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    渝產(chǎn)不同品系藥用菊花品質(zhì)的研究

    2024-01-04 08:07:36努爾艾力李隆云崔廣林
    天然產(chǎn)物研究與開發(fā) 2023年12期
    關(guān)鍵詞:草苷木犀綠原

    丁 剛,努爾·艾力,李隆云*,崔廣林

    1重慶市中藥研究院;2重慶市中藥良種選育與評價工程技術(shù)研究中心;3重慶市中藥資源學(xué)重點實驗室;4中國中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心重慶分中心,重慶400065;5重慶醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院,重慶 400016

    菊花為菊科植物菊ChrysanthemummorifoliumRamat.的干燥頭狀花序,其味甘、苦,微寒,歸肺、肝經(jīng),具有疏散風(fēng)熱、清肝明目、清熱解毒、平抑肝陽的作用[1]。菊花中的黃酮類和苯丙素類成分是菊花的主要藥效成分[2],其具有抗過敏、抑制腫瘤、抗心腦脂質(zhì)過氧化、抗菌、抗病毒以及清除自由基等廣泛藥理活性[3],目前臨床多用于風(fēng)熱感冒、眩暈、目赤昏花等病癥的治療[4,5]。

    菊花作為一大宗藥材其品種眾多,《中華人民共和國藥典》(2020年版)收載了“亳菊”“滁菊”“貢菊”“杭菊”“懷菊”五大品種[1],此外市場上還有祁菊、川菊、濟菊等品種[6]?,F(xiàn)代研究表明不同品種菊花的生物學(xué)形態(tài)有所不同,其多種有機酸類、黃酮類等成分含量亦存在明顯差異[7]。一般傳統(tǒng)選育工作重點考慮菊花的花序大小、花盤直徑、花瓣數(shù)目、香味、花色、分支、葉形和株高等植物學(xué)性狀,同時注重培育和固定其顯著的性狀特點[8],但有效成分考察較少。菊花品質(zhì)不僅其生態(tài)特征有關(guān),而且與微量元素、黃酮類、酚類、揮發(fā)油等指標息息相關(guān)[9]。

    一測多評法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)是指以質(zhì)量穩(wěn)定、對照品易獲得、臨床藥效確切的組分作為內(nèi)標物,計算其含量和其他組分與此組分之間的相對校正因子,利用藥物各組分之間的內(nèi)在函數(shù)關(guān)系,從而實現(xiàn)快速測定多種化學(xué)成分含量的一種定量測定方法。有研究表明一測多評法用于菊花中化學(xué)成分的含量測定,高效、便捷、準確可行,其結(jié)果與外標法無顯著差異,可以同時測定菊花中多種化學(xué)成分的含量[10]。

    本文以杭白菊、小洋菊、懷菊、小黃菊及陽菊品系和云陽當(dāng)?shù)仄废刀喾N不同形態(tài)特征的藥用菊花為研究對象,測定不同形態(tài)特征菊花的黃酮和有機酸類成分的含量,同時測定水分、總灰分,較全面研究單株菊花不同形態(tài)特征和多種藥效成分的內(nèi)在聯(lián)系。本研究采用聚類分析和主成分分析法,制定菊花品質(zhì)綜合評定方法,在重慶地區(qū)能夠正常生產(chǎn)的品種基礎(chǔ)上,比較菊花質(zhì)量的優(yōu)劣,最終選出品質(zhì)優(yōu)良的單株,為下一步擴繁及區(qū)域試驗提供基礎(chǔ),旨在為渝產(chǎn)藥用菊花品種選育及評價菊花品質(zhì)提供實驗數(shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 儀器

    Agilent 1260高效液相色譜儀、DAD檢測器(美國Agilent公司);Milli-Q Integral 5型純水儀(美國Millipoer公司);SGM.M8/13人工智能箱式電阻爐(中國洛陽西格馬爐業(yè)股份有限公司);BSA 124(S型電子天平(美國Millipoer公司);XMTB數(shù)顯式電熱恒溫水浴鍋(中國上海躍進醫(yī)療器械有限公司);KQ(250 DB型數(shù)控超聲波清洗儀(德國Sartorius);G2X(9240 MBE電熱鼓風(fēng)干燥箱(中國上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。

    1.2 試藥與樣品

    試劑:色譜純甲醇、磷酸、乙腈(美國TEDIA公司);分析純甲醇(重慶川東化工有限公司);超純水用Milli-Q Integral 5型純水儀制備。

    對照品:木犀草素(批號LOT-C29N10Q104574,純度≥98.92%,源葉生物科技有限公司);異綠原酸C(批號LOT-J23GB152513純度≥98.92%,源葉生物科技有限公司);木犀草苷(批號LOT-O20GB164741,純度≥99.8%,源葉生物科技有限公司);金合歡素(批號MUST-19081008,純度≥99.07%,成都曼思特生物科技有限公司);綠原酸(批號MUST-19030620,純度≥99.39%,成都曼思特生物科技有限公司);大波斯菊苷(批號MUST-19081101,純度≥9987%,成都曼思特生物科技有限公司);新綠原酸(批號MUST-19031001,純度≥99.67%,成都曼思特生物科技有限公司);異綠原酸B(批號MUST-19031602,純度≥99.05%,成都曼思特生物科技有限公司);隱綠原酸(批號MUST-19032403,純度≥99.07%,成都曼思特生物科技有限公司);異綠原酸A(MUST-21102611,純度≥98.46%,成都曼思特生物科技有限公司)。

    樣品:根據(jù)植株形態(tài)、花色、成熟度,采集重慶產(chǎn)杭白菊、小洋菊、陽菊、云陽品系,小黃菊和懷菊品系6大類品系,61個具有明顯特征的單株樣品(見圖1)。其中,陽菊和云陽品系是從浙江桐鄉(xiāng)引種培育的品種,亦屬于杭菊;懷菊是從河南焦作引種的品種,其余品系是適合重慶當(dāng)?shù)胤N植的品種。以上菊花經(jīng)李隆云研究員鑒定為菊科植物杭菊Chrysanthemummorifolium(Ramat).Tzvel.‘Hangju’ cv.nov.和懷菊Chrysanthemummorifolium(Ramat).Tzvel.‘Huaiju’ cv.nov.的干燥頭狀花序(見表1)。表1中的單株編號中的第一個數(shù)字是品系的二級特征分類(見表2),第二個數(shù)字是本品系單株的順序標記號。

    表1 不同類型菊花樣品來源Table 1 Sources of different Chrysanthemum samples

    表2 品系的二級特征Table 2 Secondary feature of strain

    圖1 不同品系菊花植物圖Fig.1 C.morifoliu plants of different strains注:A.杭白菊品系;B.懷菊品系;C.小黃菊品系;D.小洋菊品系;E.陽菊品系;F.云陽品系。Note:A.Hangzhou white chrysanthemum strain;B.Huai chrysanthemum strain;C.Xiaohuang chrysanthemum strain;D.Xiaoyang chrysanthemum strain;E.Yang chrysanthemum strain;F.Yunyang chrysanthemumstrain.

    1.3 方法

    1.3.1 水分、總灰分的檢測

    按照2020年版的《中國藥典》第四部通則0832第二法檢測菊花樣品水分含量,不宜超過15%;按照通則2302對菊花樣品總灰分進行檢測。

    1.3.2 含量測定

    混合對照品的制備:精確稱取木犀草苷、新綠原酸、異綠原酸B、隱綠原酸、綠原酸、異綠原酸A、大波斯菊苷、異綠原酸C、木犀草素等對照品,質(zhì)量分別為3.04、5.00、2.90、5.82、4.42、8.29、4.61、5.39、5.01 mg,置于已編號10 mL的9個容量瓶,金合歡素精確稱取2.24 mg置于25 mL容量瓶,加入70%甲醇水溶液,震搖,溶解,再定容至刻度線,既得單個對照品的儲備母液。分別量取適量母液置10 mL容量配制成木犀草苷60.80 μg/mL、綠原酸19.89 μg/mL、異綠原酸B 8.56 μg/mL、隱綠原酸5.01 μg/mL、新綠原酸1 μg/mL、異綠原A 65.08 μg/mL、大波斯菊苷20.05 μg/mL、金合歡素2.69 μg/mL、木犀草素5.01 μg/mL、異綠原酸C 86.24 μg/mL的混合對照品溶液。

    供試品溶液的制備:精密稱取已干燥粉碎的菊花樣品粉末(過30目篩)0.125 g,置于50 mL具塞錐形瓶,加70%甲醇水溶液25 mL,密塞,稱定質(zhì)量,于60 ℃超聲處理45 min,冷卻至室溫,用溶劑補足失重并搖勻,用0.45 μm微孔濾膜濾過既得供試品溶液。

    色譜條件:色譜柱:Symmetry?C18(250 mm× 4.6 mm,5 μm),檢測波長:有機酸類成分檢測波長327 nm,黃酮類成分檢測波長348 nm,柱溫40 ℃,進樣量10 μL,流速1.0 mL·min-1,流動相為乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B),進行梯度洗脫(0~15 min,10%A→15%A;15~17 min,15%A→20%A;17~35 min,20%A;35~40 min,20%A→30%A;40~45 min,30%A→80%A;45~52 min,80%A),色譜圖見圖2。

    圖2 混合對照品(A、C)及樣品(B、D)HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram of mixed reference substance (A,C) and sample (B,D) 注:1.新綠原酸;2.綠原酸;3.隱綠原酸;4.木犀草苷;5.異綠原酸B;6.異綠原酸A;7.大波斯菊苷;8.異綠原酸C;9.木犀草素;10.金合歡蘇。Note:1.Neochlorogenic acid;2.Chlorogenic acid;3.Cryptochlorogenic acid;4.Luteolin;5.Isochlorogenic acid B;6.Isochlorogenic acid A;7.Apigenin;8.Isochlorogenic acid C;9.Luteolin;10.Acacetin.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 方法學(xué)考察

    2.1.1 線性關(guān)系考察

    將按照 “1.3.2”的方法配制的對照品溶液,分別進行稀釋,精密吸取10 μL進樣,記錄色譜圖進行分析。以混合對照品的峰面積Y作為縱坐標,其對應(yīng)的不同進樣濃度X(μg/mL)作為橫坐標,對檢測結(jié)果進行回歸處理,分析線性范圍。結(jié)果線性良好(見表3)。

    表3 菊花10種成分的線性關(guān)系和線性范圍Table 3 Linear relationship and linear range of ten chemical component in chrysanthemum

    2.1.2 精密度考察

    取混合對照品溶液,按照“1.3.2”色譜條件連續(xù)進樣6次,記錄色譜圖進行分析。結(jié)果異綠原酸A、新綠原酸、異綠原酸B、綠原酸、異綠原酸C、隱綠原酸、金合歡素、大波斯菊苷、木犀草素、木犀草苷峰面積的RSD分別為0.060%、0.64%、0.10%、0.13%、0.070%、0.46%、0.33%、0.20%、1.1%和0.080%,表明儀器精密度良好。

    2.1.3 穩(wěn)定性考察

    取同一供試品溶液,按照“1.3.2”色譜條件,分別0、1、2、4、6、8、16、24 h進樣,記錄色譜圖進行分析。結(jié)果異綠原酸A、新綠原酸、異綠原酸B、綠原酸、異綠原酸C、隱綠原酸、金合歡素、大波斯菊苷、木犀草素、木犀草苷峰面積的RSD分別為0.70%、0.53%、0.63%、0.61%、0.67%、0.60%、0.90%、0.70%、0.97%和0.71%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.1.4 加樣回收率試驗

    精密稱取已測定含量的菊花藥材粉末,共6份,適量加入混合對照品溶液,按照供試品制備方法配制,按“2.2.3”色譜條件進行測定分析,計算回收率。結(jié)果異綠原酸A、新綠原酸、異綠原酸B、綠原酸、異綠原酸C、隱綠原酸、金合歡素、大波斯菊苷、木犀草素、木犀草苷的平均回收率分別是104.2%、93.01%、111.6%、96.41%、99.40%、97.46%、115.9%、89.67%、99.40%和99.93%,其RSD分別是 1.5%、5.6%、3.5%、1.4%、2.5%、1.8%、2.6%、3.1%、3.6%和6.2%,表明該方法回收率良好。

    2.1.5 外標法重復(fù)性考察

    取同一來源的樣品,按照供試品溶液制備方法平行制備6份供試品溶液,進樣測定分析。結(jié)果異綠原酸A、新綠原酸、異綠原酸B、綠原酸、異綠原酸C、隱綠原酸、金合歡素、大波斯菊苷、木犀草素、木犀草苷的平均含量依次1.318%、0.030%、0.180%、0.345%、2.092%、0.078%、0.023%、0.387%、0.058%和0.583%,RSD分別為0.52%、1.8%、1.4%、0.39%、1.4%、1.7%、2.7%、0.41%、2.3%和1.0%,表明該方法重現(xiàn)性良好。

    2.2 含量測定

    本研究運用一測多評HPLC法同時對菊花上述10種化學(xué)成分的含量進行檢測。首先,將“1.3.2”制備的一系列梯度濃度的混合對照品容易進樣進行檢測,記錄色譜圖,再保證結(jié)果在線性范圍內(nèi)的前提下,按公式:

    以綠原酸為內(nèi)標物,計算其與其他5個有機酸成分之間的相對校正因子(式中Wk、Am、Wm、Ak分別表示內(nèi)參物的濃度、組分m的峰面積、組分m的濃度、內(nèi)參物峰面積);以木犀草苷為內(nèi)標物,計算其與其他3個黃酮類成分之間的相對校正因子,結(jié)果見表4。菊花樣品的綠原酸,木犀草苷含量百分比用線性方程計算,其余成分含量百分比用相對校正因子計算,與外標法(external standard method,ESM)含測結(jié)果比較(見表5),一測多評和外標法含量檢測結(jié)果基本相同。

    表4 成分相對校正因子Table 4 Relative correction factor of component

    表5 菊花10種化學(xué)成分外標法和一測多評含量測定結(jié)果比較Table 5 Comparison of determination results of ten chemical components in chrysanthemum by QAMS and ESM(%)

    2.3 一測多評fkm值重現(xiàn)性考察

    2.3.1 不同儀器及色譜柱的影響

    取“1.3.2” 項下的混合對照品溶液,分別精密吸取10 μL,分別使用三根Symmetry?C18250 mm× 4.6 mm,5 μm 的色譜柱,在Agilent 1260高效液相色譜儀和Agilent 1200高效液相色譜儀上進樣檢測,求算以綠原酸和木犀草苷作為參照成分時,有機酸類和黃酮類8個成分的fkm值1.23、0.88、0.97、0.93、1.17、1.07、2.45和1.05,RSD平均值為3.3%、2.8%、3.2%、3.1%、3.2%、2.5%、3.0%和2.5%。結(jié)果說明fkm值在使用同型號儀器和色譜柱時的耐用性良好。

    2.3.2 不同流速的影響

    用Agilent 1260高效液相色譜儀,分別在0.95、1.00、1.05 mL/min的體積流量下測定,求算以綠原酸和木犀草苷作為參照成分時,有機酸類和黃酮類8個成分的fkm值 1.24、0.86、0.96、0.95、1.18、1.08、2.46和1.03,RSD平均值為3.0%、2.9%、3.1%、2.0%、2.2%、2.8%、2.9%和2.4%。結(jié)果表明在同一臺高效液相色譜儀上,體積流量變化fkm值的影響不顯著。

    2.3.3 不同柱溫的影響

    用Agilent 1260高效液相色譜儀,分別在柱溫為30、35、40 ℃的條件下測定,求算以綠原酸和木犀草苷作為參照成分時,有機酸類和黃酮類8個成分的fkm值1.23、0.87、0.98、0.95、1.18、1.06、2.44和1.06,RSD平均值為 2.6%、2.4%、3.4%、3.7%、2.8%、2.9%、3.1%和3.3%。結(jié)果表明在同一臺高效液相色譜儀上, 柱溫的變化對fkm值的影響不顯著。

    2.4 水分和總灰分

    按照2020年版中國藥典的第四部通則0832第二法檢測菊花樣品水分含量。結(jié)果顯示6大品系61個單株菊花樣品的水分含量在7.860%~12.253%之間,平均含水分含量10.183%,均低于15%,符合《中國藥典》規(guī)定;按照通則2302測定菊花樣品總灰分含量,其結(jié)果在5.793%~12.780%之間,平均總灰分含量8.163%,《中國藥典》未規(guī)定標準。

    2.5 聚類分析

    本文以菊花的異綠原酸A、新綠原酸、異綠原酸B、綠原酸、異綠原酸C、隱綠原酸、金合歡素、大波斯菊苷、木犀草素、木犀草苷及總灰分含量數(shù)據(jù)為變量,通過SPSS26.0軟件,在組間聯(lián)接法基礎(chǔ)上,以平方歐式距離為依據(jù)進行系統(tǒng)聚類分析,獲得不同菊花樣品的樹狀聚類圖。由圖3可知,當(dāng)平方歐氏距離5時,被分為五類,其中懷菊品系為一類,親緣相近其他杭菊品系根據(jù)各成分含量特點被分為四類。

    圖3 菊花樣品聚類分析圖Fig.3 Cluster analysis of chrysanthemum samples

    聚類結(jié)果與實際分類相符。

    聚類分析結(jié)果可將61個單株分為5大類,懷菊(hj-1-1)被分為一類,其有機酸類含量都很低,綜合得分也最低,品質(zhì)最差,這可能由于懷菊花是重慶引種品種,不適合在重慶種植生產(chǎn);陽菊品系(yj-8-21)被分為一類,其總灰分含量最高??偦曳质求w現(xiàn)金屬微量元素對品種質(zhì)量的影響。微量元素與中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和歸經(jīng)有著緊密的聯(lián)系,其含量小,但功能作用大,影響菊花品質(zhì)的重要因素之一。因此,可能此單株有些微量金屬元素含量或鹽類含量普遍高于其他單株;大多數(shù)云陽品系和陽菊品系種被分為一類;綜合得分排在后25%的大概分為一類,其中大多數(shù)單株的綠原酸、木犀草苷含量低于藥典規(guī)定的標準;云陽品系(yy-2-19、yy-2-20、yy-3-21~yy-3-25)被分為一類,其大多是有機酸類成分含量非常接近。

    2.6 主成分分析

    主成分分析(principal component analysis,PCA)是通過改變數(shù)據(jù)集的特征數(shù)量,簡化數(shù)據(jù),同時盡可能地保留信息,快速實現(xiàn)數(shù)據(jù)的可視化識別的一種多元統(tǒng)計分析方法。首先,對原始數(shù)據(jù)用SPSS26.0進行標準化,再進行巴特利特球形度檢驗和KMO檢驗,發(fā)現(xiàn)P<0.01,表明該批菊花數(shù)據(jù)可進行主成分分析。以10種化學(xué)成分及總灰分含量作為變量,以特征值大于1及累計貢獻率作為判斷依據(jù),選出三個主成分,詳細結(jié)果見表6、表7。由表可見,前三個主成分累計貢獻率達到79.066%,具有較強的代表性,既可以用于菊花內(nèi)在質(zhì)量的評價,又可以作為菊花選優(yōu)品種的重要指標。其中,第一個主成分特征值6.117和方差貢獻率55.608%,主要反映該主成分信息的載荷較高成分有異綠原酸A、綠原酸、異綠原酸B、新綠原酸、異綠原酸C木犀草苷、隱綠原酸等;第二個主成分的特征值1.461和方差貢獻率13.281%,載荷較高的只有大波斯菊苷;第三個主成分的特征值1.119和方差貢獻率10.177%,載荷較高的主要反映該主成分信息的成分有木犀草素和總灰分。

    表6 主成分分析Table 6 Principal component analysis

    表7 主成分因子載荷矩陣Table 7 Loading matrix of principal component factor

    根據(jù)主成分矩陣和特征值可計算獲得3個主成分PC1、PC2、PC3和被測指標間的回歸方程(公式1~3)。以所選主成分對應(yīng)的貢獻率與3個主成分累計貢獻率的比值作為權(quán)重,再用該權(quán)重值與之相應(yīng)的主成分數(shù)值相乘,從而得出不同菊花樣品的綜合評價得分值F(公式4),結(jié)果見表8,以此來綜合評價不同類型菊花的品質(zhì)。

    表8 菊花11個指標綜合得分及排名Table 8 Comprehensive score and ranking of 11 indicators of chrysanthemum

    PC1=0.374X1+0.370X2+0.379X3+0.342X4+0.353X5+0.363X6+0.083X7+0.378X8-0.123X9-0.156X10-0.133X11

    (1)

    PC2=-0.139X1-0.097X2-0.199X3+0.280X4+0.077X5+0.031X6+0.737X7-0.110X8-0.036X9-0.363X10+0.397X11

    (2)

    PC3=0.207X1+0.246X2-0.047X3-0.152X4+0.086X5+0.252X6-0.173X7-0.142X8+0.699X9-0.014X10+0.512X11

    (3)

    F=0.703PC1+0.168PC2+0.129PC3

    (4)

    上式中X1、X2、X3......X11分別表示新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、木犀草苷、異綠原酸B、異綠原酸A、大波斯菊苷、異綠原酸C、木犀草素、金合歡素、總灰分。由表8可知,綜合得分越高,排名越靠前,品質(zhì)越好;綜合得分排名前三菊花單株分別是陽菊品系(yj-2-4、yj-3-7、yj-6-15),品質(zhì)最好。此三個單株含有機酸量普遍高于其他單株,黃酮類含量分散較廣,總灰分含量無顯著差別,這說明此三個單株適宜重慶的生長環(huán)境;綜合得分排名后三單株分別是小洋菊(xy-1-1)、杭白菊(hb-1-1)、懷菊(hj-1-1),品質(zhì)最差,此三個單株有機酸、木犀草苷、大波斯菊苷含量較低,這說明此三個單株不適宜在重慶生長。

    通過主成分分析擬合出3個主成分,第一主成分主要反映有機酸類對菊花質(zhì)量的影響;第二主成分反映大波斯菊苷對菊花質(zhì)量的影響;第三主成分反應(yīng)總灰分、黃酮類含量對菊花質(zhì)量的影響。此基礎(chǔ)上結(jié)合綜合評價法選出了品質(zhì)最佳的三個單株,分別是陽菊品系(yj-2-4、yj-3-7、yj-6-15),其特點是莖稈直立,花小,白色,有機酸類成分含量均高于其他單株,木犀草苷含量比要規(guī)定的標準高于10~13倍,總灰分和水分含量無明顯特征。

    3 討論與結(jié)論

    本實驗以不同濃度比例的磷酸水和乙腈作為流動相,對菊花10種化學(xué)成分色譜峰的峰形、保留時間、分離度及基線平穩(wěn)等因素進行對比分析,最終選擇峰對稱性更好,基線更平穩(wěn),分離效果更佳的流動相系統(tǒng)即乙腈-0.4%磷酸水溶,其效果優(yōu)于藥典規(guī)定的乙腈-0.1%磷酸水溶流動相系統(tǒng)。通過掃描200~400 nm波段,發(fā)現(xiàn)有機酸類在320~335 nm之間紫外吸收較強且集中,黃酮類在330~360 nm之間紫外吸收較強且集中;綠原酸、新綠原酸、異綠原酸A等最強紫外吸收波長接近328 nm,木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草素等最強紫外吸收波長都接近348 nm,且在兩個波長兩類物質(zhì)峰面積差距較大。因此,為了含量結(jié)果的準確性,本實驗選擇了328 nm,348 nm波長分別檢測有機酸類和黃酮類成分,避免了兩類物質(zhì)因同一個波長檢測而出現(xiàn)的誤差。

    實驗選用加熱回流和超聲輔助提取方法對樣品進行提取,選用50%甲醇、75%甲醇及純甲醇對樣品進行不同時長的提取,最終綜合對比不同提取方法的提取效果、操作難易程度、時間效率,確定最優(yōu)的前期處理方法即用70%甲醇水溶液在60℃下超聲波處理45 min,該方法既顯著改善了提取的效果及準確度,又減少了繁瑣的實驗流程。

    綜上,本文研究建立以HPLC運用一測多評同時測定菊花10種化學(xué)成分含量的方法。研究以綠原酸,木犀草苷為內(nèi)標參照物,依據(jù)相對校正因子對61個菊花單株10個成分含量進行測定,與外標法結(jié)果無顯著差異。結(jié)果表明:該方法高效、便捷、準確可行,其結(jié)果與傳統(tǒng)含量測定結(jié)果基本相同;同時采用聚類分析和主成分分析法,制定菊花品質(zhì)綜合評定方法,初步篩選出了品質(zhì)最佳并適宜在重慶生長的三個優(yōu)良單株,分別為陽菊品系(yj-2-4、yj-3-7、yj-6-15)。為下一步新品種選育提供了實驗數(shù)據(jù),同時為渝產(chǎn)藥用菊花內(nèi)在質(zhì)量的全面控制和綜合評價提供了新的方法。為菊花的品種選育及質(zhì)量評價提供科學(xué)依據(jù)。

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