莫爾法測定鹽酸林可霉素中的氯離子含量

蔣祖艷 陶秋野 王曉東

（新宇藥業(yè)股份有限公司 安徽宿州 234000）

1 前言

鹽酸林可霉素作為一種林可胺類堿性抗生素，主要用于治療黃色葡萄球菌、綠色鏈球菌、肺炎雙球菌等引起的感染。鹽酸林可霉素中氯離子含量的有效測定，可論證林可霉素與鹽酸在成鹽過程中的比率，對鹽酸林可霉素的制備工藝具有較大的指導(dǎo)意義。莫爾法是以硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液為滴定劑，以鉻酸鉀為指示劑，于中性或弱堿溶液中測定氯離子的分析方法，該方法因所需設(shè)備簡單、易操作等特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用。

2 莫爾法的基本原理

以硝酸銀（AgNO3）標(biāo)準(zhǔn)溶液為滴定劑，在中性或弱堿性溶液中以鉻酸鉀（K2CrO4）為指示劑，在溶液中的氯離子與滴定的銀離子形成溶解度很小的白色氯化銀（AgCl）沉淀，當(dāng)氯離子被完全沉淀后，加入的微量的銀離子便于指示劑中鉻酸根離子反應(yīng)生成磚紅色鉻酸銀（Ag2CrO4）沉淀，指示達(dá)到滴定終點(diǎn)。

3 滴定終點(diǎn)對結(jié)果的影響

在莫爾法中，指示劑用量和滴定酸度是影響滴定終點(diǎn)的2個關(guān)鍵因素。鉻酸鉀指示劑濃度不宜過高，否則終點(diǎn)會過早出現(xiàn)，加之鉻酸鉀本身在水溶液中呈黃色，會使終點(diǎn)顏色變化不敏銳，濃度過高，自身顏色過深，影響終點(diǎn)的觀察；濃度過小也會使終點(diǎn)出現(xiàn)過遲，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。在使用該方法測定鹽酸林可霉素中氯離子的含量之前，本文對鉻酸鉀指示劑的用量進(jìn)行了單因素試驗(yàn)，分別選擇加入不同體積的5%鉻酸鉀指示劑進(jìn)行滴定，試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)鉻酸鉀指示劑的用量在0.5～0.7 mL之間，有利于滴定結(jié)果的判斷，故選擇加入5%鉻酸鉀指示劑0.5 mL。

采用莫爾法對滴定酸度進(jìn)行控制，主要是因?yàn)殂t酸根離子是弱堿性，若在酸性介質(zhì)中，鉻酸根離子會以鉻酸氫根離子形式存在或轉(zhuǎn)化為重鉻酸根離子，使鉻酸根離子濃度減小，導(dǎo)致指示終點(diǎn)的鉻酸銀沉淀出現(xiàn)較晚甚至不出現(xiàn)。若滴定溶液堿性太強(qiáng)，則會有氫氧化銀甚至氧化銀沉淀析出。因此，在試驗(yàn)設(shè)計中，需要對配制的鹽酸林可霉素溶液，使用硝酸進(jìn)行pH調(diào)控后進(jìn)行滴定，以確定滴定最佳pH范圍。結(jié)果表明，pH在4～9之間，對滴定液的消耗量是穩(wěn)定的?？紤]到配制的鹽酸林可霉素溶液本身的pH約為4.6，符合滴定要求，因此選定測定操作條件為以配置好的鹽酸林可霉素溶液直接進(jìn)行滴定。

在實(shí)際操作的過程中，滴定到顏色突變時很難觀察到磚紅色沉淀，當(dāng)有明顯的磚紅色沉淀時，卻早已過了滴定終點(diǎn)，造成滴定結(jié)果的氯離子含量偏高。實(shí)際觀察到的現(xiàn)象是初始加入鉻酸鉀指示劑時，溶液呈亮黃色，隨著滴定的進(jìn)行，白色氯化銀沉淀逐漸形成，溶液顏色開始變成亮黃色，待達(dá)到等當(dāng)點(diǎn)時，滴加的銀離子與鉻酸根離子形成沉淀，懸浮于整個溶液中，使其在亮黃色中開始呈現(xiàn)灰色，繼續(xù)滴加銀離子，最終形成穩(wěn)定的灰黃色溶液，這個較為明顯的灰黃色是作為判斷滴定終點(diǎn)的關(guān)鍵，此時若再繼續(xù)滴加硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液，灰黃色便會變成明顯的磚紅色。

綜上所述，在設(shè)計實(shí)驗(yàn)時，需要確定鹽酸林可霉素樣品的濃度和取樣體積，當(dāng)其發(fā)生改變時，需要重新考慮溶液的酸度變化及指示劑的用量。

4 檢測方法

4.1 儀器與試藥

儀器：電子天平；滴定管；移液管；容量瓶；pH試紙；鐵架臺；燒杯；玻璃棒；錐形瓶。

試藥：本法所用試劑均為分析純，水為純化水。

氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取基準(zhǔn)物氯化鈉約1.5 g，在110℃的條件下干燥3 h，移至干燥器中冷卻至室溫，稱重。繼續(xù)干燥1h，同法稱重，直至恒重。精密稱定經(jīng)110℃干燥至恒重后的基準(zhǔn)物氯化鈉0.2 g，計為W，置于500 mL錐形瓶中，加入50 mL水溶解，加入糊精溶液、碳酸鈣與熒光黃指示液，搖勻備用。

硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（0.1 mol/L）：稱取17.5 g硝酸銀于燒杯中，加水溶解，置于1 L容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，貯存于棕色瓶中。用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定已配制的氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液至達(dá)到終點(diǎn)，溶液顏色由黃綠色變?yōu)槲⒓t色。記錄硝酸銀溶液的用量V1，平行滴定3份。同法按照上述步驟，以水替代氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，作為空白，記錄硝酸銀溶液的用量V0。

按公式（1）計算硝酸銀溶液的準(zhǔn)確濃度：

式中：C（AgNO3）—硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的溶度，mol/L；W—氯化鈉基準(zhǔn)物質(zhì)的取樣量，mol/L；V1—滴定氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液所消耗的硝酸銀溶液的體積，mL；V0—滴定空白溶液所消耗的硝酸銀溶液的體積，mL；58.44—每1 mL的硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于5.844 mg的氯化鈉。

鉻酸鉀指示劑溶液的配制：稱取鉻酸鉀5 g，置于燒杯中，加入少量水溶解，在不斷攪拌的條件下，緩慢滴加硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液至其產(chǎn)生磚紅色沉淀。放置24 h，過濾后將濾液加水定容至100 mL，搖勻，備用。

氫氧化鈉溶液（1.0 mol/L）：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6 mL，以水定容至100 mL，搖勻，備用。

硝酸溶液（1%）：移取1 mL硝酸溶液，以水定容至100 mL，搖勻，備用。

4.2 實(shí)驗(yàn)步驟

精密稱定鹽酸林可霉素樣品1.2 g，置于250 mL錐形瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。加入5%的鉻酸鉀指示劑0.5 mL，在不斷震搖下，用0.1 mol/L硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，直至溶液顏色出現(xiàn)穩(wěn)定的灰黃色，即為滴定終點(diǎn)。同法進(jìn)行空白試驗(yàn)。

按公式（2）計算鹽酸林可霉素中氯離子含量：

式中：P（Cl-）—鹽酸林可霉素中氯離子的含量，%；C—硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L；V1—滴定鹽酸林可霉素樣品溶液消耗的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；V0—滴定空白溶液消耗的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；35.5—氯離子摩爾質(zhì)量；W—鹽酸林可霉素稱樣量，g。

4.3 實(shí)驗(yàn)方法的精密度

4.3.1 重復(fù)性

稱取6份鹽酸林可霉素平行樣品，分別記錄滴定消耗的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，計算每份鹽酸林可霉素樣品中氯離子含量。6份樣品檢測結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07%，表明應(yīng)用該方法檢測鹽酸林可霉素中的氯離子含量具有較好的精密度，原始數(shù)據(jù)及計算結(jié)果詳見表1。

表1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.3.2 中間精密度

同一分析人員分別在2 d測定3份鹽酸林可霉素樣品，分別記錄滴定消耗的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，計算每份鹽酸林可霉素樣品中氯離子含量。2 d共計6份樣品檢測結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.29%，表明該方法具有較好的日間精密度，原始數(shù)據(jù)及計算結(jié)果詳見表2。

表2 中間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.3.3 準(zhǔn)確度

配制濃度分別為80%、100%、120%的鹽酸林可霉素樣品溶液各3份，測定其氯離子含量，回收率=檢測值/理論值。通過計算得到回收率范圍為99.7%～100.9%，表明9份鹽酸林可霉素樣品檢測結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.45%，該方法表現(xiàn)出較好的準(zhǔn)確度。原始數(shù)據(jù)計計算結(jié)果見表3。

表3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

5 檢測結(jié)果

取連續(xù)3批次具有代表性的鹽酸林可霉素樣品，對其氯離子含量按上述方法進(jìn)行檢測，結(jié)果詳見表4。

表4 代表性批次鹽酸林可霉素樣品檢測結(jié)果統(tǒng)計表

6 結(jié)論

本文試驗(yàn)結(jié)果表明，莫爾法用于測定鹽酸林可霉素中氯離子含量時，被滴定溶液和指示劑需要控制在一定范圍內(nèi)，該方法表現(xiàn)出較好的精密度和準(zhǔn)確度，且操作簡便、成本不高，可有效應(yīng)用于鹽酸林可霉素中氯離子含量的測定。