STAGO全自動血凝分析系統(tǒng)的性能驗證

張俊國 鄭秀娥 李晉

1 山東省立醫(yī)院 （山東 濟南 250021）

2 山東省食品藥品監(jiān)督管理局審評認(rèn)證中心 （山東 濟南 250014）

3 山東省疾病預(yù)防控制中心 （山東 濟南 250014）

內(nèi)容提要： 目的：對STAGO全自動血凝分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗證。方法：對STAGO全自動血凝分析儀的精密度、線性范圍和攜帶污染率進(jìn)行驗證。結(jié)果：STAGO全自動血凝分析系統(tǒng)PT、APTT、TT和Fib 4個項目的精密度驗證均合格；Fib在測定范圍內(nèi)都表現(xiàn)出較好的線性關(guān)系（斜率0.97～1.03，r≥0.95）；APTT攜帶污染率驗證合格。結(jié)論：STAGO全自動血凝分析系統(tǒng)的精密度、線性和攜帶污染率這三個方面基本滿足臨床生化檢測的實驗要求。

Stago全自動血凝分析儀為法國STAGO公司的產(chǎn)品，是目前較為先進(jìn)的全自動血凝分析儀，它具有的凝固法，底物發(fā)色法，免疫比濁法三種不同檢測系統(tǒng)，通過8個通道采用不同檢測原理，同時對多項實驗指標(biāo)進(jìn)行檢測。根據(jù)美國臨床實驗室改進(jìn)法案（CLIA’88）對臨床實驗室質(zhì)量管理和實驗室認(rèn)可的要求，不同醫(yī)學(xué)檢驗部門必須對所使用的檢測系統(tǒng)進(jìn)行性能評價，因此參考美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)劃研究所（NCCLS）系列文件，結(jié)合實驗室實際情況，對Stago全自動血凝分析儀的精密度、線性范圍、攜帶污染率進(jìn)行了驗證實驗。

1.材料與方法

1.1 一般材料

樣品來源：本院就診患者或正常體檢者無溶血、無黃疸、無脂血的新鮮血漿。

儀器：Stago全自動血凝分析儀。

試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品：均為Stago全自動血凝分析儀配套產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 精密度評價

根據(jù)EP5-A2[1]的文件進(jìn)行實驗前質(zhì)量控制，根據(jù)EP15-A2[2]的文件進(jìn)行操作和計算。取低值及高值血漿，3次/d，連續(xù)測定5d，2次之間的時間間隔不少于2h。將測量數(shù)據(jù)錄入精密度驗證表格，自動計算批內(nèi)精密度CV%和批間精密度CV%，均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、和變異系數(shù)百分比、實驗室總誤差等。數(shù)據(jù)分析與結(jié)果判斷：批內(nèi)和批間試驗的精密度CV%均應(yīng)小于該項目方法學(xué)或醫(yī)學(xué)上的最大允許CV%。一般應(yīng)該滿足儀器廠家說明書上儀器性能的精密度要求，如果不能滿足，按以下情況來作為判斷標(biāo)準(zhǔn)：①如果CLIA’88上有相應(yīng)項目的可接受范圍（TEa），則批內(nèi)試驗的CV%≤1/4TEa，批間試驗的CV%≤1/3TEa；②如果CLIA’88或其他資料上沒有具體的要求，則按照室間質(zhì)評相應(yīng)項目的可接受范圍（TEa），批內(nèi)試驗的CV%≤1/4TEa，批間試驗的CV%≤1/3TEa；③如果上述條件均不滿足，則該項目的最大允許CV%由技術(shù)主管根據(jù)實驗室情況而定。

1.2.2 線性范圍評價

根據(jù)EP6-A[3]文件進(jìn)行操作和計算。選取一份接近預(yù)期上限（H）和一份接近預(yù)期下限（L）的混合血漿測定3次后取均值定為預(yù)期值，并按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H的關(guān)系各自配制混合血漿，形成系列評價樣品。每個稀釋度由高到低、由低到高、再由高到底重復(fù)測定3次，再由高到低重復(fù)測定3次，計算均值。將6對實測值（Y軸）與預(yù)期值（X軸）進(jìn)行直線回歸，計算y=ax+b，驗證線性范圍。以a值在0.97～1.03、r≥0.95為判定標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 攜帶污染率評價

根據(jù)ICSH的《血細(xì)胞分析儀評價指南》[4]。選取一份高濃度標(biāo)本（H），以及一份低濃度的標(biāo)本（L），按國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會制定的程序，將高值樣本連續(xù)測定3次（H1、H2、H3），緊接著連續(xù)測定低值樣本3次（L1、L2、L3），攜帶污染率結(jié)果為[（L1～L3）/（H3-L3）]×100%。結(jié)果＜2%為合格。

2.結(jié)果

2.1 精密度實驗驗證結(jié)果

PT低值批內(nèi)精密度大于廠家聲明的批內(nèi)精密度，但小于CLIA’881/4CV，批間精密度小于廠家聲明的批間精密度；PT高值批內(nèi)精密度大于廠家聲明的批內(nèi)精密度，但小于CLIA’881/4CV，批間精密度小于廠家聲明的批間精密度。APTT低值批內(nèi)精密度大于廠家聲明的批內(nèi)精密度，但小于CLIA’881/4CV，批間精密度大于廠家聲明的批間精密度，但小于CLIA’881/3CV；APTT高值批內(nèi)精密度大于廠家聲明的批內(nèi)精密，但小于CLIA’881/4CV，批間精密度大于廠家聲明的批間精密度，但小于實驗室CLIA’881/3CV。TT低值批內(nèi)精密度小于廠家聲明的批內(nèi)精密度，批間精密度小于廠家聲明的批間精密度；TT高值批內(nèi)精密度大于廠家聲明的批內(nèi)精密度，但小于實驗室CLIA’881/4CV，批間精密度小于廠家聲明的批間精密度。Fib低值批內(nèi)精密度小于廠家聲明的批內(nèi)精密度，批間精密度小于廠家聲明的批間精密度；Fib高值批內(nèi)精密度小于廠家聲明的批內(nèi)精密度，批間精密度大于廠家聲明的批間精密度，但小于實驗室CLIA’881/3CV（見表1）。結(jié)果表明Stago精密度實驗驗證合格。

表1. 精密度驗證結(jié)果

表2. APTT攜帶污染率驗證結(jié)果

圖1. Fib線性范圍驗證結(jié)果

2.2 線性范圍驗證結(jié)果

本實驗室通過驗證Fib項目的線性來評價Stago血凝分析儀的線性范圍。使用6種濃度標(biāo)本進(jìn)行Fib的檢測。將實測值（Y軸）與預(yù)期值（X軸）進(jìn)行直線回歸，計算y=ax+b。Fib的檢測值均符合a值在0.97～1.03范圍內(nèi)、r≥0.95的判定標(biāo)準(zhǔn)（見圖1）。

2.3 攜帶污染率驗證結(jié)果

本實驗通過驗證APTT攜帶污染率來評價Stago血凝分析儀攜帶污染率。APTT攜帶污染率是0.2%，＜2.0%（見表2），根據(jù)此原則判斷STAGO分析儀進(jìn)行項目檢測時，結(jié)果完全不會受其他標(biāo)本的干擾，攜帶污染試驗合格。

3.討論

Stago全自動血凝分析系統(tǒng)用于凝血、抗凝、纖維蛋白溶解系統(tǒng)功能的檢測，為出血性和血栓性疾病的診斷與鑒別診斷、溶栓及抗凝治療的監(jiān)測與療效觀察提供有價值的指標(biāo)。Stago采用了磁珠凝固法，有效避免了溶血、黃疸、脂血等在檢測中的影響，在全國大醫(yī)院中得到廣泛的應(yīng)用，本實驗室于2009年引進(jìn)該儀器，現(xiàn)根據(jù)15189實驗室認(rèn)可的要求，對儀器的精密度、線性范圍、攜帶污染率這三個方面進(jìn)行驗證。

精密度是醫(yī)學(xué)檢驗中保證測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠的重要指標(biāo)，它代表隨機誤差的大小，是對同一標(biāo)本進(jìn)行多次重復(fù)側(cè)定時測定值的一致程度，是進(jìn)行其他方法學(xué)驗證實驗的前提。本次評價使用低值和高值兩個濃度新鮮血漿，每天兩個濃度各分析1批次，批次中重復(fù)測定3次，連續(xù)測定5d。測量結(jié)果表明Stago全自動血凝分析系統(tǒng)精密度實驗證合格，儀器重復(fù)性好，均能滿足臨床要求，可以進(jìn)行后續(xù)的驗證實驗。

線性范圍驗證是觀察一種檢測方法或一個檢測系統(tǒng)的檢測范圍[5]。通過該實驗室可以了解其最高值（上限）和最低檢測值（下限），是對患者檢測結(jié)果可報告范圍的一種評價，也有助于評價偏倚的大小。對Stago全自動血凝分析系統(tǒng)PT、APTT、TT、Fib線性范圍驗證均合格，說明Stago測量各項目呈較好的線性關(guān)系。

攜帶污染率是儀器性能驗證不可缺少的一部分，APTT的攜帶污染率實驗驗證合格，因此判斷Stago全自動血凝分析儀進(jìn)行項目檢測時，結(jié)果完全不會受其他標(biāo)本的干擾。

綜上所述，Stago全自動血凝分析系統(tǒng)的精密度、線性范圍、攜帶污染率等主要性能均能達(dá)到臨床實驗室要求，能滿足臨床對出血性和血栓性疾病的診斷與鑒別診斷、溶栓及抗凝治療的監(jiān)測與療效觀察的要求。同時，本實驗為全自動血凝分析儀性能驗證提供一套較準(zhǔn)確的方案。