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    2種不同檢測(cè)系統(tǒng)的AFP、CEA、CA125檢測(cè)結(jié)果可比性評(píng)估

    2021-11-20 06:55:02肖含李?yuàn)檴?/span>崔思洋周芳宇李雨艷
    關(guān)鍵詞:批間方法學(xué)精密度

    肖含 李?yuàn)檴?崔思洋 周芳宇 李雨艷

    (吉林金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司 吉林長(zhǎng)春 130000)

    1 前言

    原發(fā)性肝癌(PHC)發(fā)病率高且進(jìn)展快速、侵襲性較強(qiáng),早期無(wú)典型癥狀,多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期,錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)。因此,探尋一種準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)方法,提升PHC的早期診斷效能,對(duì)改善患者預(yù)后具有重要影響[1]。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是診斷PHC的常用方法,但使采取單一指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),其特異度、靈敏度較低,缺乏組織及器官特異性[2]。而AFP、CEA、CA125聯(lián)合檢測(cè)在PHC診斷中的特異度、靈敏度較高,故應(yīng)用廣泛。對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)之間的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì),對(duì)保證檢測(cè)結(jié)果的一致性、準(zhǔn)確性和可比性極為重要,故本文就不同檢測(cè)系統(tǒng)之間的檢測(cè)差值進(jìn)行比較和分析,以期為相關(guān)人員提供參考。

    2 材料與試劑

    2.1 標(biāo)本采集

    采集在本院進(jìn)行健康體檢的人員的血液標(biāo)本40份。納入標(biāo)準(zhǔn):無(wú)相關(guān)血液疾??;檢查各項(xiàng)血液指標(biāo)均正常;以《臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本收集與處理》(WS/T225-2002)[3]為準(zhǔn)則。

    2.2 儀器與試劑

    X系統(tǒng):全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀(雅培i2000SR)及其配套AFP、CEA、CA125試劑;Y系統(tǒng):化學(xué)發(fā)光儀(博奧賽斯Axceed260)及其配套AFP、CEA、CA125試劑。

    3 方法

    3.1 質(zhì)控

    于X系統(tǒng)(參考系統(tǒng)-雅培)和Y系統(tǒng)(實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)-博奧)中,給予伯樂(lè)質(zhì)控品,進(jìn)行室內(nèi)全面質(zhì)控,以保障所有質(zhì)控結(jié)果均符合正常標(biāo)準(zhǔn)。

    3.2 驗(yàn)證精密度

    本文借助相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)性文件,以CLSI的EP15-A2為參考評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)值[4],測(cè)定流程以樣本檢測(cè)順序逐一進(jìn)行。選取2個(gè)不同濃度樣本,每天檢測(cè)4個(gè)批次,每批檢測(cè)1次,連續(xù)檢測(cè)5 d,共20個(gè)數(shù)據(jù)。并統(tǒng)計(jì)所得數(shù)據(jù)的均值、SD、CV,計(jì)算的CV要求≤1/3Tea。對(duì)S批內(nèi)與CV批內(nèi)、S批間與CV批間的標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行計(jì)算。

    3.3 驗(yàn)證線性規(guī)范

    以NCCLS的EP6-A文件為根據(jù)[5],以高值標(biāo)本(H)為高值血清標(biāo)本(其水平與線性范圍上限相近),以低值標(biāo)本(L)為低值血清標(biāo)本(其水平與線性范圍的下限相近),根據(jù)1H+4L、4H+1L、2H+3L、5H、3H+2L、5L配置H及L,共6個(gè)水平。對(duì)上述水平中3個(gè)項(xiàng)目CEA、CA125、AFP,利用X和Y系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估。各水平均評(píng)估2次,取均值,并利用線性回歸對(duì)水平與理論值進(jìn)行分析。X作為橫坐標(biāo)表示稀釋后理論值,Y作為縱坐標(biāo)表示實(shí)測(cè)平均值,對(duì)回歸方程進(jìn)行計(jì)算,具體方法:Y=aX+b和決定系數(shù)(R2),斜率a值0.95~1.05。R2評(píng)估線性標(biāo)準(zhǔn):R2≥0.95。

    3.4 驗(yàn)證參考區(qū)間

    以CLSI的EP方案為參考標(biāo)準(zhǔn),檢測(cè)流程遵循樣本檢測(cè)程序,選取正常健康人樣本20份,每份樣本測(cè)定1次。在20份測(cè)試對(duì)象的數(shù)據(jù)中,如果有不超過(guò)1個(gè)檢測(cè)結(jié)果(95%置信區(qū)間)在實(shí)驗(yàn)室采納的參考區(qū)間界限以外,則表明實(shí)驗(yàn)室采納的參考區(qū)間可接受。

    3.5 方法學(xué)

    比對(duì)40份已納入的臨床血清樣本,使用X系統(tǒng)和Y系統(tǒng)檢測(cè),對(duì)結(jié)果行線性回歸分析,得出Y=aX+b方程結(jié)果及R2,以此分析X系統(tǒng)和Y系統(tǒng)的測(cè)試結(jié)果。

    4 結(jié)果

    4.1 批內(nèi)和批間精密度

    X、Y系統(tǒng)檢測(cè)AFP,CEA,CA125項(xiàng)目批內(nèi)和批間精密度,詳見(jiàn)表1。

    表1 2個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的AFP,CEA,CA125項(xiàng)目批內(nèi)和批間精密度

    4.2 線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

    選取混合血清,將AFP、CEA、CA125等水平按照配制關(guān)系進(jìn)行稀釋和計(jì)算,橫坐標(biāo)作為理論預(yù)期值,縱坐標(biāo)作為實(shí)測(cè)值,借助高等數(shù)學(xué)行數(shù)據(jù)檢驗(yàn),以線性回歸方式執(zhí)行。經(jīng)計(jì)算得出:AFP:Y=0.98844X+2.2212,R2值為0.9992,詳見(jiàn)表2;CEA:Y=0.9999X-6.4297,R2值為0.998,詳見(jiàn)表3;CA125:Y=0.9918X+4.4677,R2值為0.9955,詳見(jiàn)表4。

    表2 Y系統(tǒng)AFP線性范圍測(cè)試結(jié)果(ng/ml)

    表3 Y系統(tǒng)CEA線性范圍測(cè)試結(jié)果(ng/ml)

    表4 Y系統(tǒng)CA125線性范圍測(cè)試結(jié)果(U/ml)

    斜率范圍在0.95~1.0之間,R2≥0.95,這表明Y系統(tǒng)復(fù)合廠家規(guī)定線性范圍,滿足本文檢驗(yàn)需求,具體線性范圍:AFP:0~500 ng/ml;CEA:0~500 ng/ml;CA125:0~500 U/ml。

    4.3 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

    選取AFP、CEA、CA125健康人員樣本20份,每份樣本測(cè)定1次。填寫《健康問(wèn)卷調(diào)查表》,在20份測(cè)試對(duì)象的數(shù)據(jù)中,有不超過(guò)1個(gè)檢測(cè)結(jié)果(95%置信區(qū)間)在實(shí)驗(yàn)室采納的參考區(qū)間界限以外,則表明實(shí)驗(yàn)室采納的參考區(qū)間可接受。

    4.4 方法學(xué)樣本比對(duì)

    為保證檢驗(yàn)結(jié)果的精確性,選取40份新鮮的臨床血清樣本,采用X系統(tǒng)和Y系統(tǒng)共同實(shí)施檢測(cè),利用線性回歸對(duì)檢測(cè)結(jié)果實(shí)施評(píng)估,評(píng)估后線性回歸方程分別為:AFP:Y=0.0.8775X+4.57,R2值為0.9975;CEA:Y=0.934X+0.5442,R2值為0.9996。CA125:Y=0.0.8946X-0.1084,R2值為0.9998。三者均滿足斜率在0.95~1.0,且R2≥0.95,可見(jiàn)不同檢測(cè)系統(tǒng)的AFP、CEA、CA125檢測(cè)結(jié)果具有良好的相關(guān)性。

    5 討論

    AFP是臨床公認(rèn)的PHC診斷早期篩查方法,其中原發(fā)性肝癌高危者聯(lián)合應(yīng)用血清AFP及肝臟超聲進(jìn)行篩查,作用顯著。本文采用雅培i2000SR(X系統(tǒng))和博奧賽斯Axceed 260(Y系統(tǒng)),同時(shí)檢測(cè)甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原125(CA125),對(duì)這3個(gè)項(xiàng)目分別進(jìn)行精密度、線性范圍,參考區(qū)間和方法學(xué)比對(duì)驗(yàn)證。結(jié)果表明,其精密度、參考區(qū)間和線性范圍均能符合指標(biāo)。在方法學(xué)比對(duì)中,這3個(gè)項(xiàng)目均滿足斜率在0.95~1.0且R2≥0.95。由此可見(jiàn),AFP、CEA、CA125指標(biāo)應(yīng)用于雅培i2000SR系統(tǒng)和博奧賽斯Axceed 260系統(tǒng)的檢測(cè)作用效果明顯。在日常檢測(cè)中,為保證質(zhì)量,采用不同檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)同一項(xiàng)目時(shí),應(yīng)當(dāng)進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)驗(yàn)證。

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