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    不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果對(duì)臨床輸血的意義

    2020-10-19 04:37:14蔡娟孫紅
    臨床輸血與檢驗(yàn) 2020年5期
    關(guān)鍵詞:弱陽性離心機(jī)效價(jià)

    蔡娟 孫紅

    隨著輸血醫(yī)學(xué)理念的發(fā)展, 臨床輸血安全日益得到關(guān)注,輸血前不規(guī)則抗體的篩查變得更加重要,臨床輸血技術(shù)規(guī)范[1]也明確規(guī)定對(duì)于有輸血史及妊娠史的患者輸血前要求進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查。并非所有抗體篩查鑒定工作都是簡(jiǎn)單而明確的,在臨床工作中由于諸多因素導(dǎo)致抗體篩查結(jié)果常常出現(xiàn)假陽性、弱陽性。一些醫(yī)院,特別是基層醫(yī)院對(duì)此項(xiàng)技術(shù)的開展還不成熟,對(duì)抗體篩查弱陽性結(jié)果也認(rèn)識(shí)不足。目前有關(guān)弱陽性抗篩結(jié)果的報(bào)道很少,鑒于此,本研究收集本院患者不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果,并分析其特異性分布及可能的原因,希望為輸血工作者提供借鑒。

    資料與方法

    1 研究對(duì)象 選取2017年7月~2019年6月本院不規(guī)則抗體篩查結(jié)果凝集強(qiáng)度≤1+弱陽性病例71例,其中男31例,女40例,年齡分布在12~82歲。

    2 試劑和儀器 抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);十六系抗體譜紅細(xì)胞(荷蘭sanquin公司);抗人球蛋白(IgG/C3d)檢測(cè)卡、AUTOVUE全自動(dòng)血型及配血分析系統(tǒng)(美國Ortho公司),01-BV-7212離心機(jī)(美國Ortho)和Heat Block-32免疫微柱孵育器(美國Ortho);B600-A低速離心機(jī)(北京白洋醫(yī)療器械有限公司);KA-2200血庫專用離心機(jī)(日本久保田(中國)投資有限公司)。

    3 方法 采用AUTOVUE全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查,操作步驟參照說明書。同時(shí)加做鹽水法不規(guī)則抗體篩查(在各加有患者血漿2滴的3個(gè)潔凈試管中分別加入3%~5%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗篩細(xì)胞1滴后用血型血清學(xué)專用離心機(jī)以1 000 g離心15 s觀察結(jié)果)。不規(guī)則抗體鑒定:①抗人球蛋白法:抗人球蛋白卡每孔加50 μL 1%對(duì)應(yīng)譜細(xì)胞及25 μL的患者血漿,經(jīng)37℃孵育15 min,專用微柱離心機(jī)離心觀察結(jié)果。②鹽水法:標(biāo)記相應(yīng)序號(hào)的16支潔凈試管各加入患者血漿2滴,然后分別加入3%~5% 對(duì)應(yīng)序號(hào)的抗篩譜細(xì)胞1滴,血型血清學(xué)專用離心機(jī)以1 000 g離心15 s觀察結(jié)果。部分抗體鑒定由北京解放軍總院輸血科完成。

    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)數(shù)資料采用百分率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況 共有71 例弱陽性,有輸血史比例高于無輸血史,檢測(cè)出抗體特異性的高達(dá)73%,具體見表1。

    2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性分布情況不規(guī)則抗體弱陽性人群中,女性陽性率高于男性,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);不規(guī)則抗體的弱陽性率也與年齡無關(guān)(P>0.05),見表2。

    表1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況

    表2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性率比較

    3 抗體特異性分布情況 檢出特異性抗體52例,其中Rh血型系統(tǒng)13例,占25%;P和MNSs血型系統(tǒng)各10例,均占19.2%;自身抗體6例,占11.5%;Duffy系統(tǒng)抗體4例,占7.7%;Lewis血型系統(tǒng)、Kidd血型系統(tǒng)和抗-HI 各2例,均占3.8%;聯(lián)合抗體3例,占5.8%,具體見表3。

    討 論

    輸血前進(jìn)行血型不規(guī)則抗體篩選,選擇無相應(yīng)抗原的血液輸注對(duì)精準(zhǔn)輸血和提高輸血療效具有重要的意義[2,3]。 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果經(jīng)常出現(xiàn)弱陽性,而很多弱陽性結(jié)果復(fù)查后為假陽性。這種現(xiàn)象致使有的檢驗(yàn)者認(rèn)為弱陽性結(jié)果基本上以假陽性為主,沒有復(fù)查必要,更不需要進(jìn)一步鑒定,直接判定為假陽性,沒有選擇相應(yīng)紅細(xì)胞輸注,造成臨床輸血患者出現(xiàn)無效輸血或溶血性反應(yīng)。確實(shí)有部分原因使抗篩假陽性以弱陽性結(jié)果出現(xiàn),如文獻(xiàn)報(bào)道某些廠家的微柱卡假陽性率較高,原因可能為纖維蛋白原干擾、保存過程中的細(xì)胞變形或細(xì)胞碎片增多等抗篩細(xì)胞的自身問題[4]。也可能與患者自身疾病有關(guān),特別是自身免疫性疾病患者的自身抗體、藥物性抗體,或患者血漿中某些物質(zhì)與抗人球蛋白卡中物質(zhì)反應(yīng)所致[5]。許多醫(yī)院進(jìn)行了意外抗體篩查,但未能進(jìn)一步進(jìn)行抗體鑒定,直接判斷弱陽性為假陽性或無意義。然而并非所有弱陽性結(jié)果都是假陽性,有很多實(shí)驗(yàn)人員沒有重視弱陽性結(jié)果,甚至認(rèn)為弱陽性對(duì)輸血意義不大。本研究分析71例弱陽性抗篩結(jié)果和進(jìn)一步抗體鑒定結(jié)果,提示抗篩弱陽性結(jié)果的重要性,為輸血工作者提供參考。

    根據(jù)本文資料,不規(guī)則抗體篩查弱陽性結(jié)果女性例數(shù)高于男性,不同年齡段的弱陽性率不同,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與張玉萍報(bào)道的無效輸血與性別、年齡無關(guān)一致[6]。由于本資料弱陽性樣本量較小,對(duì)結(jié)果一般性有所影響,因此對(duì)于不規(guī)則抗體弱陽性與性別、年齡、輸血史的關(guān)系,仍需要臨床進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究容量,為臨床評(píng)估提供更加嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)的參考依據(jù)。弱陽性標(biāo)本檢出特異性抗體52例,包括P、Rh、MNSs、Duffy、Lewis和Kidd血型系統(tǒng)、抗-HI、自身抗體、聯(lián)合抗體等。弱陽性標(biāo)本檢出抗體的種類與文獻(xiàn)報(bào)道的抗篩檢出抗體種類基本一致[2,3]。這些出現(xiàn)弱陽性的抗體,如抗P、抗M,其抗體性質(zhì)多為IgM型,在微柱介質(zhì)中凝集強(qiáng)度較弱,而其它抗體可能與劑量效應(yīng)、低效價(jià)抗體有關(guān)。

    Rh,MNS,Kidd,Duffy血型系統(tǒng)的抗體易出現(xiàn)“劑量效應(yīng)”現(xiàn)象[7]。其中,抗-E、抗-C、抗-M、抗-S更易表現(xiàn)出“劑量效應(yīng)”[4]。某些抗篩細(xì)胞的抗原譜設(shè)計(jì)不全或?yàn)殡s合子,就會(huì)出現(xiàn)意外抗體漏檢或凝集較弱[8]。劉自強(qiáng)報(bào)道某些抗篩細(xì)胞在檢測(cè)抗-Fyb、-Jka、-S時(shí), 當(dāng)抗體效價(jià)低于1∶4時(shí)存在漏檢可能[9]。人產(chǎn)生不規(guī)則抗體后,若沒有繼續(xù)受到免疫刺激,抗體效價(jià)會(huì)逐漸降低,但在再次輸入有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞后,會(huì)迅速激活記憶細(xì)胞產(chǎn)生大量IgG抗體,造成遲發(fā)型溶血。關(guān)于低效價(jià)不規(guī)則抗體,近年來諸多文獻(xiàn)報(bào)道其漏檢是輸血無效的原因之一[9,10]。李海云等報(bào)道71例低效價(jià)不規(guī)則抗體陽性分布與本文弱陽性標(biāo)本抗體特異性分布一致[10]。本資料中抗篩弱陽性標(biāo)本進(jìn)行抗體鑒定還會(huì)出現(xiàn)與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果全陰性的現(xiàn)象,可能為患者存在低頻抗原對(duì)應(yīng)的抗體或效價(jià)低、活性弱的抗體。還有部分弱陽性標(biāo)本抗體特異性不明確,封彥楠[5]等對(duì)同種抗體特異性不明確的81名患者血清學(xué)特征分析及紅細(xì)胞輸注效果評(píng)價(jià),認(rèn)為抗體特異性不明確原因可能為以下四種:(1)低效價(jià)同種抗體;(2)無法明確抗體特異性;(3)特異性抗體聯(lián)合未知抗體;(4)疑似某種特異性抗體。對(duì)于弱陽性標(biāo)本,須同時(shí)用鹽水法和微柱凝膠法做交叉配血試驗(yàn),選擇相合的血液輸注。

    臨床上經(jīng)常有患者存在不明原因的貧血,或輸血后無法解釋Hb不升或下降的現(xiàn)象,大量研究表明,紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是輸血無效及溶血性輸血不良反應(yīng)的主要原因[10]。如果忽視弱陽性結(jié)果,有的患者即使某次輸血沒有產(chǎn)生溶血反應(yīng)或產(chǎn)生不明顯的反應(yīng),當(dāng)患者再次輸血接受免疫刺激,會(huì)誘導(dǎo)潛在抗體與相應(yīng)抗原發(fā)生免疫記憶反應(yīng),產(chǎn)生大量抗體,出現(xiàn)紅細(xì)胞輸注無效、遲發(fā)型溶血性輸血反應(yīng),并且會(huì)加重原發(fā)病甚至威脅生命。應(yīng)選擇適宜方式篩查不規(guī)則抗體,重視弱陽性結(jié)果,以避免漏檢致受血者輸入含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞,才能保證臨床輸血安全、提高輸注效果[11]。

    (本組研究資料得到北京解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心輸血科的幫助,在此致謝?。?/p>

    利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

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