天堂寨肉疣衣屬地衣的研究

付鈺茹 浦晶 崔璨 賈澤峰

摘 要：基于形態(tài)、解剖、化學(xué)、分子方法，對(duì)天堂寨的肉疣衣屬地衣進(jìn)行系統(tǒng)研究，結(jié)果表明，該地區(qū)肉疣衣屬有4種，其中新記錄種1種，即平肉疣衣[Ochrolechia parellula（Müll. Arg.） Zahlbr.]。該種主要特征為：地衣體表面灰綠色，粗糙，有龜裂，子囊盤淺灰色，盤緣較為光滑，子囊含有8孢子，子囊孢子單胞，45～70μm×20～30μm。另外3種為輪生肉疣衣[O. trochophora （Vain.） Oshio]、顆粒肉疣衣[O. akagiensis Yasuda & Vain.]和裂芽肉疣衣[O. yasudae Vain.]。

關(guān)鍵詞：地衣型真菌;肉疣衣科;新記錄;分類學(xué)

中圖分類號(hào) Q949.34 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2022）10-0021-03

Study of the Lichen Genus Ochrolechia A. Massal. in Tiantangzhai

FU Yuru? ?PU Jing? ?CUI Can? ?JIA Zefeng

（College of Life Sciences，Liaocheng University， Liaocheng 252059， China）

Abstract：The study of lichen genus Ochrolechia from Tiantangzhai performed using morphology， anatomy， chemistry， and molecular methods. Four species of Ochrolechia are reported in the present paper， including one new record to China， O. parellula （Müll. Arg.） Zahlbr.， it′s characterized by its pale gray green thallus， rough， and cracked， gray disc， smooth disc edge， 8-spored ascus， ascospore sized 45～70μm×20～30μm. The description and discussion of O. trochophora （Vain.） Oshio， O. akagiensis Yasuda et Vain. and O. yasudae Vain. are given.

Key words：Lichenized fungi; Ochrolechiaceae; New record; Taxonomy

天堂寨自然保護(hù)區(qū)地處亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，自然條件非常優(yōu)越，動(dòng)植物種類和真菌資源均頗為豐富[1-3]，但目前對(duì)于天堂寨肉疣衣屬地衣的研究尚缺乏系統(tǒng)性。肉疣衣屬（Ochrolechia A. Massal.）地衣是世界廣布屬之一，Massalongo于1852年最早建立該屬，Zahlbruckner（1926）將該屬置于茶漬目（Lecanorales）茶漬科（Lecanoraceae）中，Schmitt I又將肉疣衣屬歸入肉疣衣科（Ochrolechiaceae）[4]。因此，該屬隸屬于真菌界（Fungi）、子囊菌門（Ascomycota）、茶漬綱（Lecanoromycetes）、雞皮衣目（Pertusariales）、肉疣衣科（Ochrolechiaceae）。

目前，肉疣衣屬在全球范圍內(nèi)已報(bào)道60多個(gè)種[5-6]，中國(guó)報(bào)道30多個(gè)種[5-16]。該屬主要識(shí)別特征為：地衣體殼狀，灰白色或灰色;子囊果為盤狀，埋生或貼生表面，盤直徑為0.1～4.0mm，顏色通常與地衣體同色，有些表面比較光滑，有些覆有粉霜，盤緣較厚，有些還帶有小凸起;子囊內(nèi)多數(shù)含8孢子;子囊孢子比較大，大小通常為35～65×19～35μm，孢子壁薄;光合共生物為共球藻屬Trebouxia;地衣化學(xué)物質(zhì)主要有三苔色酸。本研究對(duì)采自天堂寨的標(biāo)本進(jìn)行了鑒定，鑒定出肉疣衣屬有4種，其中，新記錄種1種：平肉疣衣[Ochrolechia parellula （Müll. Arg.） Zahlbr.]。另外3種是：輪生肉疣衣[O. trochophora （Vain.） Oshio]、顆粒肉疣衣[O. akagiensis Yasuda & Vain.]和裂芽肉疣衣[O. yasudae Vain.]。研究結(jié)果填補(bǔ)了天堂寨地區(qū)肉疣衣屬研究之空白，也為肉疣衣屬地衣的分類學(xué)研究提供了基礎(chǔ)材料。

1 材料與方法

研究標(biāo)本來自天堂寨自然保護(hù)區(qū)，存放于聊城大學(xué)地衣物種與基因資源生物學(xué)研究中心的標(biāo)本館（LCUF）。

外部形態(tài)特征在OLYMPUS SZX16體視顯微鏡下觀察，解剖特征在OLYMPUS BX53光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照。通過10%KOH溶液（K），Ca（ClO）2飽和水溶液（C）和95%乙醇中對(duì)苯二胺的飽和溶液（P）觀察化學(xué)顯色反應(yīng)。使用薄層色譜法（TLC） [17]鑒定地衣次生代謝產(chǎn)物。

通過DNA基因組提取、PCR擴(kuò)增、測(cè)序，將測(cè)得的ITS序列（見圖1）與NCBI中下載的肉疣衣屬其他22條序列使用MEGA6軟件進(jìn)行比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育分析。采用基于Tamura-Nei模型的最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，bootstrap值為1000。

2 結(jié)果與分析

基于ITS序列構(gòu)建的ML系統(tǒng)發(fā)育樹顯示，從GenBank中下載的肉疣衣屬序列以種為單位形成單獨(dú)的分支，說明該屬有較高的遺傳多樣性?；疑尘暗难芯繕?biāo)本屬于O. parellula分支，具有89%的較高支持率，說明其為O. parellula中國(guó)新記錄種。O. parellula與輪生肉疣衣O. trochophora、顆粒肉疣衣O. akagiensis屬于同一大分支，說明其具有較近的親緣關(guān)系。

3 描述和討論

3.1 平肉疣衣Ochrolechia parellula （Müll. Arg.）Zahlbr.，Cat. Lich. Univers. 5：693（1928）（圖2） 地衣體殼狀，連續(xù)，表面灰綠色，偏灰，粗糙龜裂，具有疣狀突起。子囊盤圓形，直徑0.5～1.5mm;盤面微凹，灰白色;盤緣灰色;盤被完全炭化，黑色，30～110μm;囊層被深褐色，16～18μm;子囊層無色，240～270μm;囊層基淺棕色，30～50μm;子囊長(zhǎng)梭狀，175～200×30～35μm，含有8孢子;子囊孢子無色透明，單胞室，橢圓狀，45～70×20～30μm;無光暈，I+藍(lán)黑色。

化學(xué)：地衣體K-，KC-，C+紅色;含有g(shù)yrophoric acid（三苔色酸）。

基物：石生。

引證標(biāo)本：安徽 金寨縣，天堂寨野豬林，1390m，2018年6月17日，賈澤峰，AH18073、AH18074。

世界分布：韓國(guó)[18]、日本[18]、南亞[19]。

討論：Ochrolechia parellula與生長(zhǎng)初期的O. trochophora相似，子囊盤邊緣光滑，而O. trochophora在發(fā)育良好時(shí)具有疣狀的邊緣。該種與O. parella相似，盤緣均較厚、全緣，兩者不同之處在于前者的子囊盤盤緣較圓、較光滑，而后者的子囊盤有些不規(guī)則，盤緣具有突起、不光滑。該種與O. akagiensis相比，子囊盤大小相近，但子囊孢子較后者略小。基于該研究材料與以上相似種的比較和在本屬中的綜合特征，確定其為中國(guó)新記錄。

3.2 輪生肉疣衣 Ochrolechia trochophora（Vain.） Oshio，J. Sci. Hiroshima Univ.，B，2 12：145（1968）（圖3：A） 地衣體殼狀，連續(xù)，表面灰白色，粗糙，有龜裂，初生地衣體和邊緣明顯。子囊盤圓形，灰白色，直徑0.8～2mm;盤面微凹;盤緣圓形逐漸變?yōu)轲酄钔黄?盤被完全炭化，黑褐色，38～50μm;囊層被棕褐色，50～65μm;子囊層無色，250～300μm;囊層基棕褐色，50～65μm;子囊長(zhǎng)棒狀，180～220×45～50μm，含有8孢子;子囊孢子無色透明，橢圓狀，60～68×22～27μm;無光暈，I+藍(lán)色。

化學(xué)：地衣體K-，KC-，C+紅色;含有g(shù)yrophoric acid（三苔色酸）和lecanoric acid（茶漬酸）。

基物：樹皮。

引證標(biāo)本：安徽 金寨縣，天堂寨風(fēng)景區(qū)，900m，2020年10月11日，朱孟麗，AH20053、AH20045;大別山主峰，1550m，2020年10月12日，朱孟麗AH20199。

世界分布：韓國(guó)[18]、北美[20-21]、歐洲[22]。

討論：Ochrolechia trochophora是中國(guó)常見的肉疣衣屬的1種，通常生長(zhǎng)在各種樹皮上，很少在巖石上發(fā)現(xiàn)。在形態(tài)特征上，該種子囊盤邊緣具有疣狀突起，與O. akagiensis相似，地衣體表面有顆粒狀突起，子囊盤形狀略不規(guī)則，盤緣有突起，不同之處是后者子囊孢子較大，前者較小。根據(jù)前人研究，O. trochophora分為2種類型：一種來自美國(guó)，地衣體及子囊盤邊緣表面具有突起[20-21];另一種來自歐洲，地衣體發(fā)育較弱[22]。中國(guó)具有以上2種類型，已在云南[7]、臺(tái)灣[7，9]、福建[22-23]、安徽[24]、浙江[24]、貴州[10，25]等地報(bào)道。

3.3 顆粒肉疣衣Ochrolechia akagiensis Yasuda，in Wainio，Bot. Mag.，Tokyo 35：54（1921）（圖3：B） 地衣體殼狀，地衣體淺灰綠色，粗糙，暗淡，有龜裂。子囊盤圓形，直徑0.8～1.6mm;盤面凹陷，淺褐色;盤緣與地衣體同色，其上褶皺較多，粗糙;盤被完全炭化，13～44μm，褐色;囊層被55～95μm，褐色;子囊層230～250μm，無色;囊層基50～70μm，淺褐色;子囊長(zhǎng)梭狀，180～210×35～40μm，含有8個(gè)孢子;子囊孢子無色透明，橢圓形，50～80×25～35μm;無光暈，I+藍(lán)黑色。

化學(xué)：地衣體K-，KC+紅色，C+紅色;含有l(wèi)ecanoric acid（茶漬酸）和gyrophoric acid（三苔色酸）。

基物：樹皮。

引證標(biāo)本：安徽 金寨縣，天堂寨風(fēng)景區(qū)，大別山主峰，1550m，2020年10月12日，朱孟麗，AH20277。

世界分布：韓國(guó)[18]和日本[26]。

討論：Ochrolechia akagiensis與O. yasudae在著生位置和裂芽形態(tài)方面有所不同，O. akagiensis通常生長(zhǎng)在苔蘚或樹皮上，為顆粒性裂芽，后者通常生長(zhǎng)在巖石或長(zhǎng)滿苔蘚的巖石上，為圓柱狀裂芽。如前所述，該種與O. trochophora相似但仍有不同之處。

3.4 裂芽肉疣衣Ochrolechia yasudae Vain.，Bot. Mag.，Tokyo 32：155（1918）（圖3：C） 地衣體殼狀，表面灰白色，粗糙，具有圓柱狀突起。子囊盤圓形，中間灰白色，直徑0.5～2mm;盤面向內(nèi)凹陷;盤緣粗糙;盤被完全炭化，黑色，65～130μm;囊層被黑褐色，25～50μm;子囊層無色，265～320μm;囊層基黃褐色，70～120μm;子囊長(zhǎng)橢圓狀，280～310×60～75μm，含有8孢子;子囊孢子無色，長(zhǎng)橢圓狀，70～110×30～50μm;無光暈，I+藍(lán)色。

化學(xué)：地衣體K-，KC-，C+紅色;檢測(cè)到gyrophoric acid（三苔色酸）。

基物：石頭。

引證標(biāo)本：安徽 金寨縣，天堂寨風(fēng)景區(qū)，大別山主峰，1690m，2020年10月12日，朱孟麗，AH20301。

世界分布：東亞和北美[5]。

討論：該種與O. akagiensis近似，比較見上。該種與寒生肉疣衣[O. frigida （Sw.） Lynge]相似，但后者盤面淺黃色，具有顆粒狀、棘狀延伸的地衣體[18]。該種與O. parellula、O. trochophora的子囊盤均較大，子囊8孢，無色透明，但該種的子囊和孢子較后兩者大。

致謝 感謝朱孟麗女士提供的地衣標(biāo)本;感謝地衣物種與基因資源生物學(xué)研究中心的老師給予的指導(dǎo)和幫助。

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（責(zé)編：王慧晴）