藥材可以進(jìn)行趁鮮加工,不僅可以減少有效成分流失、便于貯藏運(yùn)輸、提高飲片質(zhì)量,還能優(yōu)化生產(chǎn)環(huán)節(jié)、節(jié)約能源、降低生產(chǎn)成本[7]。楊惠辛[8]對懷牛膝產(chǎn)地加工炮制一體化加工工藝進(jìn)行了研究,優(yōu)化了干燥溫度、切制時含水量、切斷長短對懷牛膝質(zhì)量的影響。但鮮見川牛膝產(chǎn)地趁鮮加工相關(guān)研究報道。因此,本試驗(yàn)通過正交試驗(yàn),考察初干溫度、初干程度、發(fā)汗時間、復(fù)干溫度對川牛膝片質(zhì)量的影響,優(yōu)選出川牛膝片的最佳加工工藝,并通過質(zhì)量評價驗(yàn)證工藝的可行性,以期通過趁鮮川牛膝片相對于傳統(tǒng)川牛膝片的代謝組學(xué)差異推測其藥效作用的異同。

    1 材料與方法

    1.1 杯莧甾酮與前杯莧甾酮含量的測定方法

    參考丁剛等[9]的方法,更換了色譜柱,并對洗脫程序進(jìn)行了調(diào)整。

    1.1.1 色譜分析條件 色譜柱:C18(150 mm×4.6 mm,4 μm)。流動相:0.2%醋酸水溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脫0~5 min,95% A;5~10 min,95%~62% A;10~25 min,62%~50% A;25~30 min,50%~5% A;30~35 min,5%~95% A;35~40 min,95% A。檢測波長為243 nm,流速為1 mL/min,進(jìn)樣量為10 μL,柱溫為35 ℃。

    1.1.2 混合對照品溶液的制備 精密稱取對照品杯莧甾酮16.00 mg、前杯莧甾酮2.00 mg,分別置于10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密移取上述2種溶液各1 mL,加入6 mL甲醇,混合得到杯莧甾酮濃度為200 μg/mL、前杯莧甾酮濃度為25 μg/mL的對照品溶液。

    1.1.3 供試品溶液的制備 精密稱取干川牛膝樣品粉末(過30目篩)0.5 g,置于具塞錐形瓶中,加甲醇25 mL,稱定質(zhì)量。在80 ℃水浴1 h后,超聲處理(功率400 W,頻率40 kHz)30 min,冷卻,用甲醇補(bǔ)足失重,搖勻,0.45 μg微孔濾膜濾過,去濾液即得。

    1.1.4 方法學(xué)考察

    1)線性關(guān)系考察。將梯度濃度的混合對照品溶液按“1.1.1”的色譜條件進(jìn)樣檢測。以各對照品峰面積(Y)為縱坐標(biāo),濃度(X,μg/mL)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    2)精密度試驗(yàn)。取同一混合對照品溶液按“1.1.1”的色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄各成分的峰面積。

    3)重復(fù)性試驗(yàn)。取同一來源川牛膝樣品,按“1.1.3”的方法平行制備6份供試品溶液,分別進(jìn)樣,記錄各成分的峰面積。

    4)穩(wěn)定性試驗(yàn)。取同一供試品溶液,按“1.1.1”的色譜條件分別在0、8、16、25、34、40 h進(jìn)樣,記錄各成分的峰面積。

    5)回收率試驗(yàn)。精密稱取已知含量的同一來源川牛膝樣品6份,每份0.25 g,分別精密添加與樣品中含量相當(dāng)?shù)谋{甾酮、前杯莧甾酮對照品,按“1.1.3”的方法制備供試品溶液,按“1.1.1”的色譜條件進(jìn)樣檢測,計算得到杯莧甾酮的平均加樣回收率。

    1.2 產(chǎn)地趁鮮加工工藝參數(shù)

    1.2.1 材料 川牛膝鮮根為持正堂藥業(yè)恩施有限公司所收購,先切去蘆頭,制成單支,選擇上部直徑10.0~13.5 mm的單支,再將所有單支混勻,分成30份樣品,稱鮮重并記錄。

    1.2.2 正交試驗(yàn)優(yōu)化加工參數(shù) 隨機(jī)抽取3份樣品,采用烘干法計算川牛膝的折干率。剩余27份樣品,采用公式(1)計算切片前每份川牛膝的目標(biāo)重量,按照表1進(jìn)行初步干燥,干燥過程中不斷稱重,至每份樣品的目標(biāo)重量時停止干燥,記錄干燥時間;對每份鮮川牛膝片稱重并記錄,取出發(fā)汗、切片,進(jìn)行二次干燥,采用公式(2)計算每份川牛膝片的目標(biāo)重量,干燥過程中不斷稱重,至目標(biāo)重量時停止干燥,取出備用,記錄干燥時間。檢測樣品的含水量、總灰分、浸出物[1]、杯莧甾酮與前杯莧甾酮含量。

    Mi=(Yi×X)/(1-Z)" " " " " " " " " "(1)

    Ni=Yi×X×Vi /(1-12%) /Mi" " " " " " " " " "(2)

    式中,Mi為第i份川牛膝初步干燥的目標(biāo)重量;Yi是第i份樣品的鮮重;X為鮮川牛膝烘干至恒重后的折干率;Z為不同處理對應(yīng)的初干程度;Ni為第i份川牛膝片干燥后目標(biāo)重量;Vi為第i份鮮川牛膝片重量。

    1.3 產(chǎn)地趁鮮加工川牛膝片質(zhì)量評價

    購買自湖北省鶴峰縣燕子鎮(zhèn)的鮮品川牛膝,切去蘆頭制成單支,分成12份樣品,稱鮮重并記錄。其中9份材料應(yīng)用產(chǎn)地趁鮮加工工藝制備趁鮮川牛膝片(CXP);3份材料先干燥為川牛膝藥材,再浸潤、切片、干燥,制備傳統(tǒng)川牛膝片(CTP);同時購買市售飲片(SSP)3份作為對照。

    1.3.1 趁鮮川牛膝片質(zhì)量情況 對9份CXP的總灰分、浸出物含量、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量進(jìn)行系統(tǒng)分析,評價其質(zhì)量水平。

    1.3.2 質(zhì)量差異分析 測定樣品的總灰分、浸出物含量、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量,比較CXP、CTP、SSP的質(zhì)量差異。

    1.4 產(chǎn)地趁鮮加工川牛膝片代謝組學(xué)分析

    取3份CTP(CNX-4、CNX-5、CNX-6),隨機(jī)抽取3份CXP(CNX-7、CNX-8、CNX-9),送至山東國倉健生物科技有限公司進(jìn)行UPLC-MS/MS專項(xiàng)代謝組檢測,篩選甾酮、皂苷、黃酮類等化合物分析其相關(guān)性。以方差分析Plt;0.05為標(biāo)準(zhǔn),從甾酮類化合物中篩選相對含量差異顯著的代謝物,再以O(shè)PLS-DA分析變量投影重要度(VIP)大于1、︱log2FC︱≥1為標(biāo)準(zhǔn)篩選差異代謝物。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 杯莧甾酮與前杯莧甾酮含量的測定方法驗(yàn)證

    標(biāo)準(zhǔn)品與川牛膝樣品色譜疊加如圖1所示,杯莧甾酮-前杯莧甾酮混合標(biāo)準(zhǔn)品與樣品重疊較好,說明樣品中的目標(biāo)成分與標(biāo)準(zhǔn)品成分相同、試驗(yàn)條件適宜、分析方法可靠?。

    2.1.1 線性關(guān)系考察 杯莧甾酮的線性方程為Y=8.132 42X+24.315 48,r=0.999 8;前杯莧甾酮的線性方程為Y=11.775 77X-15.827 77,r=0.999 1。結(jié)果表明,杯莧甾酮在50~400 μg/mL、前杯莧甾酮在6~50 μg/mL時線性關(guān)系良好。

    2.1.2 精密度試驗(yàn) 杯莧甾酮、前杯莧甾酮的峰面積RSD分別為0.47%、0.20%,表明儀器精密度良好。

    2.1.3 重復(fù)性試驗(yàn) 杯莧甾酮、前杯莧甾酮的RSD分別為0.47%、0.50%,表明本方法重現(xiàn)性良好。

    2.1.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 杯莧甾酮、前杯莧甾酮的RSD分別為1.45%、1.83%,表明供試品溶液于40 h內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。

    2.1.5 回收率試驗(yàn) 杯莧甾酮與前杯莧甾酮的平均加樣回收率分別為98.3%、101.1%,RSD分別為1.04%、1.01%,表明本方法的回收率良好。

    2.2 產(chǎn)地趁鮮加工川牛膝片工藝參數(shù)

    2.2.1 川牛膝片樣品質(zhì)量狀況 試驗(yàn)處理所得27份趁鮮切制加工所得川牛膝片樣品質(zhì)量狀況見表2。各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中華人民共和國藥典》對川牛膝飲片的質(zhì)量要求。

    2.2.2 各因素對川牛膝片質(zhì)量影響的顯著性 由表3可知,初干溫度對川牛膝片的干燥時長、浸出物含量、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量存在顯著或極顯著影響,對總灰分無顯著影響;初干程度對川牛膝片的干燥時長、浸出物含量存在顯著或極顯著影響,對總灰分、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量無顯著影響;發(fā)汗時間對川牛膝片的干燥時長、浸出物含量存在顯著或極顯著影響,對總灰分、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量無顯著影響;復(fù)干溫度對干燥時長、浸出物含量、前杯莧甾酮含量存在極顯著或顯著影響,而對總灰分、杯莧甾酮含量無顯著影響。

    2.2.3 初干溫度的選擇 由表4可知,初干溫度50 ℃與30 ℃相比,浸出物含量、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量均無顯著差異,但前者干燥時長極顯著短于后者。初干溫度50 ℃與70 ℃相比,杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量和干燥時長均無顯著差異,但前者浸出物含量顯著高于后者。以質(zhì)量為先、兼顧效率為原則,50 ℃為初干溫度的最優(yōu)選擇。

    2.2.4 初干程度的選擇 由表5可知,初干程度23.1%與33.3%相比,浸出物含量無顯著差異,前者干燥時長極顯著長于后者。初干程度41.2%與33.3%相比,浸出物含量無顯著差異,前者干燥時長極顯著短于后者。初干程度41.2%與23.1%相比,浸出物含量雖顯著降低,但降低幅度較小,但前者干燥時長極顯著短于后者,降低幅度較大。以質(zhì)量為先、兼顧效率為原則,41.2%為初干程度的較優(yōu)選擇。

    2.2.5 發(fā)汗時間的選擇 由表6可知,發(fā)汗15 h與30 h相比,浸出物含量無顯著差異,前者干燥時長極顯著長于后者。發(fā)汗30 h與45 h相比,浸出物含量、干燥時長均無顯著差異。以質(zhì)量為先、兼顧效率為原則,15~30 h為發(fā)汗時間的較優(yōu)選擇。

    2.2.6 復(fù)干溫度的選擇 由表7可知,復(fù)干溫度70 ℃與30 ℃相比,前者浸出物含量、前杯莧甾酮含量均顯著高于后者,且前者干燥時長極顯著短于后者。復(fù)干溫度70 ℃與50 ℃相比,浸出物含量、前杯莧甾酮含量均無顯著差異,但前者干燥時長極顯著短于后者。以質(zhì)量為先、兼顧效率為原則,70 ℃為復(fù)干溫度的最優(yōu)選擇。

    2.2.7 最佳加工工藝選擇 綜上所述,川牛膝片趁鮮切制加工的最佳工藝:川牛膝鮮品經(jīng)處理切為單支后,先于50 ℃初步干燥至含水量41.2%時為止,發(fā)汗15~30 h,切片,再于70 ℃干燥至含水量12.0%以下,此時川牛膝切片的杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量、浸出物含量較高,且干燥時長較短。

    2.3 產(chǎn)地趁鮮加工川牛膝片的質(zhì)量評價

    2.3.1 CXP質(zhì)量情況 9份CXP的總灰分、浸出物含量、杯莧甾酮含量的均值依次為《中華人民共和國藥典》標(biāo)準(zhǔn)的56.3%、125.8%、463.3%,符合藥典標(biāo)準(zhǔn)(表8)。

    2.3.2 質(zhì)量差異分析 由表9可知,CXP與CTP的浸出物含量、總灰分、杯莧甾酮含量均無顯著差異,但均顯著優(yōu)于SSP;就前杯莧甾酮含量而言,CXP顯著優(yōu)于CTP和SSP??傮w上,CXP質(zhì)量優(yōu)于CTP和SSP。

    2.4 產(chǎn)地趁鮮加工川牛膝片代謝組學(xué)分析

    2.4.1 數(shù)據(jù)質(zhì)控樣本的適用性評價 質(zhì)控樣本(QC)由試驗(yàn)樣本等量混合制備而成,用于驗(yàn)證樣本在相同的處理方法下的重復(fù)性。質(zhì)控樣品質(zhì)譜檢測TIC重疊圖與相關(guān)系數(shù)如圖2所示,保留時間和峰強(qiáng)度均一致,代謝物檢測總離子流的重疊性高,表明儀器檢測及代謝物提取具有良好的穩(wěn)定性和可靠性。

    2.4.2 相關(guān)性分析 川牛膝主要化學(xué)成分為甾酮類、皂苷類、異黃酮類化合物等[10]。從代謝組預(yù)處理的數(shù)據(jù)中篩選出127種化合物,其中黃酮類化合物88種,皂苷類化合物15種,甾酮類化合物21種,香豆素、單萜、酚酸類化合物各1種。通過這127種化合物,對CXP與CTP進(jìn)行相關(guān)性分析,如表10所示,兩者相關(guān)系數(shù)達(dá)0.994及以上,表明CXP質(zhì)量與CTP相似度較高,可以代替后者。

    2.4.3 聚類分析 通過聚類熱圖(圖3)可以觀察并對比CXP與CTP樣品中代謝物的變化和積累情況,每組的3個重復(fù)樣品間聚類情況較好,表明不同處理內(nèi)具有良好的重復(fù)性和可信度,而不同處理間有顯著差異,說明不同加工方式對川牛膝片代謝物輪廓的影響較大。

    2.4.4 PCA與OPLS-DA分析 對127種化合物進(jìn)行PCA分析與OPLS-DA分析,結(jié)果見圖4。CXP與CTP可明顯區(qū)分,且無相互交叉重疊現(xiàn)象,說明CXP與CTP的代謝差異顯著。在PCA中,PC1對差異的貢獻(xiàn)率為69.3%,PC2對差異的貢獻(xiàn)率為11.3%,累計貢獻(xiàn)率為80.6%;在PCA中,樣本點(diǎn)間的距離越大代表樣本間代謝物的組成和含量差異越大,樣本點(diǎn)間的距離越小代表樣本間代謝物組成和含量差異越?。?1];CTP組內(nèi)相對分離,而CXP組內(nèi)相對集中,說明趁鮮加工川牛膝片的代謝物組成和含量差異較小,質(zhì)量穩(wěn)定性較好,而傳統(tǒng)川牛膝片的代謝物組成和含量差異較大,質(zhì)量穩(wěn)定性較差。在OPLS-DA分析中,Q2表示模型的預(yù)測能力,R2X和R2Y分別表示模型對X和Y矩陣的解釋率,理論上R2和Q2越接近1.0說明模型準(zhǔn)確性越好。CXP與CTP的OPLS-DA分析Q2=0.985,R2X=0.691,R2Y=0.997,說明模型較可靠,預(yù)測信度良好,可用于差異代謝物的分析。

    2.4.5 代謝差異物的篩選 以P≤0.05、︱log2FC︱≥1且VIP≥1為條件,對CXP與CTP的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,結(jié)果如圖5所示。在CTP與CXP之間有36種差異代謝物(表11),CTP相對于CXP,有24種差異化合物上調(diào),12種差異化合物下調(diào)。其中,化合物27(Glycitein大豆黃素)的︱log2FC︱=5.35,表明大豆黃素在CTP與CXP中含量相差40倍以上,說明大豆黃素具備成為鑒定2種不同加工方式川牛膝藥材的指標(biāo)性成分的潛力。

    川牛膝中的黃酮類化合物以異黃酮類為主,對心血管有保護(hù)和調(diào)節(jié)作用[12],還具有降血糖活性[13],與川牛膝活血功效相符。相對于CTP,CXP中黃酮類化合物有7種含量上調(diào),有20種含量下調(diào),黃酮類化合物含量整體呈下調(diào)趨勢。這可能預(yù)示著CXP活血的功效有一定程度的減弱。

    川牛膝中的皂苷類化合物主要為五環(huán)三萜類化合物中的齊墩果烷型三萜皂苷[14]。三萜皂苷具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制細(xì)胞毒性及抑制環(huán)氧化酶的作用[15]。CXP相對于CTP,CXP中皂苷類化合物有5種上調(diào),2種下調(diào),皂苷化合物含量整體呈上調(diào)趨勢,可能預(yù)示著CXP的抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制細(xì)胞毒性等功效有一定程度的提升。

    川牛膝中所含的甾酮類成分屬于昆蟲變態(tài)激素[16],甾酮類化合物具有促進(jìn)蛋白質(zhì)同化、抗血小板聚集、降低血糖、抗骨質(zhì)疏松等生理活性[14,17-19],與川牛膝的補(bǔ)肝益腎、強(qiáng)筋骨功效相符[20]。CXP相對于CTP,CXP中甾酮類化合物有2種下調(diào),甾酮化合物含量整體相似,可能預(yù)示著CXP的補(bǔ)肝益腎、強(qiáng)筋骨功效與CTP持平。

    3 討論與小結(jié)

    干燥過程對植物來說是干旱脅迫過程[21],中藥材在干燥過程中受溫度影響,易引起外觀性狀、有效成分及生物活性的轉(zhuǎn)變,直接影響中藥材的藥用價值與經(jīng)濟(jì)價值[22]。研究表明,不僅干燥溫度對中藥材切片活性成分含量有較大影響[23],切制時中藥材含水量對切片的難易與外觀[24]、飲片的質(zhì)量[25]也有較大影響。因此開展中藥材趁鮮加工研究,除干燥溫度外,切制時含水量也需要納入考察中。

    本研究發(fā)現(xiàn),初干溫度、初干程度、發(fā)汗時間、復(fù)干溫度4個因素均對川牛膝片質(zhì)量有顯著或極顯著影響。其中,初干溫度對杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量均有極顯著影響;復(fù)干溫度對前杯莧甾酮含量有顯著影響;4個因素均對川牛膝片浸出物含量、干燥時長有顯著或極顯著影響。通過極差分析,對川牛膝片干燥時長的影響由大到小依次為初干溫度、復(fù)干溫度、初干程度、發(fā)汗時間;對川牛膝片浸出物含量的影響由大到小依次為復(fù)干溫度、初干溫度、初干程度、發(fā)汗時間;對川牛膝片前杯莧甾酮含量的影響由大到小依次為初干溫度、復(fù)干溫度。

    中藥材是由多種化學(xué)成分構(gòu)成的復(fù)雜體系[26],少數(shù)化合物含量測定無法全面反映中藥的整體質(zhì)量和臨床功效[27]。從單一成分含量測定到一測多評,再到質(zhì)量標(biāo)志物和質(zhì)量綜合評價指數(shù)的應(yīng)用,中藥質(zhì)量評價模式正呈多元化發(fā)展態(tài)勢[28]?!吨腥A人民共和國藥典》僅對川牛膝的杯莧甾酮有含量要求。尚鳳琴[14]的研究表明杯莧甾酮、前杯莧甾酮是川牛膝中主要的甾酮類化合物。本研究發(fā)現(xiàn)CXP在浸出物含量、總灰分、杯莧甾酮含量、前杯莧甾酮含量方面優(yōu)于SSP,在前杯莧甾酮含量方面優(yōu)于CTP。

    對CXP與CTP進(jìn)行代謝組學(xué)檢測,發(fā)現(xiàn)二者前杯莧甾酮相對含量均無顯著差異,但前者均值高于后者,這可能是由于取樣差異所致。從代謝組檢測數(shù)據(jù)中確定了甾酮、皂苷、黃酮類等127種化合物,分析了不同加工方式下川牛膝片的質(zhì)量相似性,表明CXP與CTP高度相似,在較高程度上可以取代CTP。篩選出36種差異代謝物,相對于CTP,CXP中黃酮類化合物呈大幅度下調(diào)趨勢,甾醇類化合物小幅度下調(diào),皂苷類化合物呈上調(diào)趨勢,可能預(yù)示著相對于CTP,CXP活血的功效有一定程度減弱,補(bǔ)肝益腎、強(qiáng)筋骨功效持平,而抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制細(xì)胞毒性等功效有一定程度的提升。這個推測還需通過藥理藥效對比進(jìn)行驗(yàn)證。

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    收稿日期:2024-01-16

    基金項(xiàng)目:湖北省支持企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新發(fā)展項(xiàng)目(2021BAB131);國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-21);恩施州研究與開發(fā)項(xiàng)目(D20210039)

    作者簡介:郭曉亮(1982-),男,河北邯鄲人,副研究員,碩士,主要從事中藥材育種與栽培研究,(電話)13872708050(電子信箱)119626192@qq.com。

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