有毒中藥附子不同炮制方法研究進(jìn)展

李占玲 吳春麗 曹永倉

附子為毛茛科植物烏頭子根的加工品，是治療陽虛里寒證的首選中藥。附子具有回陽救逆、補(bǔ)火助陽、散寒止痛之功效，藥理作用研究主要集中在心血管、免疫、抗腫瘤等方面，其抗氧化作用及機(jī)制是研究重點，而自由基清除能力和氧化應(yīng)激水平是評價抗氧化能力的關(guān)鍵指標(biāo)[1]。附子用量小為0.3 g，大則在100 g以上，一般用量10～15 g，隨著用量差異其煎煮法也各不同。短時間煎煮，附子中烏頭堿含量較多，治療痹證、痛證效果較好；長時間煎煮，治療一些慢性病療效顯著。附子藥效與毒性并存，烏頭類生物堿是其主要藥效成分，也是其毒性成分，通過加工炮制，將雙酯型生物堿轉(zhuǎn)換為單酯型生物堿是保障臨床安全應(yīng)用的重要途徑，因此附子炮制工藝的優(yōu)化改良是歷代醫(yī)家研究的重點[2-4]。不同附子炮制品的化學(xué)成分、藥理學(xué)和毒理學(xué)作用有差異，本文通過分析附子炮制有關(guān)的典籍和現(xiàn)代研究，比較各方法差異，為更好地應(yīng)用附子提供借鑒。

1 附子炮制研究概況

1.1 古代炮制方法

附子炮制方法首見于漢代《金匱玉函經(jīng)》：“皆破解，不口父咀，或炮或生……，刀刲取里白者”?！秱摗罚骸芭谌テ?，破八片”。從漢代至唐代以“炮”“燒”“煨”“炒”等方法為主。唐代醫(yī)家開始根據(jù)不同病證使用不同輔料進(jìn)行附子加工，宋代醫(yī)家逐漸采用水洗、水浸、醋浸、黑豆煮、甘草制等。明代以后，附子加工基本沿用古法，以蒸煮等濕法為主，輔料也相對固定（如甘草、姜、童便、黑豆、鹽等）[5]。代珊等[6]運用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）比較古法炮制品與現(xiàn)代5種炮制品中生物堿含量的差異，結(jié)果顯示古法炮制有效成分保留較多，但去毒效果較差；黑順片、白附片毒性成分明顯減少，但有效成分流失較多；其中與古法差異較小的為炒附片，其原因可能是兩者炮制溫度接近，均約為170 ℃，而且炮制過程中均未有水蒸氣參與。

1.2 現(xiàn)代炮制工藝研究

《中華人民共和國藥典》詳細(xì)規(guī)定了附子炮制法：鹽附子和黑順片。現(xiàn)代技術(shù)結(jié)合傳統(tǒng)炮制工藝，又有許多新的方法出現(xiàn)，如微波炮制法、高壓炮制法、高溫炮制法、微生物發(fā)酵法等，迄今為止，有70多種傳統(tǒng)和現(xiàn)代工藝被用于附子炮制[7]。唐小龍等[8]應(yīng)用干熱滅菌和濕熱滅菌的技術(shù)方法炮制附子，具有雙酯型附子生物堿含量降低、水溶性有效成分流失減少、炮制工序簡單等特點。賀亞男等[9]探究微波炮制過程中生附片切片厚度、含水量、微波功率、炮制時間對工藝的影響，結(jié)果表明，附片厚度為3 mm、復(fù)水率60%～80%、炮制時間根據(jù)微波功率調(diào)整，能夠提升微波炮制附子質(zhì)量。

2 不同炮制方法對化學(xué)成分的影響

生物堿是附子的主要毒、效成分，單酯型生物堿是附子的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，而雙酯型生物堿如烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿等為附子的較強(qiáng)毒性成分。炮制減毒的主要機(jī)制可以歸納為：1）以烏頭堿為代表的雙酯型烏頭堿在加工炮制過程中水解成單酯型烏頭堿；2）烏頭堿類結(jié)構(gòu)上8-位乙?；恢觉；〈?，生成毒性較小的脂生物堿[10]。

2.1 加輔料

國偉等[11]按《中華人民共和國藥典》中的方法制備淡附片、甘草制飲片及黑豆制飲片，結(jié)果顯示，與鹽附子比較，分別加入甘草、黑豆炮制附子，雙酯型生物堿含量相比炮制前降低了97%，單酯型生物堿增加了26%；與甘草、黑豆共同炮制，其單酯型生物堿含量更高。葉強(qiáng)等[12]用染色法測定附子與生姜、干姜、炮姜配伍前后生物堿的變化，證實兩者配伍的減毒效果，可能機(jī)制是生姜、干姜、炮姜可提高附子生物堿的溶出度，促進(jìn)雙酯型附子生物堿轉(zhuǎn)化為單酯型附子生物堿。

2.2 膽巴炮制與無膽炮制

為研究膽巴對附子藥效成分變化的影響，劉雨詩等[13]對不同炮制品中生物堿含量進(jìn)行了分析，與生附片相比，炮制品中有效成分含量均顯著提高，毒性成分均明顯降低，無膽炮制品如蒸附片、炒附片中總生物堿和單酯型生物堿含量均比熟附片（膽巴炮制片）高出3～5倍，雙酯型生物堿含量略高，說明膽巴炮制過程增加了附子有效成分的流失，而無膽炮制工藝簡便易行，增效效果較好，減毒效果稍差，具有推廣和應(yīng)用價值。夏飛等[14]的研究得出，浸泡附子用水量1 g∶0.4 ml，蒸制120 ℃，50 min，干燥溫度100 ℃，所得附片中單酯、雙酯型生物堿含量達(dá)0.308 5%、0.014 8%，體外二苯代苦味酰肼（DPPH）清除率87.832%，對羥基自由基清除率達(dá)29.253%。該無膽附子的炮制工藝，具有減少烏頭堿類生物堿的毒性，提高抗氧化應(yīng)激作用，為安全、有效地應(yīng)用附子奠定了堅實基礎(chǔ)。

2.3 建昌幫煨制法

侯春久等[15]分析建昌幫煨附子前后3種單酯型生物堿苯甲酰新烏頭堿、苯甲酰烏頭堿、苯甲酰次烏頭堿的含量變化，結(jié)果表明建昌幫煨制法能顯著提高3種單酯型生物堿的含量，由0.009 1%升高到0.056 2%，提高了6倍多，存在顯著性差異，說明建昌幫煨制法具有“減毒存效”作用。

2.4 微波炮制法

微波炮制具有獨特的熱力學(xué)形式，溫度高、加熱時間短，并且有滅菌作用。水分子在微波和電磁場作用下高頻振動碰撞，產(chǎn)生大量熱能致使生附片中的雙酯型生物堿水解，達(dá)到減毒目的。與其他炮制品相比，微波炮制品的烏頭堿含量差異較小，但水溶物和石油醚可萃取物增多，表明微波加工能夠增加有效成分溶出，增加飲片的穩(wěn)定性，便于貯存和使用，顯著提高附子的安全性、有效性和藥用價值。

2.5 高溫高壓炮制法

高壓蒸煮方法操作簡單可控，是現(xiàn)代研究的熱點，可有效降低毒性成分含量，同時減少有效成分流失。張麗萍[16]采用0.245 Mpa蒸汽壓力，蒸制附子1.5 h，以測定小鼠最大耐受給藥量，當(dāng)給予數(shù)百倍臨床成人用量時，未見相關(guān)毒性反應(yīng)，表明該炮制方法可靠，臨床安全性高。林華等[17]采用正交試驗法對高溫炮制工藝進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果顯示，120 ℃，12 h，附子去毒效果最好，雙酯型生物堿含量（0.04～0.08 mg/g）明顯降低，單酯型生物堿含量（0.70～0.90 mg/g）略有升高，其中苯甲酰烏頭堿含量顯著增加，總生物堿含量略有降低。

3 炮制對附子藥理毒理作用的影響

3.1 炮制對附子藥理作用的影響

不同炮制方法對中藥物質(zhì)基礎(chǔ)產(chǎn)生不同的影響，藥理作用發(fā)生變化。因此，在附子的臨床應(yīng)用中，需根據(jù)附子炮制品藥理作用的不同進(jìn)行選擇。

3.1.1 強(qiáng)心作用 氯仿致小鼠心室顫動的實驗結(jié)果表明，生附子中烏頭堿類含量高，一旦增大劑量即出現(xiàn)心律失常，房室傳導(dǎo)阻滯；而炮附子則具有顯著的強(qiáng)心作用，可改善心肌缺血缺氧，提高小鼠耐缺氧能力，抗炎鎮(zhèn)痛作用也有所增強(qiáng)[18]。雖然兩者都具有強(qiáng)心作用，但生附子具有起效快、作用強(qiáng)、維持時間短的缺點，且毒效劑量難以控制；而炮附子作用弱，強(qiáng)心作用持久，有一定的量-效、時-效關(guān)系，臨床應(yīng)用劑量可控[19]。李立紀(jì)等[20]從體外血小板聚集、小鼠耳郭微循環(huán)和垂體后葉激素致缺血再灌注模型3個方面比較不同附子制品對小鼠心血管系統(tǒng)的影響，結(jié)果表明，采用控溫、除雜、制顆粒等加工的附子制品能夠抑制體外血小板聚集，對心血管系統(tǒng)有保護(hù)作用。陳海媚等[21]研究附子對鹽酸普羅帕酮致急性心力衰竭大鼠模型的影響，結(jié)果表明，炮附子能夠減少心力衰竭有關(guān)神經(jīng)體液因子分泌，改善心力衰竭大鼠血流動力學(xué)，起到強(qiáng)心作用。另外，附子對急性心力衰竭大鼠心功能有顯著改善作用，可升高血壓，加快心率，增強(qiáng)心肌收縮力，機(jī)制可能與激動α、β腎上腺素能受體有關(guān)[22]。

3.1.2 抗炎、鎮(zhèn)痛作用 雙酯型二萜類生物堿是附子抗炎、鎮(zhèn)痛的主要有效成分，對多種炎癥有抑制作用，能夠抑制醋酸所致疼痛，且抗炎鎮(zhèn)痛作用與附子煎煮時間、給藥劑量顯著關(guān)聯(lián)[23]。王麗[24]研究炒附片、黑順片、淡附片和蒸附片對炎癥模型的鎮(zhèn)痛效果，結(jié)果顯示，不同附子組在用藥6 h后足腫脹程度均明顯減輕，其中，炒附片組、黑順片組改善效果更顯著，不同附子組痛閾值相比對照組變化不明顯。因此，在附子的臨床應(yīng)用中，需根據(jù)炮制品的藥理作用不同而選擇，如在治療炎癥時，適宜選用炒附片、黑順片；對于炎癥疼痛，則適宜選用炒附片。

3.1.3 其他藥理作用 附子具有強(qiáng)心、抗心律失常、擴(kuò)張血管、抗氧化應(yīng)激反應(yīng)、改善心肌缺血、調(diào)節(jié)免疫等多種作用，在糖尿病并發(fā)癥、腫瘤治療方面也有較好療效。Wang等[25]探究附子多糖對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變的影響，結(jié)果顯示附子多糖可顯著降低細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，減少細(xì)胞凋亡，說明附子多糖對高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷具有顯著保護(hù)作用。此外，附子可溫陽散寒而流通津血，消散痰瘕，單味附子和含附子溫陽方劑均可改善腫瘤患者臨床癥狀[26-27]，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，附子可抑制腫瘤細(xì)胞生長、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、凋亡，提高機(jī)體免疫力[28-29]，因此值得進(jìn)一步研究附子在惡性腫瘤臨床治療中的應(yīng)用。

3.2 炮制對附子毒理作用的影響

烏頭類生物堿的心臟毒性和神經(jīng)毒性，主要是通過影響心肌、神經(jīng)和肌肉細(xì)胞膜的電壓敏感鈉通道釋放神經(jīng)遞質(zhì)，促進(jìn)心臟、肝臟細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化和凋亡。楊明等[30]將生附子、白附片、微波炮附子、香港炮附子分別給藥NIH系小白鼠，結(jié)果顯示，幾種附子炮制品的急性毒性大小順序為生附子＞白附片＞香港炮附子＞微波炮附子，生附子毒性比微波炮附子高4.77倍。沈玉巧等[31]證實高壓蒸制品、高溫炮制品、微波炮制品、黑順片對小鼠心、肝、腎等臟器均有一定的損傷，高壓蒸制品對心臟損害最小，其他臟器損害差異不明顯，但其損傷程度較生附片明顯降低。

中藥炮制作為中藥領(lǐng)域中非常重要的組成部分，在中藥臨床運用中發(fā)揮了重要作用。中藥經(jīng)過加工炮制可以減少或消除毒副作用，緩和藥性，增強(qiáng)藥效，改變藥物作用部位，便于服用和貯藏。藥材處理前后化學(xué)成分的變化，能夠顯著影響臨床效果和安全性，但不同處理方法對附子的影響程度不盡相同。因此，把握好附子“毒-效”辨證關(guān)系，加強(qiáng)對“減毒增效”的作用機(jī)制研究，分析中藥附子物質(zhì)基礎(chǔ)變化和藥理作用變化，能更好地研究附子臨床應(yīng)用價值。此外，也需要完善附子炮制工藝，建立附子炮制工藝質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評價體系，在確保用藥安全的前提下發(fā)揮最佳藥效，使附子在臨床應(yīng)用中擁有更廣闊的前景。