苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病菌的毒力及防治效果

韋 薇，覃義杰，和立連，何玉清，鄧明學(xué)

(1 柳州市惠農(nóng)化工有限公司，廣西柳州，545616；2 廣西特色作物研究院，廣西桂林，541004)

柑桔炭疽病是柑桔生產(chǎn)上最常見的一種病害之一，主要為害葉、梢和果，也可為害主干、大枝和花，造成葉焦、枝枯、果落、樹皮爆裂及貯藏果實(shí)腐爛，影響樹勢(shì)和產(chǎn)量，嚴(yán)重時(shí)整株死亡，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1-2]。柑桔炭疽病的病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz.)喜高溫高濕環(huán)境，生長最適溫度為21～28 ℃ ，具弱寄生性和潛伏侵染特性，即病菌入侵寄主后可處于休眠狀態(tài)而不顯癥，當(dāng)寄主組織活力下降或衰退時(shí)表現(xiàn)癥狀。通常以甜橙、椪柑、蕉柑、溫州蜜柑、檸檬、紅桔、年桔等品種發(fā)病較重[1，3-4]。目前柑桔炭疽病已經(jīng)成為世界性分布的真菌性病害，幾乎遍布于高溫多濕的熱帶和亞熱帶柑桔產(chǎn)區(qū)，如美國、巴西、阿根廷、西班牙、日本及中國，對(duì)柑桔生產(chǎn)影響較大[5-6]。在廣西，發(fā)生急性炭疽病嚴(yán)重為害的品種和時(shí)期如下：(1)金桔，9月下旬至10月上旬采前大量落果；(2)紐荷爾臍橙，采前落果、5月大量枯枝；(3)天草(又名象山紅)雜柑，5月大量枯枝、落果。目前炭疽病的防治主要以化學(xué)防治為主。殺菌劑的連續(xù)使用，會(huì)導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性從而降低防治效果。同時(shí)，農(nóng)藥在果實(shí)中的殘留對(duì)人類健康和環(huán)境安全構(gòu)成潛在威脅。據(jù)美國加利福尼亞的調(diào)查，抑霉唑連續(xù)在柑桔上使用5年以后，出現(xiàn)了抗抑霉唑菌株，在柑桔上長期使用苯丙咪唑類殺菌劑，使原本對(duì)其不敏感的柑桔炭疽病菌種急劇上升[7]。而農(nóng)藥混配則具有擴(kuò)大防治譜、降低成本、提高防治效果及延緩抗藥性產(chǎn)生等特點(diǎn)，因此利用現(xiàn)有農(nóng)藥進(jìn)行混配已成為目前農(nóng)藥開發(fā)應(yīng)用的一個(gè)重要方面[8]。苯醚甲環(huán)唑(difenoconazole)是三唑類廣譜殺菌劑[9]，在美洲和歐洲廣泛使用[10]，對(duì)子囊菌綱、擔(dān)子菌綱及某些種傳病原菌有持久的保護(hù)和治療作用。其是甾醇脫甲基化抑制劑，具有高效、廣譜、低毒、用量低的特點(diǎn)，內(nèi)吸性極強(qiáng)，通過抑制麥角甾醇的生物合成，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)功能，達(dá)到殺菌目的[11]。代森錳鋅(mancozeb)屬低毒的保護(hù)性殺菌劑[12]，殺菌范圍廣，不易產(chǎn)生抗性，防治效果明顯優(yōu)于其他同類殺菌劑。為了明確苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病的聯(lián)合毒力與最佳配比制劑的田間防治效果，進(jìn)而為生產(chǎn)上柑桔樹炭疽病的防治提供參考，筆者開展了本試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試靶標(biāo)：柑桔炭疽病菌采自湖南省園藝研究所柑桔園，由柳州市惠農(nóng)化工有限公司生測室分離鑒定后保存株菌。

供試藥劑：95%苯醚甲環(huán)唑原藥，寧波三江益農(nóng)化學(xué)有限公司生產(chǎn)；90%代森錳鋅原藥，山東濰坊潤豐化工股份科技有限公司生產(chǎn)；10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑，柳州市惠農(nóng)化工有限公司生產(chǎn)；80%代森錳鋅可濕性粉劑，江蘇龍燈化學(xué)有限公司生產(chǎn)；64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑，柳州市惠農(nóng)化工有限公司生產(chǎn)；丙酮，成都市科隆化學(xué)品有限公司；吡咯，廣東翁江化學(xué)試劑有限公司；吐溫80，廣東翁江化學(xué)試劑有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測定

采用平皿法[13]進(jìn)行藥劑的毒力測定。用電子天平稱取苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅原藥，分別用丙酮和吡咯溶解，用0.1%吐溫80水溶解稀釋，有機(jī)溶劑最終含量不超過2%，配比和濃度設(shè)置見表1。含藥平板的制備、空白對(duì)照的設(shè)置、病菌(菌餅)的接種、菌落直徑的調(diào)查及菌絲生長抑制率的計(jì)算均參考文獻(xiàn)[13]。每藥劑各濃度重復(fù)3次，接種后的平板置于(25±1) ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 d。根據(jù)各單劑及各個(gè)混配的濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的菌絲生長抑制率機(jī)率值做回歸分析，采用DPS 軟件求回歸方程y=bx+a、計(jì)算EC50、EC90及相關(guān)系數(shù)等。根據(jù)孫云沛法[14]計(jì)算混劑的共毒系數(shù)(CTC)(標(biāo)準(zhǔn)藥劑為苯醚甲環(huán)唑)，以此比較增效情況(CTC≥120為增效作用，CTC≤80為拮抗作用，80

表1 供試單劑及混劑的配比和濃度設(shè)置

1.2.2 田間防治試驗(yàn)

1.2.2.1 試驗(yàn)園條件 廣西：2018年4—6月在廣西靈川縣大境鄉(xiāng)登明村進(jìn)行，品種為春甜桔，枳砧，樹齡9年生，株行距3.0 m×3.5 m，667 m2栽80株左右，平均株高1.75 m，冠幅1.70 m，果園已封行，樹勢(shì)旺盛，所有試驗(yàn)小區(qū)的栽培條件一致。該園柑桔炭疽病發(fā)生比較嚴(yán)重，年用藥防治6～8次。砂壤土，pH值5.2，有機(jī)質(zhì)含量中等。

重慶：2018年4—5月在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所試驗(yàn)場進(jìn)行，品種為沃柑，枳砧。果園平坦，光照條件好，長勢(shì)均勻，肥水管理一致，樹齡7～8年，株行距2.5 m×4 m，667 m2栽66株。壤土，pH值6.8，土壤肥力中等。試驗(yàn)期間未施肥也未進(jìn)行灌溉。

福建：2018年8—9月在福建省閩清縣梅溪鎮(zhèn)樟洋村進(jìn)行，供試品種為雪柑，株行距3.0 m×4.0 m，樹勢(shì)中等，肥水管理水平中等，土壤肥力中等，歷年柑桔炭疽病發(fā)生嚴(yán)重，葉、果癥狀明顯。

1.2.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 000倍液，80%代森錳鋅可濕性粉劑600倍液，64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑(苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅1∶7復(fù)配)1 500、1 000和500倍液，清水對(duì)照，共6個(gè)處理。每個(gè)處理4次重復(fù)(每小區(qū)供試樹2株)，24個(gè)小區(qū)，隨機(jī)區(qū)組排列。在柑桔新梢抽發(fā)期發(fā)病前開始進(jìn)行施藥，間隔10～15 d一次，共施3次。采用“MATABI”超綠16型背負(fù)式電動(dòng)噴霧器噴霧，噴霧器工作壓力3巴(約3個(gè)大氣壓)，噴孔口徑1.0 mm，每分鐘噴水量0.5 L，噴霧直徑80～100 μm，噴幅1.0～1.2 m，每株樹噴灑藥液量1.0 kg，全株噴霧均勻。

1.2.2.3 調(diào)查方法 于第3次施藥后15 d調(diào)查防治效果，并對(duì)藥劑的安全性進(jìn)行觀察。參考《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(二)》第102部分：殺菌劑防治柑桔瘡痂病(GB/T17980.102—2004)，并結(jié)合柑桔炭疽病癥狀特點(diǎn)，對(duì)柑桔樹炭疽病的發(fā)生情況進(jìn)行分級(jí)調(diào)查[15]。每小區(qū)調(diào)查2株樹，每株樹按東、南、西、北、中5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)分級(jí)調(diào)查2個(gè)當(dāng)年生夏梢的全部葉片，2株共查20個(gè)梢，統(tǒng)計(jì)病情指數(shù)和計(jì)算防治效果。病害分級(jí)：0級(jí)：無??；1級(jí)：病斑相連面積占整個(gè)葉片面積的5%以下；3級(jí)：病斑相連面積占整個(gè)葉片面積的6%～10%；5級(jí)：病斑相連面積占整個(gè)葉片面積的11%～25%；7級(jí)：病斑相連面積占整個(gè)葉片面積的26%～50%；9級(jí)：病斑相連面積占整個(gè)葉片面積的51%以上。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力

在離體條件下，苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅對(duì)柑桔炭疽病菌有較好的室內(nèi)活性，對(duì)菌絲生長的有效抑制中濃度(EC50)分別為0.583 2和1.224 3 mg/L。兩者9種配比的混劑，共毒系數(shù)介于98和151之間。其中，苯醚甲環(huán)唑∶代森錳鋅=1∶3、1∶1、3∶1、5∶1和7∶1等5種配比的混劑，共毒系數(shù)介于80到120之間，表現(xiàn)為相加作用；其余4個(gè)配比的混劑，共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)為增效作用，尤其是苯醚甲環(huán)唑∶代森錳鋅=1∶7的共毒系數(shù)最大，為150.25，此配比選為防治柑桔炭疽病的最佳配比(見表2)。

表2 苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅不同配比復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病聯(lián)合毒力測定結(jié)果

2.2 防治效果

在廣西，64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑427、640和1 280 mg/kg對(duì)柑桔炭疽病的防治效果均在92%以上，比較理想，并且相互間及與對(duì)照藥劑(10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑100 mg/kg和80%代森錳鋅可濕性粉劑1 333 mg/kg)之間防治效果的差異均無顯著性(見表3)。

在重慶，64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑427～1 280 mg/kg的防治效果在82.92%～88.51%之間，有較好的防治效果，其中，1 280 mg/kg的防治效果優(yōu)于對(duì)照藥劑的防治效果(接近80%)(見表3)。

在福建，64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑427～1 280 mg/kg的防治效果在81.52%～85.23%之間，效果良好，分別與對(duì)照藥劑相當(dāng)(見表3)。

表3 64%苯醚甲環(huán)唑·代森錳鋅可濕性粉劑防治柑桔炭疽病田間試驗(yàn)結(jié)果

據(jù)觀察，苯醚甲環(huán)唑、代森錳鋅單劑及復(fù)配劑田間施藥后，均未發(fā)現(xiàn)對(duì)柑桔樹生長及果實(shí)有不良影響，對(duì)捕食螨等有益生物也未產(chǎn)生不良影響，表明在柑桔樹上使用安全。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)對(duì)柑桔樹脂病有兼治作用。

3 結(jié)論與討論

本研究室內(nèi)毒力測定顯示，苯醚甲環(huán)唑與代森錳鋅對(duì)柑桔炭疽病菌均具有很高的抑菌活性，EC50值分別僅為0.583 2和1.224 3 mg/L，兩者不同比例復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病菌表現(xiàn)為相加或增效作用，不存在拮抗作用，其中，苯醚甲環(huán)唑∶代森錳鋅=1∶7的共毒系數(shù)最大，為150.25。本研究中苯醚甲環(huán)唑與代森錳鋅復(fù)配的聯(lián)合作用類型，與朱衛(wèi)剛等[16]研究結(jié)果一致，與胡茂林等[17]部分一致。說明苯醚甲環(huán)唑與不同藥劑復(fù)配可能出現(xiàn)不同類型的聯(lián)合作用。

在室內(nèi)，苯醚甲環(huán)唑和代森錳鋅對(duì)柑桔炭疽病菌的抑菌活性都比較高，兩者相比，苯醚甲環(huán)唑的毒力指數(shù)比代森錳鋅要高出兩倍；但在田間，苯醚甲環(huán)唑的防治效果與代森錳鋅差不多。這可能與以下因素相關(guān)：一是柑桔炭疽病菌具有主要為害幼嫩枝條和果實(shí)而很難侵染老熟枝條的特性；二是試驗(yàn)園炭疽病情壓力大，試驗(yàn)主要調(diào)查藥劑對(duì)新梢的防治效果；三是代森錳鋅田間有效成分用藥量比苯醚甲環(huán)唑高很多。

本試驗(yàn)表明，在田間，代森錳鋅對(duì)柑桔炭疽病具有良好的防治效果，最高達(dá)95.55%，苯醚甲環(huán)唑與代森錳鋅(1∶7)復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病菌的防治效果最低在81%以上、最高達(dá)97.62%。苯醚甲環(huán)唑與代森錳鋅具有不同的作用機(jī)制，兩者復(fù)配對(duì)柑桔炭疽病菌未表現(xiàn)出拮抗作用，且代森錳鋅的價(jià)格遠(yuǎn)低于苯醚甲環(huán)唑，兩者的復(fù)配既能充分利用苯醚甲環(huán)唑高抑菌活性和代森錳鋅廣譜性的特點(diǎn)，又能降低田間用藥成本，有利于延緩抗藥性產(chǎn)生，達(dá)到有效控制柑桔炭疽病為害的目的。供試濃度對(duì)柑桔安全，無藥害，殺菌譜廣，對(duì)柑桔樹脂病有兼治作用。兩者復(fù)配藥劑在防治柑桔炭疽病上具有較好的應(yīng)用前景。