結(jié)腸息肉患者腸道菌群及臨床特點(diǎn)分析

陳文靜　黃華麗　唐少波　羅期　謝榕　盧杰夫

【摘要】 目的：分析結(jié)腸息肉患者腸道菌群及臨床特點(diǎn)，提高對(duì)結(jié)腸息肉的診斷能力，預(yù)防腸癌。方法：選取2018年6月-2020年6月在本院就診的60例經(jīng)腸鏡確診為結(jié)腸息肉的患者為試驗(yàn)組，同期的60例健康體檢者為對(duì)照組。收集晨起新鮮糞便，30 min內(nèi)送檢驗(yàn)科進(jìn)行革蘭染色涂片鏡檢了解腸道細(xì)菌情況。同時(shí)分析患者一般臨床資料、Hp感染情況及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的特點(diǎn)。結(jié)果：試驗(yàn)組BMI≥24 kg/m2比例和便秘及結(jié)腸黑變病的發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組Hp感染率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。試驗(yàn)組G桿菌減少的發(fā)生率高于對(duì)照組，G桿菌和G球菌增多的發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組G桿菌增多、G桿菌減少、G球菌減少、G球菌增多、G球菌減少的發(fā)生率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。兩組腸道菌群細(xì)菌總數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。試驗(yàn)組甘油三酯水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組空腹血糖、CRP、血清總膽汁酸水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：體重超重、長(zhǎng)期便秘、血脂增高的人群可能更容易罹患結(jié)腸息肉，結(jié)腸息肉的發(fā)生發(fā)展可能與腸道菌群失調(diào)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)腸息肉 腸道菌群 臨床特點(diǎn)

Analysis of Intestinal Flora and Clinical Characteristics of Patients with Colonic Polyps/CHEN Wenjing， HUANG Huali， TANG Shaobo， LUO Qi， XIE Rong， LU Jiefu. //Medical Innovation of China， 2021， 18（15）： -151

[Abstract] Objective： To analyze the intestinal flora and clinical characteristics of patients with colonic polyps， improving the diagnostic ability of colonic polyps and prevent colorectal cancer. Method： A total of 60 patients with colonic polyps diagnosed by colonoscopy in our hospital from June 2018 to June 2020 were selected as the experimental group， and 60 healthy subjects in the same period were selected as the control group. Fresh feces were collected from the morning and sent to the laboratory for Gram staining smear microscopy within 30 minutes to understand the intestinal bacteria. The characteristics of general clinical data， HP infection and related laboratory indicators were analyzed. Result： The proportion of BMI≥24 kg/m2 and the incidence of constipation and colonic melanosis in the experimental group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no significant difference in Hp infection rate between two groups （P>0.05）. The incidence of decreased G+ bacilli in the experimental group was higher than that in the control group， and the incidence of increased G- bacilli and G+ cocci in the experimental group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no statistical significance in the incidence of increased G+ bacilli， decreased G- bacilli， decreased G+ cocci， increased G- cocci and decreased G- cocci between two groups （P>0.05）. There was no significant difference in the total number of intestinal flora between two groups （P>0.05）. The triglyceride level in the experimental group was higher than that in the control group， the difference was statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the levels of fasting blood glucose， CRP and serum total bile acid between two groups （P>0.05）. Conclusion： People with overweight， long-term constipation， hyperlipidemia are more likely to suffer from colon polyps， and the occurrence and development of colon polyps may be related to the imbalance of intestinal flora to some extent.

[Key words] Colonic polyps Intestinal flora Clinical characteristics

First-author’s address： The First People’s Hospital of Nanning， Nanning 530022， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.15.036

結(jié)直腸癌（CRC）是一種常見(jiàn)的惡性腫瘤，流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)資料表明，全球CRC發(fā)病率在男性中位于惡性腫瘤的第4位，女性位于第3位[1-2]。近年來(lái)，隨著生活方式和飲食習(xí)慣的改變，我國(guó)CRC的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)。結(jié)直腸息肉作為CRC的癌前病變，如能早期發(fā)現(xiàn)并行腸鏡下息肉切除治療，可起到預(yù)防CRC的作用。近年來(lái)，國(guó)外有研究報(bào)道腸道菌群與結(jié)直腸息肉的發(fā)生發(fā)展有一定的關(guān)系[3-7]，但報(bào)道甚少，國(guó)內(nèi)亦有綜述及少量論著報(bào)道腸道菌群與結(jié)直腸息肉相關(guān)[8-9]，但目前研究甚少。本文通過(guò)比較結(jié)腸息肉組及無(wú)結(jié)腸息肉組兩組患者常見(jiàn)腸道菌群變化的特點(diǎn)，希望通過(guò)對(duì)人群糞便腸道菌群的初步檢測(cè)，推測(cè)人群中罹患結(jié)腸息肉的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而指導(dǎo)患者是否需進(jìn)一步腸鏡檢查，對(duì)早期發(fā)現(xiàn)及切除結(jié)腸息肉，預(yù)防腸癌起到提示作用?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月-2020年6月在本院就診的60例經(jīng)腸鏡確診為結(jié)腸息肉的患者為試驗(yàn)組，同期的60例健康體檢者為對(duì)照組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：試驗(yàn)組經(jīng)腸鏡檢查提示結(jié)腸息肉;對(duì)照組經(jīng)腸鏡檢查無(wú)結(jié)直腸息肉;無(wú)慢性腸道疾病史;研究期間無(wú)嚴(yán)重疾病發(fā)生。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：急性胃腸穿孔、腸梗阻及腹膜炎;近2周有抗生素、益生菌、益生元、微生態(tài)活菌制劑等服用史;長(zhǎng)期大量吸煙及飲酒，患有心、肝、腎等嚴(yán)重器質(zhì)性疾病;一般情況較差，嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良、患有腫瘤、精神障礙。研究對(duì)象知情同意，研究得到了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2 方法 （1）革蘭染色涂片鏡檢：兩組腸鏡檢查1周后（腸鏡檢查1周后腸道菌群基本恢復(fù)）收集晨起適量新鮮糞便，選用無(wú)菌容器留取新鮮糞便適量（3～5 g），30 min內(nèi)送檢驗(yàn)科檢驗(yàn)[10]，取干凈且經(jīng)過(guò)消毒處理的載玻片（預(yù)先加入0.9%氯化鈉溶液中1～2 d），利用無(wú)菌棉簽在載玻片上涂布，厚薄適中，待自然干燥后固定，行革蘭染色，用高倍顯微鏡觀察記錄。（2）鏡檢細(xì)菌總數(shù)：取少許新鮮糞便，立即送細(xì)菌培養(yǎng)，后用油鏡計(jì)數(shù)。（3）觀察革蘭陰性、陽(yáng)性球菌及桿菌的數(shù)量及比例變化：各菌群的比例相對(duì)于細(xì)菌總數(shù)意義更大，其不受糞便稀釋或濃縮的影響。糞便中正常球菌與桿菌的比例為25︰75。（4）兩組患者同時(shí)晨起空腹抽取靜脈血送檢驗(yàn)科檢驗(yàn)空腹血糖、甘油三酯、血清總膽汁酸、C反應(yīng)蛋白水平，行14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)有無(wú)幽門(mén)螺桿菌（Helicobacter pylori， Hp）感染。同時(shí)記錄兩組患者的排便情況。記錄兩組患者的身高、體重，進(jìn)行體質(zhì)指數(shù)（BMI）計(jì)算。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）細(xì)菌總數(shù)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，采用油鏡觀察3～5個(gè)視野，每油鏡視野細(xì)菌數(shù)在501～5 000個(gè)范圍內(nèi)屬于總菌數(shù)在正常范圍;每油鏡視野細(xì)菌數(shù)：<10個(gè)為顯著減少，11～100個(gè)為明顯減少，101～500個(gè)為略微減少，>5 000個(gè)為顯著增多，這時(shí)應(yīng)進(jìn)一步觀察各類(lèi)菌的比例，以確定哪類(lèi)菌增多。（2）成人腸道菌群各類(lèi)細(xì)菌比例的正常范圍參照張秀榮《腸道菌群糞便涂片檢查圖譜》中糞便涂片診斷腸道菌群的理論和基礎(chǔ)[11]：G桿菌占50.2%～74.0%、G桿菌占23.5%～44.0%、G球菌占2%～13%、G-球菌占0.5%～9.0%。（3）便秘的診斷參照2013版《中國(guó)慢性便秘診治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 試驗(yàn)組男34例，女26例;年齡22～51歲，平均（49.57±4.38）歲。對(duì)照組男37例，女23例;年齡23～52歲，平均（48.68±4.73）歲。兩組的性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組臨床相關(guān)資料比較 試驗(yàn)組BMI≥

24 kg/m2比例和便秘及結(jié)腸黑變病的發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組的Hp感染率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 兩組菌群變化情況比較 試驗(yàn)組G桿菌減少的發(fā)生率高于對(duì)照組，G桿菌和G球菌增多的發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組G桿菌增多、G桿菌減少、G球菌減少、G球菌增多、G球菌減少的發(fā)生率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.4 兩組腸道菌群細(xì)菌總數(shù)情況比較 兩組腸道菌群細(xì)菌總數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表3。

2.5 兩組生化指標(biāo)比較 試驗(yàn)組甘油三酯水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組空腹血糖、CRP、血清總膽汁酸水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

CRC是我國(guó)最常見(jiàn)的消化道腫瘤之一，隨著生活方式和飲食習(xí)慣的改變，我國(guó)CRC的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)?，F(xiàn)普遍認(rèn)為CRC的發(fā)生是各種致癌因素造成的腫瘤相關(guān)基因變異，如癌基因突變激活和抑癌基因失活，從而導(dǎo)致惡性腫瘤生長(zhǎng)和擴(kuò)大[12-13]。近年來(lái)，腸道菌群與CRC發(fā)病的關(guān)系日益受到關(guān)注，許多研究都表明腸道菌群在CRC的發(fā)病機(jī)制中起了重要的作用[14-16]。但一旦發(fā)生CRC，大部分發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已處于晚期，需要手術(shù)治療或因?yàn)橥砥谀[瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移而無(wú)法進(jìn)行手術(shù)治療，影響患者的生存期及預(yù)后。結(jié)腸息肉是一種結(jié)腸的良性腫瘤，被公認(rèn)為癌前病變，系常見(jiàn)病、多發(fā)病?，F(xiàn)有理論研究認(rèn)為，大腸腺瘤在大腸癌形成發(fā)展過(guò)程中不可避免，積極治療結(jié)腸息肉是預(yù)防大腸癌的重要途徑[2，17]。有報(bào)道顯示CRC和癌前病變患者的腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，雙歧桿菌、乳桿菌數(shù)量減少，腸球菌、腸桿菌及酵母菌數(shù)量增加[18-21]，本研究結(jié)果顯示試驗(yàn)組G桿菌減少的發(fā)生率高于對(duì)照組，G桿菌和G球菌增多的發(fā)生率均高于對(duì)照組，而雙歧桿菌、乳桿菌屬于G桿菌，腸桿菌屬于G桿菌，腸球菌及酵母菌屬于G球菌，與目前已有的國(guó)內(nèi)外報(bào)道基本一致。

大腸癌的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多因素、多階段參與的過(guò)程，目前國(guó)內(nèi)外多個(gè)研究表明大腸癌的癌前病變腺瘤性息肉與腸道菌群失調(diào)有密切關(guān)系[3，5]。腸道微生態(tài)失調(diào)可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂，腸道菌群既可抑制又可促進(jìn)CRC及癌前病變的發(fā)生，這主要和具體的菌群種類(lèi)有關(guān)。腸道微生物失衡導(dǎo)致條件性致病菌作用，腸道黏液滲透性增高，引起細(xì)菌遷移，激活免疫系統(tǒng)，引起炎性細(xì)胞分泌大量的炎性因子并同時(shí)與細(xì)菌的有毒代謝產(chǎn)物一起構(gòu)成腸道炎癥微環(huán)境[22]。長(zhǎng)期反復(fù)的腸道炎癥微環(huán)境容易誘發(fā)腸上皮細(xì)胞產(chǎn)生突變，發(fā)生惡性增殖，引發(fā)息肉增生，進(jìn)一步發(fā)展為癌[12]。

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組G+桿菌減少的發(fā)生率高于對(duì)照組，G-桿菌和G+球菌增多的發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示結(jié)腸息肉的發(fā)生發(fā)展可能與腸道菌群失調(diào)有關(guān)，但是先有腸道菌群失調(diào)還是先有腸道息肉，目前尚不明確。兩組腸道菌群細(xì)菌總數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），提示雖然結(jié)腸息肉患者可能存在一定的腸道菌群失調(diào)，但是腸道菌群的總的細(xì)菌數(shù)仍可能在一個(gè)正常范圍內(nèi)，可能與各菌群的比例不受糞便稀釋或濃縮的影響有關(guān)，檢測(cè)各菌群的比例相對(duì)于檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)對(duì)預(yù)示有無(wú)結(jié)腸息肉意義更大。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組甘油三酯水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），可能與高甘油三酯血癥會(huì)增加機(jī)體胰島素抵抗及機(jī)體炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步導(dǎo)致氧化應(yīng)激，促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致腸息肉及結(jié)腸癌的發(fā)生有關(guān)。因此，控制飲食，調(diào)節(jié)血脂水平，糾正腸道菌群失調(diào)，剔除大腸息肉形成的高危因素，可有效降低大腸息肉的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組BMI≥24 kg/m的比例高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），可能與體重超重甚至肥胖可增加胰島素抵抗及引起炎癥，后兩者可導(dǎo)致氧化應(yīng)激，促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致腸息肉及結(jié)腸癌的發(fā)生有關(guān)。目前，國(guó)內(nèi)外研究主要集中于腸道菌群分析在CRC中的作用，對(duì)結(jié)直腸息肉患者腸道菌群特點(diǎn)的研究較少，本研究結(jié)果表明有結(jié)腸息肉患者的腸道菌群與無(wú)結(jié)腸息肉患者的腸道菌群存在差異，提示結(jié)腸息肉的發(fā)生發(fā)展可能與腸道菌群失調(diào)有關(guān)。

綜上所述，體重超重、長(zhǎng)期便秘、血脂增高的人群可能更容易罹患結(jié)腸息肉，結(jié)腸息肉的發(fā)生發(fā)展可能與腸道菌群失調(diào)有關(guān)。

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（收稿日期：2021-02-19） （本文編輯：姬思雨）