白芷根際促生菌的篩選及其促生效果研究

江美彥 周楊 劉仁浪 姚菲 楊云舒 侯凱 馮冬菊 吳衛(wèi)

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，成都 611130）

中藥白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.）Benth. et Hook. f.或杭白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.）Benth. et Hook. f. var.formosana（Boiss.）Shan et Yuan的干燥根。白芷為藥食兩用藥材，主要含揮發(fā)油類、香豆素類、氨基酸類等多種活性成分，在臨床上常用于治療各種類型的疼痛癥狀，在食品、化工、香料等多個(gè)方面也有應(yīng)用。市場上主要以川白芷、杭白芷、禹白芷和祁白芷4種作為主流商品藥材［1-3］。而在白芷的道地產(chǎn)區(qū)四川遂寧，存在白芷早期抽薹、化肥農(nóng)藥不合理施用等問題，導(dǎo)致白芷藥材產(chǎn)量和品質(zhì)下降［4-5］。目前，為解決此類問題，在白芷播種、化肥配施、采收加工等方面已有大量研究［6-8］，但有關(guān)白芷根際促生細(xì)菌的研究尚未見報(bào)道。

植物根際是土壤微生物最活躍的區(qū)域，包含古細(xì)菌、細(xì)菌、病毒、真菌、線蟲等多種類群，其中細(xì)菌是最豐富的類群之一。植物根際促生菌（PGPR）即指非致病的有益的根際細(xì)菌［9］，PGPR能夠在植物根際產(chǎn)生和分泌各種調(diào)節(jié)化學(xué)物質(zhì)，或者抑制植物病原體和其他有害微生物，直接或間接地影響植物生長發(fā)育，從而起到促進(jìn)植物生長、提高作物產(chǎn)量、防治植物病害等作用［9-12］。PGPR具有環(huán)保、安全、有效等特點(diǎn)，同時(shí)具有改善土壤結(jié)構(gòu)、提升作物產(chǎn)量和品質(zhì)等方面的潛力［13-14］。

土壤N、P、K配比情況對(duì)白芷早抽薹、產(chǎn)量和質(zhì)量均有影響，植物PGPR分泌的鐵載體和IAA對(duì)植物也有一定的促生作用［15-17］。本試驗(yàn)以種植于四川遂寧的白芷品種BZA001和品系BZB003根際土壤為材料，分離篩選出川白芷根際促生細(xì)菌，通過盆栽試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證所篩促生細(xì)菌對(duì)白芷的促生效果，挖掘白芷根際細(xì)菌潛力，為白芷高產(chǎn)和優(yōu)質(zhì)種植提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 材料

5份種植于四川遂寧涪江流域不同地點(diǎn)的兩種白芷的根際土壤，分別為四川省遂寧市船山區(qū)順江村（XA）、順河村（XB）、遂寧市射洪市桑樹林村（XC）和遂寧市蓬溪縣永益村（XD）的白芷品種BZA001根際土壤，及遂寧市蓬溪縣永益村種植的白芷品系BZB003的根際土壤（XI）。BZA001和BZB003均為課題組多年來選育的遺傳穩(wěn)定的川白芷品種（系），BZA001已于2012年審定為“川芷2號(hào)”白芷品種。

1.2 方法

1.2.1 白芷根際細(xì)菌的分離純化 采用五點(diǎn)法及抖根法挖取白芷根系，抖掉根系多余的土，用刷子輕輕刷下根系表面的土收集作為試驗(yàn)材料。將各根際土樣過孔徑2 mm的篩后，參照楊茉等［18］的方法分離純化根際細(xì)菌，以“來源+數(shù)字”的格式命名，置4℃冰箱存放。

1.2.2 促生細(xì)菌的篩選 固氮、溶磷、解鉀細(xì)菌的篩選參照王明歡等［19］方法，接種細(xì)菌于固氮、無機(jī)磷、解鉀培養(yǎng)基上，通過菌株在選擇培養(yǎng)基上的生長情況和有無透明圈來判斷菌株有無固氮、溶磷、解鉀活性。

產(chǎn)鐵載體細(xì)菌的篩選采用鉻天青比色法，參照程誠［20］的方法進(jìn)行菌株培養(yǎng)和比色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀在630 nm處測定吸光度值，根據(jù)下列公式計(jì)算鐵載體含量：Su（%）=（Ar-A）/Ar×100%（Su為鐵載體含量；Ar為對(duì)照反應(yīng)后的吸光度值；A為菌液反應(yīng)后的吸光度值）。

產(chǎn)IAA細(xì)菌的篩選采用Salkowski比色法，參照劉曄等［21］的方法進(jìn)行菌株培養(yǎng)和比色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀在530 nm處測定吸光值，將20 mg/L IAA標(biāo)準(zhǔn)液分別稀釋為5、10、15和20 mg/L，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各個(gè)菌株IAA產(chǎn)量（μg/mL）。

1.2.3 形態(tài)學(xué)鑒定 觀察純化后的菌株菌落，記錄其形狀、顏色、邊緣、高度、干濕等性狀，并參照《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》方法進(jìn)行革蘭氏染色觀察［22］。

1.2.4 促生細(xì)菌的分子生物學(xué)鑒定 按照TIANGEN細(xì)菌基因組提取試劑盒（DP302）說明書提取DNA，采用通用引物27F/1492R進(jìn)行細(xì)菌16S rDNA基因序列的擴(kuò)增。將擴(kuò)增后PCR產(chǎn)物送擎科生物科技有限公司測序，得到的16S rDNA序列用BLAST于GenBank數(shù) 據(jù) 庫（www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST）中與己知序列進(jìn)行同源性比對(duì)分析。

1.2.5 白芷PGPR的促生效應(yīng)驗(yàn)證 通過盆栽試驗(yàn)驗(yàn)證所選促生能力最強(qiáng)的PGPR菌株對(duì)白芷的促生效應(yīng)。將菌株接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，180 r/min，37℃恒溫?fù)u床培養(yǎng)3 d，6 000 r/min離心10 min后收集菌體，加入無菌水振蕩重懸，將菌液濃度調(diào)至OD595=1（備用）。盆栽試驗(yàn)土壤來自于四川省遂寧市川白芷種植基地（船山區(qū)余建村）。盆栽試驗(yàn)所用白芷品種BZA001、品系BZB003幼苗于2020年10月播種于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)成都校區(qū)青蒲園內(nèi)，第二年3月選擇長勢一致的川白芷植株（每株白芷幼苗保持在相似重量下），用流水沖洗白芷幼苗根部至無褐色土壤痕跡后，將白芷根部浸泡于75%乙醇5 min后，迅速用無菌水沖洗掉殘余酒精（重復(fù)兩次），移栽于圓形花盆（d=35 cm），每盆種5株。

試 驗(yàn) 共4個(gè) 處 理 組：（1）BZA001+蒸 餾 水；（2）BZB003+蒸 餾 水；（3）BZA001+XI-1；（4）BZB003+XI-1。每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5株，共30株。從4-6月在白芷根部3.0 cm處澆灌菌液，每株100 mL，每月澆菌一次，共3次，對(duì)照組澆等量無菌水。在白芷采收期7月下旬進(jìn)行采收，統(tǒng)計(jì)各組白芷株高、根長、根粗、地上鮮重和根鮮重，并以根鮮重衡量各組產(chǎn)量，計(jì)算增產(chǎn)率，參考《中國藥典》測定歐前胡素和異歐前胡素含量［23］。

1.2.6 數(shù)據(jù)分析 利用Microsoft Excel 2010和 SPSS 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 根際細(xì)菌菌株分離純化

從5份種植于四川遂寧不同地點(diǎn)的白芷根際土壤中共分離純化出77株細(xì)菌，分別編號(hào)為XA-1-9；XB-1-16；XC-1-2；XD-1-36；XI-1-14。

2.2 促生細(xì)菌篩選

2.2.1 固氮活性菌株篩選 將77株細(xì)菌在固氮培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，2 d后轉(zhuǎn)接，經(jīng)3次轉(zhuǎn)接后，有23株仍能生長，具有固氮能力，如表1所示。其中菌株XB-8、XB-9、XB-11、XB-13、XB-14、XB-15、XD-9、XD-10、XD-13、XD-23、XD-27、XI-1、XI-3長勢較好，具有較強(qiáng)的固氮能力，如圖1所示。

圖1 部分白芷根際細(xì)菌固氮效果圖Fig. 1 Nitrogen-fixing effect of rhizosphere bacteria of A.dahurica var. formosana

表1 白芷根際菌株固氮活性篩選Table 1 Screening of nitrogen-fixing activity of strains around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

2.2.2 溶磷活性菌株篩選 將77株細(xì)菌分別點(diǎn)接在無機(jī)磷培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d，以透明圈直徑/菌落直徑（D/d）的值判斷株菌溶磷能力。20株細(xì)菌在無機(jī)磷培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈，具有溶磷活性（D/d=1.03-2.42），其中，菌株XI-1和XI-3溶解無機(jī)磷的能力最強(qiáng)（圖2-3）。

圖2 白芷根際細(xì)菌溶解無機(jī)磷活性測定Fig. 2 Determination of dissolving inorganic phosphorus activities of bacteria around the rhizosphere of A.dahurica var. formosana

2.2.3 解鉀活性菌株篩選 將77株細(xì)菌點(diǎn)接在解鉀培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d，以透明圈直徑/菌落直徑（D/d）的值判斷株菌解鉀能力。有5株細(xì)菌在在解鉀培養(yǎng)基上生長，但均未出現(xiàn)透明圈，說明全部菌株均無解鉀活性（圖4）。

圖4 部分白芷根際細(xì)菌解鉀效果圖Fig. 4 Potassium-solubilizing effect of bacteria around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

圖3 白芷根際細(xì)菌XI-1溶磷效果圖Fig. 3 Phosphorus-solubilizing effect of bacteria XI-1 around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

2.2.4 產(chǎn)鐵載體菌株篩選 利用鉻天青比色法初步篩選出能夠產(chǎn)生鐵載體的細(xì)菌，根據(jù)溶液變黃程度判斷產(chǎn)鐵載體能力，顏色越黃表示菌株產(chǎn)鐵載體能力越強(qiáng)。77株細(xì)菌中有50株細(xì)菌菌液加入CAS檢測液后溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S綠色，4株細(xì)菌（XB-13、XB-14、XC-1、XD-29）菌液變?yōu)辄S色，說明這些細(xì)菌具有一定產(chǎn)鐵載體能力，以XB-13、XB-14、XC-1、XD-29產(chǎn)鐵載體能力相對(duì)較強(qiáng)（圖5）。

圖5 白芷部分根際細(xì)菌產(chǎn)鐵載體顯色反應(yīng)Fig. 5 Color reaction of siderophores produced by the bacteria around rhizosphere of A. dahurica var.formosana

用酶標(biāo)儀在630 nm處測定變黃菌液吸光度值，按公式計(jì)算菌液鐵載體含量。如圖6所示，4株產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)的細(xì)菌（XB-13、XB-14、XC-1、XD-29）所產(chǎn)生鐵載體含量均大于30%，其中菌株XB-13產(chǎn)鐵載體能力最強(qiáng)，其菌液鐵載體含量為34.08%。

圖6 白芷根際細(xì)菌產(chǎn)鐵載體測定Fig. 6 Determination of producing siderophores capacity of bacteria around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

2.2.5 產(chǎn)IAA菌株篩選 利用Salkowski’s比色液顯色反應(yīng)判斷77株白芷根際細(xì)菌是否產(chǎn)生IAA。以未接種培養(yǎng)液為陰性對(duì)照，以5 μg/mL IAA溶液為陽性對(duì)照，根據(jù)反應(yīng)后菌液顏色變粉紅色程度進(jìn)行判斷，顏色越紅代表菌株產(chǎn)IAA能力越強(qiáng)（圖7）。與Salkowski’s比色液 反 應(yīng)后77株 細(xì)菌中有15株細(xì)菌的菌液變?yōu)榈凵?，表明其產(chǎn)IAA能力較弱；7株 細(xì) 菌（XA-6、XB-14、XB-14、XD-11、XD-29、XI-1、XI-3）的菌液顯著變紅色，產(chǎn)IAA能力較強(qiáng)。

圖7 測定部分白芷根際細(xì)菌產(chǎn)IAA活性的顯色反應(yīng)Fig. 7 Color reaction of IAA production activity of some bacteria around the rhizosphere of A. dahurica var.formosana

使用酶標(biāo)儀在530 nm處測定顯著變紅的7株細(xì)菌菌液的吸光度值，計(jì)算細(xì)菌的IAA產(chǎn)量結(jié)果如圖8所示。7株細(xì)菌IAA分泌量范圍為5.39-21.96 μg/mL，其中菌株XI-1和XI-3產(chǎn)IAA的能力最強(qiáng)，分泌量為21.96和20.82 μg/mL，其次為XD-29，為17.17μg/mL。

圖8 白芷根際細(xì)菌產(chǎn)IAA定量測定Fig. 8 Quantitative determination of IAA production by bacteria around the rhizosphere of A. dahurica var.formosana

2.3 促生細(xì)菌的鑒定

根據(jù)固氮、溶磷、解鉀、產(chǎn)鐵載體和產(chǎn)IAA五種促生特性篩選的結(jié)果，去除46株無促生潛力或促生潛力較弱的的菌株，對(duì)剩下的31株P(guān)GPR菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定。其中，綜合能力最強(qiáng)的XI-1菌株將作為后續(xù)盆栽試驗(yàn)研究材料。

2.3.1 形態(tài)鑒定 觀察并記錄31株菌的菌落形狀、顏色、邊緣、高度、光澤等性狀，挑取單菌落并進(jìn)行革蘭氏染色。其中，菌株XI-1菌落為灰白色，圓形，拱起，邊緣波狀，有光澤，屬革蘭氏陰性細(xì)菌（圖9，表2）。

表2 白芷根際細(xì)菌的形態(tài)和革蘭氏染色特征Table 2 Morphology and Gram staining characteristics of bacteria around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

圖9 白芷根際細(xì)菌XI-1菌落圖Fig. 9 Colony of bacteria XI-1 around the rhizosphere of A. dahurica var. formosana

2.3.2 16S rDNA序列比對(duì)分析 將31株菌分別依次進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增和測序，測序后在GenBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行比對(duì)分析。如表3所示，所篩31株白芷PGPR比對(duì)結(jié)果同源性均大于99%，可確定為同一種［24］。結(jié)合形態(tài)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，31株P(guān)GPR中有20株菌株來源于芽孢桿菌屬（Bacillus），占64.52%，4株菌株來源于腸桿菌屬（Enterobacter），2株菌株來源于類芽孢桿菌（Paenibacillus），2株菌株來源于假單胞菌屬（Pseudomonas），2株菌株來源于克雷伯菌屬（Klebsiella），1株來源于假芽孢桿菌屬（Fictibacillus）。菌 株XI-1與Klebsiella grimontii菌株同源相似性最高，達(dá)99.79%，結(jié)合菌落形態(tài)特征，初步鑒定XI-1菌株為Klebsiella grimontii。

表3 菌株的16S rDNA序列同源性分析Table 3 Homology analysis of 16S rDNA sequences of all strains

2.4 PGPR對(duì)川白芷促生效果的驗(yàn)證

選擇綜合能力最強(qiáng)的白芷根際細(xì)菌克雷伯氏菌株XI-1進(jìn)行盆栽試驗(yàn)，該XI-1具有較強(qiáng)的固氮、溶磷、產(chǎn)IAA活性，其溶磷能力達(dá)2.42（D/d），產(chǎn)IAA能力達(dá)21.96 μg/mL。

盆栽試驗(yàn)結(jié)果如圖10所示，克雷伯氏菌株XI-1對(duì)各處理組白芷生長均有明顯的促進(jìn)作用。該試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)接種菌株XI-1后，BZA001的株高、根粗和根鮮重均顯著增長，增產(chǎn)率達(dá)31.85%（圖10-A，10-C，10-E）；歐前胡素含量顯著下降為6.04 mg/g，但單株歐前胡素總含量略有上升（圖10-G，圖10-I）；異歐前胡素含量差異不顯著（圖10-H，圖10-I）。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)接種后BZB003的株高、根長、根粗、地上鮮重和根鮮重均顯著增長，且該菌對(duì)BZB003的增產(chǎn)效果優(yōu)于對(duì)BZA001的效果，增產(chǎn)率達(dá)64.59%（圖10-F）；歐前胡素含量顯著下降，為5.91 mg/g，但其單株歐前胡素總含量處于顯著上升水平，達(dá)48.73 mg/株（圖10-G，圖10-I）；施菌后異歐前胡素含量顯著下降為1.0 mg/g，而其單株總含量仍處于略高于對(duì)照的水平（圖10-H，圖10-J）。這些結(jié)果表明該P(yáng)GPR菌株確實(shí)對(duì)兩種川白芷品種（系）均有促進(jìn)白芷生長和產(chǎn)量起作用。

圖10 接種XI-1對(duì)兩個(gè)不同白芷品種（系）的促生效果Fig. 10 Growth-promoting effect of inoculated XI-1 on two different varieties（line）of A. dahurica var. formosana

3 討論

目前，生物肥料以固氮生物肥料為主，其次是增磷生物肥料，生物肥料種類和數(shù)量遠(yuǎn)少于合成農(nóng)用化學(xué)肥料［9］。而應(yīng)用于中藥材種植的微生物菌肥不足百種，市場需求較大［25］。已有的研究表明，由PGPR制成的微生物肥料經(jīng)濟(jì)、環(huán)保，可替代部分化肥用量，同時(shí)可增加產(chǎn)量，提高品質(zhì)［26］，是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展下化肥的有效補(bǔ)充，這在黃瓜［27］、番茄［28］、玉米［29］、小麥［30］等研究中已有大量報(bào)道。由此，本試驗(yàn)開展白芷根際促生細(xì)菌對(duì)白芷產(chǎn)量和品質(zhì)影響研究具有重要意義，可為生產(chǎn)實(shí)際中提高白芷產(chǎn)量和改進(jìn)品質(zhì)，以及開展白芷專用菌肥研究提供理論依據(jù)。

本試驗(yàn)結(jié)合細(xì)菌固氮、溶磷、溶鉀、產(chǎn)鐵載體、產(chǎn)IAA能力，共篩選出31株促生潛力較強(qiáng)的白芷根際促生菌。土壤PGPR具有多樣性及廣泛性，Maria等［31］從番茄根際分離出200株細(xì)菌，篩選出兩株P(guān)GPR菌劑潛在菌種資源，分別屬于泛菌屬和假單胞菌屬；雷海英等［32］以苦參根際土壤為材料，共分離鑒定了20株促生菌，發(fā)現(xiàn)它們分屬于5個(gè)菌屬，其中假單胞菌屬占所有菌株的50%。本試驗(yàn)細(xì)菌鑒定結(jié)果發(fā)現(xiàn)31株白芷根際促生菌多為芽孢桿菌屬（Bacillus），占64.52%。芽孢桿菌屬是常見的PGPR種類之一［33］，路曉培［34］在內(nèi)蒙古武川馬鈴薯和涼城植物檸條根際土中共分離鑒定了134株細(xì)菌，其中以芽孢桿菌屬數(shù)量最多，占所有菌株的22.31%。芽孢桿菌因其耐受性強(qiáng)、促生防病效果明顯，被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及綠化造林中［35］，白芷根際芽孢桿菌應(yīng)同樣存在巨大應(yīng)用潛力。

本試驗(yàn)中促生潛力最強(qiáng)的菌株XI-1為Klebsiella grimontii，屬克雷伯氏菌屬菌株。已有的研究表明，該屬的產(chǎn)酸克雷伯氏菌可提高土壤酶活、促進(jìn)玉米幼苗的生長并提高玉米的耐鹽堿能力［36］。除此之外，克雷伯氏菌還可降解部分有害物質(zhì)，林楊等［37］發(fā)現(xiàn)吉林克雷伯氏菌2N3對(duì)噻吩磺隆污染土壤具有較好修復(fù)作用。謝澳文等［38］以香豆素為唯一碳源篩選出的克雷伯氏菌株對(duì)黃曲霉毒素具有顯著降解作用。有關(guān)K. grimontii作為微生物菌肥運(yùn)用于植物的研究還相對(duì)較少，菌株XI-1在白芷促生和其他功能開發(fā)上具有較大潛力，但進(jìn)一步開發(fā)利用還需進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)［39］。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，接種來源于BZB003的根際PGPR菌株XI-1后，2份不同的白芷品種（系）歐前胡素和異歐前胡素含量均下降，其中BZB003歐前胡素和異歐前胡素含量下降均達(dá)顯著水平。謝澳文等［38］發(fā)現(xiàn)香豆素可作為部分克雷伯氏菌株的碳源供其生長，據(jù)此推測白芷的香豆素成分（如歐前胡素和異歐前胡素）可能是使PGPR菌株XI-1在白芷根際定殖的因素之一，這為菌株XI-1和白芷相互作用研究提供了新的思路。

XI-1同時(shí)具有較強(qiáng)的固氮、溶磷和產(chǎn)IAA能力，且在不施肥條件下對(duì)白芷生長及產(chǎn)量表現(xiàn)出積極的促進(jìn)作用，增產(chǎn)率分別高達(dá)31.85%和64.59%，具有成為微生物菌肥的應(yīng)用前景。白芷主要有效成分歐前胡素和異歐前胡素含量雖顯著下降，但其單株總成分含量并未下降，且遠(yuǎn)高于《中國藥典》（2020版）規(guī)定的歐前胡素和異歐前胡素含量［23］，這一方面可能與白芷品種（系）BZA001和BZB003自身性狀優(yōu)良有關(guān)，另一方面也可能與白芷在盆栽的低營養(yǎng)逆境下生長受抑，次生代謝產(chǎn)物反而累積有關(guān)［40］。同時(shí)，本試驗(yàn)結(jié)果還表明，XI-1對(duì)BZB003白芷品系的促生長作用優(yōu)于BZA001品種，表明該菌株更能與BZB003建立良好的互利共生關(guān)系，至于其中的相互作用機(jī)制仍待進(jìn)一步研究。

總體而言，本試驗(yàn)所篩白芷根際PGPR菌株具有很大的開發(fā)前景，可為未來白芷種植中增產(chǎn)保質(zhì)、化肥減施提供科學(xué)依據(jù)。

4 結(jié)論

從白芷根際分離篩選得到31株P(guān)GPR菌株，其 中64.52%均 屬 于 芽 孢 桿 菌 屬（Bacillus）。K.grimontii菌株具有較強(qiáng)的固氮、溶磷、產(chǎn)IAA活性，綜合促生潛力最強(qiáng)，其溶磷活性達(dá)2.42（D/d），產(chǎn)IAA活性達(dá)21.96 μg/mL。盆栽結(jié)果表明，在不施肥的條件下XI-1對(duì)2種不同白芷品種（系）的生長及產(chǎn)量均有顯著提高，增產(chǎn)率分別為31.85%和64.59%。K. grimontii菌株XI-1在一定程度上緩解了缺肥對(duì)白芷生長的限制，具有發(fā)展為白芷微生物菌劑的潛質(zhì)。