金艷獼猴桃應用生長調節(jié)劑膨大效果及其殘留分析

錢亞明 郭榮 劉春曉 顏志梅 李浩

摘要 以金艷獼猴桃為試材，于花后14 d分別對幼果噴施氯吡脲（CPPU）10 mg/L、CPPU 20 mg/L及CPPU 10 mg/L+赤霉酸（GA3）20 mg/L的溶液，以不噴施生長調節(jié)劑為對照，研究不同處理對金艷獼猴桃果實的膨大效果及不同采樣時期果實中的生長調節(jié)劑殘留情況。結果表明，噴施CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L處理的金艷獼猴桃縱徑、橫徑、果實單果質量相對最大，分別為5.78 cm、4.48 cm、85.19 g，極顯著高于對照（P<0.01）的4.86 cm、3.63 cm、43.03 g;各處理果實中CPPU的殘留量均遠小于國家殘留限量標準（0.05 mg/kg）。

關鍵詞 金艷獼猴桃;生長調節(jié)劑;膨大;殘留

中圖分類號 S 663.4? 文獻標識碼 A? 文章編號 0517-6611（2022）01-0197-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.01.053

The Swelling Effect and Residue Analysis of Jinyan Kiwifruit with Growth Regulator

QIAN Ya-ming1， GUO Rong2， LIU Chun-xiao1 et al

（1.Fruit Research Institute， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/Jiangsu Key Laboratory of High-Efficiency Horticultural Crop Genetic Improvement， Nanjing，Jiangsu 210014;2.Agricultural Technology Extension Center of Liuhe District in Nanjing， Nanjing， Jiangsu 211500）

Abstract Taking Jinyan kiwifruit as the test material， the young fruits were sprayed with solutions of forchlorfenuron （CPPU） 10 and 20 mg/L and CPPU 10 mg/L+gibberellic acid （GA3） 20 mg/L 14 days after flowering.Taking no spraying of growth regulators as a control， we studied the expansion effect of different treatments on Jinyan kiwifruit fruits and the residues of growth regulators in the fruits at different sampling periods.The results showed that the longitudinal diameter， transverse diameter and single fruit quality of Jinyan kiwifruit sprayed with CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L were relatively the largest， which were 5.78 cm， 4.48 cm， and 85.19 g， which were significantly higher than the control （P<0.01） 4.86 cm， 3.63 cm， 43.03 g.The residues of CPPU in the fruits of each treatment were far less than the national residue limit standard （0.05 mg/kg）.

Key words Jinyan kiwifruit;Growth regulator;Swelling;Residue

基金項目 江蘇省農業(yè)科技自主創(chuàng)新資金（CX（17）2005）;江蘇現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項。

作者簡介 錢亞明（1973—），男，江蘇泰興人，研究員，碩士，從事獼猴桃、葡萄為主的漿果類果樹研究。

通信作者，副研究員，博士，從事獼猴桃品種收集、評價、種質創(chuàng)新及關鍵技術研究。

收稿日期 2021-05-08

“金艷”是1984年中國科學院武漢植物園以毛花獼猴桃為母本、中華獼猴桃為父本選育而成的一個極耐貯藏、晚熟種間雜交黃肉獼猴桃新品種[1]，2012年引入江蘇省農業(yè)科學院六合植物科學基地種植，具有果形端正、自然果個相對較大、風味較好等特點，是適于在江蘇適度規(guī)模發(fā)展的獼猴桃品種[2]。氯吡脲（CPPU）、赤霉酸（GA3）均為低毒性植物生長調節(jié)劑，在葡萄、枇杷等果樹上應用廣泛[3-5]，具有促進果實膨大、提升果實品質、提高果實商品性等作用，目前在翠香、徐香、軟棗等獼猴桃上也有應用報道[6-8]，但在金艷獼猴桃上的應用鮮見報道。

在果品生產過程中使用植物生長調節(jié)劑，消費者除關注其對果實品質有沒有影響外，會對其使用安全性更為關切，而其在果實中的殘留量從一定程度上可以反映獼猴桃果品的安全性問題。該試驗以金艷獼猴桃為試材，通過噴施常規(guī)濃度的GA3和CPPU，考察其在不同時期果實中的殘留量，為生產調節(jié)劑的規(guī)范使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗基地概況

試驗在江蘇省農業(yè)科學院六合基地獼猴桃種植園區(qū)進行，2014年建園，采用T型棚架栽培、常規(guī)管理，定植株行距為2 m×3 m，起約40 cm的高壟進行栽植，樹體長勢一般。田間按雌雄比5∶1配置授粉樹，進行田間自然授粉。試驗期間，疏花疏果、肥水管理、病蟲害防治等同田間常規(guī)管理，保持基本一致。

1.2 供試材料

金艷獼猴桃，自揚州市江都區(qū)樊川鎮(zhèn)精品果園場引進;75%赤霉酸（GA3）結晶粉，由上海同瑞生物科技有限公司（原上海第十八制藥廠）生產;0.1%氯吡脲（CPPU）可溶劑，由四川蘭月科技開發(fā)公司生產。

1.3 試驗方法

試驗于2019年5月23日（花后14 d）進行，分別對金艷獼猴桃果面噴施CPPU 10 mg/L、CPPU 20 mg/L、CPPU 10 mg/L+ GA3 20 mg/L，以不噴施生長調節(jié)劑為對照，共計4個處理。單株為一個小區(qū)，隨機處理，重復3次。

1.4 測定內容與方法

1.4.1 生長調節(jié)劑對金艷獼猴桃果實性狀的影響。于果實近成熟期即9月18日，每株隨機采集6個金艷獼猴桃果實，測定果實縱徑、橫徑和單果質量。果實縱徑、橫徑采用游標卡尺測定，橫徑進行“十”字交叉測量，取平均值;單果質量采用電子天平測定，精度0.1 g;計算果形指數(shù)、平均單果質量，其中，果形指數(shù)計算公式為：果形指數(shù)=果實縱徑/果實橫徑。

1.4.2 金艷獼猴桃果實中生長調節(jié)劑的殘留量測定。

1.4.2.1 測試樣品采集。取樣分3次進行，5月23日噴施生長調節(jié)劑前取樣1次，所有處理整體混合在一起，形成1個測試混樣;6月25日各處理分別混合取樣，計取樣4個;9月18日各單株分別采樣，計取樣12個。每采集測試樣品不低于300 g，采集樣品當日置于-18 ℃冰箱中凍存，待測。果實中生長調節(jié)劑殘留量的測定委托卡文思檢測技術有限公司進行，采用高效液相色譜-串聯(lián)質譜法（HPLC-MS/MS）進行檢測。

1.4.2.2 生長調節(jié)劑殘留量的測定。

（1）CPPU殘留量測定。將樣品置于液氮中研磨至粉碎，準確稱量約5 g 新鮮粉碎樣品，向粉末中加入含0.5%甲酸的20%乙腈提取緩沖液10 mL，4 ℃超聲30 min;6 000 r/min 離心5 min，取上清，過strata-X 小柱，以5 mL 甲醇洗脫;避光，以氮氣吹干有機相，以0.4 mL 甲醇溶解;過0.22 μm 濾膜，進行HPLC-MS/MS檢測。

（2）GA3殘留量測定。將樣品于液氮中研磨至粉碎，準確稱量約3 g 樣品于玻璃試管中，向粉末中加入異丙醇/鹽酸提取緩沖液10 mL，同時加入1 μg/mL 的內標溶液8 μL，4 ℃振蕩30 min;加入二氯甲烷20 mL，4 ℃振蕩30 min;4 ℃，13 000 r/min 離心5 min，取下層有機相;避光，以氮氣吹干有機相，以400 μL 甲醇（含0.1%甲酸）溶解;過0.22 μm 濾膜，進行HPLC-MS/MS檢測。

（3）檢測液相條件。poroshell 120 SB-C18 反相色譜柱（2.1 mm×150 mm，2.7 μm）;柱溫為30 ℃;流動相為A∶B=（甲醇含0.1%甲酸）∶（水含0.1%甲酸）;洗脫梯度為0～1 min，20%A，1～9 min，80%A，9～10 min，80%A，10.0～10.1 min，20%A，10.1～15.0 min，20%A;進樣體積為2 μL。

（4）質譜條件。氣簾氣為103.4 kPa，噴霧電壓為4 500 V，霧化氣壓力為448.2 kPa，輔助氣壓力為482.6 kPa，霧化溫度為400 ℃。

1.5 統(tǒng)計分析

采用Excel 2010和SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行處理和統(tǒng)計分析，采用Duncan’s新復極差法進行差異性比較。

2 結果與分析

2.1 生長調節(jié)劑對金艷獼猴桃果實性狀的影響

CPPU是一種具有高活性的合成類細胞分裂素，在果樹上普遍使用，可刺激細胞分裂達到增加果實開花坐果率和體積的作用[9]。GA3是活性較高的一種赤霉素，既可由工業(yè)發(fā)酵赤霉菌而獲得，又在植物體發(fā)育過程中的種子、莖尖、嫩葉上被發(fā)現(xiàn)，并參與植物的生長發(fā)育過程[10]。由表1可見，與不使用生長調節(jié)劑（CK）相比，分別噴施CPPU 10 mg/L、CPPU 20 mg/L及CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L的金艷獼猴桃，其果實縱徑有顯著增加（P<0.05），果實橫徑和單果質量有極顯著增加（P<0.01）;噴施CPPU 10 mg/L+ GA3 20 mg/L的金艷獼猴桃，其果實縱徑、橫徑、單果質量相對均最大，分別為5.78 cm、4.48 cm、85.19 g，均極顯著高于對照處理，而果形指數(shù)相對最小，為1.29，顯著低于噴施CPPU 20 mg/L處理的，與其他處理間差異不顯著;單一噴施CPPU對金艷獼猴桃果形指數(shù)的影響不顯著（P>0.05）。

2.2 生長調節(jié)劑在金艷獼猴桃果實中的殘留情況

2.2.1 CPPU。由表2可見，對照處理及噴施生長調節(jié)劑前采樣的果實（5月23日），均能檢測出含量極小的CPPU殘留，這可能是基質干擾或儀器誤差所致;噴施CPPU處理的金艷獼猴桃，其果實中CPPU含量均高于對照，其中，6月25日采集的果樣，噴施CPPU 20 mg/L處理的果實中CPPU殘留量相對最高，為0.933 3 ng/g，明顯高于其他處理，說明隨著CPPU使用濃度越高，早期其在果實中的殘留量相對越大，而噴施CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L處理的果實中CPPU殘留量為0.382 0 ng/g，明顯高于CPPU 10 mg/L處理的，可能是由于GA3的使用會影響CPPU在果實中的降解所致，具體原因有待進一步研究;9月18日采樣的果實，各處理的果實中CPPU殘留量相互間差異不顯著，且殘留量極小。

2.2.2 GA3。由表3可見，5月23日的金艷獼猴桃幼果中GA3含量相對最高，為36.216 3 ng/g，明顯高于其他時期的果實，這說明GA3在幼果中的含量相對較高;6月25日采集的金艷獼猴桃，使用含GA3處理的果實中GA3殘留量相對最高，為18.793 8 ng/g，明顯高于其他3個處理，說明外源GA3的使用會明顯影響其在果實中的降解;9月18日采集的金艷獼猴桃，噴施CPPU 20 mg/L處理的果實中GA3殘留量相對最高，為0.083 1 ng/g，顯著高于CPPU 10 mg/L和對照處理，與CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L處理的差異不顯著，這一定程度反映CPPU與GA3存在一定的互作關系，高濃度CPPU的使用可能會影響果實中GA3的降解。

3 結論與討論

對5年生金艷獼猴桃果面分別噴施CPPU 10 mg/L、CPPU 20 mg/L、CPPU 10 mg/L+ GA3 20 mg/L的溶液，以不噴施生長調節(jié)劑為對照，研究不同生長調節(jié)劑處理對金艷獼猴桃果實性狀及果實中CPPU、GA3殘留量的影響，結果表明，與不使用生長調節(jié)劑相比，使用CPPU可以顯著增大金艷獼猴桃果實縱徑（P<0.05），極顯著增加果實橫徑和單果質量（P<0.01），而單一使用CPPU對金艷獼猴桃果形指數(shù)的影響不顯著（P>0.05）;噴施CPPU 10 mg/L+ GA3 20 mg/L的金艷獼猴桃，其縱徑、橫徑、單果質量相對最大，分別為5.78 cm、4.48 cm、85.19 g，均極顯著高于對照處理，而果形指數(shù)相對最小，為1.29，顯著低于CPPU 20 mg/L處理，這一定程度上反映使用高濃度CPPU可以明顯增加獼猴桃果實的縱徑，而增加GA3可使果實橫徑增加更為明顯;6月25日采集的果樣中，噴施CPPU 20 mg/L處理的果實，其CPPU殘留量相對最高，為0.933 3 ng/g，明顯高于其他處理，而9月18日的各處理，其果實中CPPU的殘留量相互間差異不顯著，且都遠小于國家獼猴桃CPPU殘留限量（0.05 mg/kg）的標準[9];5月23日的金艷獼猴桃幼果中GA3殘留量相對最高，為36.216 3 ng/g，明顯高于其他時期的果實，這說明幼果期GA3對果實調控起十分關鍵的作用;6月25日時，使用含GA3處理的金艷果實中GA3殘留量相對最高，為18.793 8 ng/g，明顯高于其他3個處理，說明GA3的使用可以延緩其果實發(fā)育過程中的降解，對果實橫徑的增大發(fā)揮著一定作用;9月18日采集的金艷獼猴桃，CPPU 20 mg/L處理的果實中GA3殘留量相對最高，為0.083 1 ng/g，顯著高于CPPU 10 mg/L處理和對照，與CPPU 10 mg/L+GA3 20 mg/L處理的差異不顯著，這說明CPPU、GA3存在一定的互作關系，其機理有待進一步研究。

目前我國對獼猴桃GA3殘留量已不作限量要求，而CPPU屬低毒性植物生長調節(jié)劑，美國、歐盟、韓國乃至我國對其殘留均進行了較為嚴格的限定。該試驗實際測得的果實中CPPU、GA3的殘留量遠小于國家或國際上的限量標準[11]，說明CPPU、GA3的使用幾乎不會影響獼猴桃果品的安全性，這與柴振林等[12-13]的研究結論吻合。但是，張帆等[14]認為使用膨大劑后獼猴桃增產30%～50%，但其連年過量使用膨大劑會對獼猴桃樹體生長產生負面影響，主要是生殖生長和營養(yǎng)生長失衡、樹體抗逆性減弱、果實畸形嚴重、商品性降低等，且易導致 “大小”年現(xiàn)象的發(fā)生。因此，在實際使用過程中，還是應科學規(guī)范使用以CPPU、GA3為主的生長調節(jié)劑，以確保果實品質和商品性的提高。

參考文獻

[1] 鐘彩虹，王圣梅，黃宏文，等.極耐貯藏的種間雜交黃肉獼猴桃新品種‘金艷’[C]//中國園藝學會獼猴桃分會第四屆研討會論文

摘要集.北京：中國園藝學會，2010：6.

[2] 錢亞明，趙密珍，于紅梅，等.5個獼猴桃品種在江蘇地區(qū)的引種表現(xiàn)[J].江蘇農業(yè)科學，2017，45（22）：143-145.

[3] 王壯偉，吳偉民，夏瑾，等.GA3和CPPU對‘紫金早生’葡萄果實品質的影響[J].中外葡萄與葡萄酒，2019（1）：16-19.

[4] 張翔宇，尹克林.GA3和CPPU處理對雜交枇杷果實無核化及其品質的影響[J].南方農業(yè)，2008，2（5）：15-16.

[5] 朱盼盼，王錄俊，李蕊，等.不同配比GA3和CPPU對葡萄果實品質的影響[J].安徽農業(yè)科學，2018，46（19）：38-40，62.

[6] 朱杰麗，楊柳，柴振林，等.氯吡脲對“徐香”獼猴桃果實品質的影響[J].福建林業(yè)科技，2014，41（1）：113-115，165.

[7] 劉煥.膨大劑處理對獼猴桃品質及貯藏性的影響[D].楊凌：西北農林科技大學，2018.

[8] 劉銘，樸一龍，安嬌，等.不同植物生長調節(jié)劑對軟棗獼猴桃果實無核化及膨大效果研究[J].延邊大學農學學報，2019，41（1）：13-17，23.

[9] 李圓圓.采前CPPU處理對獼猴桃采后品質及細胞超微結構的影響機制研究[D].楊凌：西北農林科技大學，2018.

[10] 郝鵬博.外源赤霉素和多效唑對桃節(jié)間長度及赤霉素代謝基因表達影響[D].鄭州：河南農業(yè)大學，2017.

[11] 中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會，中華人民共和國農業(yè)農村部，國家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量：GB 2763—2019[S].北京：中國農業(yè)出版社，2019.

[12] 柴振林，楊柳，朱杰麗，等.氯吡脲在獼猴桃中的殘留動態(tài)研究[J].果樹學報，2013，30（6）：1011-1015.

[13] 李瑞娟，于建壘，宋國春，等.氯吡脲在獼猴桃和土中的消解動態(tài)與殘留測定[J].山東農業(yè)科學，2009，41（2）：78-80，83.

[14] 張帆，李瑩.怎樣看待膨大劑在獼猴桃上的應用[J].西北園藝（果樹?？?，2007（6）：6-7.