試論獸藥殘留檢測中高效液相色譜使用存在的問題和處理對策

徐雯 馮賓施 何熙桐

摘要：（HPLC-MS/MS）是一種檢測獸藥殘留的重要技術，該技術在應用中主要是通過高效液相色譜原理綜合相應的定性、定量分析系統(tǒng)對具有高沸點、熱不穩(wěn)定化合物、非揮發(fā)新的化合物進行分離鑒定，該技術在應用中主要通過大氣壓化學電離技術和電噴霧電離技術對待檢測物體進行定性分析。本文中首先探究了高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中存在的問題，然后再結合實際情況，提出完善高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中的處理措施，為完善我國現(xiàn)有高效液相色譜獸藥殘留檢測技術提供些許參考意見。

關鍵詞：獸藥殘留檢測;高效液相色譜;問題探究;處理對策

引言

高效液相色譜的工作原理是利用HPLC技術將待分析的成分分離出來，并將其送入質譜檢測系統(tǒng)。高效液相色譜技術在離子源的高溫高壓下，便可以將待檢測物體由液態(tài)向氣態(tài)進行轉變，使帶檢測物體成為氣態(tài)化的準分子離子，該分析儀可以對待檢測物體進行一級質量分析，并根據(jù)質核比率進行質荷比分離，這樣待檢測氣體在碰撞式中母離子變換誘導解離，而母離子的特征碎片會隨著二級質量分析儀再次進行分離。

一、高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中存在的問題

在采用高效液相色譜技術進行獸藥殘留分析的過程，主要存在以下幾點缺陷：一是高效液相色譜技術在采用中主要以篩選法為主，測定動物飼料結構相似藥物的過程中，其主要是進行抗原抗體反應，因此不能對動物飼料中同類型藥物進行定性分析，導致動物飼料中的獸藥殘留分析結論精確度較差;二是液相色譜技術有時在測定畜牧產品中靈敏度低，選擇性差等特點，越來越難以滿足用戶的要求;三是現(xiàn)階段對獸藥殘留的限制越來越嚴格，我國政府已經制定并實施了獸藥殘留標準，明確規(guī)定了在動物尿液中的進行獸藥殘留分析中，對禁用獸藥（A類），如硝基呋喃等，在分析期間判定點（IPs）不在4以下，而對禁用獸藥（B類），如磺胺類，判定點（IPs）在不在3以下的較高要求。

二、完善高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中的處理措施

1.采用酸化乙腈進行樣品提取，提高獸藥殘留量檢測精度

對動物性食品進行獸藥殘留檢測，可以保障動物飼料的健康性，在采用高效液相色譜進行飼料中獸藥殘留檢測的過程中，如果僅是采用單一藥品樣品檢測，那么可能無法提取飼料樣品中的獸藥殘留量，但是對樣品采用酸化乙腈進行直接提取，在交提取后的樣品采用甲酸溶液進行稀釋，這樣便可以形成以甲酸溶液和乙腈體系為主的梯度洗脫，在對獸藥殘留藥進行檢測中，利用C18色譜柱便可以精準的檢測出動物飼料中的獸藥殘留量，采用這一方法便可以對動物飼料中的苯比咪唑類藥物濃度進行監(jiān)測，通常監(jiān)測范圍在0.02～10.0mg/L，此外在這一范圍內可以形成良好的線性監(jiān)測數(shù)據(jù)。在對樣品進行檢測完畢后，再通過采用三氯甲烷提取一定的溶液，采用SPE小柱進行深度凈化，就可以再次形成外標法定量，采用這一方法對飼料中的獸藥殘留量回收率較高，且定量限定額可達到0.05mg/L。

2.利用液相色譜-串聯(lián)質譜法，提高畜產品獸藥殘留量測定精度

在對畜產品中的獸藥殘留量進行檢測的過程中，可采用液相色譜-串聯(lián)質譜法進行檢測，該方法可以對畜產品中的喹諾酮類藥物進行精準檢測，通常采用串聯(lián)質譜法可以對動物源性食品中弗羅沙星、依諾沙星、諾氟沙星、斯帕沙星等7種喹諾酮類藥物進行檢測。在檢測過程中依然可以采用乙腈溶液進行提取，將提取后的溶液通過正乙烷溶液進行離析脫脂，在采用小柱凈化對強陽離子進行固相萃取，這樣便可以對1.0～100ug/L的喹諾酮類藥物進行檢測，在對動物源性食品中的獸藥殘留量進行回收率檢查的過程中，發(fā)現(xiàn)動物源性食品中的獸藥殘留量回收率可達到93%，在對獸藥殘留進行精準檢測的過程中，還可以通過串聯(lián)質譜法與正離子檢測法相配合的形式，對不同類型的氨基酸縮合而成的小分子肽類獸藥成分進行監(jiān)測，但是在這一過程中需要采用濃度在4%的三氯乙酸乙腈溶液對蛋白進行除去，再采用濃度在1%的甲酸和1%的甲酸乙腈進行混合，這樣便可以的畜產品中的多肽類抗生素進行提取，且提取回收率在75%左右。

3.利用甲醇-乙酸乙酯，提高畜禽尿液獸藥檢測精度

在對畜禽尿液中的獸藥進行檢測的過程中，可以采用乙醇-乙酸乙酯進行檢測，通過這一方法便可以對畜禽尿液中十余種鎮(zhèn)靜劑內藥物進行檢測，其主要步驟是采用濃度在1%的甲酸溶液與乙腈溶液進行混合，然后通過色譜柱對樣品進行分離，進而采用電噴霧正電子模式對樣品進行電離，再通過基質校準對畜禽尿液中的獸藥殘留量進行定量分析。同時在檢測過程中可以采用LC-MS/MS的數(shù)據(jù)譜圖受儀器在全掃描模式下進行獸藥殘留量檢測，但是在檢測中不同儀器條件（如碰撞能、碰撞氣體流量等）給出的化合物高效液相色譜圖會有很大差異，這就需要檢測人員對檢測儀器進行精準調節(jié)。

三、結束語

高效液相色譜技術在科學研究中可以作為一種高效分離、定性、定量的離子檢測技術，對飼料、食品、尿液中的獸藥殘留量具有著顯著的檢測優(yōu)勢。同時在采用該技術的過程中，對樣品的處理工藝較為簡單，可以在同一步驟中對樣品中的多種藥物成分進行殘留檢測，并不需要對藥品進行衍生化反應，這樣便可以顯著提高樣品的檢測精度。

在科研院所和大型質檢機構可以應用所以高效液相色譜技術，是因為高效液相色譜技術在對殘留獸藥進行前掃描測定的過程中，可以采用標準物質校準方法對殘留獸藥中的化合物結構進行離子分析，進一步提高我國現(xiàn)有高效液相色譜技術的檢測精度。

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