Genexpert試驗(yàn)、液體培養(yǎng)法在結(jié)核分枝桿菌耐藥性監(jiān)測中的效能分析

黃振超

（清遠(yuǎn)市慢性病防治醫(yī)院 廣東清遠(yuǎn) 511500）

1 前言

近年來，隨著環(huán)境污染及部分群體生活和飲食習(xí)慣的改變，結(jié)核病的患病率有逐漸回升的趨勢，需要對(duì)該病加強(qiáng)警惕。及早檢查發(fā)現(xiàn)并治療[1-2]。常規(guī)檢測方法主要以痰培養(yǎng)為主，雖診斷正確率高，但花費(fèi)時(shí)間較長、培養(yǎng)環(huán)境與人體內(nèi)環(huán)境差異較大，需要尋求更先進(jìn)的檢測方法。本文就Genexpert試驗(yàn)、液體培養(yǎng)法在結(jié)核分枝桿菌耐藥性檢測中的效能分析進(jìn)行探討。

2 資料與方法

2.1 一般資料

本次研究對(duì)象共360例，是我院收治的疑似肺結(jié)核患者，選取時(shí)間段為2019年10月—2020年2月，其中肺結(jié)核確診患者63例。觀察組：男性49例，女性14例；患者年齡范圍（17～91）歲，平均年齡為（69.14±2.89）歲。所有患者的各項(xiàng)資料對(duì)比無明顯差異（P＞0.05）。本次研究符合我院醫(yī)學(xué)倫理標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)過醫(yī)務(wù)科同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者病情資料詳盡；認(rèn)知功能正常。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并多種慢性疾??；合并精神疾病患者；合并心律失常、心力衰竭、休克等嚴(yán)重并發(fā)癥；資料不全者。

2.2 方法

選取所有受檢者晨起時(shí)的痰液標(biāo)本3 ml，吸取2 ml做液體培養(yǎng)，另外1 ml進(jìn)行GeneXpert/RIF檢測。液體培養(yǎng)方法：選擇美國BD公司所提供的分枝桿菌分析系統(tǒng)及配套試劑，痰液標(biāo)本經(jīng)處理后，選取一部分到培養(yǎng)管中，適當(dāng)添加營養(yǎng)劑和雜菌抑制劑，置于培養(yǎng)儀中，培養(yǎng)時(shí)間為42 d；GeneXpert/RIF檢測：選擇美國Cepheid公司所提供的GeneXpert/RIF檢測系統(tǒng)和試劑盒，將1 ml的痰標(biāo)本與2 ml的標(biāo)本處理液混合，充分液化后靜置15 min，選取2 ml樣品放入一次性無菌移樣管，置于反應(yīng)盒中，開始進(jìn)行檢測[3]。

2.3 觀察指標(biāo)

（1）以傳統(tǒng)羅氏培養(yǎng)結(jié)果和藥敏試驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)，觀察2組檢測方法的敏感度、特異度。

（2）觀察2種檢測方法結(jié)核分枝桿菌診斷符合率和利福平耐藥性診斷符合率變化。耐藥例數(shù)為6例。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義為P＜0.05。

3 結(jié)果

3.1 2組檢測方法敏感度和特異度變化

2種檢測方法，檢測敏感度、特異度相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表1。

表1 2組檢測方法敏感度和特異度變化[n（%）]

3.2 2種檢測方法結(jié)核分枝桿菌診斷符合率和利福平耐藥性診斷符合率變化

數(shù)據(jù)表明，2種檢測方法結(jié)核分枝桿菌診斷符合率和利福平耐藥性診斷符合率相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表2。

表2 兩種檢測方法結(jié)核分支桿菌診斷符合率和利福平耐藥診斷符合率變化[n（%）]

4 討論

耐多藥肺結(jié)核是對(duì)一種常見結(jié)核病藥物如利福平、異煙肼產(chǎn)生耐藥性的難治型結(jié)核病，其中我國耐利福平的患者約7.3萬，占全球患者的13%。由于病程較長，對(duì)抗結(jié)核藥物產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致患者病情延誤，給患者帶來身心痛苦和經(jīng)濟(jì)壓力。故對(duì)耐藥肺結(jié)核的檢測，引起了醫(yī)學(xué)界的高度重視。

以往的檢測方法有涂片鏡檢、固體羅氏培養(yǎng)、固體藥敏試驗(yàn)等，是較為常見的細(xì)菌學(xué)診斷方法，其中，固體培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)方法都是通過細(xì)菌培養(yǎng)的方式來進(jìn)行檢測，其檢驗(yàn)步驟、標(biāo)本處理質(zhì)量要求較高，且培養(yǎng)時(shí)間較長，會(huì)對(duì)患者的臨床救治產(chǎn)生一定的影響；涂片鏡檢易受標(biāo)本質(zhì)量的影響，應(yīng)用率較低。

近年來隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，液體培養(yǎng)法和GeneXpert試驗(yàn)引起了廣大醫(yī)學(xué)工作者的重視。液體培方法培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的速度較快、檢測準(zhǔn)確率高，能夠有效彌補(bǔ)傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的不足，但其對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的專業(yè)水平要求較高[4]。

GeneXpert試驗(yàn)是近年來臨床上較為常用的基因芯片檢測方法，該檢測方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：

（1）檢測準(zhǔn)確率高：該法通過采用多個(gè)光譜化學(xué)檢測，能夠隨時(shí)提供較為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，便于動(dòng)態(tài)觀察患者的治療效果，檢測準(zhǔn)確率高，能夠避免誤診或漏診。

（2）操作簡便：該法將樣本準(zhǔn)備與定量檢測統(tǒng)一，檢測過程具有規(guī)范性，可以通過系統(tǒng)軟件進(jìn)行分析計(jì)算，能夠有效減輕檢驗(yàn)人員的壓力，檢測時(shí)間較短、操作簡便，便于及早發(fā)現(xiàn)及治療。

（3）該法對(duì)利福平耐藥敏感度、特異度較高，在陽性痰標(biāo)本結(jié)核分枝桿菌及利福平耐藥性檢測中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，便于幫助患者快速確立治療方案[5]。但是GeneXpert檢測方法也有不足：

（1）該法只能檢測利福平是否耐藥，不利于不耐利福平患者的治療，可能會(huì)在一定程度上影響患者的治療效果。

（2）該法所需設(shè)備較為昂貴，不利于偏遠(yuǎn)地區(qū)的醫(yī)院推廣應(yīng)用。

本次研究結(jié)果表明，液體培養(yǎng)方法和GeneXpert實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果準(zhǔn)確性、特異度、敏感度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可見液體培養(yǎng)方法可作為GeneXpert實(shí)驗(yàn)的有效補(bǔ)充。

綜上所述，GeneXpert試驗(yàn)與液體培養(yǎng)法均能有效監(jiān)測結(jié)核分枝桿菌積極利福平耐藥性，但GeneXpert試驗(yàn)具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，對(duì)于挽救患者的生命更具有積極意義。