• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    微生物合成3-甲硫基丙醇的研究現(xiàn)狀

    2022-02-07 13:09:30馬景浩張玉姣成柳潔李秀婷范光森
    中國釀造 2022年1期
    關(guān)鍵詞:脫羧酶丙醇硫基

    馬景浩,王 洋,張玉姣,成柳潔,滕 超,李秀婷,范光森*

    (1.北京工商大學(xué) 食品與健康學(xué)院,北京 100048;2.北京工商大學(xué) 北京市食品添加劑工程技術(shù)研究中心,北京 100048;3.濟(jì)南海關(guān)技術(shù)中心 德州實(shí)驗(yàn)室,山東 德州 253000)

    3-甲硫基丙醇(俗稱菠蘿醇)是一種重要的含硫高級醇,常溫下為易流動的淡黃色液體,低濃度時(shí)具有強(qiáng)烈的肉類芬芳香氣,天然存在于蘋果、番茄、醬油、奶酪、白酒、葡萄酒、啤酒、威士忌、白蘭地等食品或飲料中,能賦予眾多食品其特有的風(fēng)味[1]。3-甲硫基丙醇香氣閾值低,在1~3 mg/L之間即可表現(xiàn)出一種令人愉悅的、肉類的或者烤制奶酪的香氣,是調(diào)配肉味香精的重要香料之一,是國家允許使用的食品用香料,廣泛應(yīng)用于香精香料調(diào)配和食品增香,是一類應(yīng)用非常廣泛的食用香料化合物,市場需求量大[2-3]。

    目前,3-甲硫基丙醇的生產(chǎn)方法包括化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法,其中化學(xué)合成法是目前3-甲硫基丙醇生產(chǎn)的主要方法。化學(xué)合成法雖然成本低,但卻存在合成過程污染較大等問題,不能滿足消費(fèi)者日益對環(huán)保、綠色和純天然香精香料青睞的需求。由于生物轉(zhuǎn)化制備天然3-甲硫基丙醇具有構(gòu)型單一、綠色環(huán)保,成為近年來生產(chǎn)3-甲硫基丙醇的重要發(fā)展方向[4]。相關(guān)研究表明,微生物,尤其是酵母能代謝L-蛋氨酸發(fā)酵合成3-甲硫基丙醇,是生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)天然3-甲硫基丙醇的有效途徑。目前,有關(guān)微生物發(fā)酵合成3-甲硫基丙醇的研究相對較少,需要對其進(jìn)行深入研究。本文正是基于微生物合成3-甲硫基丙醇的重要性,通過對微生物合成3-甲硫基丙醇的主要微生物及其代謝途徑中的關(guān)鍵酶進(jìn)行簡述,加強(qiáng)對微生物產(chǎn)天然3-甲硫基丙醇研究現(xiàn)狀的了解,為相關(guān)研究提供參考。

    1 3-甲硫基丙醇在食品中的作用

    3-甲硫基丙醇具有強(qiáng)烈的甜香、湯或肉樣香氣,早在1973年美國食用香料與提取物制造者協(xié)會(Flavour and Extract Manufactuere's Association,F(xiàn)EMA)將其確定為一般認(rèn)為安全的香料物質(zhì),在食品中建議用量為0.1~50 mg/kg[5],1986年,我國相關(guān)食品國家標(biāo)準(zhǔn)也將其列為暫時(shí)允許使用的食品香料。3-甲硫基丙醇特有的肉香味及其低閾值特性,對眾多食品呈現(xiàn)獨(dú)特的風(fēng)味發(fā)揮了重要的作用,如在切達(dá)干酪、藍(lán)奶酪、卡門培爾干酪等奶酪中呈現(xiàn)發(fā)酵卷心菜的獨(dú)特氣味,能很容易在奶酪中被辨識出,是奶酪整體風(fēng)味的重要組成部分[6-7];盡管3-甲硫基丙醇是否是芝麻香型白酒中的特征風(fēng)味物質(zhì)存有爭論,但其在部分品牌芝麻香型白酒的風(fēng)格形成中發(fā)揮著重要作用,并且在豉香型白酒及果酒的呈味中也具有重要的貢獻(xiàn),表現(xiàn)出花椰菜和煮熟蔬菜的香氣,對風(fēng)味品質(zhì)的貢獻(xiàn)顯著[1,8];3-甲硫基丙醇是黃酒中的重要含硫化合物,在清爽型黃酒中香氣強(qiáng)度較高,主要賦予黃酒青香和煮熟蔬菜的氣味,豐富黃酒的香氣[9];3-甲硫基丙醇也是葡萄酒中重要的風(fēng)味物質(zhì),能賦予葡萄酒煮土豆味,豐富其風(fēng)味[10]。除此之外,因其具有甜的肉及肉湯氣味,3-甲硫基丙醇是調(diào)配肉味香精的重要原料,還可用于調(diào)配諸如水果、蔬菜、醬油、酒等眾多食用香精,用途廣泛[11]。

    2 3-甲硫基丙醇的生產(chǎn)方法

    2.1 化學(xué)合成法

    化學(xué)合成方法因具有成本低、合成快、產(chǎn)物濃度高的優(yōu)勢,一直是3-甲硫基丙醇主流的生產(chǎn)方法。目前,有關(guān)3-甲硫基丙醇的化學(xué)合成方法主要有四種:①采用甲硫醇和烯丙醇的加成反應(yīng)。②利用3-氯-1-丙醇和甲硫醇鈉在醚中進(jìn)行取代反應(yīng)。③采用烯丙基甲基硫醚的分解反應(yīng)。④3-巰基-1-丙醇和硫酸二甲酯的取代反應(yīng)(圖1)[11]。其中,前兩種反應(yīng)是目前實(shí)際生產(chǎn)中所采用的方法,相關(guān)研究也較多。劉玉平等[11]以3-氯-1-丙醇和甲硫醇鈉為原料,在相轉(zhuǎn)移催化劑四甲基溴化銨的作用下發(fā)生取代反應(yīng),制得了純度較高的3-甲硫基丙醇,產(chǎn)率達(dá)到81%。雖然,化學(xué)合成成本低廉,但存在的一些諸如原料毒性高、生產(chǎn)過程中的毒副產(chǎn)物難以去除及污染較大等問題引起關(guān)注,在一定程度上限制了其在工業(yè)化生產(chǎn)中的長期使用,必須拓展新的生產(chǎn)方法[12]。

    圖1 3-甲硫基丙醇的4種化學(xué)合成方法Fig.1 Four chemical synthesis methods for 3-methithiopropanol

    2.2 微生物合成法

    有關(guān)研究表明,微生物可以將甲硫氨酸轉(zhuǎn)化為3-甲硫基丙醇[7,13]。如,BUZZINI P等[13]篩選獲得10株能夠轉(zhuǎn)化氨基酸生成3-甲硫基丙醇的酵母菌株,產(chǎn)量在0.04~0.40 g/L。雖然,當(dāng)前微生物轉(zhuǎn)化合成3-甲硫基丙醇的速率不及化學(xué)方法,但由于其具有反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)物構(gòu)型單一、綠色環(huán)保、所用原料安全無污染等特點(diǎn),成為近年來制備“綠色”和“天然”的3-甲硫基丙醇的重要發(fā)展方向。

    2.2.1 生產(chǎn)3-甲硫基丙醇的天然菌株

    當(dāng)前,國內(nèi)外有關(guān)微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)天然3-甲硫基丙醇的研究相對較少,能夠產(chǎn)生3-甲硫基丙醇的微生物種類不多,主要集中于酵母菌株(表1)。已報(bào)道能夠產(chǎn)3-甲硫基丙醇的菌株包括釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)、漢遜德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、酒類酒球菌(Oenococcus oeni)、擔(dān)子菌酵母(Basidiomycetous yeasts)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)、魯氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)、擬威爾酵母(Williopsis)等[4,13-21]。目前,天然微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)3-甲硫基丙醇的能力相對較弱,CASTILLO-LOZANO M L D等[7]通過搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)5株酵母菌株,其中乳酸克魯維酵母KL640和釀酒酵母SC45能轉(zhuǎn)化生成3-甲硫基丙醇,產(chǎn)量分別為14.51 mg/L和25.70 mg/L;BUZZINI P等[13]從37株擔(dān)子菌酵母中獲得10株可以生成3-甲硫基丙醇的酵母,其產(chǎn)量在0.04~0.40 g/L;侯晟等[4]優(yōu)化了釀酒酵母SC408發(fā)酵合成3-甲硫基丙醇的條件,在最優(yōu)條件下,該菌株所產(chǎn)3-甲硫基丙醇的量達(dá)到1.6 g/L;為進(jìn)一步提高釀酒酵母SC408發(fā)酵合成3-甲硫基丙醇的產(chǎn)量,王成濤等[22]采用發(fā)酵-分離耦合技術(shù)降低3-甲硫基丙醇對細(xì)胞的毒害作用,最終產(chǎn)量可達(dá)2.26 g/L,為已報(bào)道天然菌株中所產(chǎn)3-甲硫基丙醇最高產(chǎn)量;另外,WILLIAMS A G等[23]從切達(dá)干酪中分離獲得29株能產(chǎn)3-甲硫基丙醇的乳酸菌,產(chǎn)量也較低,在0.04~0.30 g/L之間。天然菌株所產(chǎn)3-甲硫基丙醇普遍低的現(xiàn)象(幾乎都低于0.1 g/L),成為采用天然菌株進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)3-甲硫基丙醇最主要的限制因素[24]。

    表1 產(chǎn)3-甲硫基丙醇的天然菌株Table 1 Natural strains that produce 3-methylthiopropanol

    續(xù)表

    2.2.2 生產(chǎn)3-甲硫基丙醇的基因工程菌

    隨著人們對天然生產(chǎn)的3-甲硫基丙醇的需求增加以及基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展,越來越多的學(xué)者開始采用分子生物學(xué)技術(shù)對菌株進(jìn)行改造,以此實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)3-甲硫基丙醇的工程菌株。劉麗等[26]通過過表達(dá)釀酒酵母S288C中的氨基轉(zhuǎn)移酶ARO8基因構(gòu)建工程菌ARO8,工程菌所產(chǎn)3-甲硫基丙醇達(dá)到0.76 g/L,相比野生型S288C提高了28.8%;溫明顯等[3]通過過表達(dá)釀酒酵母INVSc1中的脫羧酶基因ARO10構(gòu)建了釀酒酵母轉(zhuǎn)化子SC10-1,其產(chǎn)3-甲硫基丙醇的量相比天然菌株提高了55.2%,達(dá)到0.90 g/L;YIN S等[27]通過共表達(dá)氨基轉(zhuǎn)移酶基因ARO8和ARO10構(gòu)建了釀酒酵母轉(zhuǎn)化子S810,在搖瓶水平上,該工程菌所產(chǎn)3-甲硫基丙醇達(dá)到1.27 g/L,通過分批補(bǔ)料發(fā)酵罐培養(yǎng),產(chǎn)量達(dá)到3.24 g/L;ETSCHMANN M M W等[24]通過分批補(bǔ)料發(fā)酵方法實(shí)現(xiàn)了工程菌釀酒酵母CEN.PK113-7D高產(chǎn)3-甲硫基丙醇的目的,產(chǎn)量可達(dá)3.5 g/L;楊雪蓮等[28]優(yōu)化了過表達(dá)脫羧酶基因ARO10的釀酒酵母工程菌合成3-甲硫基丙醇的發(fā)酵條件,在最優(yōu)條件下,工程菌株所產(chǎn)3-甲硫基丙醇可達(dá)4.38 g/L,為已報(bào)道中的最高水平。部分產(chǎn)3-甲硫基丙醇的基因工程菌株見表2,由表2可知,通過基因改造可以實(shí)現(xiàn)3-甲硫基丙醇產(chǎn)量的大幅度提高,為工業(yè)化應(yīng)用微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)3-甲硫基丙醇打下基礎(chǔ)。

    表2 產(chǎn)3-甲硫基丙醇的基因工程菌株Table 2 Genetically engineered strains producing 3-methylthiopropanol

    3 微生物生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)3-甲硫基丙醇的關(guān)鍵基因和酶

    在酵母細(xì)胞中,Ehrlich途徑是生物轉(zhuǎn)化生成高級醇的最重要的途徑[2]。3-甲硫基丙醇是高級醇的一種,可以由蛋氨酸經(jīng)過Ehrlich途徑代謝產(chǎn)生[34]。在3-甲硫基丙醇的生物合成過程中,如果沒有蛋氨酸,3-甲硫基丙醇幾乎不產(chǎn)生,這足以表明Ehrlich途徑在合成3-甲硫基丙醇中的重要性[24]。在Ehrlich途徑中,首先,蛋氨酸在氨基轉(zhuǎn)移酶(aminotransferase)作用下發(fā)生轉(zhuǎn)氨基作用生成α-酮-γ-甲硫基丁酸(α-keto-γ-(methylthio)butyrate,KMBA),然后在脫羧酶(decarboxylase)作用下生成3-甲硫基丙醛,最后在乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase,ADH)作用下發(fā)生還原反應(yīng)生成3-甲硫基丙醇[24,35]。

    圖2 微生物轉(zhuǎn)化L-蛋氨酸產(chǎn)3-甲硫基丙醇的Erich途徑Fig.2 Erich pathway of microbial transformation of L-methionine to produce 3-methylthiopropanol

    3.1 氨基轉(zhuǎn)移酶

    在Ehrich途徑中具有轉(zhuǎn)氨作用的基因有4種,分別為BAT1、BAT2、ARO8和ARO9[2]。CHOLET O等[36]對漢斯德巴氏酵母菌(Debaryomyces hansenii)、馬克斯克魯維酵母(Kluyveromyces marxianus)和解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中的86個(gè)基因進(jìn)行了脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)微陣列分析,發(fā)現(xiàn)能高效同化L-蛋氨酸的解脂耶氏酵母中,與釀酒酵母同源的基因BAT2和ARO8表達(dá)量較高,表明這兩種轉(zhuǎn)氨酶在酵母通過Ehrich途徑轉(zhuǎn)化蛋氨酸生成3-甲硫基丙醇中起到一定的作用。研究表明,基因BAT1編碼線粒體氨基轉(zhuǎn)移酶BAT1p,優(yōu)先參與支鏈氨基酸(BCAAs)的生物合成,BAT2則編碼細(xì)胞質(zhì)氨基轉(zhuǎn)移酶BAT2p,參與BCAAs的分解代謝,兩者在3-甲硫基丙醇的合成中起到的作用較小,而在合成其他高級醇中的作用顯著[37-40]。基因ARO8和ARO9則分別編碼Aro8p和Aro9p,兩者作用的底物是芳香族氨基酸,分別被稱為芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶Ⅰ和Ⅱ[41-42]。Aro8p屬于組成型表達(dá)蛋白,是主要的芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶,它的表達(dá)易受到氨基酸合成代謝的影響;Aro9p則是一種誘導(dǎo)表達(dá)蛋白,其表達(dá)受到氮源調(diào)控以及ARO8基因缺失等因素的影響。在已有研究中發(fā)現(xiàn),雖然L-蛋氨酸不是芳香族氨基酸,但其代謝過程與芳香族氨基酸相似,基因ARO8和ARO9在利用L-蛋氨酸合成3-甲硫基丙醇中起到重要的作用[42-43]。Aro8p和Aro9p都具有廣泛的底物特異性,其表達(dá)水平在以L-蛋氨酸為唯一氮源、葡萄糖受限的條件下較高,Aro8p表現(xiàn)出較強(qiáng)的催化蛋氨酸轉(zhuǎn)氨基生物活性[2,43-44]。URRESTARAZU A等[43]研究表明,單獨(dú)缺失ARO8或ARO9基因的釀酒酵母都能在含有蛋氨酸存在的基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,而同時(shí)缺失ARO8和ARO9基因后則無法生長,通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),ARO8基因編碼的芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶I不僅對芳香族氨基酸具有轉(zhuǎn)氨作用,而且還對蛋氨酸、α-氨基乙二酸和亮氨酸具有轉(zhuǎn)氨活性,ARO9基因編碼的芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶II同樣具有較寬廣的底物特異性。YIN S等[27]研究發(fā)現(xiàn),過表達(dá)ARO8基因提高的芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶活性明顯高于過表達(dá)ARO9基因所獲得的活性,表明相比芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶II,芳香族氨基酸轉(zhuǎn)移酶I在轉(zhuǎn)化L-蛋氨酸合成3-甲硫基丙醇中效果更為明顯。DEED R C等[25]研究表明,單獨(dú)缺失基因ARO8可使釀酒酵母BY4743合成3-甲硫基丙醇的能力下降44%,使商用葡萄酒酵母F15合成3-甲硫基丙醇的能力降低92%;單獨(dú)缺失ARO9基因?qū)︶劸平湍窧Y4743合成3-甲硫基丙醇沒有影響,然而卻使菌株F15的3-甲硫基丙醇含量相比野生型菌株提高了46%。另外,相關(guān)研究還表明,轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨作用具有可逆性,Aro8p和Aro9p可以催化α-KMBA發(fā)生轉(zhuǎn)氨作用產(chǎn)生L-蛋氨酸[45-46]。綜上可見,酵母通過Ehrlich途徑合成3-甲硫基丙醇中轉(zhuǎn)氨酶Aro8p所發(fā)揮的轉(zhuǎn)氨作用最為重要。

    3.2 脫羧酶

    在轉(zhuǎn)氨酶的作用下,L-蛋氨酸轉(zhuǎn)化為α-KM BA,α-KMBA則在脫羧酶作用下生成3-甲硫基丙醛,這種醛也具有獨(dú)特的肉香味,對番茄、奶酪和醬油呈味也發(fā)揮重要的作用[47-48]。脫羧酶與轉(zhuǎn)氨酶不同,在Ehrlich途徑中是不可逆的[2]。VURALHAN Z等[48-49]研究了釀酒酵母CEN.PK113-7D中的脫羧酶,結(jié)果表明其擁有5個(gè)候選基因可以編碼:ARO10(YDR380w)、THI3(YDL080c)、PDC1(YLR044c)、PDC5(YLR134w)和PDC6(YGR087c),表達(dá)的脫羧酶屬于硫胺二磷酸依賴性脫羧酶[27]。ARO10基因編碼的脫羧酶具有廣泛的底物特異性,尤其對芳香族氨基酸具有很強(qiáng)的轉(zhuǎn)氨活性,是產(chǎn)生支鏈和含硫雜醇類的關(guān)鍵貢獻(xiàn)者,尚未發(fā)現(xiàn)THI3編碼具有活性的脫羧酶,PDC1基因和PDC5基因編碼為丙酮酸脫羧酶,與ARO10基因編碼的脫羧酶類似,對所有支鏈和含硫的2-oxo酸均表現(xiàn)出活性,兩者中一種的缺失都會激發(fā)另一種的大量表達(dá),而PDC6僅能在含低硫的條件下表達(dá),并且PDC5基因編碼的脫羧酶脫羧效率與PDC1基因編碼的相當(dāng),而PDC6基因編碼的脫羧酶的脫羧效率最低[50-52]。

    VURALHAN Z等[48]研究發(fā)現(xiàn),在以苯丙氨酸、亮氨酸或蛋氨酸為唯一氮源時(shí),5種脫羧酶基因中只有ARO10基因轉(zhuǎn)錄水平上調(diào),其中使用L-Met作為唯一氮源時(shí),ARO10基因的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)15倍,當(dāng)其他四個(gè)基因失活時(shí),ARO10能編碼足夠量的苯丙酮酸脫羧酶活性[49]。PERPETE P等[35]研究發(fā)現(xiàn),KMBA在Ydr380wp作用下可脫羧生成3-甲硫基丙醛,若Ydr380wp失活,釀酒酵母不能將L-蛋氨酸轉(zhuǎn)化為3-甲硫基丙醇,而缺失其他四個(gè)脫羧酶仍能轉(zhuǎn)化3-甲硫基丙醇,由此推測KMBA的脫羧作用受Ydr380wp特異性影響。LIU B等[21]研究發(fā)現(xiàn),鹽度可以提高魯氏接合酵母中ARO10基因的表達(dá),從而增加其合成3-甲硫基丙醇的含量。YIN S等[27]通過基因過表達(dá)研究同樣發(fā)現(xiàn),ARO10基因的過表達(dá)可顯著提高細(xì)胞脫羧酶活性,從而提高了3-甲硫基丙醇的產(chǎn)量。由此可見,5種脫羧酶中,ARO10基因所編碼的脫羧酶對酵母通過Ehrlich途徑合成3-甲硫基丙醇更為重要。

    3.3 醇脫氫酶

    在Ehrlich途徑中,3-甲硫基丙醇合成的最后一步是氧化還原反應(yīng),其由3-甲硫基丙醛在醇脫氫酶的作用下發(fā)生還原反應(yīng)而生成的,這一步是非限制性速度,不限制3-甲硫基丙醇的轉(zhuǎn)化速度,因?yàn)榻湍钢写嬖谠S多乙酸脫氫酶,可被其中的任何一種催化完成[2]。

    BOER V M等[53]研究發(fā)現(xiàn),醛的氧化或還原受培養(yǎng)條件的影響,在葡萄糖限制型的恒化培養(yǎng)基中,當(dāng)進(jìn)行有氧發(fā)酵時(shí)大部分醛被氧化為酸,進(jìn)行無氧發(fā)酵時(shí)大部分醛被還原為醇。VALLET A等[54]研究表明,僅有的能合成3-甲硫基丙醇細(xì)菌-酒類酒球菌IOEB 8406中存在乙醇脫氫酶(ADH)活性,在3-甲硫基丙醇的合成中起到重要的作用。DICKINSON J R等[55]采用13C核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)和氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)分析發(fā)現(xiàn),醇脫氫酶Adh1p、Adh2p、Adh3p、Adh4p、Adh5p和Sfa1p中的任何一種都能將醛轉(zhuǎn)化成3-甲硫基丙醇。然而,CHE Y X等[31]分析了在添加3-甲硫基丙醛的條件下酵母中7個(gè)ADH基因的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),只有ADH4表達(dá)量明顯增加,在釀酒酵母S288c中過表達(dá)ADH4后,3-甲硫基丙醇產(chǎn)量明顯增加,這表明不同醇脫氫酶在合成3-甲硫基丙醇中的重要性不同,有待進(jìn)一步研究。

    3.4 脫甲硫基酶

    在Ehrlich途徑中,L-蛋氨酸或其衍生物α-KMBA可以通過脫甲基化轉(zhuǎn)化,從而產(chǎn)生甲硫醇(methanthiol,MTL),從而對3-甲硫基丙醇的合成產(chǎn)生影響,具有脫甲硫基功能的酶有胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase,CGL)和胱硫醚-β-裂解酶(cystathionine β-lyase,CBL)等[35]。KNOLL C等[56]研究發(fā)現(xiàn)酒類酒球菌中胱硫醚-γ/β-裂解酶似乎參與了蛋氨酸代謝途徑生成甲硫醇,在過表達(dá)胱硫醚-γ-裂解酶基因的菌株中,顯著增加了蛋氨酸的分解,產(chǎn)生了更多的甲硫醇。JIA K Z等[57]研究發(fā)現(xiàn)胱氨酸-β-裂解酶(CBL)可以將蛋氨酸和KMBA降解為甲硫醇,是合成甲硫醇的限速酶。然而,劉麗等[30]敲除胱硫醚-γ-裂解酶基因后,釀酒酵母S288c所產(chǎn)3-甲硫基丙醇產(chǎn)量降低,推測可能除了胱硫醚-γ-裂解酶外,還有其他酶參與了L-蛋氨酸的去甲基化。ZHANG Q等[58]在粉紅螺旋聚孢霉和釀酒酵母中過表達(dá)E3-泛素-蛋白連接酶HUWE1后顯著提高了去甲基硫醇途徑中甲硫醇及其衍生物的生物合成,而抑制了Ehrlich途徑中的3-甲硫基丙醛和3-甲硫基丙醇的生物合成。由此可見,影響Ehrlich途徑的支路上的酶對于3-甲硫基丙醇合成也具有重要影響。

    4 展望

    3-甲硫基丙醇是許多食品中的重要風(fēng)味物質(zhì),隨著人們對天然添加劑3-甲硫基丙醇需求的增加,微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)3-甲硫基丙醇成為滿足消費(fèi)者需求的重要方法。但已報(bào)道的天然菌株中具有高產(chǎn)3-甲硫基丙醇的菌株較少,需要進(jìn)一步篩選高產(chǎn)產(chǎn)3-甲硫基丙醇的天然菌株,另外,可以利用基因工程對天然菌株進(jìn)行改造,如可以通過過表達(dá)Ehrlich途徑中的關(guān)鍵酶,也可以敲除胱硫醚-γ-裂解酶基因,減少蛋氨酸的支路代謝,從而提高3-甲硫基丙醇的產(chǎn)量,再次,也可以通過在發(fā)酵過程中分離出發(fā)酵產(chǎn)物3-甲硫基丙醇以減少其對微生物的毒性,從而連續(xù)不斷的轉(zhuǎn)化生成3-甲硫基丙醇。隨著對微生物研究的深入,也可利用微生物群落法對不同的微生物進(jìn)行最佳組合從而獲得3-甲硫基丙醇的最大產(chǎn)量。由此可見,通過傳統(tǒng)篩選方法、分子生物技術(shù)及發(fā)酵技術(shù)等組合可以實(shí)現(xiàn)生物法高效轉(zhuǎn)化合成3-甲硫基丙醇,為生物法合成天然的3-甲硫基丙醇提供廣闊的應(yīng)用空間。

    猜你喜歡
    脫羧酶丙醇硫基
    手性磷酰胺類化合物不對稱催化合成α-芳基丙醇類化合物
    分子催化(2022年1期)2022-11-02 07:10:30
    食品中3-氯丙醇酯的研究現(xiàn)狀
    棕櫚油還能吃嗎
    食品與生活(2017年5期)2017-05-27 20:28:38
    低溫轉(zhuǎn)化噴漿造粒硫基復(fù)合肥(15-15-15)裝置工藝設(shè)計(jì)
    新型離子液體的合成及其在Heck反應(yīng)合成烯丙醇類化合物中的應(yīng)用
    鋱-2-甲硫基煙酸摻雜配合物的合成及熒光性質(zhì)研究
    硫基復(fù)合肥的現(xiàn)狀與前景展望
    河南化工(2014年1期)2014-08-30 07:01:03
    中科院研制出源自糖精的三氟甲硫基化試劑
    浙江化工(2014年9期)2014-08-15 00:50:54
    沒食子酸脫羧酶及酶法制備焦性沒食子酸研究進(jìn)展
    右旋糖酐對草酸脫羧酶的修飾研究
    国产成人精品久久久久久| 另类亚洲欧美激情| 在线天堂中文资源库| 母亲3免费完整高清在线观看 | 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久精品人人爽人人爽视色| 极品人妻少妇av视频| 欧美精品av麻豆av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 熟女av电影| 免费观看av网站的网址| 搡女人真爽免费视频火全软件| 男女边吃奶边做爰视频| 韩国av在线不卡| 日韩欧美一区视频在线观看| 免费观看在线日韩| 啦啦啦在线观看免费高清www| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久精品区二区三区| 久久久久国产网址| 日韩中字成人| 精品少妇内射三级| 久久99热6这里只有精品| 精品亚洲成国产av| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲一区二区三区欧美精品| 9色porny在线观看| 另类精品久久| 尾随美女入室| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产片内射在线| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲精品自拍成人| 观看美女的网站| 麻豆乱淫一区二区| 宅男免费午夜| 日韩中字成人| 国产在视频线精品| 免费少妇av软件| 色94色欧美一区二区| 看非洲黑人一级黄片| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲精品av麻豆狂野| 国内精品宾馆在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲欧美精品自产自拍| 男女国产视频网站| 国产精品久久久久久久久免| 免费av不卡在线播放| 五月伊人婷婷丁香| 久久精品国产综合久久久 | 亚洲欧洲日产国产| 少妇熟女欧美另类| 看免费成人av毛片| 国产成人免费观看mmmm| 春色校园在线视频观看| 午夜免费观看性视频| 美女大奶头黄色视频| 国产精品免费大片| 熟女人妻精品中文字幕| 午夜免费男女啪啪视频观看| 免费观看a级毛片全部| 成人影院久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 一区二区三区乱码不卡18| 精品亚洲成国产av| 亚洲精品自拍成人| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜影院在线不卡| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 中文字幕av电影在线播放| 香蕉精品网在线| 亚洲在久久综合| 久久99精品国语久久久| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲三级黄色毛片| 国产精品一国产av| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲成人av在线免费| www.色视频.com| 午夜福利影视在线免费观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 制服人妻中文乱码| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲第一区二区三区不卡| 欧美精品国产亚洲| 久久99热6这里只有精品| 久久久久久久久久成人| 国产成人免费观看mmmm| 在线免费观看不下载黄p国产| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 热99国产精品久久久久久7| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 一本大道久久a久久精品| 在线观看一区二区三区激情| 男的添女的下面高潮视频| 91久久精品国产一区二区三区| 三级国产精品片| 99re6热这里在线精品视频| 99香蕉大伊视频| 精品少妇内射三级| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲精品自拍成人| 国产精品久久久久久av不卡| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲成国产人片在线观看| 五月天丁香电影| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲欧洲国产日韩| 国产亚洲精品久久久com| 国产成人精品一,二区| 国产成人精品在线电影| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一级爰片在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产精品一区二区在线观看99| 各种免费的搞黄视频| 成年人午夜在线观看视频| 日韩一区二区视频免费看| 视频在线观看一区二区三区| 美女内射精品一级片tv| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 只有这里有精品99| 国产免费一区二区三区四区乱码| 老熟女久久久| 亚洲av电影在线进入| 久久久久视频综合| 婷婷色av中文字幕| 插逼视频在线观看| 欧美精品国产亚洲| 久久久久久人人人人人| 亚洲成人av在线免费| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 熟女av电影| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 高清欧美精品videossex| 两个人免费观看高清视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产在线一区二区三区精| 满18在线观看网站| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日本av免费视频播放| 午夜91福利影院| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产成人aa在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产熟女午夜一区二区三区| 在现免费观看毛片| 久久久久久久久久久免费av| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产综合精华液| 咕卡用的链子| 97在线视频观看| 色视频在线一区二区三区| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美3d第一页| 亚洲在久久综合| 伦理电影大哥的女人| 国产成人免费观看mmmm| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产片内射在线| 免费日韩欧美在线观看| a级毛片黄视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲欧美清纯卡通| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产午夜精品一二区理论片| 99国产综合亚洲精品| 最黄视频免费看| 大片电影免费在线观看免费| 99久久精品国产国产毛片| 国产精品久久久久久精品古装| tube8黄色片| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 香蕉国产在线看| 人人澡人人妻人| 激情视频va一区二区三区| 国产av精品麻豆| 欧美另类一区| 丝袜喷水一区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的| videosex国产| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 青春草视频在线免费观看| 两性夫妻黄色片 | 在线精品无人区一区二区三| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产日韩欧美视频二区| 国产福利在线免费观看视频| 亚洲色图综合在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 熟女人妻精品中文字幕| 免费观看在线日韩| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日本黄色日本黄色录像| 大片电影免费在线观看免费| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲一码二码三码区别大吗| 美女内射精品一级片tv| 国产一区二区三区综合在线观看 | 18禁国产床啪视频网站| 日日撸夜夜添| 青春草国产在线视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲精品国产色婷婷电影| 极品少妇高潮喷水抽搐| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲精品日本国产第一区| 十八禁网站网址无遮挡| 男女国产视频网站| 久久狼人影院| 色吧在线观看| 成年av动漫网址| 丝袜人妻中文字幕| 在现免费观看毛片| 在线天堂最新版资源| 青青草视频在线视频观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 啦啦啦啦在线视频资源| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| videosex国产| 国精品久久久久久国模美| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 在线观看三级黄色| 午夜福利视频在线观看免费| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲成人一二三区av| 交换朋友夫妻互换小说| 午夜老司机福利剧场| 国产毛片在线视频| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲少妇的诱惑av| 人人妻人人澡人人看| a级毛色黄片| 国产成人精品久久久久久| 高清不卡的av网站| 91精品三级在线观看| 夫妻午夜视频| 国产色婷婷99| 亚洲精品色激情综合| 久久久久久人人人人人| 最新的欧美精品一区二区| 国产精品久久久久成人av| 国产一区二区激情短视频 | 免费看av在线观看网站| 国产又色又爽无遮挡免| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲第一区二区三区不卡| av在线播放精品| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲成国产人片在线观看| 国产成人欧美| 国产精品偷伦视频观看了| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产成人一区二区在线| 有码 亚洲区| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 满18在线观看网站| 丰满乱子伦码专区| 麻豆乱淫一区二区| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 中文字幕人妻丝袜制服| 搡女人真爽免费视频火全软件| 性色avwww在线观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜久久久在线观看| 国产日韩欧美视频二区| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 欧美日韩亚洲高清精品| 国产精品人妻久久久久久| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲四区av| 免费看不卡的av| 少妇被粗大猛烈的视频| 大片免费播放器 马上看| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久久国产欧美日韩av| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产免费现黄频在线看| 亚洲成人手机| av有码第一页| 美女福利国产在线| 国产成人精品在线电影| 啦啦啦中文免费视频观看日本| a级片在线免费高清观看视频| 日韩av免费高清视频| 亚洲国产精品国产精品| 极品人妻少妇av视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产一区二区在线观看日韩| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 99热国产这里只有精品6| 久久精品久久久久久久性| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品久久久久久av不卡| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品少妇久久久久久888优播| 免费看不卡的av| √禁漫天堂资源中文www| 国产又爽黄色视频| 少妇的逼好多水| 国产高清三级在线| 日本vs欧美在线观看视频| 飞空精品影院首页| 波多野结衣一区麻豆| 麻豆乱淫一区二区| 成人手机av| 一级黄片播放器| av网站免费在线观看视频| 免费日韩欧美在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| av女优亚洲男人天堂| 满18在线观看网站| 国产 精品1| 精品福利永久在线观看| 曰老女人黄片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品熟女久久久久浪| 免费观看在线日韩| 精品一区二区三区视频在线| 在线天堂最新版资源| 亚洲国产最新在线播放| 99国产综合亚洲精品| av国产久精品久网站免费入址| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产精品久久久久久av不卡| 最近中文字幕2019免费版| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产一区二区三区综合在线观看 | 免费观看av网站的网址| 久久久久网色| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 日本黄大片高清| 国产精品久久久久成人av| 天堂中文最新版在线下载| 99久国产av精品国产电影| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 久久精品国产综合久久久 | 一级黄片播放器| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品一二三区在线看| 一区二区三区精品91| 久久精品夜色国产| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 人妻少妇偷人精品九色| 国产黄色免费在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲图色成人| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 五月开心婷婷网| 国产男人的电影天堂91| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久久久久久久久成人| 国产黄色免费在线视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产黄频视频在线观看| av卡一久久| 午夜视频国产福利| 美女主播在线视频| 一二三四在线观看免费中文在 | 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲成人一二三区av| 永久网站在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 老熟女久久久| 男人操女人黄网站| 女性被躁到高潮视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 色哟哟·www| 欧美 日韩 精品 国产| 精品人妻偷拍中文字幕| 婷婷色综合www| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产精品一区二区在线观看99| 一级毛片我不卡| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | av视频免费观看在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 人人澡人人妻人| 九草在线视频观看| 一区二区三区乱码不卡18| 大话2 男鬼变身卡| 人妻系列 视频| av网站免费在线观看视频| 99热6这里只有精品| 国产精品一国产av| 97在线人人人人妻| 国产男女内射视频| 高清视频免费观看一区二区| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 免费看不卡的av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩欧美精品免费久久| 国产成人精品无人区| 99热6这里只有精品| 波多野结衣一区麻豆| av线在线观看网站| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲,欧美,日韩| 国产成人免费无遮挡视频| 国产有黄有色有爽视频| 午夜激情av网站| 国产有黄有色有爽视频| www日本在线高清视频| 一级片免费观看大全| 欧美成人午夜精品| 亚洲欧洲国产日韩| 青春草视频在线免费观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 黄色一级大片看看| 午夜老司机福利剧场| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 久久国产精品大桥未久av| 丰满少妇做爰视频| 母亲3免费完整高清在线观看 | 精品人妻一区二区三区麻豆| 精品久久国产蜜桃| 免费看光身美女| videossex国产| 人成视频在线观看免费观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产色爽女视频免费观看| 夫妻午夜视频| 免费大片黄手机在线观看| 性色avwww在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 欧美3d第一页| 美女国产视频在线观看| 少妇的逼水好多| 国精品久久久久久国模美| 国产精品久久久久久久电影| 久久人人爽人人片av| av福利片在线| 久久久国产欧美日韩av| av天堂久久9| 伦理电影大哥的女人| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 成年av动漫网址| 啦啦啦在线观看免费高清www| 中国美白少妇内射xxxbb| 热re99久久国产66热| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 性色av一级| 精品一区二区免费观看| 日韩一区二区视频免费看| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 秋霞在线观看毛片| 亚洲美女视频黄频| 久久久精品免费免费高清| 黄色怎么调成土黄色| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 青春草国产在线视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 秋霞伦理黄片| 免费观看无遮挡的男女| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美成人精品欧美一级黄| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲,欧美,日韩| 美国免费a级毛片| 男女边摸边吃奶| 内地一区二区视频在线| 少妇的逼好多水| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产精品偷伦视频观看了| av在线app专区| 国产片内射在线| 亚洲成色77777| 国产成人aa在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| h视频一区二区三区| 国产av国产精品国产| 日本黄大片高清| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品少妇黑人巨大在线播放| 午夜福利影视在线免费观看| 久久99蜜桃精品久久| 免费黄频网站在线观看国产| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 插逼视频在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 成人国语在线视频| 尾随美女入室| 99久久精品国产国产毛片| 欧美精品一区二区免费开放| 国产成人精品一,二区| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲一码二码三码区别大吗| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产男女内射视频| 看十八女毛片水多多多| 狂野欧美激情性bbbbbb| 精品久久久久久电影网| 18+在线观看网站| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲精品,欧美精品| tube8黄色片| 日本av手机在线免费观看| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久久久久久久免| 国产男女内射视频| 亚洲经典国产精华液单| 久久精品夜色国产| 桃花免费在线播放| 18禁国产床啪视频网站| 99久久精品国产国产毛片| 哪个播放器可以免费观看大片| 夜夜爽夜夜爽视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 日韩av不卡免费在线播放| 日日啪夜夜爽| 人人澡人人妻人| 日本黄大片高清| 三上悠亚av全集在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 大陆偷拍与自拍| 免费黄色在线免费观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 国产成人欧美| 色哟哟·www| 黑丝袜美女国产一区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品午夜福利在线看| 看免费成人av毛片| 51国产日韩欧美| 我的女老师完整版在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品99久久99久久久不卡 | 免费在线观看黄色视频的| 欧美变态另类bdsm刘玥| 午夜福利影视在线免费观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲丝袜综合中文字幕| 午夜91福利影院| 制服诱惑二区| 午夜福利乱码中文字幕| 午夜老司机福利剧场| 日本av免费视频播放| 久久婷婷青草| 午夜老司机福利剧场| 成人黄色视频免费在线看| 久久这里有精品视频免费| 久久精品国产综合久久久 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 色视频在线一区二区三区| 美女大奶头黄色视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 精品少妇久久久久久888优播| 久久久久久久久久久久大奶| 涩涩av久久男人的天堂| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩av不卡免费在线播放| 丝袜喷水一区| 国产成人免费无遮挡视频| 超色免费av| 精品一区二区三卡| 精品卡一卡二卡四卡免费| 制服诱惑二区| 国产午夜精品一二区理论片| 久久国内精品自在自线图片| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 午夜福利,免费看| 国产精品一区www在线观看| 亚洲av.av天堂|