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    紫外分光光度法測定刺梨原汁中總黃酮含量的研究

    2020-12-28 02:32:20耿寧劉易偉卿云光
    食品安全導(dǎo)刊·中旬刊 2020年11期
    關(guān)鍵詞:總黃酮含量測定

    耿寧 劉易偉 卿云光

    摘要:建立一種操作簡單、結(jié)果可靠、測定成本較低的檢測刺梨原汁中總黃酮含量的方法。通過實驗驗證,方法定量限為7.00mg/100g,在常見樣品濃度和檢出最高限的測試結(jié)果變異系數(shù)(CV值)分別為2.3%、1.9%,4個刺梨原汁樣品中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/g,平均回收率為100.3%。

    關(guān)鍵詞:刺梨原汁;總黃酮;含量測定

    刺梨是貴州的特色食品資源[1],含有豐富的活性成分黃酮類物質(zhì),貴州省生產(chǎn)的刺梨鮮果,加工產(chǎn)品主要以刺梨原汁為主,然后再利用刺梨原汁加工成濃縮汁、飲料等多種營養(yǎng)食品和保健品[2],刺梨原汁中含有豐富的活性成分總黃酮,是一種很強的抗氧劑,可有效清除體內(nèi)的氧自由基,阻止細胞的退化、衰老,也可阻止癌癥的發(fā)生,改善心腦血管疾病的癥狀[3] [4]。建立一種適合刺梨原汁中總黃酮含量的測定方法,為檢測機構(gòu)和相關(guān)企業(yè)提供更適合的檢測方法,提高檢測效率,也對于規(guī)范刺梨產(chǎn)品加工企業(yè)質(zhì)量管理、強化市場監(jiān)管、促進貴州刺梨產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義和作用。

    一、儀器、試劑及材料

    1.儀器

    TU-1901紫外可見分光光度計,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。

    2.對照品

    蘆丁對照品(供UV法測定,含量為92.4%),中國食品藥品檢定研究院。

    3.試劑

    無水乙醇、甲醇,均為分析純。

    4.樣品

    “刺梨原汁”(貴州天瀧集團投資開發(fā)有限公司,樣品1);“刺梨原汁”(貴州貴定敏子食品有限公司,樣品2);“刺梨原汁”(貴州山果王健康實業(yè)有限公司,樣品3);“刺梨汁”(貴州綠視野綠色開發(fā)有限公司,樣品4)。

    二、方法與結(jié)果

    1.試樣制備

    稱取1g(精確至0.01g)的試樣至25ml容量瓶中,用乙醇定容,搖勻后,超聲提取20min,室溫靜置30min,取上清液1mL于25mL比色管中,用甲醇定容后待測。

    2.標準曲線的制備

    以蘆丁為對照品,精確稱取蘆丁標準品109.7mg(含量為92.4%)于100mL容量瓶內(nèi),用甲醇定容至刻度,得1.014mg/mL蘆丁儲備溶液。依次稀釋至濃度為1.01μg/mL、2.03μg/mL、3.04μg/mL、4.06μg/mL、5.07μg/mL、6.08μg/mL蘆丁對照品溶液,以甲醇溶液為零點,于360nm處測量吸光度。以蘆丁對照品濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制校準曲線,線性方程為y=0.0299x-0.0003,R2=0.9999,表明蘆丁含量在0~6.08μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,經(jīng)計算,該方法在0~380mg/100g范圍內(nèi),樣品中總黃酮濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

    3. 檢出限(LOD)和定量限(LOQ)實驗

    樣品空白獨立測試20次實驗,計算結(jié)果為0.63 mg/100g,計算標準偏差(s)為2.278×10-16。

    根據(jù)LOD=樣品空白平均值+3s,即LOD=0.63+3×2.278×10-16,計算結(jié)果保留小數(shù)點后兩位,LOD=0.63 mg/100g。

    為增加數(shù)據(jù)可信度,且檢測樣品的結(jié)果范圍為55~90 mg/100g,取LOQ值=10×LOD值,即LOQ=6.30 mg/100g,最終取值LOQ=7.00mg/100g。

    4.精密度實驗

    精確稱取1號樣品12份,其中6份分別加入3mg蘆丁對照品,按照“1.試樣制備”方法處理并測定,結(jié)果如表1所示。結(jié)果顯示本方法在常見樣品濃度和檢出最高限的測試結(jié)果變異系數(shù)(CV值)分別為2.3%、1.9%,均符合GB/T 27404-2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中相關(guān)規(guī)定,表明方法精密度良好。

    5. 樣品檢測及回收率實驗

    分別取樣品1、2、3、4號樣品做加標回收試驗,然后按照“1.試樣制備”處理,結(jié)果如表2所示,樣品1、2、3、4中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/mL,且平均回收率為100.3%,表明方法準確性好。

    三、結(jié)語

    綜上所述,本文以蘆丁為對照品,通過紫外分光光度法測定總黃酮含量,操作簡單、結(jié)果可靠、測定成本較低,在總黃酮含量為7~380mg/100g范圍內(nèi),精密度良好,測試結(jié)果準確,適用于刺梨原汁中總黃酮的測定。測試樣品1、2、3、4中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/100g,而相關(guān)報道中提到刺梨鮮果中總黃酮含量高達0.89%[4],說明在加工過程中,刺梨鮮果中的大部分黃酮類化合物殘留在刺梨果渣內(nèi),如何將總黃酮類化合物更有效地提取到刺梨原汁中,本方法可以為下一步研究奠定基礎(chǔ)。

    參考文獻:

    [1] 貴州省刺梨發(fā)展現(xiàn)狀分析[J]. 劉易偉,楊舒清.? 食品安全導(dǎo)刊(下旬刊),2020,(第2期)

    [2].黔南州刺梨產(chǎn)業(yè)鏈分析[J]. 羅桃,王玉奇,陳文本.? 中國林副特產(chǎn),2020,(第5期):106-107

    [3] 刺梨中活性物質(zhì)的提取與性能探討[J].陳代秀,夏偉麗,胡思前,郭艷華,張玉敏.? 化肥設(shè)計,2020,58(02):13-17

    [4] 刺梨黃酮的精制及其抗氧化活性比較[J].張匯慧,吳彩娥,范龔健,等. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2015,39 (3):101-105

    [5] 刺梨總黃酮的含量測定及資源利用[J].杜薇,劉國文. 食品科學(xué),2003(01):112-114.

    作者簡介:耿寧 ,貴州省黔南州都勻人,食品安全檢測員,工程碩士。

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