羅 璇,程 成,張 琦,王允圃,宋蕭蕭,解鴻蕾,劉玉環(huán),崔 憲,
(1.南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西 南昌 330047;2.南昌大學(xué) 生物質(zhì)轉(zhuǎn)化教育部工程研究中心,江西 南昌 330047;3.哈爾濱市疾病預(yù)防控制中心,黑龍江 哈爾濱 150000)
生物胺是一類具有生物活性、含氮堿性低分子質(zhì)量有機(jī)化合物的總稱。其廣泛分布于動植物及食品中,尤其在發(fā)酵食品中含量較高。生物胺具有“低促高毒”的特點(diǎn),適量攝入能夠起到促進(jìn)生長、增強(qiáng)代謝活力、清除自由基等作用,而過量攝入則會導(dǎo)致人體中毒等不良反應(yīng)。有研究表明,食品中的組胺、酪胺和苯乙胺分別超過100、100 mg/kg和30 mg/kg會造成人體中毒[1]。此外,尸胺、腐胺等二胺還能夠與亞硝酸鹽反應(yīng)生成亞硝胺等雜環(huán)類致癌物質(zhì)。因此,考慮到生物胺對于人體的危害,Taylor等[2]建議把生物胺總量作為衡量食品安全的重要指標(biāo)。目前,我國僅針對部分食品(如魚類、酒類等)中生物胺含量制定了相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),而傳統(tǒng)發(fā)酵食品中生物胺的限量問題并未引起足夠重視。我國傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品主要分為固態(tài)類發(fā)酵豆制品(豆豉、腐乳等)與液態(tài)類發(fā)酵豆制品(醬油等),因其風(fēng)味獨(dú)特、營養(yǎng)價(jià)值高等特點(diǎn)在日常生活中被廣泛食用,其中生物胺的含量也逐漸受到關(guān)注。Gong Xiao等[3]研究發(fā)現(xiàn)豆豉中存在大量腐胺(108.9 mg/kg)、尸胺(121.4 mg/kg)、組胺(202.4 mg/kg)、酪胺(94.1 mg/kg)等。Jeon等[4]在韓國傳統(tǒng)豆類發(fā)酵食品清國醬中發(fā)現(xiàn)β-苯乙胺、組胺和酪胺含量分別超過了推薦的毒性限度的19、4 倍和3 倍。因此,研究發(fā)酵豆制品中生物胺含量對保障其食品安全具有重要意義。
發(fā)酵食品中微生物代謝產(chǎn)生的生物胺的種類和含量受到多種因素的影響。Guan Rongfa等[5]報(bào)道,黃酒中的白蘇和紅蘇含量直接影響生物胺產(chǎn)生菌的數(shù)量。Fong等[6]研究表明,腌肉、發(fā)酵魚、醬菜等發(fā)酵制品中較高的氨基酸含量能夠增加生物胺含量和積累程度。Zaman等[7]發(fā)現(xiàn)Bacillus amyyloliquefaciens和Staphylococcus carnosus的分離株能夠減少魚露發(fā)酵過程中組胺的積累程度。目前,多數(shù)研究集中于發(fā)酵豆制品發(fā)酵過程以及貯藏過程中生物胺含量的監(jiān)測[8],針對發(fā)酵豆制品中生物胺含量與原料理化性質(zhì)、微生物群落的相關(guān)性分析鮮有報(bào)道。
本研究以7 種液態(tài)類發(fā)酵豆制品和7 種固態(tài)類發(fā)酵產(chǎn)品為研究對象,對8 種常見生物胺含量、理化性質(zhì)、微生物群落進(jìn)行檢測,并通過Pearson相關(guān)性、結(jié)構(gòu)方程模型、冗余分析等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行相關(guān)性分析,以探究發(fā)酵豆制品中生物胺的產(chǎn)生機(jī)制,為完善發(fā)酵豆制品的標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)提供理論基礎(chǔ)。
從江西南昌某超市購買的14 種保質(zhì)期內(nèi)發(fā)酵豆制品作為實(shí)驗(yàn)材料,分為4 類產(chǎn)品,如表1所示。
表1 實(shí)驗(yàn)樣品信息Table 1 Sample information
組胺鹽酸鹽、酪胺鹽酸鹽、腐胺鹽酸鹽(純度 均≥99%),色胺鹽酸鹽、亞精胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品(純度均≥98%),1,7-二氨基庚烷內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)上海源葉生物科技有限公司;β-苯乙胺鹽酸鹽、尸胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)上海麥克林生化科技有限公司;精胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)北京索萊寶科技有限公司。
K9860型全自動凱氏定氮儀 山東海能科學(xué)儀器有限公司;PHS-3G型pH計(jì) 梅特勒-托利多科技(中國)有限公司;HD-4型智能水分活度測試儀 無錫市華科儀器儀表有限公司;1260 Infinity型高效液相色譜儀 安捷倫科技(德國)有限公司。
1.3.1 理化指標(biāo)檢測
pH值測定根據(jù)GB 5009.237—2016《食品pH值的測定》[9];總酸及氨基酸態(tài)氮測定根據(jù)GB 5009.235—2016《食品中氨基酸態(tài)氮的測定》[10];食鹽含量測定根據(jù) GB/T 12457—2008《食品中氯化鈉的測定》[11],采用直接沉淀滴定法;水分活度測定根據(jù)GB 5009.238—2016《食品水分活度的測定》[12],采用水分活度儀擴(kuò)散法測定;凱氏氮測定利用K9860全自動凱氏定氮儀進(jìn)行測定。上述指標(biāo)取樣平行測定3 次。
1.3.2 生物胺含量檢測1.3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立分別取100 m g/L 生物胺標(biāo)準(zhǔn)混合使用液,用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋,配制成質(zhì)量濃度為2.0、3.0、4.0、5.0、12.0、20.0、40.0 mg/L的生物胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,臨用現(xiàn)配。
1.3.2.2 色譜條件及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
參考GB 5009.208—2016《食品中生物胺的測定》[13]。采用HPX-87 C18色譜柱(300 mm×7.8 mm),紫外檢測波長254 nm,柱溫35 ℃,進(jìn)樣量20 μL。流動相A為90%乙腈、10%含0.1%乙酸的0.01 mol/L乙酸銨溶液,流動相B為10%乙腈、90%含0.1%乙酸的0.01 mol/L乙酸銨溶液,流速為0.8 mL/min。梯度洗脫程序如表2所示。
表2 衍生后樣品的分離洗脫梯度Table 2 Gradient elution program
1.3.3 樣品預(yù)處理
醬油樣品與固態(tài)發(fā)酵豆制品的預(yù)處理分別參考Qi Qi[14]和Hu Min[15]等,處理后樣品按1.3.2.2節(jié)色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣分析。
1.3.4 微生物群落多樣性分析
樣品由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行16S rDNA高通量測序,并在美吉生信云平臺進(jìn)行分析。
1.4.1 繪圖及單因素方差分析、Pearson相關(guān)性分析
使用Origin 2022軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并繪圖。使用SPSS 25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、Pearson相關(guān)性分析。P<0.05,差異顯著。
1.4.2 結(jié)構(gòu)方程模型
使用SPSS AMOS軟件進(jìn)行結(jié)構(gòu)方程模型分析[16],其路徑方程如式(1)、(2)所示:
式中:p為內(nèi)生變量個(gè)數(shù);q為外生變量個(gè)數(shù);yi為p×1觀察到內(nèi)生變量個(gè)數(shù)的向量;xi為q×1觀察到外生變量個(gè)數(shù)的向量;α為p×1回歸方程截距的向量;B為p×p回歸方程斜率的矩陣;Γ為p×q回歸方程斜率的矩陣;ζi為p×1干擾因素即殘差的向量;Ψ為p×p干擾因素的協(xié)變量矩陣。
根據(jù)目前已有的研究結(jié)果,氨基酸態(tài)氮含量與體系的鹽度、pH值具有一定關(guān)系,生物胺總量受到鹽度、pH值、總酸、水分活度、氨基酸態(tài)氮以及凱氏氮等指標(biāo)的影響[3,6,8]。因此,該模型下的兩條路徑模型構(gòu)建為:1)pH值和鹽度對氨基酸態(tài)氮的影響;2)鹽度、pH值、總酸、水分活度、氨基酸態(tài)氮以及凱氏氮對生物胺總量的影響。根據(jù)上述條件,利用結(jié)構(gòu)方程模型對生物胺及各類理化指標(biāo)之間的關(guān)系進(jìn)行分析。
取生物胺標(biāo)準(zhǔn)混合使用液,根據(jù)上述色譜條件進(jìn)行分析,重復(fù)測定3 次,得到8 種生物胺的出峰時(shí)間及標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖,如圖1a所示。以生物胺質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)得到線性回歸方程,其線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)(R2)均大于0.99,表明8 種生物胺質(zhì)量濃度與峰面積之間存在良好線性關(guān)系。液體類代表性樣品黑豆老抽(1-1)色譜圖如圖1b所示,固體類樣品豆豉(2-4)色譜圖如圖1c所示。
圖1 生物胺標(biāo)準(zhǔn)品與代表性樣品的高效液相色譜圖Fig.1 High performance liquid chromatogram of biogenic amine standards and representative samples
如表3、4所示,不同發(fā)酵豆制品的生物胺含量存在一定差異,但所有樣品中均能檢出組胺。色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、亞精胺、精胺質(zhì)量濃度和生物胺總量在14 種樣品中范圍分別是0~1274、0~1867、0~7908、0~715、15.3~2637、0~947、0~115、0~498、112~11209 mg/L。
表3 液體發(fā)酵豆制品中生物胺含量Table 3 Biogenic amine contents in fermented liquid soybean productsmg/L
在液態(tài)類產(chǎn)品中8 種生物胺均能檢出,但因制作工藝不同,不同樣品的生物胺總量存在差異。老抽類和生抽類醬油(1-1~1-4)中生物胺總量低于250 mg/L,各類生物胺含量均低于限制值,在生物胺安全方面表現(xiàn)良好。在同類型產(chǎn)品中,黑豆類醬油(1-1、1-3)生物胺含量明顯高于黃豆類醬油(1-2、1-4),可能是由于黑豆中蛋白質(zhì)含量較高,為生物胺產(chǎn)生菌提供了更多可利用底物[17]。脫脂大豆醬油(1-5)、蒸魚豉油(1-6)、牡蠣減鹽醬油(1-7)中生物胺總量分別為11209.7、10266.7、8262.5 mg/L,并顯著高于其他樣品(P<0.05),遠(yuǎn)超過1000 mg/kg的限量標(biāo)準(zhǔn),對人體健康具有負(fù)面影響[18]。其中,脫脂大豆醬油(1-5)樣品中腐胺含量最高,達(dá)到7908 mg/L;蒸魚豉油(1-6)樣品中組胺含量最高,達(dá)到2637 mg/L;牡蠣減鹽醬油(1-7)中樣品苯乙胺含量最高,達(dá)到1867 mg/L。近年來,已開展了市售醬油中生物胺含量的相關(guān)研究。于金芝等[19]報(bào)道表明,市售醬油中生物胺總量范圍為102.87~760.28 mg/kg,以酪胺、組胺為主。陸永梅[20]對市售醬油生物胺含量進(jìn)行分析,結(jié)果表明酪胺、組胺、尸胺、亞精胺、精胺含量分別為0~672.7 mg/kg、0~591.9 mg/kg、0~550.3 mg/L、0~485.9 mg/L、0~145.2 mg/L。曹忠娜[21]發(fā)現(xiàn),部分市售醬油中的生物胺總量已超出美國食品藥品監(jiān)督管理局建議食品中生物胺總量不大于1000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)。由此可見,目前部分市售醬油類產(chǎn)品中的生物胺含量存在潛在健康安全風(fēng)險(xiǎn),有必要研究影響其中生物胺形成的因素。
如表4所示,檢測的固態(tài)類產(chǎn)品生物胺總量均低于1000 mg/kg。相比于豆腐乳類產(chǎn)品(2-1~2-3),豆豉類產(chǎn)品(2-4~2-6)生物胺總量較高。在豆豉(2-4)中8 種生物胺均有檢出,生物胺總量達(dá)到867.3 mg/L,以組胺(459.0 mg/kg)和酪胺(220.0 mg/kg)為主。根據(jù)Gong Xiao等[3]的研究,豆豉樣品中存在著大量腐胺、尸胺和組胺。這可能是由于豆豉在發(fā)酵過程中產(chǎn)生大量氨基酸,為生物胺的生成提供了更多前體物質(zhì),在氨基酸脫羧酶的作用下,氨基酸脫羧生成生物胺[8,22]。雖然非傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品巧克力(2-7)生物胺總量(412.6 mg/kg)相比于豆豉類產(chǎn)品較低,但其組胺含量高達(dá)338.0 mg/kg,超過了100 mg/kg限定值[2],也存在一定潛在安全風(fēng)險(xiǎn)。
表4 固體發(fā)酵豆制品中生物胺含量Table 4 Biogenic amine contents in fermented solid soybean productsmg/kg
如表5 所示,14 種樣品的pH 值、水分活度、鹽度、氨基酸態(tài)氮、總酸、凱氏氮含量分別為4.83~6.83、0.653~0.999、0.29~37.92 g/100 g、0.52~1.28 g/100 g、10.82~83.67 g/kg、1.31%~6.04%。在液態(tài)類產(chǎn)品中,醬油類產(chǎn)品1-5~1-7 總酸含量顯著高于1-1~1-4 樣品(P<0.05),其他指標(biāo)無明顯差異。同時(shí),醬油類產(chǎn)品1-5~1-7生物胺總量顯著高于1-1~1-4樣品(P<0.05)(表3)。固態(tài)類產(chǎn)品中,豆豉類產(chǎn)品(2-4、2-5)的總酸含量顯著高于其他樣品(P<0.05),鹽度顯著低于大部分其他樣品(P<0.05)。同時(shí),豆豉類產(chǎn)品(2-4、2-5)的生物胺總量高于大部分固體(表3、4)。此外,巧克力的鹽度顯著低于醬油類產(chǎn)品及豆腐乳類產(chǎn)品(P<0.05)。而具有較低鹽度的巧克力生物胺總量也顯著低于1-5~1-7樣品(P<0.05)(表3、4)。
表5 不同發(fā)酵豆制品理化性質(zhì)Table 5 Physicochemical properties of different fermented soybean products
如圖2所示,水分活度、總酸、鹽度和氨基酸態(tài)氮與大部分生物胺含量呈正相關(guān),而pH值和凱氏氮與大部分生物胺含量呈負(fù)相關(guān)??偹岷退只疃扰c亞精胺的生成呈顯著正相關(guān)。較高的水分活度可能促進(jìn)產(chǎn)胺微生物生長繁殖,導(dǎo)致生物胺積累[23]。李東蕊等[24]的研究表明,環(huán)境因素如pH值與總生物胺、腐胺呈高度相關(guān),而其他環(huán)境因素如NaCl濃度、總酸、含水量和氨基酸態(tài)氮?jiǎng)t對亞精胺的生成有一定積極影響,這與本研究結(jié)果一致??偹嵩谏锇返纳蛇^程中起到重要作用,這是由于微生物通過脫羧作用產(chǎn)生堿性生物胺提高細(xì)胞內(nèi)外的pH值抵御酸性環(huán)境[25]。因此,如表5所示,本研究中14 個(gè)樣品均呈輕微酸性,符合微生物產(chǎn)生生物胺的pH值條件[6]。通常,總酸含量越高,pH值越低,越有利于生物胺的產(chǎn)生。當(dāng)pH值較低時(shí),對微生物的脫羧作用促進(jìn)越明顯[25],因此pH值與大部分生物胺含量呈負(fù)相關(guān)。凱氏氮含量越高,其中氨氮含量也越高,可能會對pH值的上升具有促進(jìn)作用,從而不利于生物胺產(chǎn)生。此外,高濃度NaCl會使食品體系的滲透壓升高,從而影響微生物的生長和氨基酸脫羧酶的活性。Qi Qi等[26]研究發(fā)現(xiàn)耐鹽性酵母Zygosaccharomyces rouxii和Candida versatilis在含17% NaCl的高鹽環(huán)境下能產(chǎn)生大量的生物胺。然而,高濃度的NaCl也可能導(dǎo)致某些嗜鹽微生物的氨基酸脫羧酶活性下降。Chander等[27]通過研究不同鹽含量(0%~6%)對Lactobacillus bulgaricus產(chǎn)生物胺能力的影響,發(fā)現(xiàn)較高含量的NaCl對該種微生物產(chǎn)胺能力有一定抑制作用。綜上所述,食品中微生物的生理活動與生物胺的產(chǎn)生和積累具有密切聯(lián)系。
圖2 生物胺與理化指標(biāo)的相關(guān)性熱圖Fig.2 Heatmap of the correlation between biogenic amines and physicochemical indices
如圖3所示,近似均方根誤差(the root mean square error of approximation,RMSE)為0.00,表明為最佳擬合。pH值(因子載荷-0.616)、凱氏氮(因子載荷-0.343)對生物胺的產(chǎn)生具有負(fù)面效應(yīng);水分活度(因子載荷0.413)、鹽度(因子載荷0.330)和總酸(因子載荷0.399)對生物胺的產(chǎn)生具有正面效應(yīng)。相關(guān)性分析表明水分活度、總酸、鹽度和氨基酸態(tài)氮與大部分生物胺含量呈正相關(guān)(圖2)。結(jié)構(gòu)方程模型分析的結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了本研究中發(fā)酵豆制品的水分活度、總酸、鹽度與生物胺含量呈正相關(guān)。
圖3 6 種環(huán)境因素影響生物胺總量的結(jié)構(gòu)方程模型Fig.3 Structural equation modeling of six environmental factors affecting the total amount of biogenic amines
選取具有代表性的6 種樣品:黑豆老抽(1-1)、黃豆老抽(1-2)、脫脂大豆醬油(1-5)、豆豉(2-4)、納豆(2-5)、水豆豉(2-6)進(jìn)行微生物群落分析,如 圖4所示。
圖4 6 種樣品屬水平微生物群落相對豐度Fig.4 Relative abundance of microbial communities in six samples at the genus level
圖5 6 種樣品微生物屬水平群落熱圖Fig.5 Heatmap of the microbial communities in six samples at the genus level
體系中微生物群落組成在一定程度上影響著生物胺種類與含量。如圖4、5所示,假單胞菌屬是黑豆老抽醬油(1-1)、黃豆老抽醬油(1-2)、脫脂大豆醬油(1-5)樣品中的優(yōu)勢菌屬,芽孢桿菌屬是豆豉(2-4)、納豆(2-5)、水豆豉(2-6)的優(yōu)勢菌屬。研究表明,假單胞菌能夠分泌熱穩(wěn)定的脂肪酶水解乳脂,釋放游離脂肪酸增加總酸含量,從而促進(jìn)生物胺的產(chǎn)生和積累[28]。除此之外,假單胞菌還具有產(chǎn)生腐胺、酪胺、尸胺的能力[29]。這可能是脫脂大豆醬油(1-5)的生物胺含量顯著高于其他樣品(P<0.05)的原因。芽孢桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌素已被證明能夠抑制產(chǎn)胺菌的活性[30]。因此,在芽孢桿菌的抑制作用下,樣品豆豉(2-4)、納豆(2-5)、水豆豉(2-6)中生物胺總量顯著低于樣品脫脂大豆醬油(1-5)(P<0.05)。此外,糞腸球菌具有合成酪胺的能力[18],其在水豆豉(2-6)中的相對豐度較高,水豆豉(2-6)中酪胺占總生物胺含量比例也最高(35.90%)(表3)。
此外,有研究表明,生物胺的形成還受到基質(zhì)和環(huán)境條件的影響[18]。為進(jìn)一步探究微生物與理化指標(biāo)、生物胺含量之間的關(guān)系,對上述樣品的生物胺含量以及微生物相對豐度進(jìn)行相關(guān)性分析,如圖6所示。對這些樣品的生物胺含量、理化性質(zhì)以及微生物相對豐度進(jìn)行冗余分析,如圖7所示。
圖6 6 種樣品生物胺含量與微生物相對豐度相關(guān)熱圖Fig.6 Heatmap of the correlation between biogenic amine contents and relative abundance of microbial communities in six samples
圖7 6 種樣品微生物菌屬與基礎(chǔ)理化指標(biāo)冗余分析結(jié)果Fig.7 Redundancy analysis of microbial genera versus basic physicochemical indices in six samples
如圖6所示,假單胞菌屬、代爾夫特菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、水桿菌屬與生物胺總量、精胺、亞精胺、酪胺、尸胺、腐胺、色胺的產(chǎn)生呈正相關(guān)。而芽孢桿菌屬與7 種生物胺含量及生物胺總量呈負(fù)相關(guān),四聯(lián)球菌屬、腸球菌屬、片球菌屬與生物胺總量呈負(fù)相關(guān)。如圖7所示,納豆(2-5)、豆豉(2-4)、水豆豉(2-6)3 種固體樣品的凱氏氮含量、總酸含量與芽孢桿菌屬的相對豐度呈正相關(guān)。這可能是由于芽孢桿菌屬更適合在總酸含量較高的條件下生長,這與鄒俊杰等[31]的研究結(jié)果一致。而黃豆老抽醬油、黑豆老抽醬油、脫脂大豆醬油的假單胞菌屬相對豐度與鹽度和氨基酸態(tài)氮呈正相關(guān)。其中黑豆老抽(1-1)、黃豆老抽(1-2)、脫脂大豆醬油(1-5)中假單胞菌屬的相對豐度最高(圖4),其鹽度范圍為29.41~31.10 g/100 g(表5)。谷新晰等[32]也證明假單胞菌屬受氨基酸態(tài)氮的影響較顯著(0.001<P≤0.01)。生物胺總量與假單胞菌屬相對豐度呈正相關(guān),與芽孢桿菌屬、四聯(lián)球菌屬相對豐度呈負(fù)相關(guān),這與相關(guān)性分析結(jié)果一致。
綜上所述,假單胞菌屬可能是因?yàn)樵黾恿梭w系中脂肪酸含量進(jìn)而促進(jìn)了生物胺的累積,而芽孢桿菌屬則可能是因?yàn)楫a(chǎn)生細(xì)菌素抑制產(chǎn)胺菌活性進(jìn)而抑制了生物胺的產(chǎn)生。此外,總酸含量較高的條件能促進(jìn)芽孢桿菌屬生長,較高的鹽度(29.41~30.90 g/100 g)和氨基酸態(tài)氮能夠促進(jìn)假單胞菌屬的生長。樣品的理化性質(zhì)通過影響微生物的生理活動從而最終影響食品中生物胺的水平。因此,理化性質(zhì)和微生物群落均對生物胺生成具有一定影響。為進(jìn)一步保障發(fā)酵豆制品潛在健康安全風(fēng)險(xiǎn),建議控制發(fā)酵豆制品的制作工藝與發(fā)酵菌種等。
以7 種液態(tài)發(fā)酵豆制品和7 種固態(tài)發(fā)酵豆制品為研究對象,對8 種常見生物胺含量、微生物群落多樣性以及相關(guān)理化指標(biāo)進(jìn)行測定。脫脂大豆醬油、蒸魚豉油、牡蠣減鹽醬油中的生物胺總量分別為11209.7、10266.7、8262.5 mg/L,顯著高于其他樣品(P<0.05)。大部分液體樣品中生物胺含量高于固體。樣品中pH值和凱氏氮含量與生物胺總量呈負(fù)相關(guān),水分活度(因子載荷0.413)、總酸含量(因子載荷0.399)和鹽度(因子載荷0.330)對生物胺總量的正面效應(yīng)最大,對生物胺的產(chǎn)生和積累起到積極作用。假單胞菌是黑豆老抽、黃豆老抽、脫脂大豆醬油中的優(yōu)勢菌種,與發(fā)酵豆制品中生物胺含量呈正相關(guān)。芽孢桿菌屬是豆豉、納豆、水豆豉中的優(yōu)勢菌種,與發(fā)酵豆制品中生物胺含量呈負(fù)相關(guān)。